P0332 抗酒石酸酸性磷酸酶检测试剂盒

体外诊断试剂产品分类分类目录按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂一、临床血液学和体液学检验试剂 1.1 血液学检验试剂(盒)1.1.1血液一般检验试剂(盒) 1.1.2溶血试验试剂(盒)1.1.3血栓与止血检验试剂(盒) 1.2 组织配型类试剂(盒)1.3尿液检验试剂(盒)、试纸1.4 粪便检验试剂(盒)、试纸 1.5其他体液及排泄物检验试剂(盒)二、临床化学检验试剂2.1无机离子检验试剂(盒)2.2蛋白质检验试剂(盒)2.3 糖类检验试剂(盒)、试纸 2.4 酶类检验试剂(盒)2.4.1 肝脏疾病诊断试剂(盒) 2.4.2 肾脏疾病诊断试剂(盒) 2.4.3 心肌疾病诊断试剂(盒) 2.4.4 体液和其他酶测定试剂(盒) 2.5 非蛋白含氮类化合物检测试剂(盒) 2.6 脂类检验试剂(盒)2.7血气与电解质分析试剂(盒) 2.8内分泌检验试剂(盒)2.8.1 下丘脑垂体激素测定试剂(盒) 2.8.2 甲状腺激素测定试剂(盒) 2.8.3 肾上腺激素测定试剂(盒) 2.8.4 性腺激素测定试剂(盒) 2.8.5 胰腺和肠胃激素测定试剂(盒)2.8.6 其他激素测定试剂(盒)2.9维生素和药物及代谢物类检验试剂(盒) 2.9.1维生素测定类试剂(盒)2.9.2药物和药物代谢物检测试剂(盒)三、临床免疫学检验试剂3.1 传染病免疫学诊断检验试剂(盒) 3.1.1 肝炎病毒血清学标志物检验试剂(盒) 3.1.2 其他病毒血清学标志物检验试剂(盒) 3.1.3 细菌血清学检验试剂(盒)3.1.4其他微生物血清学检验试剂(盒) 3.2肿瘤标志物类试剂(盒)3.3细胞免疫检验测定试剂(盒)四、微生物学检验试剂4.1 培养基4.2微生物学检验类试剂(盒)4.3微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂(盒) 4.4药敏试剂4.5生化鉴定培养基4.6染色液五、组织细胞学检验试剂5.1 细胞、组织化学染色剂类试剂5.2 免疫组化与人体组织细胞类试剂(盒)六、变态反应、自身免疫诊断检验试剂(盒)七、遗传性疾病检验试剂八、分子生物学检验试剂8.1分子诊断试剂(盒)8.1.1 分子杂交诊断试剂(盒)8.1.2 PCR试剂(盒)8.2人类基因检测类试剂(盒)8.3 生物芯片类试剂(盒)8.3.1 基因芯片类检测试剂(盒)8.3.2 蛋白质芯片类检测试剂(盒) 8.3.3 其他生物芯片类检测试剂(盒)九、其它检验试剂(盒)按药品受理和审评的体外诊断试剂*1.ABO血型定型试剂(盒)*2.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂(盒) *3.丙型肝炎病毒(HCV)抗体试剂(盒) *4.人类免疫缺陷病毒HIV(1，2型)抗体试剂(盒)人类免疫缺陷病毒抗原/抗体诊断试剂(盒) *5.梅毒螺旋体抗体试剂(盒) *6.放免试剂(盒)注:以上带*号的五个品种，预期用途为血源筛查时按药品受理和审评，为临床诊断时，按第三类医疗器械进行管理。

ｄｏｉ：１０．１１６５９／ｊｊｓｓｘ．１１Ｅ０２１１２８·基础研究·塞来昔布对去卵巢骨质疏松症的保护机制研究王 ，阿尖措，王德元　（青海红十字医院骨科二病区，青海西宁８１００００）［摘　要］　目的　探讨塞来昔布对骨代谢稳态和骨质疏松症的作用。

方法　体外培养骨髓来源巨噬细胞（ＢＭＤＭ）、ＲＡＷ２６４．７和ＭＣ３Ｔ３ Ｅ１。

采用ＣＣＫ ８试剂盒检测不同浓度塞来昔布对ＢＭＤＭ和ＭＣ３Ｔ３ Ｅ１细胞活力的影响；采用抗酒石酸酸性磷酸酶（ＴＲＡＣＰ）染色检测塞来昔布对破骨细胞分化形成的影响；采用实时聚合酶链反应（ＲＴ ＰＣＲ）检测ＢＭＤＭ和ＭＣ３Ｔ３ Ｅ１细胞中活化Ｔ 细胞核因子１（ＮＦＡＴｃ１）、ＴＲＡＣＰ、组织蛋白酶Ｋ（ＣＴＳＫ）、降钙素受体（ＣＴＲ）、ＢＭＰ ２、Ｒｕｎｘ２和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）ｍＲＮＡ水平；采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测细胞ｐ ＮＦ κＢ、ＮＦ κＢ、ＮＦＡＴ和ＧＡＰＤＨ的表达水平。

采用荧光素酶报告基因试验检测ＢＭＤＭ中ＮＦ κＢ和ＮＦＡＴ活性。

采用卵巢切除术构建骨质疏松症小鼠模型，雌性Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠３０只随机分为对照组、模型组、塞来昔布低剂量（１２．５ｍｇ／ｋｇ）组、塞来昔布中剂量（２５ｍｇ／ｋｇ）组和塞来昔布高剂量（５０ｍｇ／ｋｇ）组，每组６只，分别以相应剂量的溶剂或药物灌胃进行干预处理。

采用微计算机断层扫描（ｍｉｃｒｏ ＣＴ）扫描各组小鼠胫骨，分析骨微结构参数变化。

结果　塞来昔布可抑制破骨细胞分化，但并不影响细胞活力。

塞来昔布可抑制ＲＮＡＮＫＬ诱导的ＮＦＡＴｃ１、ＴＲＡＣＰ、ＣＴＳＫ和ＣＴＲｍＲＮＡ表达，并抑制ｐ ＮＦ κＢ和ＮＦＡＴ蛋白表达及ＮＦ κＢ和ＮＦＡＴ活性。

塞来昔布可促进成骨细胞增殖，并促进ＢＭＰ ２、Ｒｕｎｘ２和ＡＬＰｍＲＮＡ表达。

与模型组比较，塞来昔布低剂量组、塞来昔布中剂量组和塞来昔布高剂量组小鼠骨体积／总体积（ＢＶ／ＴＶ）和骨小梁数目（Ｔｂ．Ｎ）显著增加（Ｐ＜０．０１），骨小梁分离度（Ｔｂ．Ｓｐ）显著减小（Ｐ＜０．０１）。

抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP 5b）定量测定一、简介和用途、适用范围大量的抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）是由骨吸收的破骨细胞和有活力的巨噬细胞所释放的。

在血液循环中的TRACP有TRACP 5b 和TRACP 5a二种形式， TRACP 5b 来源于破骨细胞，而TRACP 5a来源于巨噬细胞。

由破骨细胞刚分泌到血液中的TRACP 5b是有活性的酶，但当TRACP 5b在血液循环中被清除之前已无活性，并被降解为碎片。

这样TRACP 5b不会因肝、肾功能受损而在血液中积蓄。

血清中TRACP 5b均来源于破骨细胞，此酶在昼夜的活性水平变化不明显，且不受进食的影响，故可在一天的任何时候都可以采集标本进行检验。

此试剂盒依据测定由破骨细胞释放的TRACP 5b的特异性测定方法。

它可以用于测定骨吸收亢进的病人，如原发性骨质疏松和肾性骨病，也可以预测骨折的危险性，并便于了解抗骨吸收治疗的效果。

在肿瘤病人中，当TRACP 5b 的活力增高提示肿瘤骨转移。

在体外，培养基中TRACP 5b的活力大小代表了破骨细胞数量的多少，因此应用于此试剂盒在进行人的破骨细胞培养时，可用于检测破骨细胞的数量。

二、试验原理测试孔内已包被抗TRACP单克隆抗体→加入校准液、质控品和样品→加入释放剂→有活性的TRACP 5b从结合蛋白质上离解→TRACP 5b与孔内包被的抗TRACP单克隆抗体结合→加入底物pNPP孵育→加入终止液终止反应→在酶标仪上检测结果。

此试验的优点1、所测定的TRACP 5b是由破骨细胞专一释放的。

2、此试验对TRACP 5a或其它磷酸酶没有干扰。

3、溶血不影响结果。

4、不受昼夜变化的影响。

5、不受肝脏、肾脏疾病的影响。

6、不受进食的影响。

7、酶标板容易拆卸，方便检测。

三、试剂盒（一）组成1、酶标板：96孔，已包被抗—TRACP抗体。

2、质控液：3×0.5ml。

3、校准液：3×0.5ml(3×1U/L,3×5U/L,3×10U/L)。

212中国骨质疏松杂志2021年2月第27卷第2期Chin J Osteoporos,February2021,Vol27,No.2 Published online doi：10.3969/j.issn.1006-7108.2021.02.010维生素E治疗对老年雌性大鼠骨量、骨代谢以及自噬水平影响杨海超*黄炜韩晓东唐山市工人医院，河北唐山063000中图分类号：R681文献标识码：A文章编号：1006-7108(2021)02-0212-05摘要：目的观察维生素E对老年雌性大鼠骨量、骨代谢作用及自噬水平的影响。

方法10只年轻雌性大鼠和20只老年雌性Sprague-Dawley大鼠被随机分为三组:对照组(10只年轻大鼠)、模型组(10只老年大鼠)和治疗组(10只老年大鼠)。

在实验过程中，治疗组接受维生素E治疗。

治疗12周后，通过Micro-CT和HE切片染色检测大鼠股骨骨密度(bone mineral density,BMD)和骨微结构变化;使用ELISA试剂盒检测血清中骨转换标志物水平的改变;通过蛋白质印迹检测维生素E对骨细胞自噬蛋白的影响。

结果Micro-CT检测和HE切片染色表明维生素E治疗可以改善老年大鼠股骨干骺端骨密度和骨小梁微观以及微观参数［骨体积/总体积(BV/TV)，骨小梁厚度(Tb.Th)，骨小梁数(Tb.N)和骨小梁分离度(Tb.Sp)］。

和模型组比较，治疗组骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)水平明显降低，骨形成指标骨钙素(OC)水平明显增加；自噬相关蛋白LC3-H/LC3-I、Beclin1和Atg5的蛋白质表达更高,p62表达显著降低；比较差异有统计学意义(P<0.05)。

结论维生素E能够通过提高自噬水平和改善骨转换来保护老年雌性大鼠的骨量。

关键词：自噬;骨转换;老年雌性大鼠;维生素EEffects of Vitamin E treatment on bone mass,bone metabolism and autophagy in aged female ratsYANG Haichao*,HUANG Wei,HAN XiaodongTangshan Workers Hospital,Tangshan063000*Corresponding author:YANG Haichao,Email:3384604245@Abstract:Objective To observe the effects of vitamin E on bone mass and bone metabolism and the effect on the autophagy in aged female rats.Methods Ten young rats and twenty old female Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups:a control group(10young rats),a model group(10old rats),and a treatment group(10old rats),10in each group.During the experiment,the treatment group received vitamin E treatment.After12weeks of treatment,BMD and bone microstructure changes in femurs of rats were detected by Micro-CT detection and HE section staining；ELISA kits were used to detect changes in the levels of bone turnover markers in serum；and the effect of vitamin E on autophagy proteins in bone cells was detected by Western blot. Results Micro-CT detection and HE section staining showed that vitamin E treatment could improve the bone mineral density and trabecular bone microscopic parameters in the femoral metaphysis of aged rats.Serological result showed that the level of anti-tartrate acid phosphatase5b(TRACP-5b),a bone resorption indicator,was significantly reduced,and osteocalcin(OC),a bone formation indicator,was significantly increased.At the same time,the protein expression of autophagy-related proteins LC3-H/LC3-I, Beclin1and Atg5was higher,and p62expression was significantly reduced(P<0.05).Conclusion Vitamin E protects bone mass in elderly female rats by increasing autophagy levels and improving bone turnover.Key words:autophagy；bone turnover；aged female rats；vitamin E老年骨质疏松症的发病率随着世界人口的老龄率、与死亡风险增加密切相关［1］,老年骨质疏松性化而逐渐增加。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************碧云天网站微信公众号网址：酸性磷酸酶检测试剂盒产品编号产品名称包装P0326 酸性磷酸酶检测试剂盒120次产品简介：碧云天生产的酸性磷酸酶检测试剂盒(Acid Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织样品的裂解或匀浆产物的上清液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性的试剂盒。

酸性磷酸酶(Acid Phosphatase)，也称酸性磷酸酯酶，是一种在溶酶体中含量较高的酸性水解酶，被认为是鉴定溶酶体亚细胞组分的标志物。

酸性磷酸酶是一个蛋白家族，哺乳动物中其分子量从18kD到100kD不等。

酸性磷酸酶分为两类，一类为酒石酸盐敏感型，一类为氟离子敏感型。

溶酶体中的酸性磷酸酶为酒石酸盐敏感型，而红细胞和巨噬细胞中的酸性磷酸酶为氟离子敏感型。

血浆中的酸性磷酸酶活性范围在2-7.9U/L，血清中酸性磷酸酶的活性范围在2.5-11.7U/L。

精液(semen)中含有高浓度的酸性磷酸酯酶，活力可以达到87-436KU/L。

本试剂盒可以检测细胞或组织样品的裂解或匀浆产物的上清液、血浆、血清、尿液或纯化的酶样品等中的酸性磷酸酶活性。

Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物，在酸性条件下，可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。

para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下，呈黄色产物，可以在400-415nm检测吸光度。

产物黄色越深，说明酸性磷酸酶检活性越高，反之则酶活性越低。

据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。

包括标准品和空白对照，本试剂盒共可进行120个样品的检测。

人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)水平。

用纯化的TRACP5b抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)，再与HRP标记的酒石酸酸性磷酸酶5b抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

南京建成生物工程研究所价目表南京建成生物工程研究所价目表二○○四年七月一、抗氧化检测试剂及科研试剂：（注：**为新试剂盒）序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A001 超氧化物歧化酶（SOD）测试盒100T 盒羟胺法240.00 建成50T 盒羟胺法130.00 建成A003 丙二醛（MDA）测试盒100T 盒TBA法150.00 建成50T 盒TBA法90.00 建成A002 黄嘌呤氧化酶（XOD）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A015 总抗氧化能力（T-AOC）测试盒50T 盒比色法120.00 建成25T 盒比色法70.00 建成A018 羟自由基测试盒50T 盒比色法150.00 建成A052 超氧阴离子自由基（O ）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A044 髓过氧化物酶（MPO）测试盒50T 盒比色法160.00 建成A007 过氧化氢酶（CAT）测试盒紫外分光光度法100T 盒紫外比色法100.00 建成可见光分光光度法100T 盒钼酸铵法100.00 建成A064 过氧化氢（H2O2）测试盒50T 盒比色法50.00 建成A004 谷胱甘肽—S转移酶（GSH—ST）测试盒80T 盒比色法200.00 建成A005 谷胱甘肽—过氧化物酶（GSH—PX）测试盒50T 盒比色法200.00 建成A062 谷胱甘肽－还原酶(GR)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A006 还原型谷胱甘肽（GSH）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A061 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 测试盒50T 盒比色法180.00 建成A063 巯基（-SH）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A034 单胺氧化酶（MAO）测试盒50T 盒紫外比色法150.00 建成A012一氧化氮（NO）测试盒(硝酸还原酶法) 50T 盒比色法300.00 建成25T 盒比色法180.00 建成A013 一氧化氮（NO）测试盒（化学法测NO2—）100T 盒比色法150.00 建成A014 -1 一氧化氮合成酶（NOS）测试盒[（T－NOS、iNOS、cNOS）三型同时出结果] 50T 盒比色法480.00 建成25T 盒比色法260.00 建成A014-2 一氧化氮合成酶（NOS）测试盒[总NOS（T－NOS）] 50T 盒比色法350.00 建成25T 盒比色法200.00 建成A019-1 乳酸（LD）测试盒（测全血）50T 盒紫外比色法240.00 建成50T 盒可见光比色法240.00 建成A019-2 乳酸（LD）测试盒（测血清、组织）50T 盒比色法200.00 建成A020 乳酸脱氢酶（LDH）测试盒100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法130.00 建成A016-1 A TP酶测试盒（组织及细胞膜需高速离心）(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法150.00 建成A016-2 A TP酶测试盒（组织及细胞膜不需高速离心）(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A057 Cu-A TP酶（Cu-A TPase）测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A069 氢－钾A TP酶（H+-A TPase）测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A070-1 超微量A TP酶测试盒（可测Na+K+、Ca2+Mg2+ A TPase、总ATPase）200T 盒比色法390.00 建成100T 盒比色法230.00 建成A070-2 超微量A TP酶测试盒（可测总A TPase）100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A021 苹果酸脱氢酶测试盒50T 盒紫外比色法面议建成A022 琥珀酸脱氢酶测试盒50T 盒比色法240.00 建成A032 肌酸激酶（CK）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A023 胆碱酯酶（CHE）测试盒50T 盒比色法70.00 建成A024 乙酰胆碱酯酶（T-CHE）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A025 丁酰胆碱酯酶测试盒50T 盒比色法150.00 建成A027 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）测试盒50T 盒比色法100.00 建成A031 b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）测试盒50T 盒比色法260.00 建成A053 β-葡萄糖醛酸苷酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A055** 红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测试盒50T 盒比色法260.00 建成A059 碱性磷酸酶（AKP）测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶（ACP）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A049 前列腺酸性磷酸酶（PACP）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A058 抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP）测试盒50T 盒比色法180.00 建成A068 钙调神经磷酸酶（CaN）测试盒25T 盒比色法200.00 建成A072 全血2，3-二磷酸甘油酸（2，3-DPG）测试盒50T 盒比色法面议建成A047 谷氨酰胺合成酶（GS）测试盒50T 盒比色法300.00 建成A048 腺苷脱氨酶(ADA)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A073** 谷氨酰胺测试盒50T 盒比色法200.00 建成A074** 谷氨酸测试盒50T 盒比色法260.00 建成A075** 谷氨酰胺、谷氨酸（两种均可测）50T 盒比色法480.00 建成A076** 丙酮酸激酶（PK）测试盒50T 盒比色法面议建成A077** 己糖激酶（HK）测试盒50T 盒比色法面议建成A036 唾液酸（SA）测试盒(带SA标准) 50T 盒比色法200.00 建成A017-1 细胞凋亡测试盒（TdT酶、稀释液、POD）10片盒TUNEL法1450.00 建成A017-2 细胞凋亡测试盒（TdT介导的原位末端切口平移双标记法）(全套）10片盒TUNEL法1850.00 建成A008 维生素E（VE）测试盒50T 盒比色法130.00 建成A009 维生素C（VC）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A010 维生素B1（V B1）测试盒50T 盒比色法面议建成A011 维生素B2（V B2）测试盒50T 盒比色法面议建成A026 总氨基酸（T—AA）测试盒80T 盒比色法100.00 建成A030-1 羟脯氨酸测试前处理试剂消化液50T 瓶比色法100.00 建成调PH试剂50T 瓶比色法70.00 建成A030-2 羟脯氨酸（Hyp）测试盒（可测血清、培养液、尿液、心肌、皮肤、软骨、肝脏等等）50T 盒比色法180.00 建成A041 5’-核苷酸酶（5’-NT）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A035 D—木糖测试盒50T 盒比色法100.00 建成A056 糖化血红蛋白（GHb）测试盒15T 盒比色法55.00 建成A037 糖化血清蛋白（GSP）测试盒（果糖胺法）（带标准）50T 盒比色法150.00 建成25T 盒比色法80.00 建成A043 肝/肌糖元测试盒50T 盒比色法160.00 建成A038 脂蛋白（a）[LP（a）]测试盒96T 盒ELISA法380.00 建成A054 脂肪酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A067 总脂酶【脂蛋白脂酶（LPL）/肝脂酶（HL）】测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法160.00 建成A042 游离脂肪酸(NEFA)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A033 脂褐质测试盒50T 盒荧光比色法100.00 建成A039 血清铁测试盒50T 盒比色法100.00 建成A040 总铁结合力(TIBC)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A029 铜兰蛋白（CP）测试盒50T 盒比色法150.00 建成A071 微量游离血红蛋白测试盒50T 盒比色法80.00 建成A028 白蛋白测试盒（溴甲酚绿法）100T 盒比色法30.00 建成A045-1 总蛋白定量测试盒（双缩脲法）100T 盒比色法30.00 建成A045-2 总蛋白定量测试盒（考马斯亮兰法）100T 盒比色法30.00 建成A046 蛋白标准品(总蛋白、白蛋白) 1ml 支7.00 建成A050-1 溶菌酶（LZM）测试盒（带标准）30T 盒试管比浊法60.00 建成A050-2 溶菌酶（LZM）测试盒（带标准）30T 盒平板法60.00 建成A050-3 溶菌酶标准品2mg 支6.00 建成A050-4 微球菌粉30mg 支40.00 建成A065 解脲（溶脲）支原体快速培养基（UU培养基）每人份支培养基10.00 建成A066 人型支原体快速培养基每人份支培养基10.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成二、不孕症系列酶免疫试剂：序号产品名称规格单位检测方法售价厂家B001 抗心磷脂抗体测试盒（ACL）IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒（ACL）IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒（ACL）IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B002 抗精子抗体测试盒（AsAb）IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒（AsAb）IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒（AsAb）IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B003 抗子宫内膜抗体测试盒（EmAb）IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒（EmAb）IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒（EmAb）IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成B004 抗卵巢抗体测试盒（AoAb）IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒（AoAb）IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒（AoAb）IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成三、常用试剂：序号产品名称规格单位检测方法售价厂家C001 钾（K）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）45.00 建成30T 盒比浊法（手工）35.00 建成C002 钠（Na）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）45.00 建成30T 盒比浊法（手工）35.00 建成C003 氯（Cl）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）45.00 建成30T 盒比色法（手工）28.00 建成C004 钙（Ca）测试盒（带标准）30T 盒比色法（上机）40.00 建成30T 盒比色法（手工）30.00 建成C006 磷（Pi）测试盒（带标准）100T 套孔雀绿显色39.00 建成A059 碱性磷酸酶（AKP）测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶（ACP）测试盒50T 盒比色法130.00 建成C009 谷丙转氨酶（SGPT）测试盒100T 盒比色法30.00 建成C010 谷草转氨酶（SGOT）测试盒100T 盒比色法30.00 建成C018 总胆红素、直接胆红素测试盒80T 套咖啡因比色法65.00 建成80T 套一步法65.00 建成C017 Υ—谷氨酰转移酶（Υ—GT）测试盒100T 套比色法88.00 建成C020 尿胆红素测试盒50T 套哈里森氏法25.00 建成C033 尿胆原测试盒50T 套25.00 建成C013 尿素氮（BUN）测试盒100T 套脲酶比色法36.00 建成100T 套二乙酰－肟比色法27.00 建成C016 淀粉酶（AMS）测试盒100T 套淀粉一碘比色法39.00 建成C012 尿酸测试盒50T 套比色法40.00 建成C011-1 肌酐（Cr）测试盒（苦味酸法）100T 套比色法（除蛋白）60.00 建成C011-2 肌酐（Cr）测试盒（苦味酸法）100T 套比色法（不除蛋白）40.00 建成C021 血红蛋白稀释液（测试液）5ml 支HICN比色法4.50 建成C022 血红蛋白标准品5ml×4支套比色法12.00 建成C023 血红蛋白校正液250ml 瓶比色法35.00 建成100ml 瓶比色法14.00 建成C024 血小板稀释液（计数液）100ml 瓶8.00 建成C025 白细胞稀释液（计数液）100ml 瓶8.00 建成C037 红细胞稀释液（计数液）100ml 瓶8.00 建成C026 血细胞仪清洗液250ml 瓶25.00 建成C028 CO2结合力测试盒2ml×3×10 套滴定法40.00 建成C034 脑脊液蛋白测试盒50T 盒磺基水杨酸法50.00 建成C038 血沉测试液100ml 瓶10.00 建成C039 嗜酸粒细胞直接计数液40ml×1 瓶50.00 建成C040 网织红细胞计数液8 ml×2 套试管法30.00 建成10 ml×1 瓶玻片法20.00 建成C035-1 尿蛋白定性测试盒100T 盒磺基水杨酸法30.00 建成C035-2 尿蛋白定量测试盒100T 盒CBB法30.00 建成C041 尿糖试剂100ml 瓶班氏法40.00 建成C027 尿粪隐血测试盒100T 套联苯胺法15.00 建成100T 套邻联甲苯胺法15.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成四、染液类序号产品名称规格单位检测方法售价厂家D001 碱性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D002 酸性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D003-1 酸性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-2 中性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-3 碱性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-4 双重酯酶染液5.0ml´4 盒染色60.00 建成D009 快速血细胞染液50ml×2 套染色40.00 建成D004 糖元染液10ml×4 盒染色40.00 建成D005 苏木素染液50ml×1 瓶染色40.00 建成D019 伊红染液100ml×1 套染色50.00 建成D006 H-E染液套染色55.00 建成D007 瑞氏染液50ml×2 套染色40.00 建成D010 瑞氏一姬姆萨复合染液50ml×2 套染色40.00 建成D011 姬姆萨染液套染色30.00 建成D015 巴氏染液（脱落细胞染色）套染色50.00 建成D017 快速H-E组织细胞及脱落细胞染液10ml×4 染色20.00 建成D008 革兰氏染液50ml×4 套染色50.00 建成D012 抗酸染液50ml×2 套染色40.00 建成D013 溴酚兰溶液1.0ml 支染色10.00 建成D014 溴乙淀溶液1.0ml 支染色20.00 建成D016 细胞活性鉴别染液20ml 瓶伊文斯蓝法20.00 建成D018 血管通透性测试染液20ml 瓶美蓝法20.00 建成D020** 过氧化物酶染液5ml 套染色20.00 建成五、各种浓度及PH值的缓冲液：(注: 以下缓冲液PH值、摩尔浓度按客户要求配制。

低浓度DMSO对RANKL诱导的RAW264.7细胞破骨分化的影响张鑫;李金源;沈晨曦;刘庆辉;毕文娟【摘要】（1）目的探讨低浓度二甲基亚枫（DMSO）对RANKL诱导的破骨细胞前体RAW264.7细胞破骨分化的影响。

（2）方法将细胞接种在24孔板上,采用0、0.001%、0.005%、0.01%、0.05%、0.1%、0.15%、0.2%等八种低浓度的DMSO作用于RANKL诱导的RAW264.7,细胞4天后,各培养孔随机采集照片20张,用显微镜每孔随机收集20张照片,使用Image-Pro Plus6.0软件对每张图进行测量,记录每张照片中RAW264.7细胞的细胞总数及总面积。

（3）结果较RANKL组相比,DMSO浓度为0.005%和0.01%时,RAW264.7细胞形成破骨细胞的表面积均显著增大,差异有统计学意义（P〈0.01）,且0.005%和0.01%两组间差异无统计学意义（P〉0.05）;而DMSO浓度进一步提高为0.1%,0.15%,0.2%时,破骨细胞表面积随浓度升高而减小;DMSO浓度为0.001%,0.05%,0.1%时,破骨细胞表面积与未加DMSO组差异无统计学意义（P〉0.05）。

（4）结论 DMSO浓度为0.005%和0.01%时促进RAW264.7细胞的破骨分化,而随着DMSO浓度的进一步提高,DMSO对RAW264.7破骨分化的促进作用消失,甚至表现为抑制破骨分化。

【期刊名称】《华北理工大学学报：医学版》【年(卷),期】2018(020)001【总页数】6页(P1-6)【关键词】DMSO;RAW264.7;RANKL;破骨分化【作者】张鑫;李金源;沈晨曦;刘庆辉;毕文娟【作者单位】华北理工大学口腔医学院河北唐山063000;华北理工大学口腔医学院河北唐山063000;华北理工大学口腔医学院河北唐山063000;华北理工大学口腔医学院河北唐山063000;华北理工大学口腔医学院河北唐山063000;【正文语种】中文【中图分类】R329.2二甲基亚砜(Dimethyl Sulphoxide，DMSO)是一种含硫有机化合物，通常作为冰冻细胞，组织和器官的重要试剂，也可以作为渗透剂通过皮肤和黏膜给药。

2-8℃
Stop Solution
3ml×1 bottle
6ml×1 bottle
2-8℃
wash solution
（20ml×20fold）
×1bottle
（20ml×30fold）
×1bottle
2-8℃
Specimen requirements
1.serum-coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-minat the speed of2000-3000 r.p.m. removesupernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
4.cell culture supernatant-detect secretory components,collect sue a sterile container,centrifugation 20-minat the speed of2000-3000 r.p.m. removesupernatant,detectthe composition of cells, Dilut cell suspension withPBS（PH7.2-7.4）,Cell concentration reached 1 million / ml,repeated freeze-thaw cycles,damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-minat the speed of2000-3000 r.p.m. removesupernatant,Ifprecipitation appeared,Centrifugal again.

小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)酶联免疫分析(ELISA)最近更新时间：2011年3月8日提供商：上海研辉生物科技有限公司资料大小：0K文件类型：下载次数：0次资料类型：浏览次数：48次相关产品：详细介绍：小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平。

用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)，再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

Ｐ ｎ ＭＡ （ ｔ ＜ ．１ Ｇ ｏ ｐ Ｐ ｉ ｄ ｄ ａ ｃｅ ｓｄ Ｂ ｆ ｕ ａ ｐｎ ｌ ． ） Ａ ｍ ｒ ｉ ｉｃ ｎ ｄ — Ｍ ａｄＰ ｂ ｈ ０ ） ｒｕ ＭＡ ｙ ｌｅ ｎｉ ｒａｅ ＭＤ ｏ ｍｂ ｒ ｉｅ ＜ ０ ． ｏｅｓ ｎｆ ａ ｔ ｅ ｏ ０ ． ｅ ｎ ｌ ｓ ０ ５ ｇ ｉ
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人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平。

用纯化的人TRAP抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入TRAP抗体，再与HRP标记的酒石酸酸性磷酸酶抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)浓度。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

细胞与分子生物学红景天苷抑制破骨细胞分化和极化的初步研究易清清1，梁鹏晨2，孙苗苗2，杨荣3，梁冬雨1，沙爽4，常庆1△摘要：目的探究红景天苷抑制破骨细胞分化和极化的作用。

方法体外培养RAW264.7细胞，加入可溶性核因子κB受体活化因子配体（sRANKL）连续培养5d诱导为破骨细胞。

设置对照组（培养基不含红景天苷）和实验组（培养基中红景天苷剂量分别为15、30、60mg/L），通过TRAP染色对比诱导分化结果，通过鬼笔环肽染色和茜素红染色观察破骨细胞F-Actin环形成和破骨细胞钙化情况，通过qPCR检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、非受体酪氨酸激酶（c-Src）、组织蛋白酶K（CK）、整合素β3（Integrinβ3）mRNA表达水平，Western blot检测MMP-9和c-Src蛋白表达水平。

结果与对照组相比，各实验组TRAP染色阳性细胞数显著减少，F-Actin环形成减少，而破骨细胞茜素红染色显著加深，钙化加重（均P＜0.05），且随着红景天苷剂量的升高，变化更加明显。

与对照组相比，30和60mg/L SAL组MMP-9、c-Src、CK mRNA表达水平均降低，同时各实验组MMP-9及c-Src蛋白表达水平显著降低。

结论红景天苷对破骨细胞的分化、极化和骨吸收有一定的抑制作用，其作用机制可能与下调MMP-9和c-Src表达有关。

关键词：红景天属；破骨细胞；细胞分化；红景天苷；细胞极化；骨吸收中图分类号：R285.5文献标志码：A DOI：10.11958/20212038A preliminary study of the inhibitory effect of salidroside on differentiation andpolarization of osteoclastsYI Qingqing1,LIANG Pengchen2,SUN Miaomiao2,YANG Rong3,LIANG Dongyu1,SHA Shuang4,CHANG Qing1△1Clinical Research Center,Jiading District Central Hospital Affiliated to Shanghai University of Medicine&Health Sciences, Shanghai201800,China;2Graduate School,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine;3Department of Pathology,Jiading District Central Hospital Affiliated to Shanghai University of Medicine&Health Sciences;4Shanghai Key Laboratory for Molecular Imaging,Shanghai University of Medicine&Health Sciences△Corresponding Author E-mail:*********************Abstract:Objective To investigate the inhibitory effect of salidroside(SAL)on osteoclast differentiation and polarization.Methods RAW264.7cells were cultured in vitro and induced into osteoclasts by adding solvable receptor activator of nuclear factor kappa B ligand(sRANKL)for5days.The control group(culture medium without SAL)and the experimental group(culture medium with SAL in dosage of15,30,60mg/L respectively)were set.The results of inducing differentiation were compared by TRAP staining.F-Actin ring formation and osteoclast calcification were compared by phalloidin staining and alizarin red staining.Real time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(qPCR)was used to detect expression levels of MMP-9,c-Src,CK and Integrinβ3.The expression levels of MMP-9 and c-Src proteins were detected by Western blot assay.Results Compared with the control group,the number of TRAP positive cells,and F-Actin ring formation were significantly reduced in each experimental group.The calcification of osteoclasts and the alizarin red staining of osteoclasts were significantly deepened,indicating the the increased calcification (P＜0.05).Compared with the control group,the expression levels of MMP-9,CK and c-Src mRNA decreased in the30and 60mg/L SAL groups,and the expression levels of MMP-9and c-Src protein decreased significantly in each group.Conclusion Salidroside can inhibit the differentiation,polarization and bone resorption of osteoclasts,and its mechanism may be related to the down-regulation of MMP-9and c-Src expression.Key words:rhodiola;osteoclasts;cell differentiation;salidroside;cell polarization;bone resorption基金项目：上海市嘉定区卫健委重点项目（2020-ZD-03）；上海市嘉定区自然科学基金资助项目（JDKW-2020-0013）作者单位：1上海健康医学院附属嘉定区中心医院中心实验室（邮编201800）；2上海中医药大学研究生院；3上海健康医学院附属嘉定区中心医院病理科；4上海健康医学院分子影像中心作者简介：易清清（1988），女，主管技师，主要从事中药与医学生物材料研究。

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重庆 医 学 ２００８年 １月 第 ３７卷 第 ２期
１５９
· 临 床 研 究 ·
血 清 抗酒 石 酸 酸 性磷 酸 酶 ５ｂ测 定在 老 年 人 中的临 床应 用
肖 恩 ，司 良毅 △，孟 萍 （第三 军 医大 学西 南 医院老年 病科 ，重 庆 ４０００３８）
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｔａｒｔｒａｔｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ５ｂ ａｎｄ ｉｔｓ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ａｇｅｄ ｐｅｏｐｌｅ ＸＩＡＯ Ｅｎ，ＳＩ Ｌｉａｎｇ—Ｙｉ ，Ｍ ＥＮＧ Ｐｉｎｇ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｅｒｏｎｔｏｌｏｇｙ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｈｉｒｄ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００３８，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｔａｒｔｒａｔｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ５ｂ （ｓＴＲＡＣＰ５ｂ）ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ ｂｏｎｅ．Ｍ ｅｔｈｏｄｓ Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｂｏｎｅ ＴＲＡＣＰ５ ｂ ｒｅａｇｅｎｔ ｂｏｘ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ ＩＤＣ Ｃｏｍｐａｎｙ，ｓＴＲＱＣＰ５ ｂ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｉｎ ７９ ｃａｓｅｓ ｏｆ ，关 注 老 年 人 身 心 健 康 及 生 存 质量 已成 为 世 界 卫 生 组 织 关 注 的焦 点 ，尤 其 是 骨 质 疏 松 症 已成 为 临 床 研 究 热 点 。该 病 的 发 生 多 见 于 老 年 人 及 绝 经 后 妇 女 ，但 一 些 疾 病 如 糖 尿 病 、肿 瘤 等 也 可 以继 发 导致 骨 质 疏 松 症 。正 常 人 骨 骼 代 谢 是 通 过 骨 转 换 过 程 进 行 ，在 骨 转 换 过 程 中 ，破 骨 细 胞 吸 收 骨 质 形 成 的 吸 收 陷 窝 由 成 骨 细 胞 合 成 分 泌 类 骨 质 ，并 矿 化 形 成 新 的 骨 基 质 予 以 填 补 ，在 全 身 激 素 和局 部 因 子 的 调 节 下 ，骨 吸 收 和骨 形 成 的功 能 保 持 动 态 平 衡 。 骨 转 化 功 能 过 高 或 过 低 均可 导致 骨质 疏 松 疾 病 的发 生 。 国 内 外 研 究 表 明 ：血 清 抗 酒 石 酸酸 性 磷 酸 酶 ５ｈ（ＴＲＡｃＰ５ｂ）作 为 第 ２代 骨 吸 收 标 记 物 ，是 一 个 具 有 特 异性 和 高 敏感 度 的 骨 吸 收 指 标 ＿】 ］。 因 此 ，本 组 选 择 住 院老 年 人 群 进 行 血 清 ＴＲＡＣＰ５ｂ水 平 测 定 ，以期 发 现 哪 些 疾 病 能 够 引起 骨 吸收 增 加 ，从 而 进 行 临 床 干 预 治 疗 ，预 防 骨 质 疏 松 症 的发 生 。 １ 对 象 与 方 法 １．１ 对 象 １．１．１ 正 常 对 照 组 老 年 健 康 体 检 者 ６Ｏ例 ，男 、女 各 ３Ｏ例 ， 女 性 均 已绝 经 ，绝 经 年 限 ８年 以上 。肝 肾功 能 正 常 。排 除 以 下 情 况 ：（１）有腰 椎 或 髋 部 骨折 史 ；（２）有 影 响 骨 代 谢 的 疾 病 ，包 括 甲状 腺及 甲状 旁腺 疾病 ，糖 尿 病 、柯 兴 综 合 征 等 代 谢 内 分 泌 系

·论著·作者简介：卢世云，副主任医师，E-mail ：lushiyun@medmail．com．cn降钙素原、C 反应蛋白与急性胰腺炎严重程度和预后的关系卢世云，林志辉，潘秀珍（福建医科大学省立临床学院、福建省立医院消化内科，福州350001）［摘要］目的探讨降钙素原（PCT ）、C 反应蛋白（CＲP ）与急性胰腺炎（AP ）严重程度和预后的相关性。

方法回顾性分析106例急性胰腺炎（AP ）的降钙素原、C 反应蛋白水平，其中重症急性胰腺炎（SAP ）45例，轻症急性胰腺炎（MAP ）61例。

分析它们与其他生化指标、AP 病情程度及患者预后的相关性。

结果SAP 组患者血清PCT 及CＲP 水平分别为（7．86ʃ2．38）μg /L 和（148．26ʃ16．46）mg /L ，明显高于MAP 组的（5．22ʃ2．13）μg /L 和（47．62ʃ9．89）mg /L （P ＜0．01）。

AP 患者血清PCT 水平与CＲP 水平呈正相关（r =0．316，P ＜0．01），且两者与24h APACHE II 评分、Ｒanson 评分、Balthazar CT 评分均呈正相关（P ＜0．05或＜0．01）。

结论检测PCT 与CＲP 水平有助于判断AP 病情发展和预测预后。

［关键词］胰腺炎；C 反应蛋白质；降钙素；危险因素中图分类号：Ｒ576．1文献标识码：ADOI ：10．3969/J．issn．1672-6790．2013．06．007Ｒelationship between serum procalcitonin ，C reactive protein and severity and prognosis of acute pancreatitis LU Shiyun ，LIN Zhihui ，PAN Xiuzhen （Department of Gastroenterology ，Fujian Provincial Hospital ，Fuzhou 350001，China ）［Abstract ］ObjectiveTo analyze the correlation of serum procalcitonin （PCT ），C reactive protein （CＲP ）and severity and prognosis of acute pancreatitis （AP ）．MethodsThe serum levels of PCT ，CＲP of 106cases of acutepancreatitis were collected and analyzed retrospectively ，including 45severe acute pancreatitis （SAP ）and 61mild a-cute pancreatitis （MAP ）．Then their relationship with other biochemical parameters ，the severity and prognosis of AP was analyzed．ＲesultsThe serum PCT and CＲP levels were （7．86ʃ2．38）μg /L and （148．26ʃ16．46）mg /L inSAP group ，and both were significantly higher than those in MAP （5．22ʃ2．13）μg /L and （47．62ʃ9．89）mg /L （P ＜0．01）．The serum levels of PCT was positively correlated with serum levels of CＲP （r =0．316，P ＜0．01），and both were positively correlated with 24h APACHE IIscore ，Ｒanson score ，Balthazar CT score （P ＜0．05or ＜0．01）．Con-clusion Our results indicate PCT and CＲP levels may evaluate progression of AP and predict prognosis at an earlydate．［Key words ］Pancreatitis ；C-reactive protein ；Calcitonin ；Ｒisk factors急性胰腺炎（AP ）是临床消化科常见的急腹症，起病急剧，发展迅速，并发症多，重症急性胰腺炎（SAP ）病死率高达20% 30%。

西安赫特生物科技有限公司 XAHT-01-014-019-2015抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒该试剂盒可用于血液、骨髓或组织来源的白细胞的酸性磷酸酶染色。

抗酒石酸酸性磷酸酶是一种糖基化的含金属蛋白酶，在破骨细胞(osteoclast)和破软骨细胞(chondroclast)中高表达。

在活化的巨噬细胞和神经元中也有表达。

抗酒石酸酸性磷酸酶在细胞信号转导、细胞增殖和分化等方面起重要作用，也和活性氧产生和铁离子转运等有关。

抗酒石酸酸性磷酸酶可以被破骨细胞释放到血液中，几乎被认为是是机体破骨活性的唯一血液指标。

使用naphthol AS-BI phosphate及fast garnet GBC salt进行染色。

在酸性环境下，可快速偶联，形成不溶解的染料沉淀。

试剂准备1. Fast Garnet GBC Base溶液的配制：使用前，将1管Fast Garnet GBC Base溶于2mL FastGarnet GBC Base缓冲液中，新鲜配置。

2. 固定液：将25mL柠檬酸溶液，65mL丙酮及8mL 37%甲醛混合。

置于玻璃瓶中，盖紧盖子。

保存于2–8°C，可稳定2个月。

如果明显挥发，应丢弃。

使用说明1. 去离子水37°C预热备用；2. 固定液放置室温至18~26°C，将载片浸泡于固定液中，固定30sec。

去离子水冲洗，不要让载片干燥；也可使用4%多聚甲醛固定；3. 准备两支检测试管，每支中均加入0.5mL Fast Garnet GBC Base溶液与0.5mL亚硝酸钠溶液，将其混匀30sec，静置2min；4. 准备两个100mL烧杯，分别标记为A和B，按照下表将各成分混合，尽量避光操作；试剂烧杯A 烧杯B（对照）45mL预热至37°C的去离子水 45mL1.0mL从第三步得到的混合液 1.0mL0.5mLNaphthol AS-Bl Phosphate溶液 0.5mL2.0mL 乙酸缓冲液 2.0mL1.0mL 酒石酸盐溶液 —5. 准备两个玻片染缸，分别标记为A和B，分别将烧杯的溶液倒入相应的染缸中。

（1）问：小鼠乙酰胆碱Elisa试剂盒后期数据处理中空白的OD值有什么作用？答：可以将标准品和样本的OD值同时减去空白的值进行计算，或者都不减，保持同一水平就行。

（2）问：那我们算出来的ACH含量为什么出现负值？答：说明个别样本的浓度很低,当浓度接近第6个点的时候,直线方程就有可能计算出负值。

（3）问：小鼠乙酰胆碱ELISA试剂盒，组织标本切割标本后能用生理盐水稀释吗？还有稀释的倍数是多少?答：生理盐水也可以，加入量1:3。

（4）问：我想问一下，标准品浓度与标准品吸光度值之间是不是线性回归？检测出来的吸光度值很低一般都存在哪些原因？大部分在0.08左右？（大鼠5羟色胺（5-HT）Elisa试剂盒）答：是线性回归。

检测出来的值比较低，样本、稀释、操作等，原因很多，但只要在可操作范围就行。

（5）问：做出来的结果：标准品的吸光度呈线性回归，但是样品的吸光度都和本体吸光度值接近，正常未予干预的大鼠血浆都基本没有5-HT 表达，这是什么原因？（大鼠5羟色胺（5-HT）Elisa试剂盒）答：样本、稀释、室控和机器操作等，原因都可能造成吸光度都和本体吸光度值接近，好像荧光法里面有种试剂盒可以检测滴度。

（6）问：Elisa试剂盒的使用的方法是什么啊？答：采用双抗夹心法（目前暂行）（7）问：一个孔需要多少量的血清？答：一个孔上样量10-50微升。

（8）问:未处理的样本我需要邮寄多少的量？答：每个孔需要100ul（9）问：样本怎么保存？答：当天要用的样本保存4℃，隔天样本-20℃（近期一个月左右要用的样本），长期保存样本-70℃（一年或者更长时间多久都可以用），避免反复冻融。

（10）问：EP管是什么管？答：离心管。

（11）问：收集血清的时候用什么管？答：普通离心管即可。

（12）问：96t可以检测多少个样本？48t可以检测多少个样本？答：96t标准的可以检测85个样本，其他有10个标准品孔，1个空白对照。

96t单孔可以检测90个样，7个标准品控1个空白对照。