抗肿瘤新靶点――黏着斑激酶

黏着斑激酶在结肠癌细胞株中的表达及其RNA干扰载体的构建陈玉英;梁后杰【摘要】目的检测结肠癌细胞株中FAK的蛋白表达水平,并构建FAK靶向RNA 干扰重组体.方法通过免疫细胞化学SP法和Western Blotting技术检测结肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29、LOVO中FAK的表达水平;针对FAK序列设计并合成具有小发夹结构的两条DNA序列,经退火后再重组入pGenesil-1载体,并转化大肠杆菌DH5α,经酶切及测序鉴定后转染结肠癌HT29细胞株.结果 FAK在SW480、HCT116、HT29、LOVO等细胞株中均有较高表达,其中HT29为最高.重组体经鉴定与设计序列一致,并稳定转染HT29细胞.结论 FAK在4个细胞株中高表达可能对结肠癌及其进展有重要作用;FAK靶向RNA干扰重组体的成功构建和转染,为结直肠癌新的基因治疗方法提供可能的思路.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2008(023)001【总页数】4页(P8-10,17)【关键词】黏着斑激酶;RNA干扰;结肠癌;构建;表达;【作者】陈玉英;梁后杰【作者单位】400038,中国人民解放军第三军医大学西南医院肿瘤科;400038,中国人民解放军第三军医大学西南医院肿瘤科【正文语种】中文【中图分类】R735.3+5黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是1种非受体型蛋白酪氨酸激酶，是介导细胞与细胞间、细胞与细胞外基质信号转导的重要胞内分子，具有调节细胞与细胞外基质 (ECM) 黏附的作用。

近年来研究发现FAK与细胞生存、增殖、凋亡等密切相关[1～3]。

据报道FAK在结肠癌中高表达[4]，且与结、直肠不同病变细胞的发生、黏附、迁移、增殖、侵袭和转移等生物学行为有重要作用[5]。

因而，FAK可能是结肠癌治疗的1个重要靶点，而抑制FAK的功能可能可以阻断多条与肿瘤相关的信号通路，成为结直肠癌治疗的新策略。

FAK在恶性肿瘤中的作用的研究进展作者：周晓霞崔潇付贺飞来源：《中国实用医药》2009年第17期【摘要】黏着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)是一种非受体酪氨酸激酶,参与多种信号途径,与细胞生存、细胞周期调控、黏附、迁移侵袭及血管生成等相关[1]。

FAK在许多肿瘤组织中表达增强,包括肺癌、鳞状细胞喉癌、侵袭性结肠癌和乳腺癌、卵巢癌、转移性前列腺癌和恶性黑素瘤等,并参与肿瘤的发生、发展、侵袭、转移。

【关键词】黏着斑激酶;恶性肿瘤1FAK的结构及其基因定位FAK是一种非受体型酪氨酸激酶,与酪氨酸激酶2(proline2richtyrosinekinase2,PYK2)及细胞黏着激酶β(cellularadhesionkinaseβ,CAKβ)组成FAK家族[2]。

FAK基因定位于人8q24,FAK蛋白由1028个氨基酸组成,分子量125kD,含有3个功能区:带有FERM区的氨基端(N端)、由富含Pro区和黏着斑定位区(focaladhesiontargeting,FAT)组成的羧基端(C端)和激酶区。

2FAK的表达及信号转导机制FAK基因的564到+47碱基区是其高表达所必须的[3],FAK基因5′端GC富集区有转录因子结合区,包含NFκB和P53结合位点。

磷酸化是FAK激活的重要方式。

FAK的激活还依赖整合素β胞质区及细胞骨架的完整性[4]。

通过N端区靶定的生长因子受体GFRs、C端区的介导黏附的整合素家族介导信号通路。

通过与PI3K的p85亚基结合和磷酸化,形成磷脂类PIP2/3和活化的PKB,从而介导生存信号通路。

FAK结合Grb2使Tyr925磷酸化致使Grb2/Sos/Ras/ERK 通路激活,从而调节增殖和迁移。

与p130CAS相互作用结合到C端Pro富含区域从而介导移动。

3FAK相关的信号转导通路及其在恶性肿瘤中的作用机制AFK与多个信号通道蛋白有联系,如Src家族的蛋白激酶,p130cas,Shc,Grb2以及磷脂酰肌3激酶等。

黏着斑激酶通过细胞周期蛋白依赖性激酶2、c-junN端激酶促进人肺动脉平滑肌细胞增殖林春龙【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2008(024)002【摘要】目的:探讨黏着斑激酶(FAK)促进人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)增殖的机制.方法:取肺癌部分切除手术病人远离肺癌的周围正常组织,酶消化法培养细胞.在正义寡核苷酸(FAK SODNs)、反义寡核苷酸(FAK ASODNs)、随机寡核苷酸(FAK MS)转染后,用免疫印迹方法测定了FAK、c-junN端激酶(JNK)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达;用流式细胞仪测定了细胞周期、细胞凋亡;用免疫组织化学法测定胞浆FAK的表达.结果:免疫印迹结果表明,与FAK MS组比较,应用FAK ASODNs转染后HPASMCs FAK、JNK、CDK2蛋白质的表达明显降低(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01);而用正义寡核苷酸转染后则明显增加(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05).流式细胞仪测定结果示:与FAK MS转染组比较:FAK SODNs转染后,HPASMCs中G1相的比例显著减少,S相显著增加(P＜0.01),细胞凋亡减少(P＜0.01);而FAK ASODNs转染后结果则相反.免疫组织化学结果显示:FAK SODNs转染后HPASMCs胞浆染色增强,FAK ASODNs转染后胞浆浅染,提示FAK表达减少.结论:FAK可能经由JNK、CDK2信号通路促使细胞增殖.【总页数】4页(P303-306)【作者】林春龙【作者单位】湖南师范大学附属岳阳医院,岳阳市立二医院呼吸内科,湖南,岳阳,414000【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.黏着斑激酶促进人肺动脉平滑肌细胞增殖 [J], 林春龙;张珍祥;徐永健2.血管紧张素Ⅱ对人肺血管平滑肌细胞增殖及黏着斑激酶表达的影响 [J], 林春龙;张珍祥;徐永健3.蛙皮素对人胰腺癌细胞系CFPAC-1细胞周期蛋白D1/细胞周期蛋白依赖性激酶4的影响 [J], 吴东方;钱家鸣;李景南;陈原稼4.内皮素-1促进人肺血管平滑肌细胞黏着斑激酶的表达 [J], 林春龙;张珍祥;徐永健;倪望;陈仕新5.沉默黏着斑激酶促进人胃癌SGC-7901细胞骨架蛋白解聚及细胞形态损伤 [J], 高宁;张静;杜娟;慕明涛;刘俊俊;金文杰;何慧敏;侯颖春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

肝细胞癌中粘着斑激酶表达增加及意义周景师;窦科峰;李海民【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2003(016)001【摘要】@@ 0 引言rn我国为肝细胞癌(HCC)高发区,目前大肝癌切除术后5年复发率为60%～80%,小肝癌亦达到40%～50%.如何降低复发率、提高无瘤生存率就显得甚为重要和迫切[1].如果能在早期发现HCC的转移复发倾向,并以此指导临床治疗,那么必将促使HCC疗效实现一次飞跃.欧美发达国家为HCC低发区,故关于HCC侵袭转移的研究较少.然而在一些恶性肿瘤中已发现一种调节细胞形态和运动的细胞质内蛋白质酪氨酸激酶--粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)表达的改变,并与肿瘤细胞的侵袭和转移显著相关.国内尚未见关于HCC中FAK蛋白表达情况的研究报告.故本实验设计用免疫组化技术检测在HCC、肝硬化及正常肝标本中FAK的表达情况.【总页数】2页(P66-67)【作者】周景师;窦科峰;李海民【作者单位】第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西西安,710032;第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西西安,710032;第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西西安,710032【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.粘着斑激酶在唾液腺腺样囊性癌中的表达与临床意义 [J], 林宇静;周文英;曹婉维;郑燕璇;王晓鸿2.粘着斑激酶及磷酸化粘着斑激酶在结肠癌中的表达及其临床意义 [J], 张险峰;于皆平;于红刚;刘竹军;罗和生3.粘着斑激酶及磷酸化粘着斑激酶在鼻咽癌中的表达及意义 [J], 高尚;董频;李大伟;沈斌4.粘着斑激酶和血管内皮生长因子在唾液腺腺样囊性癌中的表达及意义 [J], 龚攀;欧阳可雄;陈凯;邝燕好;李劲松5.E-cadherin与粘着斑激酶在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义 [J], 王刚成;高阳;孔烨;闫慧颖;韩广森因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

文章编号:1008-0392(2001)06-0064-03粘着斑激酶及其在肿瘤侵袭和转移中的作用王　钢综述　朱　炎审校(同济大学口腔医学研究所,上海　200072)关键词:粘着斑激酶;肿瘤;侵袭;转移中图分类号:R 781.9 文献标识码:A收稿日期:2001-02-15基金项目:铁道部科技基金(J -99Z030)作者简介:王　钢(1975-),男,医师,硕士. 多细胞机体内信息传递是维持正常机能的基本生物学机制之一,信号分子可是可溶性的(如激素和生长因子)也可是不可溶性的(如细胞外基质ECM )。

大信号分子可通过胞膜表面受体传导生物信号产生胞核水平反应称信号传导。

传导通路有多信号分子参与具放大作用,其作用方式的偏差将会导致组织器官的疾病。

蛋白磷酸化/去磷酸化循环是信号通路的重要部分,激酶催化A TP 三位磷酸基转化到蛋白上。

酶活性高度可调,激酶和磷酸酶的作用底物可是自身,此特点导致催化的级联作用对环境的细微变化反应迅速。

磷酸化/去磷酸化循环普遍存在于从糖元代谢到细胞生长的过程中。

粘着斑激酶(focal adhesion kinase ,pp 125FA K )是一种非受体型酪氨酸激酶,调节粘着斑完整性,在丝氨酸转化细胞的磷酸化蛋白中发现,与酪氨酸激酶2(proline 2rich tyrosine kinase 2,P YK2)及细胞粘附激酶β(cellular adhesion kinase β,CA K β)组成FA K 家族[1]。

FA K 结构高度保守,人FA K 编码位于8q24,cDNA 全长4285,编码1028个氨基酸,分子量125KD 。

分子水平与其它非受体型酪氨酸激酶有明显区别,由三个功能域组成即氨基端功能域、羧基端功能域、介于两者之间的390到650位高度保守的催化功能域,无传导蛋白信号的SH 2和SH 3结构。

氨基端有与整合素β亚单位细胞之间的多肽结合部位可与细胞骨架蛋白和信号传导蛋白结合的位点;羧基端介导蛋白质之间的信号传导,含有三个富含脯氨酸的区域可与目标蛋白的SH 3结合,含有150氨基酸的粘着斑定位序列(focal adhesion targetingsequence ,FA T )能将粘着斑和FA K 结合起来。

抗肿瘤新靶点——黏着斑激酶作者：陈博张忠伟万升标江涛来源：《健康必读·下旬刊》2011年第06期【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2011)06－0017－01【摘要】黏着斑激酶（focal adhesion kinase, FAK）于1992年被发现后受到广泛的关注。

研究已经证实肿瘤的发生、侵袭或转移能够导致FAK的激活或者过表达，因此抑制FAK的功能可以达到阻断肿瘤相关的信号通道，从而控制或者治愈肿瘤。

【关键词】肿瘤信号通路过表达黏着斑激酶1 FAK的结构FAK的结构如图1所示，其包含三个功能区域：N端FERM（protein 4.1, ezrin, radixin and moesin homology）结构域、C端结构域和中央激酶区。

现已知道的FAK包含6个位点能够被磷酸化，分别为Tyr 397、Tyr 407、Tyr 576、Tyr 577、Tyr 861和Tyr 925，该位点是FAK能否发挥信号传导功能的关键部位[1-6]。

2 FAK的生物学功能FAK作为多功能的非受体酪氨酸激酶，主要通过以下几个途径发挥其生物学功能，从而参与肿瘤的侵袭、转移、发生和发展。

（1）调节细胞的存活、生长、发育和凋亡。

FAK对于细胞的凋亡起到明显的阻止作用，一旦FAK功能被阻断，细胞就会凋亡而死[7]。

当FAK发生活化，不仅能够增加血管平滑肌细胞的DNA的合成，还能够对VSMC的增殖起显著的抑制作用。

内皮细胞的形态发生过程包含五个方面，即: 锚定、外侵、迁移、穿透和生存，FAK能够影响其形态发生的过程。

通过调节黏着斑聚集，从而对于细胞的生长和存活产生影响[8-10]。

例如在新鲜的成纤维细胞中微量注入抗FAK的抗体，能够导致细胞的死亡，而将其注入培养的成纤维细胞中时，细胞在4个小时内开始发生凋亡。

这些实例表明FAK可以通过将细胞与ECM锚定信号传至细胞核，导致细胞凋亡发生抑制。

黏着斑激酶信号转导及生物学效应杨长春1x(综述,马增春2(审校摘要:黏着斑激酶(FAK 是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶,起介导细胞外信号由整合素向细胞内转导的作用,FAK 的磷酸化激活以及由此所产生的一系列下游蛋白质的磷酸化,是细胞外基质与细胞相互作用并产生一系列生物学效应的关键环节,参与细胞增殖、迁移与凋亡的调节过程。

研究显示,黏着斑激酶表达及活化与肿瘤、心血管疾病密切相关,已成为生物学领域研究的热点及治疗的新靶点。

关键词:黏着斑激酶;信号转导;生物学效应Fo cal Adh es i on K i na s e Signa lT ran s d ucti on and Its B i o l og i cal E ffects Y A NG Chang 2c hun 1,MA Z e ng 2chun 2.(1.The F irs t De part men t of Na lou,t he Ge nera lH os pit a l of Ch i neseP eople c s Armed P oli ce F orces ,Bei 2jing 100039,Ch i na;2.Beiji ng In s tit u t e of Rad iation M ed i ci ne ,Beijing 100850,Ch i naAb stract :I n creasi ng st ud ies have de m on strated that f ocal adhes i on k i nase(F AK,a non 2recep t or t yro 2si n e k i n ase ,i nvol ves i n the i ntracell u l ar si gnal transducti on m ed i ated by i ntegri n.Phosphoryl ati on of F AK it 2self and follo w i ng protei n s is the key li nk in t h e interactions bet w een extracell u l ar m atri x and cell s wh ich i n turn s h o w a series of b i ological effects ,i ncl ud i ng cell p roliferati on,m i grati on and apop t osis .M any researchesh ave reported t hat the exp res s i on and acti vati on ofFAK has correlat ed with t um or and cardiovascu l ar d isease ,FAK has been t h e hot spot i n b i ol ogy fiel d and i t w ill be a ne w target i n therapy .K ey word s :Focal adh es i on k i nase ;Si gnal transdu cti on;Bi ological effects黏着斑激酶(f ocal adhesion kinase ,FA K ,是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶,在细胞内信号转导中具有重要作用,是细胞内多条信号转导通路的交汇点,与细胞迁移、增殖、凋亡等生物学过程的调节密切相关。

ＦＡＫ在恶性肿瘤中的作用的研究进展周晓霞崔潇付贺飞【摘要】黏着斑激酶（ｆｏｃａｌａｄｈｅｓｉｏｎｋｉｎａｓｅ，ＦＡＫ）是一种非受体酪氨酸激酶，参与多种信号途径，与细胞生存、细胞周期调控、黏附、迁移侵袭及血管生成等相关…。

ＦＡＫ在许多肿瘤组织中表达增强，包括肺癌、鳞状细胞喉癌、侵袭性结肠癌和乳腺癌、卵巢癌、转移性前列腺癌和恶性黑素瘤等，并参与肿瘤的发生、发展、侵袭、转移。

【关键词】黏着斑激酶；恶性肿瘤１ＦＡＫ的结构及其基因定位ＦＡＫ是一种非受体型酪氨酸激酶，与酪氨酸激酶２（ｐｒｏ－ｌｉｎｅ２ｒｉｃｈｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ２，ＰＹＫ２）及细胞黏着激酶Ｂ（ｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｋｉｎａｓｅｌ３，ＣＡＫｆｌ）组成ＦＡＫ家族拉Ｊ。

ＦＡＫ基因定位于人８ｑ２４，ＦＡＫ蛋白由１０２８个氨基酸组成，分子量１２５ｋＤ，含有３个功能区：带有ＦＥＲＭ区的氨基端（Ｎ端）、由富含Ｐｒｏ区和黏着斑定位区（ｆｏｃａｌａｄｈｅｓｉｏｎｔａｒｇｅｔｉｎｇ，ＦＡＴ）组成的羧基端（ｃ端）和激酶区。

２ＦＡＫ的表达及信号转导机制ＦＡＫ基因的５６４到＋４７碱基区是其高表达所必须的¨Ｊ，ＦＡＫ基因５’端ｃｃ富集区有转录因子结合区，包含ＮＦ・ＫＢ和Ｐ５３结合位点。

磷酸化是ＦＡＫ激活的重要方式。

ＦＡＫ的激活还依赖整合素Ｂ胞质区及细胞骨架的完整性Ｈ１。

通过Ｎ端区靶定的生长因子受体ＧＦＲｓ、ｃ端区的介导黏附的整合索家族介导信号通路。

通过与ＰＩ・３Ｋ的ｐ８５亚基结合和磷酸化，形成磷脂类ＰＩＰ２／３和活化的ＰＫＢ，从而介导生存信号通路。

ＦＡＫ结合Ｇｒｂ２使Ｔｙｒ９２５磷酸化致使Ｇ吐１２／ｓ０８／Ｒ且ｓ／ＥＲＫ通路激活，从而调节增殖和迁移。

与ｐ１３０ＣＡＳ相互作用结合到Ｃ端Ｐｒｏ富含区域从而介导移动。

３ＦＡＫ相关的信号转导通路及其在恶性肿瘤中的作用机制ＡＦＫ与多个信号通道蛋白有联系，如Ｓｒｃ家族的蛋白激酶，ｐ１３０ｅａｓ，Ｓｈｃ，Ｇｒｂ２以及磷脂酰肌３激酶等。

黏着斑激酶在结肠癌中的表达与临床意义张险峰;于皆平;于红刚;刘竹军;周晓东;罗和生【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2004(13)6【摘要】目的研究黏着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)在结肠癌中的表达水平与侵袭、转移及分化的关系.方法用免疫组织化学S-P法检测45例结肠癌及对应的癌旁组织的FAK的表达.结果癌与癌旁组织表达率分别为82.22%(37/45)、28.89%(13/45),有显著差异性(P＜0.01).癌组织中FAK表达率在分化程度(P=0.014)、浸润深度(P=0.003)和淋巴结转移(P=0.016)中有显著差异性,在年龄(P＞0.05)、性别(P=0.246)、及远处转移(P=0.818)中无差异.结论结肠癌中FAK 的表达水平明显升高,与分化程度、浸润、淋巴结转移相关.可望作为癌症治疗的新领域.【总页数】3页(P625-627)【作者】张险峰;于皆平;于红刚;刘竹军;周晓东;罗和生【作者单位】430060,武汉,武汉大学人民医院;430060,武汉,武汉大学人民医院;430060,武汉,武汉大学人民医院;430060,武汉,武汉大学人民医院;430060,武汉,武汉大学人民医院;430060,武汉,武汉大学人民医院【正文语种】中文【中图分类】R735【相关文献】1.粘着斑激酶及磷酸化粘着斑激酶在结肠癌中的表达及其临床意义 [J], 张险峰;于皆平;于红刚;刘竹军;罗和生2.黏着斑激酶在结肠癌细胞株中的表达及其RNA干扰载体的构建 [J], 陈玉英;梁后杰3.黏着斑激酶在骨肉瘤中的表达及临床意义 [J], 任可;姚楠;陆军;施鑫;吴苏稼;马捷;王宸4.黏着斑激酶在结肠癌组织中的表达及意义 [J], 刘启胜;董卫国;于红刚5.黏着斑激酶与磷酸化黏着斑激酶在舌鳞癌中的表达及意义 [J], 黄晓峰;牟永斌;胡勤刚;陈亮;蒋文晖;陈湘华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。