2013实验11 植物的组织培养ppt课件
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《植物的组织培养》实验记录表页数:2
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植物的组织培养-课件
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实验材料用具
• 培养瓶、镊子、超净台、灭菌锅、封口膜 和橡皮圈、有棉球的广口瓶、酒精灯、三 角漏斗、培养皿
• MS培养基 • 萘乙酸、苄基腺嘌呤 • 发芽培养基 • 生根培养基
实验过程
制备MS固体 培养基
冲洗—酒精—无
接种
生芽
栽培
生根 移栽
思考
1、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组 织培养过程中还需要提供有机物培养基？
此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境 为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物 体的光能自养。
2、培养过程中为什么需要进行光照
在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽 和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一 个个体的演变过程。
植物的组织培养技术ppt
n(个)
3.1 6.1 5.3 5.0
回答下列问题： (1)按照植物旳需求量，培养基中无机盐旳元素可分为 ____________和________两类。上述培养基中，6－BA属于 ________类生长调整剂。 (2)在该试验中，自变量是________，因变量是_________， 自变量旳取值范围是________。 (3)从试验成果可知，诱导丛芽总数至少旳培养基是________ 号培养基。 (4)为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 ________(填“6－BA”或“IAA”)。
①按照不同旳顺序使用这两类激素，会得到不同旳试验
成果(如下表)：
使用顺序
试验成果
先使用生长素，后使用细胞 有利于细胞分裂，但细胞
分裂素
不分化
先使用细胞分裂素，后使用 生长素
细胞既分裂又分化
同步使用
分化频率提升
②当同步使用这两类激素时，两者用量旳百分比影响植 物细胞旳发育方向。
①高：利于根的分化、抑制芽的形成 细生胞长分素裂用素量用量的比值②低：利于芽的分化、抑制根的形成
(1)配制诱导愈伤组织旳固体培养基，分装后要进行________。 接种前，要对人参根进行________。 (2)用于离体培养旳根切块，叫做________。培养几天后发觉少 数培养基被污染，若是有颜色旳绒毛状菌落，属于________ 污 染；若是有光泽旳黏液状菌落，属于________污染。 (3)用少许________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团， 在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提升人参皂苷合成量。 (4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中 提取人参皂苷宜选用________措施，操作时应采用________加 热。
人教版高中生物选修一 课件植物的组织培养(共16张) (共16张PPT)
营 养 ② 外 因
pH控制在5.8左右 温度控制在18－22℃
每日用日光灯照射12h
[归纳提升]植物组织培养的原理、条件及结果： (1)原理：植物细胞的全能性。 (2)起点：植物细胞组织或器官。 离体状态 一定的营养物质 (3)条件： 特定的激素浓度及配比 适宜的温度、pH、光照等 (4)终点：形成完整的植株
a.材料选择什么时期最好，为什么？ 花期为初花期，花粉发育在单核期，成功率最高。 b.如何选择单核期细胞？
选择完全未开放的花蕾
c.还有哪些影响花药培养的因素？
亲本植株的生长条件、材料的预处理及接种密度等。
二、实验操作
（一）材料的选取: 染色镜检
1.确定花粉发育时期的最常用的方法
有 醋酸洋红法 。
2. 针对不易着色的花粉细胞核，采用的方法 是：焙花青-铬矾法 。花粉细胞核被染成 蓝黑 色。
植物组织培养过程:
离 体 组 织 或 细 胞
脱分化
愈 伤 再分化 组 织
芽
根
植 物 体
不需要光
需要光
影响植物组织培养的因素
①内因
植物的种类，同一植物材料的年龄、保存 时间的长短等。 大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S； 矿质 微量元素：B、Mn、Zn、Cu、Fe、 元素 Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 激素：生长素、细胞分裂素 环境因子 pH、温度、光照
植物组织培养
在无菌和人工控制条件下，将离 体的植物器官、组织、细胞，培养在 人工配置的培养基上，给予适宜的培 养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽 ，最终形成完整的植株。
植物组织培养的理论基础——细胞全能性
• 概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完 整个体的潜能。 • 基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特 有的全套遗传物质。 • 表达条件：离体条件 无菌操作 适宜物质的诱导和调节（植物激素） 适宜的营养物质 温度、酸碱度、光照等条件的控制
实验11 植物的组织培养技术 (共37张PPT)-精
二、影响植物组织培养的因素及成功的 关键
1．影响因素
(1)内部因素：材料的选取。
(2)外部因素：营养成分的种类及配比； 植物激素的用量及使用顺序；pH、温度、 光照等。
2．获得成功的关键
(1)植物组织培养所利用的植物材料体积 小、抗逆性差、对培养条件要求较高。
(2)培养材料一旦被微生物污染，就会导 致实验失败。原因是微生物增殖快，生 长迅速，消耗养分多，并产生代谢废物 毒害培养材料。
①当植物激素X与植物激素Y的浓度比等 于1时，________________；
②___________________；
③______________________。
(4)若植物激素Y是生长素，在植物组织 培养中其主要作用是___；则植物激素X 的名称是__。
(5)生产上用试管苗保留植物的优良性状， 其原因是_________________。
(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机 溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜 选用________方法，操作时应采用 ________加热。
【解析】 (1)灭菌是指用强烈的物理或 化学的方法，杀死物体内外的一切微生 物，包括芽孢和孢子。消毒指使用较为 温和的物理或化学方法仅杀死物体表面 或内部一部分对人体有害的微生物。在 组织培养过程中要防止杂菌的污染，需 要对固体培养基进行灭菌，对人参根进 行消毒。(2)用于离体培养的离体的植物 组织或器官(根切块)称为外植体。
(4)人参皂苷溶于水溶性有机溶剂，可以 用萃取法从培养物干粉中提取。萃取时 要采用水浴加热，这是因为有机溶剂都 是易燃物，用明火加热容易引起燃烧、 爆炸。
【答案】 (1)灭菌 消毒 (2)外植体 真菌(霉菌) 细菌 (3)果胶 (4)萃取 (浸取) 水浴
植物的组织培养课件
光照控制
提供适宜的光照强度和时间，以满足植物细胞对光的需求。
气体交换与湿度控制
保持培养室内良好的气体交换和湿度条件，以利于植物细胞的生 长和发育。
03
植物组织培养的遗传与变异
细胞全能性与基因表达
细胞全能性
指一个细胞含有该生物全部的遗传信息，在适当的条件下可以发育成完整的生 物个体。
基因表达
在植物组织培养过程中，细胞需要重新获得或关闭某些基因的表达，以适应新 的生长环境。
05
植物组织培养的挑战与前景
技术瓶颈与创新发展
要点一
技术瓶颈
植物组织培养技术在实际应用中面临诸多挑战，如培养基 的优化、外植体的选择与处理、污染防控等。
要点二
创新发展
针对这些技术瓶颈，研究者不断探索新的方法和手段，如 采用新型生物材料、改进培养基配方、引入基因编辑技术 等，以提升植物组织培养的效率和成功率。
伦理与法律问题
伦理问题
植物组织培养技术涉及到生命伦理问题，如胚胎干细胞研究、基因编辑等，需要遵循严 格的伦理规范和审查机制。
法律问题
植物组织培养技术的知识产权保护、生物安全法规等方面也存在一定的法律风险和挑战， 需要遵守相关法律法规。
植物组织培养在农业可持续发展中的作用与前景
作用
植物组织培养技术对于农业可持续发展具有 重要意义，可以快速繁殖优良品种、保护濒 危植物资源、提高农作物的抗逆性和产量等 。
植物组织培养中的基因编辑技术
基因编辑技术
在植物组织培养中，基因编辑技术如CRISPR-Cas9等被广泛应用于对植物基因进行精确编辑和改造。
基因编辑的应用
通过基因编辑技术，可以实现对植物抗病、抗虫、抗逆等性状的改良，提高农作物的产量和品质。
提供适宜的光照强度和时间，以满足植物细胞对光的需求。
气体交换与湿度控制
保持培养室内良好的气体交换和湿度条件，以利于植物细胞的生 长和发育。
03
植物组织培养的遗传与变异
细胞全能性与基因表达
细胞全能性
指一个细胞含有该生物全部的遗传信息，在适当的条件下可以发育成完整的生 物个体。
基因表达
在植物组织培养过程中，细胞需要重新获得或关闭某些基因的表达，以适应新 的生长环境。
05
植物组织培养的挑战与前景
技术瓶颈与创新发展
要点一
技术瓶颈
植物组织培养技术在实际应用中面临诸多挑战，如培养基 的优化、外植体的选择与处理、污染防控等。
要点二
创新发展
针对这些技术瓶颈，研究者不断探索新的方法和手段，如 采用新型生物材料、改进培养基配方、引入基因编辑技术 等，以提升植物组织培养的效率和成功率。
伦理与法律问题
伦理问题
植物组织培养技术涉及到生命伦理问题，如胚胎干细胞研究、基因编辑等，需要遵循严 格的伦理规范和审查机制。
法律问题
植物组织培养技术的知识产权保护、生物安全法规等方面也存在一定的法律风险和挑战， 需要遵守相关法律法规。
植物组织培养在农业可持续发展中的作用与前景
作用
植物组织培养技术对于农业可持续发展具有 重要意义，可以快速繁殖优良品种、保护濒 危植物资源、提高农作物的抗逆性和产量等 。
植物组织培养中的基因编辑技术
基因编辑技术
在植物组织培养中，基因编辑技术如CRISPR-Cas9等被广泛应用于对植物基因进行精确编辑和改造。
基因编辑的应用
通过基因编辑技术，可以实现对植物抗病、抗虫、抗逆等性状的改良，提高农作物的产量和品质。
植物的组织培养技术-课件
【答案】C
植物组织培养与花药培养技术的异同
高等动物的精子也是由减数分裂形成的，但是和被子植物 不同。高等动物的精子形成是精原细胞经过减数分裂生成 精细胞，然后精细胞再变形形成精子。
二、植物组织培养与花药培养技术的异同 1. 相同之处：培养基配制方法、无菌技术及接种操作基本相 同，原理相同，即由离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织， 再分化成丛芽，诱导生根，然后进行移栽。 2. 不同之处：生殖方式不同，植物组织培养属于无性生殖， 而花药培养属于有性生殖。植物组织培养取得的外植体为体 细胞，染色体数无需加倍，花药培养取材为花药，培养成的 为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理， 使染色体数目加倍，重新恢复正常植株的染色体数，后代才 能恢复可育性。在花药开裂释放出许多胚状体时，需尽快将 幼小植株分开，并移植，培养成的植株要进一步鉴定筛选。
(3)接种：始终在__________旁进行，对接种工具要用________ 灭菌。
(4)培养与移栽：在________℃的无菌箱中培养，得到________ 后进行移栽。
三、月季的花药培养
1. 被子植物花粉的发育过程：花粉母细胞(________细胞)、四 分体时期、单核期、______期、精子。
【答案】D
理念依据 基本过程 影响因素
操作过程
生殖方式 可育性
组织培养
花药培养
细胞的全能性
细胞的全能性
脱分化、再分化
脱分化、再分化
选材、营养、激素、 选材、营养、激素、pH、
pH、温度、光照等
温度、光照等
制备培养基、外植体 选材、材料消毒、接种
消毒、接种、培养、 和培养、筛选和诱导、
移栽、栽培
移栽、栽培选育
2. 产生花粉植株的两种途径
植物组织培养与花药培养技术的异同
高等动物的精子也是由减数分裂形成的，但是和被子植物 不同。高等动物的精子形成是精原细胞经过减数分裂生成 精细胞，然后精细胞再变形形成精子。
二、植物组织培养与花药培养技术的异同 1. 相同之处：培养基配制方法、无菌技术及接种操作基本相 同，原理相同，即由离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织， 再分化成丛芽，诱导生根，然后进行移栽。 2. 不同之处：生殖方式不同，植物组织培养属于无性生殖， 而花药培养属于有性生殖。植物组织培养取得的外植体为体 细胞，染色体数无需加倍，花药培养取材为花药，培养成的 为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理， 使染色体数目加倍，重新恢复正常植株的染色体数，后代才 能恢复可育性。在花药开裂释放出许多胚状体时，需尽快将 幼小植株分开，并移植，培养成的植株要进一步鉴定筛选。
(3)接种：始终在__________旁进行，对接种工具要用________ 灭菌。
(4)培养与移栽：在________℃的无菌箱中培养，得到________ 后进行移栽。
三、月季的花药培养
1. 被子植物花粉的发育过程：花粉母细胞(________细胞)、四 分体时期、单核期、______期、精子。
【答案】D
理念依据 基本过程 影响因素
操作过程
生殖方式 可育性
组织培养
花药培养
细胞的全能性
细胞的全能性
脱分化、再分化
脱分化、再分化
选材、营养、激素、 选材、营养、激素、pH、
pH、温度、光照等
温度、光照等
制备培养基、外植体 选材、材料消毒、接种
消毒、接种、培养、 和培养、筛选和诱导、
移栽、栽培
移栽、栽培选育
2. 产生花粉植株的两种途径
植物的组织培养课件
应用领域与前景展望
要点一
应用领域
植物组织培养技术已广泛应用于快速繁殖、无病毒苗培育 、种质资源保存、次生代谢产物生产、基因工程等方面。 例如，通过植物组织培养技术可以快速繁殖名贵花卉、果 树等经济作物；培育无病毒苗可以提高作物产量和品质； 利用植物细胞培养生产次生代谢产物如紫杉醇等具有重要 药用价值的化合物。
选用高效外植体
选择生长旺盛、再生能力强的 外植体，提高诱导率和增殖倍 数。
引入新技术
如微繁殖技术、胚胎培养技术 等，降低实验成本和提高实验
效率。
THANKS FOR WATCHING
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培养箱
提供恒定的温度、湿度和光照 条件，用于植物组织的培养。
高压灭菌器
对培养基、器械等进行高温高 压灭菌处理，确保无菌操作。
显微镜及成像系统
观察植物组织生长情况，记录 实验数据。
实验室安全管理与操作规范
实验室安全制度
制定并执行实验室安全管理制度，确保实验 人员遵守安全规定。
无菌操作规范
遵守无菌操作原则，避免污染培养物。
06 植物组织培养技术应用实 例分析
快速繁殖优质种苗技术
实验室条件下的无菌操作
利用植物组织培养技术，在实验室内进行无菌操作，可以快速繁 殖出大量优质种苗。
缩短繁殖周期
通过组织培养技术，可以缩短植物的繁殖周期，提高繁殖效率。
保持优良品种特性
组织培养繁殖可以保持母株的优良性状，避免品种退化。
脱毒苗生产技术
营养物质和添加剂对增殖分化的影响
营养物质
植物组织培养需要充足的营养物质，包括碳源、氮源、无机盐、维生素等。这些营养物质为细胞提供 能量和合成物质的原料，对细胞的增殖和分化具有重要影响。
植物组织培养技术课件
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培》
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培养技术》
•《植物组织培养技术》
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•《植物组织培养技术》
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植物的组织培养技术整理 PPT课件
5.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键
（1）必要性：植物材料体积小、抗性差，培养条件要求高。 （2）范围：培养基灭菌和外植体的消毒。 既要考虑药剂的消毒效果；还要考虑植物材料的耐受能力。
1.打开封口膜、 培养间生长几日
接种——培养——移栽——栽培
1.70%酒精消毒、灼烧 2.不要倒插 3.每瓶接种6－8块 2.清洗培养基转移消 过毒的蛭石、珍珠岩
2．产生花粉植株 (1)产生花粉植株的两种途径：
离体条件下，未经受精，但经 过胚胎发生和发育过程，形成 的与合子胚相类似的结构。
胚状体：
(2)上述两种途径并无绝对界限，主要取决于
种类及其浓度配比 。
（一）材料选取
1、从花药看： 月季的初花期 从花粉看： 单核期 从花蕾看： 完全未开放的 2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。
幼苗长壮， 移栽到土壤.
菊花的组织培养的实验操作
【回扣教材】
菊花植物组织培养的实验操作，归纳如下： 母液 、 1．制备MS固体培养基：具体操作是配制各种_____ 灭菌 。 配制培养基、_______ 消毒 。 2．外植体_______ 工作台 3．接种：要先消毒 ________(70% 酒精)，所有的接种 酒精灯 旁进行。 操作都必须在_________
定期消毒 ， 4．培养：________ 无菌箱 中培养，培养期间___________ 培养温度控制在______________ 18～22℃ ，每日用日光灯光照 12 h。 流水 清 移栽 ：打开培养瓶封口膜培养 ―→_______ 5 ． _______ 洗根部培养基 ―→ 移植到消毒蛭石或珍珠岩等环境 土壤 中。 ―→移栽到________
生长情况 ，适时浇水、 6 ．栽培：观察并记录幼苗 __________ 开花 。 施肥，直至_________
植物的组织培养技术(共27张PPT)
➢按培养方法分为
固体培养 液体培养
看护培养 微室培养
按培养过程分为
初代培养
继代培养
离体的植物器官、组织、细胞 将植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织接种在无菌培养基上进行培养。
初代培养 继代培养 运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株，而且均来自一单一的个体，遗传性状一致。
再分化：经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件 下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
4.植物组织培养分类
➢按材料的类别分
愈伤组织培养 细 胞 培养
器 官 培养
原生质体培养
最为常见的组织培养
悬浮细胞培养 单细胞培养
胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、 花和幼果的部分组织的培养
⑴愈伤组织培养
将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存 在，而其细胞脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再 生植株。它是最为常见的。
1.组织培养定义
组织培养是指用
无菌方法使植 物体的离体器
官、组织和细胞 在人为提供的条 件下生长和发育 的所有培养技术 的总称，也称之 为离体培养。
（二）奠基阶段（从20世纪30
年代末到50年代中）：
1934年，White 用番茄根尖 建立起第一个活跃生长的无性繁 殖系，从而使非胚器官的培养首 先获得成功。
脱 分 化
离体的植物器官、 组织、细胞
愈伤组织
植物全能性 的表达
根、芽
胚状体 再生植株
游离单细胞 或原生质体
人工种子
培养条件：基 本培养基和适 宜的植物生长 调节物质，适 宜的温度、空 气、无菌环境、 适合的PH、 适时光照等。
脱分化：将分化组织的已停止分裂的细胞从植物体 部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。
选修1_植物的组织培养技术 PPT课件
(3)MS培养基与微生物培养基的比较:
微生物培养基以有机营养为主，而MS培养基则需提供大
量无机营养。
二、月季的花药培养 1.被子植物的花粉发育
2.产生花粉植株的两种途径
这两种途径的区别主要取决于培养 基中 激素的种类及其浓度 的配比 。
3.影响花药培养的因素
材料 的 选 择 从花药来看，应当选择初花期的花药 从花粉来看，应当单核期 选择的花粉
实验结果
利于根的分化，抑制芽的形 该比值高时 生长素用 成 量与细 利于芽的分化，抑制根的形 胞分裂 该比值低时 成 素用量 的比例 该比值适中 促进愈伤组织的生长 时
1.植物细胞具全能性的原因是什么？不同 细胞的全能性表达难易程度如何？ 植物细胞具有全能性的原因是因为植 物体的每一个具核的活细胞都包含有该物种 所特有的全套遗传物质。
微生物培养基以有机营养为主 。与微生物的培养不同， MS 培养 基则需提供大量无机营养，无机 盐混合物包括植物生长必需的大 量元素和微量元素两大类。
4.为什么无菌技术是植物组织培养成功的 关键？ 植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等 常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的 植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件 的要求较高。用于植物组织培养的培养基同 样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、 真菌等的生长。培养材料一旦被微生物(如细 菌)污染，其分裂快、生长迅速，会争夺培养 基中的营养，还会产生代谢废物毒害培养材 料，导致实验失败。因此要进行严格的无菌
1.外植体：是指用于离体培养的植物器官或组织。
2.愈伤组织：是指离体的植物组织或细胞，在培养了一段 时间以后，通过脱分化形成的不定形的薄壁细胞。 3.细胞分化、脱分化和再分化 （1）细胞分化：是指植物个体发育过程中，细胞在形态、 结构和生理功能上产生稳定性差异的过程。 （2）脱分化：是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤 组织的过程，又叫做去分化。
植物的组织培养PPT课件全解 浙教版
2.本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激 素，为什么？
天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用 时间短，而人工合成的，没有分解酶，作用时 间长，效果显著。
3.如果在自然界取植物样本进行组织培养,你认为应采取什 么措施保证样本不被污染?
（1）操作环境清洁（2）植物样本的洁净（3）操作 敏捷迅速
•
【解析】在“细胞大小与物质运输的关系”实验中，可以用蓝墨水代表进入细胞的物质，马铃薯小方块代表细胞，A正确；NaOH在体积不同的琼脂块内扩散的速率相同，B正确；琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小，C错误；由于NaOH在琼脂块中的扩散速度是一定的，因此NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比，随着琼脂块的增大而减小，D正确。
1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基) 2.奈乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用 少量0.1mol/LHCL溶解 3.发芽培养基(灭菌) 4.生根培养基(灭菌)
(三)步骤
1.取外植体 超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶片
2.生芽培养 生芽培养基中,放入1-3段切段(茎部插入培养基,盖上 封口膜.日光灯下保持18~25℃的温度培养,每天光照 不少于14.5h
脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从
植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的 分裂活性。
再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下
可有转变为各种不同细胞类型的能力。
愈伤组织
污染途径
1、外植体带菌 3、接种操作时带入
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
4、环境不清洁
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用 时间短，而人工合成的，没有分解酶，作用时 间长，效果显著。
3.如果在自然界取植物样本进行组织培养,你认为应采取什 么措施保证样本不被污染?
（1）操作环境清洁（2）植物样本的洁净（3）操作 敏捷迅速
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【解析】在“细胞大小与物质运输的关系”实验中，可以用蓝墨水代表进入细胞的物质，马铃薯小方块代表细胞，A正确；NaOH在体积不同的琼脂块内扩散的速率相同，B正确；琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小，C错误；由于NaOH在琼脂块中的扩散速度是一定的，因此NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比，随着琼脂块的增大而减小，D正确。
1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基) 2.奈乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用 少量0.1mol/LHCL溶解 3.发芽培养基(灭菌) 4.生根培养基(灭菌)
(三)步骤
1.取外植体 超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶片
2.生芽培养 生芽培养基中,放入1-3段切段(茎部插入培养基,盖上 封口膜.日光灯下保持18~25℃的温度培养,每天光照 不少于14.5h
脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从
植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的 分裂活性。
再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下
可有转变为各种不同细胞类型的能力。
愈伤组织
污染途径
1、外植体带菌 3、接种操作时带入
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
4、环境不清洁
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
组织培养PPT课件
自来水
75%酒精 10～30s
无菌水冲洗2～3次
2 ～10% NaClO3 10～15min
0.1～0.2% HgCl2 5～10min
无菌水冲洗4～5次
无菌滤纸吸干
切割
.
36
（2）.果实、种子
自来水
75%酒精
果实：2% NaClO3 10min 无菌水清
洗数次 剖出种子或组织
种子： NaClO3 20—30min～几小时 视种皮的硬度而定，种皮太硬的，先去
从植物体上获取外植体后，要先用自来水冲洗
10min[表面不光滑的，需冲洗1～2h，可用洗衣粉/洗洁
精清洗，必要时可用毛刷]
滤纸吸干水分 消毒[可
先在70%的酒精溶液中浸泡30s]
.
34
1）.常用的消毒剂
消毒剂
用法&用量
处理时间
优缺点
漂白粉 饱和液取上清
酒精
70～75%
H2O2
6～12%
升汞（HgCl2） 0.1～0.2%
KCl 0.4～0.8mol/L
甘露醇： 0.4～0.6mol/L
山梨醇 ：0.8～1.2mol/L
.
47
四.植物组培的培养基
1）.组成 ①.激素
生长素：IAA、NAA、2，4-D、IBA
分裂素：KT 6-BA 玉米素
用量：0.1～10mg/L
②.无机盐 总浓度 25mmol/L 左右
NO3- 25～40mmol/L
0.5×0.3×0.2㎝3 易产生Callus
大蒜蒜瓣
0.2×0.2×0.1 ㎝3 较少/不产 生
.
32
3）.分离原生质体（Protoplast）
植物的组织培养技术ppt课件(自制)1
94.对一个适度工作的人而言，快乐来自于工作，有如花朵结果前拥有彩色的花瓣。――[约翰·拉斯金] 95.没有比时间更容易浪费的,同时没有比时间更珍贵的了，因为没有时间我们几乎无法做任何事。――[威廉·班] 96.人生真正的欢欣，就是在于你自认正在为一个伟大目标运用自己；而不是源于独自发光.自私渺小的忧烦躯壳，只知抱怨世界无法带给你快乐。――[萧伯纳]
答案：(1)B、C、D 细胞分裂素浓度大于生长素浓度 (2)培养基 中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂 素与生长素的浓度比) D
【例1】 (2009·山东高考)人参是一种名贵中药材，其有效成分主 要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程 如下：
请回答：
(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________。接 种前，要对人参根进行________。
(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中提 取 人 参 皂 苷 宜 选 用 ________________ 方 法 ， 操 作 时 应 采 用 ________加热。
尝试自解：________
思路点拨：灭菌是对物体或生物表面及内部的微生物进行彻 底消除，而消毒只是消灭表面的微生物；霉菌与细菌的菌落 特点不同，要对此进行区分；果胶是植物细胞壁以及胞间层 的主要组成成分之一，所以应用果胶酶可以专一性地分解果 胶，达到分离植物组织的目的；水浴加热可以适当增加其溶 解度。 答案：(1)灭菌 消毒 (2)外植体 真菌(霉菌) 细菌 (3)果 胶 (4)萃取(浸取) 水浴
答案：(1)植物细胞具有全能性(2)[①]脱分化 [②]再分化 植物 激素(3)植物的茎尖或根尖很少被病毒感染，甚至无病毒(4)细胞分 裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度,适当调控好不同培养期的培养基 中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度和它们的比例
答案：(1)B、C、D 细胞分裂素浓度大于生长素浓度 (2)培养基 中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂 素与生长素的浓度比) D
【例1】 (2009·山东高考)人参是一种名贵中药材，其有效成分主 要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程 如下：
请回答：
(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________。接 种前，要对人参根进行________。
(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中提 取 人 参 皂 苷 宜 选 用 ________________ 方 法 ， 操 作 时 应 采 用 ________加热。
尝试自解：________
思路点拨：灭菌是对物体或生物表面及内部的微生物进行彻 底消除，而消毒只是消灭表面的微生物；霉菌与细菌的菌落 特点不同，要对此进行区分；果胶是植物细胞壁以及胞间层 的主要组成成分之一，所以应用果胶酶可以专一性地分解果 胶，达到分离植物组织的目的；水浴加热可以适当增加其溶 解度。 答案：(1)灭菌 消毒 (2)外植体 真菌(霉菌) 细菌 (3)果 胶 (4)萃取(浸取) 水浴
答案：(1)植物细胞具有全能性(2)[①]脱分化 [②]再分化 植物 激素(3)植物的茎尖或根尖很少被病毒感染，甚至无病毒(4)细胞分 裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度,适当调控好不同培养期的培养基 中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度和它们的比例
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4.适应锻炼 将苗转移至草炭土或蛭石中继续生长，用玻璃罩或塑料布保持80％ 以上的湿度，2~3天后打开减低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处 于自然湿度下为止。
5.定植 将苗转移到土中培养。
外植体
愈伤 组织
胚状体
丛芽
生根
消毒 接种
生芽培养
生根培养
幼苗
植株
锻苗
定植
11
课后题 1.不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实验相同的生长素和 细胞分裂素浓度？
不相同 2.本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？
天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用时间短，而人工合成的，没有 分解酶，作用时间长，效果显著。
3.如果在自然界取植物样本进行组织培养，你认为应采取什么措施保证样本不 被污染? （1）操作环境清洁（2）植物样本的洁净（3）操作敏捷迅速
4.植物组织培养条件:
含有全部营养成分的培养基、一定的温度、 空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。
细胞分裂素多，生长素少 细胞分裂素少，生长素多 细胞分裂素适中，生长素少 细胞分裂素生长素比例合适
诱导芽的生成 诱导根的生成 愈伤组织只生长不分化 诱导根芽的分化
二、实验
培养基配制 外植体的选取 消毒接种 培养 移栽和栽培等。
18
思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？
生长素 / 细胞分裂素
高 利于根和愈伤组织的形成
19
适中 利于根芽的分化
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。
实验11 植物的组织培养
;.
1
大多绿色开花植物靠种子繁殖（有性繁殖），不用种子繁殖（无性繁殖）的方法 有：
营养繁殖
扦插 嫁接 压条
无性繁殖
组织培养
一、组织培养概述
1.概念
组织培养就是取一部分植物组织 （外植体），如叶、芽、茎、根、花瓣 或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶 中的琼脂培养基上，给予一定的温度和 光照，使之产生愈伤组织，或进而生根 发芽。
8
2、步骤 1.取外植体
超净台上将无菌幼苗(无菌水冲洗)切段，每段至少1张叶片
2.生芽培养 生芽培养基中，放入1-3段切段（茎一部分插入培养基），盖上封口膜。 日光灯下保持18~25℃的温度培养，每天光照不少于14.5h。
3.生根培养 2~3周后，将丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中，在上述条件 下继续培养。
再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的 能力。
愈伤组织
污染途径
1、外植体带菌 3、接种操作时带入
2、培养基及接种器具 灭菌不彻底
4、环境不清洁
污染的预防措施
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
7
1、实验材料 （1）MS培养基： 大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg 微量元素：Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、I、Co 有机成分：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
（2）萘乙酸NAA、苄基腺嘌呤BA （3）发芽培养基： MS培养基+BA+NAA+琼脂+蒸馏水 （4）生根培养基： MS培养基+NAA+琼脂+蒸馏水
2、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体 的能力。
3.植物组织培养的基本过程:
离体的植物器官、 脱分化 组织、细胞
愈 再分化 伤 组 织
根 生长发育
植
芽
物
体
植物组织培养过程示意图
烟草植株
根细胞 形成愈 培养 伤组织
发育成 幼胚
长成 幼苗
成熟植株
4. 同LB培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需 提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元 素两大类。
13
14
脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱 出来，恢复细胞的分裂活性。
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脱 分 化
离体的植物器官、 组织、细胞
愈伤组织
植物全能性 的表达
根、芽
胚状体 再生植株
游离单细胞或 原生质体
人工种子
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扦插
压条
嫁接
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