实验11 植物的组织培养

植物组织培养实验报告学院：生命科学技术学院班级：11生物技术(制品)学号：**********姓名：**植物组织培养实验报告实验一植物组织培养母液的配制一、实验目的1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。

2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。

二、实验原理培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。

大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物（碳源、维生素、肌醇、氨基酸等）、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。

无机盐类由大量元素和微量元素组成。

大量元素中，氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在，但在培养基中多用硝酸类，也可以将硝酸类和铵类混合使用；磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供；钾是培养基中主要的阳离子；钙、钠、镁的需要量较少。

微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。

培养基中的铁离子，大多数以螯合物的形式存在，即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。

有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。

培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱，因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。

培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。

蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。

在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。

一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。

肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。

常用的植物生长调节物质包括以下三类：①生长素类：吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、二氯苯氧乙酸（2,4-D）②细胞分裂素：玉米素（ZT）6-苄基嘌呤（6-BA）和激动素（KT）。

③赤霉素：组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸（GA3）。

培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。

其中最为常见的为酵母提取物。

琼脂作为培养基的支持物，也是最常用的邮寄附加物，他可以是培养基呈固体状态，以利于组织和细胞的培养。

植物组织培养是否成功，在很大的程度上取决于培养基的选择之上。

院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师）年级13级学号17130208 组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6指导老师实验名称植物组织培养综合实验一、实验目的1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法；3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法；4.了解组织培养的基本程序；5.掌握接种的方法和材料的培养过程；6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术；7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体；8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别二、实验原理1.植物细胞的全能性一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。

植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。

2.植物细胞表现出全能性的条件1.离体状态；2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）；3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型3.无菌条件把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。

用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。

在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。

组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。

4.脱分化与愈伤组织已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。

脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。

所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。

5.培养基植物组织培养常用的培养基为MS培养基。

常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。

植物组织培养实验基本步骤
1. 材料准备：准备所需的植物材料和培养基。

2. 消毒：消毒植物材料，如叶片、茎段等，以防止细菌和真菌的污染。

3. 器具消毒：消毒实验所需的培养瓶、显微镜片、剪刀等器具。

4. 取材料：用消毒过的器具将所需植物材料取出，例如茎段。

5. 材料处理：将植物材料进行预处理，如切割、消毒或暴露在光线下以诱导发芽等。

6. 培养基制备：根据实验需求准备培养基，培养基是一种富含营养物质的液体或凝胶。

7. 培养瓶准备：将培养基倒入消毒过的培养瓶中，通常是将液体培养基加入到瓶中，然后用胶状凝胶封上。

8. 材料接种：将植物材料放入培养瓶中的培养基中，通常是将茎段插入培养基中或将植物组织切割成小块直接放入培养基中。

9. 培养条件调控：设置适宜的光照、温度、湿度和气体浓度等
培养条件，以促进植物组织的生长和分化。

10. 观察和记录：随着时间的推移，观察植物组织的发育和生长情况，并记录相关的数据。

11. 分离和传代：当组织生长到一定程度时，可以将其分离成更小的部分，并继续在新的培养基上进行培养，以扩增植物组织。

12. 实验结束：当实验达到预定的目标或需要终止时，停止培养，处理培养瓶和实验残余物，如进行消毒处理。

需要注意的是，以上步骤只是植物组织培养实验的一般步骤，具体的实验步骤和条件可能因实验目的和植物种类的不同而有所变化。

菊花的组织培养实验设计引言概述：菊花的组织培养是一种常见的实验方法，它可以用来研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等。

本文将介绍一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。

一、实验材料的准备1.1 菊花的种子：选择健康、无病虫害的菊花种子作为实验材料。

1.2 培养基：准备含有适当濃度的植物激素的培养基，如MS培养基。

1.3 高温消毒器具：为了防止细菌和真菌的污染，需要准备高温消毒的器具，如高温培养箱。

二、实验步骤的安排2.1 种子表面消毒：将菊花的种子表面进行消毒处理，以杀灭种子表面的细菌和真菌。

2.2 菊花的离体培养：将消毒后的种子放置在含有培养基的培养皿中，进行离体培养。

2.3 培养条件的调节：调节培养皿中的温度、光照和湿度等条件，以促进菊花的生长和发育。

三、实验结果的分析3.1 菊花的生长情况：观察菊花在培养基上的生长情况，包括根系的形成、茎的生长以及叶片的展开等。

3.2 菊花的再生能力：观察菊花在培养基上的再生能力，包括新芽的形成、花蕾的发育以及花朵的开放等。

3.3 菊花的遗传变异：通过观察不同菊花品种在培养基上的生长情况和形态变化，分析菊花的遗传变异情况。

四、实验注意事项4.1 实验环境的准备：实验室应保持整洁，避免细菌和真菌的污染。

4.2 实验操作的规范：实验操作要严格按照实验步骤进行，避免误操作导致实验结果的偏差。

4.3 实验结果的记录：实验过程中要及时记录实验结果，以便后续的数据分析和讨论。

综上所述，本文介绍了一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。

通过这种实验方法，可以深入研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等方面的问题。

希望本文能为菊花的组织培养实验提供一定的参考和指导。

植物组织培养实验报告实验名称：葡萄柚的扩繁组织培养学院：园林学院专业：2012级园林小组成员：指导老师：实验日期：2014.9.1—2014.10.14实验一：葡萄柚扩繁培养基的制备（1L)实验时间：9月1日实验地点:西南林业大学六楼实验室实验步骤：1．量取液体。

大量元素100 ml（用100 ml的量筒量），微量元素、有机元素、铁盐均10 ml（用10ml的量筒量），将上述量取的溶液混合于1L大烧杯中。

2.加纯水至500-600 ml刻度线稀释。

3.称取蔗糖30 g，用玻璃棒搅拌至溶解。

4.定容。

用1000 ml量杯定容后转移至大烧杯5.用移液枪取6-BA100μml,IBA 40μml。

6.混匀，调PH至5.9。

7.称取琼脂7g于塑料盆内。

将调好PH的培养基倒入塑料盆，置于微波炉内煮14min。

8．分装，封口，标记。

9. 121℃高温灭菌20min。

1000ml约一共分装33个瓶，加上实验老师给予的3个培养基我们组一共有36个瓶。

实验二：葡萄柚组培接种工作实验时间：9月3日实验地点：西南林业大学A栋六楼接种实验室实验过程：准备材料及器材：葡萄柚脱毒苗、超净工作台，手套、剪刀（3把）、镊子（3把）、酒精灯两盏、无菌皿。

实验步骤：1.接种前准备工作：用酒精棉球将超净工作台台面擦拭一遍，然后将所需物品放入超净工作台内。

2.接种操作：⑴将超净台的门打开至1/3，带上手套，用酒精将双手进行消毒，反复揉搓双手使手上酒精挥发完全，将手伸入超净台内。

⑵点燃酒精灯。

点燃前要确保手上的酒精已完全挥发，否则容易造成危险打开无菌皿。

⑶镊子消毒。

先用手将报纸打开，后在酒精灯上灼烧（除手捏的地方不烧，其余的均要烧，烧到烫为止。

镊子用完都要放到特定放镊子的架子中，且每次用时均要灼烧消毒）。

⑷挑拣材料。

先将盛放葡萄柚脱毒苗的瓶子上的塑料膜取下。

拿取镊子和剪刀（注意取放剪刀与镊子时要绕过培养基的瓶口，防止污染）。

用镊子将所需脱毒苗从玻璃瓶中夹到无菌皿上。

植物组培实训报告实训时间：2022年9月1日至2022年9月10日实训地点：XX大学植物生物技术实验室一、实训目的本次实训旨在通过植物组培技术，培养学生对植物生长发育和组织培养技术的理解和掌握能力。

通过实际操作，加深学生对植物细胞培养、愈伤组织诱导、植物器官再生等方面的实践经验，提高学生的动手能力和科学思维能力。

二、实训内容1.细胞培养基的配制在实验开始前，我们首先准备了培养基的配制工作。

根据实验要求，我们按照一定比例调配了含有蔗糖、植物激素和微量元素的培养基。

这是植物组培实验的基础，也是植物细胞生长和分化所需要的养分来源。

2.植物种子的消毒和萌发在组培实验中，种子的消毒是非常重要的一步。

我们采用了酒精和漂白粉的消毒方法，确保种子表面没有细菌和真菌的污染。

随后，我们将消毒后的种子均匀地播放在培养基上，利用培养基中的植物激素刺激种子的萌发和生长。

3.愈伤组织的诱导和分化在种子萌发后，我们将其转移到含有植物激素的培养基上，利用植物激素的作用，诱导种子发生愈伤组织的产生。

通过调节植物激素的浓度和比例，我们成功地诱导了愈伤组织的形成。

随后，我们将愈伤组织转移到新的培养基上，促进其分化为植物器官，如根系、茎和叶片等。

4.植物器官的再生通过将愈伤组织转移到含有适当激素的培养基上，我们成功地促使愈伤组织分化为植物器官。

根据实验要求，我们调整了培养基中植物激素的浓度和组合，以达到不同器官的再生目的。

经过一段时间的培养，我们观察到了根系、茎和叶片的再生情况，并进行了相关的测量和记录。

三、实训收获通过本次植物组培实训，我们获得了丰富的实践经验和知识。

首先，我们对植物细胞培养的基本原理和技术有了更深入的了解。

其次，我们掌握了植物组织培养的基本操作技巧，包括培养基的配制、种子的消毒和萌发、愈伤组织的诱导和植物器官的再生等。

最重要的是，我们培养了扎实的动手能力和科学思维能力，提高了解决实际问题的能力。

四、实训总结通过本次植物组培实训，我们深刻认识到植物组培技术在植物生物学研究和植物育种中的重要性。