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植物组织培养实验报告学院：生命科学技术学院班级：11生物技术(制品)学号：**********姓名：**植物组织培养实验报告实验一植物组织培养母液的配制一、实验目的1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。
2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。
二、实验原理培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。
大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物（碳源、维生素、肌醇、氨基酸等）、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。
无机盐类由大量元素和微量元素组成。
大量元素中，氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在，但在培养基中多用硝酸类，也可以将硝酸类和铵类混合使用；磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供；钾是培养基中主要的阳离子；钙、钠、镁的需要量较少。
微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。
培养基中的铁离子，大多数以螯合物的形式存在，即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。
有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。
培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱，因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。
培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。
蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。
在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。
一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。
肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。
常用的植物生长调节物质包括以下三类：①生长素类：吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、二氯苯氧乙酸（2,4-D）②细胞分裂素：玉米素（ZT）6-苄基嘌呤（6-BA）和激动素（KT）。
③赤霉素：组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸（GA3）。
培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。
其中最为常见的为酵母提取物。
琼脂作为培养基的支持物，也是最常用的邮寄附加物，他可以是培养基呈固体状态，以利于组织和细胞的培养。
植物组织培养是否成功，在很大的程度上取决于培养基的选择之上。
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师）年级13级学号17130208 组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6指导老师实验名称植物组织培养综合实验一、实验目的1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法；3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法；4.了解组织培养的基本程序；5.掌握接种的方法和材料的培养过程；6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术；7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体；8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别二、实验原理1.植物细胞的全能性一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。
植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。
2.植物细胞表现出全能性的条件1.离体状态；2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）；3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型3.无菌条件把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。
用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。
在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。
组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。
4.脱分化与愈伤组织已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。
脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。
所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。
5.培养基植物组织培养常用的培养基为MS培养基。
常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。
植物组织培养实验基本步骤
1. 材料准备：准备所需的植物材料和培养基。
2. 消毒：消毒植物材料，如叶片、茎段等，以防止细菌和真菌的污染。
3. 器具消毒：消毒实验所需的培养瓶、显微镜片、剪刀等器具。
4. 取材料：用消毒过的器具将所需植物材料取出，例如茎段。
5. 材料处理：将植物材料进行预处理，如切割、消毒或暴露在光线下以诱导发芽等。
6. 培养基制备：根据实验需求准备培养基，培养基是一种富含营养物质的液体或凝胶。
7. 培养瓶准备：将培养基倒入消毒过的培养瓶中，通常是将液体培养基加入到瓶中，然后用胶状凝胶封上。
8. 材料接种：将植物材料放入培养瓶中的培养基中，通常是将茎段插入培养基中或将植物组织切割成小块直接放入培养基中。
9. 培养条件调控：设置适宜的光照、温度、湿度和气体浓度等
培养条件，以促进植物组织的生长和分化。
10. 观察和记录：随着时间的推移，观察植物组织的发育和生长情况，并记录相关的数据。
11. 分离和传代：当组织生长到一定程度时，可以将其分离成更小的部分，并继续在新的培养基上进行培养，以扩增植物组织。
12. 实验结束：当实验达到预定的目标或需要终止时，停止培养，处理培养瓶和实验残余物，如进行消毒处理。
需要注意的是，以上步骤只是植物组织培养实验的一般步骤，具体的实验步骤和条件可能因实验目的和植物种类的不同而有所变化。
菊花的组织培养实验设计引言概述：菊花的组织培养是一种常见的实验方法，它可以用来研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等。
本文将介绍一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。
一、实验材料的准备1.1 菊花的种子：选择健康、无病虫害的菊花种子作为实验材料。
1.2 培养基：准备含有适当濃度的植物激素的培养基，如MS培养基。
1.3 高温消毒器具：为了防止细菌和真菌的污染，需要准备高温消毒的器具，如高温培养箱。
二、实验步骤的安排2.1 种子表面消毒：将菊花的种子表面进行消毒处理，以杀灭种子表面的细菌和真菌。
2.2 菊花的离体培养：将消毒后的种子放置在含有培养基的培养皿中，进行离体培养。
2.3 培养条件的调节：调节培养皿中的温度、光照和湿度等条件，以促进菊花的生长和发育。
三、实验结果的分析3.1 菊花的生长情况：观察菊花在培养基上的生长情况，包括根系的形成、茎的生长以及叶片的展开等。
3.2 菊花的再生能力：观察菊花在培养基上的再生能力，包括新芽的形成、花蕾的发育以及花朵的开放等。
3.3 菊花的遗传变异：通过观察不同菊花品种在培养基上的生长情况和形态变化，分析菊花的遗传变异情况。
四、实验注意事项4.1 实验环境的准备：实验室应保持整洁，避免细菌和真菌的污染。
4.2 实验操作的规范：实验操作要严格按照实验步骤进行，避免误操作导致实验结果的偏差。
4.3 实验结果的记录：实验过程中要及时记录实验结果，以便后续的数据分析和讨论。
综上所述，本文介绍了一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。
通过这种实验方法，可以深入研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等方面的问题。
希望本文能为菊花的组织培养实验提供一定的参考和指导。
植物组织培养实验报告实验名称：葡萄柚的扩繁组织培养学院：园林学院专业：2012级园林小组成员：指导老师：实验日期：2014.9.1—2014.10.14实验一：葡萄柚扩繁培养基的制备（1L)实验时间：9月1日实验地点:西南林业大学六楼实验室实验步骤：1．量取液体。
大量元素100 ml（用100 ml的量筒量），微量元素、有机元素、铁盐均10 ml（用10ml的量筒量），将上述量取的溶液混合于1L大烧杯中。
2.加纯水至500-600 ml刻度线稀释。
3.称取蔗糖30 g，用玻璃棒搅拌至溶解。
4.定容。
用1000 ml量杯定容后转移至大烧杯5.用移液枪取6-BA100μml,IBA 40μml。
6.混匀，调PH至5.9。
7.称取琼脂7g于塑料盆内。
将调好PH的培养基倒入塑料盆，置于微波炉内煮14min。
8．分装，封口，标记。
9. 121℃高温灭菌20min。
1000ml约一共分装33个瓶，加上实验老师给予的3个培养基我们组一共有36个瓶。
实验二：葡萄柚组培接种工作实验时间：9月3日实验地点：西南林业大学A栋六楼接种实验室实验过程：准备材料及器材：葡萄柚脱毒苗、超净工作台，手套、剪刀（3把）、镊子（3把）、酒精灯两盏、无菌皿。
实验步骤：1.接种前准备工作：用酒精棉球将超净工作台台面擦拭一遍，然后将所需物品放入超净工作台内。
2.接种操作：⑴将超净台的门打开至1/3，带上手套，用酒精将双手进行消毒，反复揉搓双手使手上酒精挥发完全，将手伸入超净台内。
⑵点燃酒精灯。
点燃前要确保手上的酒精已完全挥发，否则容易造成危险打开无菌皿。
⑶镊子消毒。
先用手将报纸打开，后在酒精灯上灼烧（除手捏的地方不烧，其余的均要烧，烧到烫为止。
镊子用完都要放到特定放镊子的架子中，且每次用时均要灼烧消毒）。
⑷挑拣材料。
先将盛放葡萄柚脱毒苗的瓶子上的塑料膜取下。
拿取镊子和剪刀（注意取放剪刀与镊子时要绕过培养基的瓶口，防止污染）。
用镊子将所需脱毒苗从玻璃瓶中夹到无菌皿上。
植物组培实训报告实训时间：2022年9月1日至2022年9月10日实训地点：XX大学植物生物技术实验室一、实训目的本次实训旨在通过植物组培技术，培养学生对植物生长发育和组织培养技术的理解和掌握能力。
通过实际操作，加深学生对植物细胞培养、愈伤组织诱导、植物器官再生等方面的实践经验，提高学生的动手能力和科学思维能力。
二、实训内容1.细胞培养基的配制在实验开始前，我们首先准备了培养基的配制工作。
根据实验要求，我们按照一定比例调配了含有蔗糖、植物激素和微量元素的培养基。
这是植物组培实验的基础，也是植物细胞生长和分化所需要的养分来源。
2.植物种子的消毒和萌发在组培实验中，种子的消毒是非常重要的一步。
我们采用了酒精和漂白粉的消毒方法，确保种子表面没有细菌和真菌的污染。
随后，我们将消毒后的种子均匀地播放在培养基上，利用培养基中的植物激素刺激种子的萌发和生长。
3.愈伤组织的诱导和分化在种子萌发后，我们将其转移到含有植物激素的培养基上，利用植物激素的作用，诱导种子发生愈伤组织的产生。
通过调节植物激素的浓度和比例，我们成功地诱导了愈伤组织的形成。
随后，我们将愈伤组织转移到新的培养基上，促进其分化为植物器官，如根系、茎和叶片等。
4.植物器官的再生通过将愈伤组织转移到含有适当激素的培养基上，我们成功地促使愈伤组织分化为植物器官。
根据实验要求，我们调整了培养基中植物激素的浓度和组合，以达到不同器官的再生目的。
经过一段时间的培养，我们观察到了根系、茎和叶片的再生情况，并进行了相关的测量和记录。
三、实训收获通过本次植物组培实训，我们获得了丰富的实践经验和知识。
首先，我们对植物细胞培养的基本原理和技术有了更深入的了解。
其次，我们掌握了植物组织培养的基本操作技巧，包括培养基的配制、种子的消毒和萌发、愈伤组织的诱导和植物器官的再生等。
最重要的是，我们培养了扎实的动手能力和科学思维能力，提高了解决实际问题的能力。
四、实训总结通过本次植物组培实训，我们深刻认识到植物组培技术在植物生物学研究和植物育种中的重要性。
植物组织培养实验报告实验报告：植物组织培养一、实验目的掌握植物组织培养的实验技术，培养植物组织，研究其生长过程和生理生化特性。
二、实验原理三、实验步骤1.提取组织：从植物器官中提取叶片、茎段等组织。
2.消毒处理：将提取出的组织进行消毒处理，浸泡在含有消毒剂的溶液中，达到杀灭外界微生物的目的。
3.培养基准备：配置适合植物组织培养的培养基，包括基础培养基和添加剂。
4.培养条件：将消毒处理后的组织置于培养基中，放置在恒温恒湿的培养箱中，设置适宜的光照和温度条件。
5.观察记录：观察组织在培养基上的生长情况，记录其形态变化、增殖情况等。
6.提取代表性样本：根据需要，提取生长良好、代表性的样本进行下一步的分析。
四、实验结果经过数天的培养，观察到了组织的形态发生了变化。
最初的组织经过消毒处理后放置在培养基上，经过一段时间的培养，发现组织逐渐增殖。
最初的组织形态变得模糊，开始出现小芽的形成。
随着时间的推移，这些小芽逐渐长大，发展成幼苗，并开始生长根系。
同时，观察到培养基的颜色也发生了变化，由最初的无色逐渐变为淡黄色。
五、实验分析由实验结果可知，植物组织培养可以通过一系列的人工控制，使植物细胞和组织在无菌条件下繁殖和发育。
通过调节培养基的配方、光照和温度等条件，可以控制生长的速度和分化程度。
实验中观察到的小芽和根系的形成表明植物组织在培养基上能够继续分化和增殖，这为后续的植物繁殖和基因改造提供了基础。
六、实验总结本次实验通过植物组织培养的方法，成功地培养出了植物幼苗，并观察到了其生长过程。
通过实验我们了解到了植物组织培养的基本原理和操作技术，并对植物的细胞分化和增殖有了更深入的了解。
植物组织培养作为一种重要的生物技术手段，不仅可以用于植物繁殖和育种，还可以应用于植物基因工程和药物研究等方面。
1.张三，李四，王五.植物组织培养技术的应用[A].植物生长与发育研究进展[C].北京：科学出版社。
2. Liu K，Liu G F.植物组织培养与应用研究进展[J]. 中国园艺科技.八、附录实验操作记录：日期操作内容观察结果XX月XX日提取叶片叶片消毒漂白后变白XX月XX日放置培养基出现小芽的形成.........注意事项：实验过程中需要严格遵守无菌操作规范，保持培养箱的洁净，避免外界微生物的污染。
初中生物实验重点内容归纳一、植物学实验1.植物细胞的观察：使用显微镜观察植物细胞结构，了解细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等结构。
2.植物组织切片：制作植物组织切片，观察不同的植物组织结构，如保护组织、营养组织、输导组织等。
3.植物根、茎、叶的解剖：解剖植物的根、茎、叶，观察其内部结构，了解植物的生长和营养吸收过程。
4.植物开花和结果：观察植物的开花和结果过程，了解植物的生殖方式。
二、动物学实验1.动物细胞的观察：使用显微镜观察动物细胞结构，了解细胞膜、细胞质、细胞核等结构。
2.动物解剖：解剖动物（如鱼、虫等），观察其内部器官，了解动物的生理功能。
3.动物生理实验：如观察动物的心跳、呼吸等生理现象，了解动物的生理功能。
三、微生物学实验1.微生物的观察：使用显微镜观察微生物（如细菌、真菌等）的结构，了解微生物的基本特征。
2.微生物培养：进行微生物的培养实验，了解微生物的生长条件和生命活动。
四、生态学实验1.生态瓶制作：制作生态瓶，观察生态系统的组成和运作，了解生物与环境的关系。
2.植物的光合作用：通过实验了解植物的光合作用过程，了解植物生长所需的光照、二氧化碳等条件。
3.土壤小动物调查：调查土壤中的小动物类群丰富度，了解土壤生物的多样性。
五、生物技术实验1.植物的组织培养：进行植物的组织培养实验，了解植物组织培养的技术和应用。
2.酶的提取和鉴定：提取植物或动物组织中的酶，进行酶的鉴定实验，了解酶的特性。
六、健康与营养学实验1.食物中营养成分的检测：检测食物中的蛋白质、脂肪、碳水化合物等营养成分，了解食物的营养价值。
2.人体生理指标的测量：测量人体的血压、脉搏等生理指标，了解人体的生理功能。
以上是初中生物实验的重点内容，通过这些实验，学生可以更好地了解生物学的基本知识和科学方法。
习题及方法：一、植物学实验1.习题：植物细胞的哪个结构具有保护作用？方法：回顾植物细胞的结构，结合实验观察结果，确定具有保护作用的结构。
名词解释1.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。
其最大的特征是失去分裂能力。
3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。
其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。
4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。
5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。
6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。
通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。
7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。
8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。
9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。
10.无菌操作：亦称接种。
指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。
由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。
11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。
这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。
实验报告大蒜茎尖的组织培养谢婷婷江宋青万嫣文吕凌宇一、实验目的掌握植物组织培养的相关理论知识及操作方法；通过自行设计并完成实验，提高动手能力和思维能力；利用植物细胞的全能性，使大蒜茎尖经过脱分化作用形成愈伤组织，再分化为有结构的组织和器官，最终增殖培育出大量品质优良的大蒜试管苗。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性原理。
植物组织培养是在无菌环境下，将离体的植物器官、组织以至单个细胞，在人工配置的培养基上培养，使其能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。
植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。
这一过程称为“脱分化”。
已经脱分化的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化”。
三、实验材料、试剂和器材1 供试材料以购于府前菜场的大蒜为实验材料，实验在丽水学院生态学院组培实验室进行。
2 仪器与设备超净工作台、培养事、电子天平、烧杯、容量瓶、玻璃棒、量筒、移液管。
3 试剂70%酒精、95%酒精、0.1%升汞、蔗糖、琼脂条、6-BA（1.5 mg/L；2.0 mg/L）、2,4-D（2.0 mg/L）、NAA（1.0 mg/L；）、IBA（2.0 mg/L）、10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物。
四、实验步骤1.培养基的配制及灭菌诱导培养基：MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L出芽培养基：MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L生根培养基：MS+IBA 2.0 mg/L（1）将MS母液（10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物）按顺序排列、检查是否失效。
（2）在装有3/4蒸馏水的容器中加入0.7%琼脂和3%蔗糖，加热溶化。
（3）依次吸取适量各种母液移到容器中。
（4）用蒸馏水定容到相应体积。
植物组织培养实验室基本设备：超净工作台；培养室、；洗涤、消毒室，卧式高压消毒锅；温室（培养大棚）；常用仪器：1.蒸馏水器（学习操作），2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅（学习使用、操作），3.天平：⑴药物天平（工业天平）、粗天平、（精密度1/10）⑵分析天平（精密度1/10000），4.超净工作台（学习、使用、操作），5.电热干燥箱（烘箱），6.恒温光照培养箱（学习、操作），7.电冰箱，8.显微镜和解剖镜：①手提式解剖镜（学习、使用、操作）②立体解剖镜③普通显微镜，9.旋转培养机，10. 离心机（学习、使用、操作），11. 酸度测定仪：⑴精密PH4－7 试纸；⑵笔型袖珍酸度计。
必要的器皿：（一）玻璃器皿：1.培养器皿：①试管②三角烧瓶（锥形瓶）③圆形高形培养瓶（罐头瓶）④培养皿⑤扁身培养瓶⑥L 型和T 型管⑦凹面载玻片，2.盛装器皿：①试剂瓶②烧杯，3.计量器皿①量筒②容量瓶③吸管，4.其它器皿滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。
（二）金属器械：1.镊子类：① 20－25cm 长型镊子（接种或转移愈伤组织）②尖端弯曲“枪型”镊子（镊取较小的植物组织）③尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥离表皮用）④尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物），2.解剖刀和刀类：①眼科用刀种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织中小细胞团）②解剖刀（手术刀）③双面刀片焊接在玻棒上（切取茎尖用）④锋利小刀、大刀和小铁锹，3.剪刀类：①解剖剪②眉剪③眼科剪④18－25cm 弯头剪⑤俢枝剪，4.接种针。
几种常用药剂的配制：（一）用95%尝试酒精配比不同浓度的酒精的配制。
学习配制70%和75%酒精。
（二）消毒剂:1. 20%次氯酸钠溶液：称取20g 次氯酸钠用少许水溶解，100ml 水定容。
2. 0.1%升汞（HgCl2）溶液：称取0.1g HgCl2少许水溶解，100ml水定容。
（三）洗涤剂:1. 2HCl酒精：95%酒精100ml 加入2mlHCl，2.硫酸－重铬酸钾洗液：取10g 重铬酸钾加入蒸馏水90ml，加热溶解冷却后，逐渐加入浓硫酸175ml，放入棕色玻璃瓶备用，（注意：切记不可将盛过洒精，甲醛等原剂的药品玻璃器皿直接泡入洗液在，因为重铬酸钾是一种强的氧化剂，一旦被还原氧化，洗液变绿，失去洗涤作用）。
