实验7植物的组织培养(浙科版选修1)xuesheng

实验11 植物的组织培养【学习目标】1.说明植物组织培养的基本原理。

2.学习植物组织培养的基本技术。

3.进行菊花的组织培养，尝试植物激素的应用。

【教学重点】1.植物组织培养的相关概念和过程2.影响植物组织培养的因素3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。

【教学难点】1.影响植物组织培养的因素。

2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。

【诱学导思】一、植物组织培养的相关概念和基本过程1.植物组织培养的相关概念（1）细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。

细胞分化是基因__________的结果。

（2）细胞的全能性：__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。

细胞全能性是组织培养的基本原理。

（3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。

（4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。

（5）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成__________，这个过程叫做再分化。

（6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。

二、影响植物组织培养的因素1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。

同种植物材料，__________ ，__________ 等也会影响实验结果。

菊花的组织培养，一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。

2.外部因素：（1）营养条件常用的是__________ 培养基，其主要成分包括：__________，如_____________________________；__________ ，如___________；__________ 等。

实验 11植物的组织培育[ 学考报告 ]知识内容考试属性考情解读1.进行菊花的组织培育。

植物的组织培育加试 2.试一试植物激素的应用。

3.说明植物组织培育的原理一、植物组织培育1.看法组织培育就是取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培育基上，恩赐必然的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根萌芽。

2.原理植物细胞拥有全能性，即生物体的细胞，拥有使后代细胞形成完满个体的能力。

3.基本过程脱分化再分化外植体――→ 愈伤组织――→ 胚状体― →新植物体4. 培育条件(1) 含有全部营养成分的培育基、必然的温度、空气、无菌环境、合适的pH、适岁月照等。

高——利于根的形成生长素 /细(2)适中——有利于愈伤组织的生长胞分裂素低——有利于芽的形成二、菊花的组织培育1.资料： MS培育基 ( 用于配置萌芽和生根的培育基) ；萘乙酸用少量 0.1 mol/L NaOH 溶液溶解；苄基腺嘌呤用少量0.1 mol/L HCl 溶解；萌芽培育基 ( 灭菌 ) ；生根培育基 ( 灭菌 ) 。

2.步骤(1)无菌幼苗进行组织培育取外植体超净台大将无菌幼苗切段，每段最少 1 张叶片生芽培育生芽培育基中，放入 1～ 3 段切段，茎部插入培育基，盖上封口膜，日光灯下保持 18～ 25 ℃的温度培育，每日光照很多于14.5 h生根培育2～3 周后，将丛状苗在无菌条件下转入生根培育基中，在上述条件下继 续培育适应锻炼 将苗转移至草炭土或蛭石中， 用玻璃罩或塑料布保持 80%以上的湿度， 2～(炼苗 ) 3 天后打开降低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止定植将苗转移到土中培育(2) 自然生长的茎进行组织培育5%次另一 5% 超净台将茎70%乙 氯酸钠移至次氯酸钠上用无醇中浸溶液中生芽→→ 溶液中浸 →菌水清→泡 10 min 浸泡 培育泡 5 min 洗5 min基中1．不相同植物、不相同组织的生根和生芽可否都可使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度？提示： 不相同植物、不相同组织，植物组织培育的难易程度不相同， 因此不能贸然使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度，要研究使用何种激素( 合成激素 ) 以及激素的浓度才行。

实验报告课程名称：植物生理学实验 指导老师：翁晓燕 成绩：实验名称：植物组织培养 实验类型: 定量同组学生姓名：胡季宏一、实验目的和要求 三、实验材料和主要仪器 五、实验数据记录和处理 七、实验讨论和心得 二、实验内容和原理四、实验方法和步骤六、实验结果和分析一、实验目的和要求掌握植物组织培养的基本理论和技术，明确组培的作用与应用。

二、实验内容和原理1、组织培养的理论基础——细胞全能性。

植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息，从而具备发育成完整植株的遗传能力。

在适宜条件下，任何一个细胞都可以发育成一个新个体。

2、利用母液配制培养基——防沉淀、防失活、合适pH 、高压灭菌。

3、选取无菌外植体接种。

在无菌条件下，将灭过菌的材料，经适当切割，转移到培养基上。

4、控制条件下培养，观察成苗全过程。

三.实验材料和主要仪器实验材料：花菜主要仪器设备：无菌（光照）培养室、超净工作台，高压灭菌锅、pH 计等。

四、实验方法和步骤（一）配制培养基MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 1.0mg/L母液配制 大量元素——N 、P 、K 、Ca 、Mg 、S微量元素——I 、B 、Mn 、Zn 、Mo 、Cu 、Co铁盐——Fe有机化合物——肌醇 、烟酸、盐酸吡哆醇 、盐酸硫胺素、甘氨酸植物生长调节剂——NAA 、 6-BA500ml 母液各组分用量及配制方法：1、先在搪瓷量杯中加入约500ml 蒸馏水，依次加入下列组份并搅拌溶解：大量元素(10×) 50ml CaCl2 (100×) 5ml微量元素 (100×) 5ml 铁盐(100 ×) 5ml肌醇 (100 ×)5ml 烟酸 0.5mg /ml 0.5ml盐酸吡哆醇(0.5mg /ml)0.5ml 盐酸硫胺素(0.1mg/ml)0.5ml甘氨酸 (2.0mg /ml) 0.5ml 专业： 生物系统工程姓名： 徐梦浙学号： 3120100203 地点：生物实验中心313NAA (0.1mg /ml) 0.5ml 6-BA(1.0mg /ml) 0.5ml蔗糖 15.0g2、定容到500ml。

实验11 植物的组织培养一、选择题1. MS培养基与微生物的培养基相比,需要提供大量的（）A.无机营养B.蔗糖C.甘氨酸和维生素D.激素2.用商度分化的植物细胞、组织或器官进行组织培养可以形成愈伤组织。

下列有关叙述中，不正确的是（）A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B.该愈伤组织的细胞没有全能性C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构3.用兰花茎尖细胞可快速培育兰花苗，这种生殖方式不是（）A.无性生殖B.组织培养C.植物克隆D.有性生殖4.马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会因感染病毒而减产。

获得无病毒植株的最佳方法是（）A.选择优良品种进行杂交B.进行远缘植物体细胞杂交C.利用芽体进行植物组织培养D.人工诱导基因突变5.下列菊花组织培养的操作步骤中，顺序排列正确的是（）A.制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培B.制备MS固体培养基、外拉体消毒、培养、接种、移栽、栽培C.外植体消毒、制备MS固体培养基、接种、培养、移栽、栽培D.制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、移栽、培养、栽培6.某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。

为了防止性状分离并快速繁殖,可以利用该植物的一部分器官或组织进行离体培养,发育出完整杭株进行离体培养时不应采用该植株的（）A.茎尖B.子房壁C.叶片D.花粉粒7.下列育种方式需用植物组织培养技术的是（）A.诱变育种B.多倍体育种C.单倍体育种D.杂交育种8.植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分化、脱分化和再分化的关键性因素。

在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成（）A.先使用生长素，后使用细胞分裂承B.先使用细胞分裂素，后使用生长素C.同时使用D.都不使用9.生长素比细胞分裂素比值低时，则（）A.有利于根的分化，抑制芽的形成B.有利于芽的分化，抑制根的形成C.促进愈伤组织形成D.促进根和芽的分化10.下列关于愈伤组织的说法中不正确的是（）A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质11.在一个多细胞生物体内，存在形态、结构和生理功能上具有稳定性差异的细胞，是因为（）A.细胞失去全能性B.不同的细胞，基因是不同的C.不同细胞中基因选择性表达的结果D.变异一般是不定向的12.菊花的组织培养一般选择（）A.开过花的老枝B.正在开花的枝条C.未开花植株的茎上部新萌生的侧枝D.任何枝条均可13.下列植物细胞全能性最高的是（）A.形成层细胞B.韧皮部细胞C.木质部细胞D.叶肉细胞参考答案：一、选择题1.A2.B3.D4.C5.A6.D7.C8.C9.B 10.B 11.C 12.C 13.A。

实验七植物的组织培养一、植物组织培养1．概念：取一部分植物组织，在无菌的条件下接种在培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽，培养为成熟植株的技术。

2．理论基础：植物细胞的全能性。

3．培养基 (1)发芽培养基：细胞分裂素浓度大于生长素浓度的培养基。

(2)生根培养基：生长素浓度大于细胞分裂素浓度的培养基。

4．培养过程外植体――→脱分化愈伤组织――生芽丛状苗―→生根幼苗――→ 植株二、菊花的组织培养1．材料 MS 培养基、发芽培养基、生根培养基、萘乙酸(NAA)、苄基腺嘌呤(BA)、菊花幼苗。

2．操作流程1.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性。

2.影响植物组织培养的因素有：植物材料、营养物质、植物激素及pH 、温度、光照等。

3.植物组织培养的一般过程为：离体的植物器官、组织、细胞――→脱分化愈伤组织――→发芽培养基丛状苗――→生根培养基生根――→ 植株 4.发芽培养基中细胞分裂素相对较多而生长素相对较少；生根培养基中生长素较多而细胞分裂素较少。

1．不同植物、不同组织的生根和生芽是否都要使用相同的生长素和细胞分裂素浓度？提示：不相同。

2．本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？提示：天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用时间短，而人工合成的，没有分解酶，作用时间长，效果显著。

3．植物组织培养过程中，产生污染的途径有哪些？提示：①外植体带菌；②培养基及接种器具灭菌不彻底；③接种操作时带入；④环境不清洁。

核心要点一| 有关植物组织培养的几个问题及分析1．细胞的全能性(1)概念：指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。

(2)原因：生物体的每一个体细胞都是由受精卵经有丝分裂而来的，含有本物种的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全套基因。

(3)植物细胞表达全能性的条件：①离体状态；②一定的营养物质；③植物激素；④其他适宜的外界条件(温度、pH、氧气、光照、无菌等)。

授人以鱼不如授人以渔
——以《植物的组织培养》复习为例一、学生学习现状和选考32题分析
学生在复习浙教版选修一“生物技术实践”的过程中，普遍反映平时做的练习和真题差距太大，同时感觉选考复习过程中，找不到复习的有效方法，只能死背教材，付出很多时间和精力，但是进步不大。

分析近几年的选考真题的变化，主要有以下特点：（1）不是一味地找课本死角，挖冷门填空；（2）着眼于知识的理解、迁移、应用；（3）必修与选修的结合，注重结合知识、运用。

结合学生学习现状和选考真题32题分析，教师确定本节课的设计目的是：通过共同分析选考真题，引导学生自己去寻找选考出题规律，以“出题者”的视野去读教材和仿制题，达到“授人以鱼不如授人以渔”的最终目的。

二、教材分析
《植物的组织培养》是浙教版选修一“生物技术实践”中第四部分《浅尝现代生物技术》中的课题。

该实验以细胞全能性的理论知识为实验原理，内容包括组织培养的激素和培养基介绍、设备及用品、材料、步骤、思考与练习，与这节课内容相关联的其它知识有：必修一细胞分化、细胞全能性的基本概念、选修一的无菌操作知识、选修三的植物组织培养技术。

三、学生分析
在一轮复习的基础上，学生对已学知识和内容已完成了基础的识记，这一节课的学习给学生指引下复习方向，不仅要“知其然”还要“知其所以然”，同时进行深化和扩展，掌握植物组织培养的实验过程和应用。

四、教学目标
1、通过对选考真题的分析，基于选择试验材料用具和实施实验步骤，能理解生物实验现象的思想方法，以此指导探究生命活动规律，解决实际问题；
2、运用归纳与概括方法、演绎与推理，寻找选考真题的规律，发展学生科学思维；
3、通过仿制选考题，发展学生的批判性思维和创造性思维。

五、教学过程。

实验植物的组织培养-浙科版选修1 生物技术实践教案一、实验目的1.了解植物的组织培养技术；2.掌握组织培养的实验方法和步骤；3.学习细胞分裂及分化的基本知识。

二、实验原理组织培养基的配制1.组织培养基是一种供组织细胞生长和分化的营养液，通常由多个成分组成，如糖类、氨基酸、维生素、生长激素等。

2.不同类型的植物需要不同的培养基。

例如，生长在土壤中的植物需要含有氮、磷和钾的基础培养基（MS培养基），而水生植物需要含有低浓度无机盐的培养基。

3.为方便组织培养，常用的培养基为固态培养基，通常由琼脂制成。

组织培养的操作1.实验室常用的植物材料为茎尖、幼叶和愈伤组织。

2.首先，将材料表面用75%的酒精消毒，再通过酸性或碱性水洗去除残留的酒精。

3.将处理后的材料分离到小碗或表皮培养皿中。

4.随后，将培养基的溶液制备，并注入到上述容器中。

5.容器应密封，并置于光照适当的温度下，培养7-14天。

实验过程1.选取材料：幼年的西红柿幼苗。

2.材料消毒：使用75%酒精消毒、再用蒸馏水充分冲洗。

3.取一个操作室内净化器过滤器的样品盒，盒内设置一个小碗，容积为50ml。

然后向小碗中注入20ml MS培养基。

4.取一片新鲜的西红柿幼苗，将其愈伤组织分离出来后，将组织块剪成约5mmx5mm大小，然后将组织块平均分布放置在小碗中。

5.盖上扣子，悬挂于白炽灯下，温度维持在24-26°C，光照强度维持在3000-5000lx左右。

6.坚持观察，每隔3-4天，更换一次培养基。

三、实验结果与分析1.经过14天的培养，图中愈伤组织生长良好，增殖率达到91.1%。

2.另外，愈伤组织的形态学也发生了显著变化。

愈伤组织从原来的小块变成了较大的块状组织。

四、实验注意事项1.测量、调配溶液时应按要求进行。

2.实验过程中所用的仪器、设备、材料均需消毒或灭菌处理，避免外源微生物的污染。

3.实验室操作时应注意安全。

五、总结组织培养是一种重要的生物技术手段，能够实现植物的无性繁殖、基因转化和抗病性研究等。