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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书【试剂盒名称】人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）【试剂盒用途】定量检测人子血清、血浆及相关液体样本中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。
将标准品、待测样本加入到预先包被人血管内皮细胞生长因子（VEGF））多克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））含量。
【试剂盒组成】1 酶标包被板12孔×8条7 底物夜A6mL2 标准品：1600pg/ml0.6mL 8 底物夜B6mL3 20倍浓缩洗涤液20mL9 终止液6mL4 标准品稀释液6mL10 说明书1份5 样本稀释液6mL 11 封板膜1张6 酶标试剂6mL12 密封袋1个备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：1600、800、400、200、100、50pg/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
血管内皮生长因子检测45（最新版）目录一、血管内皮生长因子的概念二、血管内皮生长因子的作用三、血管内皮生长因子的检测方法四、血管内皮生长因子检测的意义五、结论正文一、血管内皮生长因子的概念血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，简称VEGF）是一种在血管内皮细胞中表达的蛋白质，它可以促进血管内皮细胞的增殖和迁移，从而促进血管的发生和生长。
在生理过程中，血管内皮生长因子对于血管的生长和发育具有重要的调节作用。
二、血管内皮生长因子的作用血管内皮生长因子主要有以下作用：1.促进血管内皮细胞的增殖和迁移：血管内皮生长因子可以刺激血管内皮细胞增殖和迁移，从而促进血管的发生和生长。
2.促进淋巴管的形成：血管内皮生长因子可以与淋巴细胞结合，通过与血管内皮生长因子受体结合，诱导淋巴管的形成。
3.参与肿瘤生长和转移：血管内皮生长因子在肿瘤生长和转移过程中发挥重要作用，它可以促进肿瘤血管的发生和生长，从而为肿瘤提供营养和氧气，促进肿瘤的生长和转移。
三、血管内皮生长因子的检测方法血管内皮生长因子的检测方法主要包括以下几种：1.免疫学检测方法：如酶联免疫吸附试验（ELISA）等，通过检测血液或组织中血管内皮生长因子的表达水平，了解其含量。
2.实时荧光定量 PCR 法：通过检测血管内皮生长因子 mRNA 的表达水平，了解其基因表达情况。
3.蛋白质印迹法：通过检测蛋白质表达水平，了解血管内皮生长因子的含量。
四、血管内皮生长因子检测的意义血管内皮生长因子检测对于了解血管内皮生长因子在疾病发生和发展中的作用具有重要意义，它可以：1.诊断和监测肿瘤：血管内皮生长因子在肿瘤发生和转移过程中发挥重要作用，通过检测血管内皮生长因子的水平，可以了解肿瘤的发生和转移情况，为肿瘤的诊断和监测提供依据。
2.评估治疗效果：在治疗过程中，通过检测血管内皮生长因子的水平，可以评估治疗的有效性。
3.研究血管发生和生长的机制：通过检测血管内皮生长因子的水平，可以了解血管发生和生长的机制，为相关领域的研究提供依据。
血管内皮细胞生长因子的检测和临床意义
董晓军;陈泮藻
【期刊名称】《标记免疫分析与临床》
【年(卷),期】2002(009)003
【摘要】@@ 血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是近年发现的一种与血管增殖有关的多肽生长因子.因它具有增加血管通透性引起内皮细胞增殖和血管形成等多种生物学功能,又称血管通透性因子(vascular permeability factor, VPF).它能特异的、高效的促进血管内皮细胞有丝分裂,具有促血管生成作用.因此,VEGF对生理性血管生成过程十分重要,VEGF促成血管生成活性是通过多种机制实现的.
【总页数】3页(P169-171)
【作者】董晓军;陈泮藻
【作者单位】解放军总医院科技开发中心,北京,100853;解放军总医院基础所【正文语种】中文
【中图分类】R33
【相关文献】
1.原发性肝癌患者血清基质金属蛋白酶9和血管内皮细胞生长因子检测的临床意义
2.子宫内膜异位症患者外周血和腹腔液中血管生成素-2和血管内皮细胞生长因子水平的检测及临床意义
3.乳腺癌患者血清血管内皮细胞生长因子的检测及其临床意义
4.原发性肺癌患者血清血管内皮细胞生长因子检测的临床意义
5.肺癌患者血清血管内皮细胞生长因子水平检测的临床意义
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过敏性紫癜患儿血D-二聚体测定的意义
李琳
【期刊名称】《浙江中西医结合杂志》
【年(卷),期】2006(016)007
【摘要】目的:观察过敏性紫癜患儿不同病期血D-二聚体的变化.方法:观察30例于入院时及恢复期取血,采用Nycocard Reader Ⅱ多功能全定量金标法测定仪测定D-二聚体的量,并与健康儿童25例(正常组)作比较.结果:正常组D-二聚体
0.33±0.12mg/L,观察组发病初期1.87±0.76mg/L,较正常组显著升高(P<0.01),恢复期下降至0.41±0.25mg/L,较发病初期差异有非常显著性意义,P<0.01.结论:D-二聚体测定能早期、准确判断过敏性紫癜患儿的血液高凝状态,并可作为预后的判断指标.
【总页数】2页(P416-417)
【作者】李琳
【作者单位】浙江省绍兴市第二医院儿科,绍兴,312000
【正文语种】中文
【中图分类】R72
【相关文献】
1.儿童过敏性紫癜血D-二聚体的测定意义 [J], 唐雪梅;李永柏;吴道奇;陈琼;盛朝凯
2.过敏性紫癜患儿25例血D-二聚体测定及临床意义 [J], 徐坚;钱镜秋
3.幼年类风湿关节炎患儿血D-二聚体测定及其临床意义 [J], 狄亚珍
4.过敏性紫癜患儿血D-二聚体检测的临床意义 [J], 秦晓红;胡浩忠
5.D-二聚体、LTB4、IL-23在急性期过敏性紫癜患儿外周血的水平表达及意义 [J], 钟华杰
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血管内皮生长因子VEGF检测临床意义和检测优势血管内皮生长因子是一种具有高度生物活性的功能性糖蛋白。
它是特异性的、生理作用强大的内皮细胞有丝分裂原，能作用于血管内皮细胞，使其增殖、迁移、管腔形成，参与血管生成并使毛细血管通透性增加。
它可致肿瘤血管异常生长，阻碍抗肿瘤药物有效输送至肿瘤组织内，并可刺激新生血管生长因子增加。
肿瘤与血管的关系：肿瘤生长和转移原理一方面，如果没有足够的血液供应和营养，肿瘤是长不大的，也就1-2mm3的样子。
肿瘤生长必须依赖血管的生成来提供必要的营养物质和氧气；另一方面，肿瘤的转移也需要血管通透性的改变来实现。
由此可见，肿瘤的生长、转移与血管是密切相关的。
VEGF检测的临床意义1、肿瘤的早期筛查。
肿瘤的生长、转移十分迅速，当肿瘤细胞团向实体肿瘤转化过程中，肿瘤细胞会产生大量VEGF，促进新生血管的生成，此时多为肿瘤Tis期和T1期，是肿瘤早期筛查的最佳时期，并可通过现有的临床手段予以确诊。
早期筛查可提高肿瘤患者的生存率，延长生存时间。
2、肿瘤的广谱性筛查。
有血管新生趋势变化，就伴随VEGF浓度变化。
VEGF可筛查几乎所有实体肿瘤，它的广谱性是其他检测指标不可代替。
3、VEGF可用于肿瘤临床诊断和预后评估。
临床上很多恶性肿瘤疾病缺乏特异性的肿瘤标志物，例如肾癌等。
而由于VEGF的广谱性、敏感性使得通过血液检测VEGF就可辅助诊断这类恶性肿瘤疾病。
同时，根据VEGF的水平变化可反映肿瘤的发展程度，对肿瘤的预后可作出判断。
一般而言，同一种恶性肿瘤，VEGF水平越高，肿瘤恶性程度也越高，预后相对较差。
VEGF检测优势1、早：在癌症发生的早期即可发现，对肿瘤早期发现具有重要意义；2、广：广谱性肿瘤标志物，适用于各种肿瘤的筛查和检测；3、准：联合其他肿瘤标志物检测提高诊断的准确性；4、高：灵敏度高，VEGF的最低检测限为pg级，分析灵敏度为目前肿瘤标志物中最高。
过敏性紫癜患者尿P选择素和血管内皮生长因子的检测林雀卿;徐祖森【期刊名称】《中国麻风皮肤病杂志》【年(卷),期】2010(026)007【摘要】采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测22例过敏性紫癜(HSP)患者尿P-选择素及血管内皮生长因子(VEGF)水平,并与14名健康儿童对照.HSP急性期有与无肾脏损害患者尿P-选择素、VEGF水平均明显高于正常对照组(P<0.05);急性期P-选择素明显高于恢复期(P<0.05);恢复期除有肾损害组尿P-选择素水平未高于正常对照组(P>0.05)外,其他均高于正常对照组(P<0.05);HSP有肾脏损害组急性期尿P-选择素、VEGF水平呈正相关(r=0.994,P<0.05).P-选择素、VEGF可能参与过敏性紫癜血管炎的发病过程,尿P-选择素、VEGF的表达与过敏性紫癜病情发展有一定相关性.【总页数】3页(P484-486)【作者】林雀卿;徐祖森【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤性病科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤性病科,武汉,430030【正文语种】中文【相关文献】1.过敏性紫癜患者血、尿β2微球蛋白的检测 [J], 崔玉霞;张涛;张玲;王艳芳2.过敏性紫癜患儿尿清蛋白与血管内皮生长因子的相关性 [J], 陈年发;段永强3.过敏性紫癜患者早期肾损伤尿微量蛋白检测的临床价值 [J], 邢精红;马娉婷;王媛媛;唐永明4.尿P选择素在过敏性紫癜患儿中表达水平及其临床意义 [J], 白晓玲;郑楠;许波;常向秀;姚慧;孙晓明5.过敏性紫癜患者血液P选择素的检测 [J], 李保强;马春虎;齐宝全;张春梅;陆洁;段昕所因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
过敏性紫癜患者血管内皮生长因子含量测定刘雯蓓,马小玲,季必华 [摘 要] 目的 探讨血浆血管内皮生长因子(V EGF)在过敏性紫癜中的变化和意义。
方法 采用EL ISA方法对26例过敏性紫癜患者(急性期12例和静止期14例)血浆V EGF浓度进行检测,并以20例健康人血浆V EGF浓度作为对照。
结果 20例健康人血浆V EGF含量为(63.8±59.3)μg/L,急性期和静止期过敏性紫癜患者血浆V EGF含量分别为(557.3±389.4)μg/L,(135.9±80.4)μg/L,两组与健康人比较,差异均有高度显著性(P<0.01)。
结论 V EGF在过敏性紫癜的发病中可能起一定的作用。
[关键词] 紫癜,过敏性;血管内皮生长因子[中图分类号] R554 [文献标识码] A [文章编号] 1001-7089(2003)04-0232-01Determination Levels of VEG F in Plasma of P atients with Aller gic PurpuraL IU Wen2bei,MA Xiao2ling,J I Bi2hua(Depart ment of Derm atology,A f f iliated Hospital of W annan Medical College,W uhu241000,China) Abstract: Objective To detect the plasma concentration of V EGF in the patients with allergic purpura and to evaluate the predictive value.Methods The plasma concentration of V EGF were measured by ELASA in26patients with allergic purpura(12 cases of acute allergic purpura and14cases of resting allergic purpura)and20healthy controls.R esults The plasma V EGF levels were(63.8±59.3)μg/L in20healthy controls,(557.3±389.4)μg/L in12patients with acute allergic purpura and(135.9±80.4)μg/L in14with resting allergic purpura.The difference was significant(P<0.01).Conclusion The V EGF may play an important role in the pathogenesis of allergic purpura.K ey w ords: Allergic purpura;Vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,V EGF)又叫血管通透因子(vascular permeabili2 ty factor,V PF)或血管调理素(vasculotropin),与胚胎发育、创伤组织的修复、缺血、炎症及肿瘤的发生密切相关,且日趋引人重视。
我们通过对过敏性紫癜患者血浆V EGF浓度的检测,探讨血浆V EGF在过敏性紫癜中的变化和意义。
1 材料与方法1.1 临床资料 过敏性紫癜26例,男16例,女10例;急性期12例,静止期14例;平均年龄15.4±4.8岁,病程<15天12例,15天～1月8例,1～2月4例, >2月2例。
对照组20例,男女各10例。
年龄16.5±5.2岁,为健康人。
1.2 血浆样本收集 所有病例均在晨起空腹抽取外周静脉血2ml,置于预装有ED TA血浆抗凝剂的玻璃试管中,4℃保存,2h内1000r/min离心15～20 min。
将上清(血浆)按1次用量分装冷藏于-20℃备用。
如见有明显的溶血,则弃用。
1.3 方法 使用EL ISA试剂盒(购于北京晶美生物 [作者单位] 皖南医学院附属医院皮肤性病科,安徽芜湖 241000 [作者简介] 刘雯蓓(1970-),女,安徽省六安市人,主治医师,医学学士,主要从事自身免疫性疾病及性病研究。
工程有限公司),待检血浆按试剂盒说明书进行,应用酶标仪(TECAN2spectra,丹麦产),依试剂盒规定,在一定波长的紫外灯下读取各样品的OD值。
根据标准品浓度得出标准曲线和换算公式,计算出待测样品的浓度。
1.4 统计学处理 数据以( x±s)表示,采用t检验(方差齐时)及t′检验(方差不齐时)。
2 结果健康人血浆V EGF含量为(63.8±59.3)μg/L,急性期和静止期患者血浆V EGF含量分别为(557.3±389.4)μg/L和(135.9±80.4)μg/L,与健康人比较,差异均有高度显著性(t′=4.36,P<0.01;t=3.01,P <0.01)。
3 讨论过敏性紫癜比较常见,任何年龄皆可发病,但以儿童和青年发病为多。
病因较复杂,其发生机理现主要是Ⅲ型变态反应,即体内免疫复合物(IC)形成并沉积于局部血管,激活补体,引起中性粒细胞及一系列生物因子活化,导致血管损伤、血细胞外渗和炎症。
本研究结果显示急性期和静止期过敏性紫癜患者血浆中V EGF平均浓度均高于健康人,差异均有高度显著性(P均<0.01),表明V EGF参与过(下转第261页)差异均无显著性(t=1.31、1.09,P均>0.05)。
同时BCG组与对照组治疗前后的血清IL210、IFN2γ变化差值比较,差异有显著性,BCG组效果强于对照组(t=3.95、3.859,P均<0.05)。
表1 治疗前CA患者与正常人IL210和IFN2γ水平 x±s(μg/L)组别例数IL210IFN2γCA治疗前6012.49±6.1525.12±11.25正常人 257.49±4.7842.65±28.00表2 BCG组和对照组治疗前后血清细胞因子IL210和IFN2γ水平变化 ( x±s)μg/L组别IL210对照组BCG组IFN2γ对照组BCG组治疗前11.47±5.2613.56±6.5725.0±14.0325.12±11.25治疗后11.17±5.929.52±4.1125.2±13.9630.7±13.33治疗前后差0.36±0.23 5.06±1.170.21±0.113 3.06±0.733 2.3 BCG组与对照组临床疗效(复发率) BCG组有5例复发,复发率16.7%;对照组16例复发,复发率53.3%,两组比较,差异有显著性(χ2=8.864,P<0.05)。
对照组复发率高于BCG组3 讨论尖锐湿疣(CA)是一种病毒感染性疾病,临床复发率较高。
以往CA的治疗多采用抗病毒及局部治疗,随着对尖锐湿疣发病机制研究的深入,细胞免疫功能的抑制和失衡越来越受到重视。
研究表明,CA患者体内存在多种Th1和Th2型细胞因子水平异常及明显的Th1/Th2型细胞因子产生失衡[3,4]。
我们的研究也表明CA患者确实存在IFN2γ水平的下降和IL210水平的升高,且两者间呈显著负相关。
细胞免疫功能的抑制和失衡可能是CA患者病情反复发作、病程迁延不愈的原因。
BCG2PSN有效成分主要为多糖、核酸等免疫原性物质,通过多次反复接种刺激机体改变免疫状态,提高机体抗病毒感染能力。
本实验显示,CA患者经BCG2PSN治疗后IL210水平显著降低,IFN2γ水平显著升高,且均差异有显著性,而对照组治疗前后的IL210、IFN2γ水平差异无显著性。
IL210作为一种细胞因子合成抑制因子,能有效地抑制Th1型细胞因子(如IL2 2、IFN2γ等)在mRNA水平的合成[5],通过抑制IL22、IFN2γ等的产生达到其免疫抑制的目的[6,7]。
而IFN2γ能增加单核细胞的吞噬作用,激活中性粒细胞、N K细胞、血管内皮细胞等,并与其它细胞因子协同,在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节方面有重要作用。
本研究结果表明,卡介菌多糖核酸可调节Th1/Th2细胞因子产生失衡,从而纠正因细胞因子产生失衡而引起的一系列细胞免疫反应抑制效应,来提高细胞免疫功能和减少临床复发率。
本研究结果为卡介菌多糖核酸在临床上的广泛应用,尤其是在抗病毒感染方面的应用,提供了一定的理论基础。
[参 考 文 献][1]Zarcone R,Bellinip,Cardon G,et al.Vulvo2vaginal HPV infection:Im2munological aspects[J].Minerva G inecol,1996,48(3):61.[2]Matorras R,AriceTa J M,Remeateria A,et al.Human immunodefi2ciency virus2induced immunosuppression:A risk factor for human papil2 lomavirus infection[J].Am J obstet G ynecol,1991,14:42.[3]陆春,朱国兴,周建,等.尖锐湿疣患者血清IL22、IL26及IL28水平的检测及其临床意义[J].中国实验临床免疫学杂志,1999,11(5): 22-23.[4]马翠玲,刘玉峰,金伯泉,等.尖锐湿疣患者细胞介素22产生水平及淋巴细胞增殖反应的实验观测[J].第四军医大学学报,1995,16: 108.[5]Marshall JD,Aste AM,Chehimiss,et al.Regulation of human inter2leukin218mRNA expression[J].Clin Immunol,1999,90:15-20. [6]Taga K,Tosato G.IL210inhibits human T cell proliferation and IL22production[J].J Immunol,1992,148:1143.[7]Hsu DH,Moore KW,Spites H,et al.Differential effects of IL24andIL210on IL222induced IFN2gamma Synthesis and Lymphokine2activat2 ed killer activity[J].Int Immunol,1992,4:563.[收稿日期] 2002211214 [修回日期] 2002212225(上接第232页)敏性紫癜的病理过程。
