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基因工程和细胞工程
适用学科生物适用年级高三适用区域人教版课时时长（分钟）120
知识点基因工程的诞生
基因工程的原理、技术及应用蛋白质工程
植物的组织培养
动物细胞培养与体细胞克隆细胞融合与单克隆抗体
教学目标1.使学生掌握基因工程的相关知识
2.使学生掌握细胞工程的相关技术
3.使学生掌握基因工程和细胞工程在生活中的应用
教学重点1．基因工程操作工具的作用及特点２.基因工程的操作流程分析
3．植物组织培养的原理、过程及应用4．动物细胞培养的原理、过程及应用。
养的原理、过程及应用
教学过程
一、课堂导入
(1)用比较、归纳法来掌握基因工程操作工具的种类、作用以及基因工程操作流程中各步骤的原理、方法。
(2)以流程图的形式复习植物组织培养、体细胞杂交、动物细胞培养、单克隆抗体制备的原理和操作步骤。
二、复习预习
答案：①限制酶②载体③基因表达载体的构建④目的基因的检测和鉴定⑤转基因动物⑥基因治疗⑦基因⑧可产生自然界没有的蛋白质⑨细胞的全能性、细胞膜的流动性⑩植物体细胞杂交⑪培育作物新品种⑫细胞增殖⑬动物细胞核的全能性⑭获得克隆动物个体⑮细胞膜流动性⑯给小鼠注射抗原⑰产生专一抗体的杂交瘤细胞
三、知识讲解
考点1 基因工程及蛋白质工程
1．基因工程的基本工具和基本方法的比较
将目的基因注入动物受精卵中
术
2.蛋白质工程
(1)蛋白质工程流程图
(2)蛋白质工程与基因工程的比较
造或生产人类所需蛋白质
易错点分析：
1.基因工程属于基因重组，是使基因异体表达的技术；
2.基因工程属于DNA分子水平的操作，其本质是转基因，而蛋白质工程的才做水平还是DNA分子水平，其本质为改（造）基因。
考点2 细胞工程
1．植物组织(细胞)培养和动物细胞培养
2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
3.动物体细胞核移植的过程(流程图)
易错点分析：
1. 细胞工程5大技术的原理和操作过程；
2. 在植物组织培养中各种植物激素的利用；
3.单克隆抗体的制作过程。
我们在学习细胞工程时要知道，细胞工程和基因工程是两个独立的工程，但是二者存在一定的联系，细胞工程可以为基因工程提供后续操作，毕竟基因工程仅是在分子水平改造细胞，而培养出个体就得交给细胞工程或胚胎工程了。
四、例题精析
【例题1】
【题干】普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。
科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种，操作流程如下图。
请据图回答：
(1)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞采用最多的方法是________，筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的________的表达。
(2)为促使图中②、③过程的顺利完成，需要在________条件下进行。
要快速繁殖转基因抗软化番茄植株，目前常用的科技方法是________。
为获得这种番茄的脱毒苗，应用其________进行培养。
(3)除了图示培育方法外，还可通过蛋白质工程技术，对________的结构进行特定的改变，从而获得抗软化的番茄品种，关键的操作是对________进行定向改造。
(4)为防止转基因番茄通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其他植物而造成基因污染，可将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄植物细胞的________(结构)中。
【答案】(1)农杆菌转化法标记基因
(2)无菌和人工控制植物组织培养(微型繁殖) 茎尖
(3)多聚半乳糖醛酸酶多聚半乳糖醛酸酶基因
(4)线粒体或叶绿体
【解析】(1)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。
标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，因此筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上标记基因的表达。
(2)②和③过程是植物组织培养，该过程只有在无菌和人工控制条件下才能顺利完成。
运用植物组织培养技术可以快速繁殖优良品种，该技术又称植物的微型繁殖技术。
植物分生区附近如茎尖的病毒极少，可以切取一定大小的茎尖进行组织培养，从而获得脱毒苗。
【例题2】
【题干】下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。
图中tet R表示四环素抗性基因，amp R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。
筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。
A．启动子B．tetR
C．复制原点D．ampR
(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)技术。
A．农杆菌转化B．大肠杆菌转化
C．显微注射D．细胞融合
(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。
A．核酸分子杂交B．基因序列分析
C．抗原－抗体杂交D．PCR
【答案】(1)HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素 (2)A (3)C (4)C
【解析】构建目的基因表达载体必须使目的基因和载体被限制性核酸内切酶同时酶切后露出相同的黏性末端。
从图中可以看出，载体无SmaⅠ酶的切割位点，若要将人乳铁蛋白基因插入载体，就只能选择HindⅢ和BamHⅠ；要选出含有目的基因的大肠杆菌可以通过检测标记基因是否表达来确定，四环素抗性基因中插入了目的基因而失活，故标记基因是氨苄青霉素抗性基因；启动子位于基因首端，是RNA 聚合酶识别和结合的部位，具有调控转录的功能；要使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达就必须在重组载体中插入乳腺蛋白基因的启动子；检测蛋白质一般使用抗原－抗体杂交技术。
【例题3】
【题干】科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄－马铃薯”杂种植株(如图所示)，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。
据图回答下列问题：
(1)在实现过程②的技术之前使用________酶处理细胞以去除细胞壁。
(2)在将杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是________，其中过程④相当于________过程，过程⑤涉及的分裂方式为________。
(3)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
【答案】(1)纤维素酶和果胶(2)细胞的全能性脱分化有丝分裂(3)m＋n 单
【解析】(1)植物体细胞杂交过程中应该用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
(2)杂种细胞培育成为杂种植株依据的原理是细胞的全能性，杂种细胞的组织培养过程要经过脱分化和再分化过程，在植物组织培养过程中只涉及有丝分裂。
(3)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则产生的“番茄—马铃薯”细胞所含的染色体为m＋n条，属于异源四倍体。
该杂种植株的花粉经离体培养得到的植株无论含几个染色体组，均为单倍体。
课程小结。
