抗凝血酶III(AT III)活性测定

抗凝血酶（AT ）检测介绍用途采用自动化分析仪定量测定血浆中抗凝血酶（AT ）的活性，能用于诊断AT 合成减少或消耗增加性疾病，和监测替代治疗效果。

概述和解释AT 是血浆凝血酶、活化因子V 的抑制剂，不可逆的抑制这些酶的复合物。

加入肝素后活化凝血因子的失活加速。

抗凝血酶（A ）有助于迅速测定抗凝血酶的生理活性，能用于诊断遗传性和获得性抗凝血酶缺乏，表示血栓危险度增加。

获得性抗凝血酶缺乏常见于大手术后或伴败血症的弥散性血管内凝血（DIC ）、坏死、肝实质病变（肝炎、药物中毒、嗜酒）和含雌激素的口服避孕药等消耗性疾病。

试验能早期检出有血栓危险度的病人。

方法学原理应用肝素使标本中抗凝血酶III 转换成抑制剂，使凝血酶失活。

残余凝血酶采用动力学方法测量405nm 吸光度的增加，公式如下：[]残余肝素过量标本＋凝血酶－凝血酶＋凝血酶III -AT ATIII ⎯⎯→⎯IPA ANBA OH Arg o Pr Gly Tos IPA ANBA Arg o Pr Gly Tos −+−−−−⎯⎯⎯⎯→⎯−−−−−残余凝血酶病人标本中吸光度线性降低与抗凝血酶III 出现呈线性关系。

样本为了获得血浆，仔细混合1份枸橼酸钠（0.11mol/l ）和9份静脉全血，避免产生泡沫。

立即离心，不小于1500×g 、至少10分钟。

标本稳定性-20℃ 1月2~8℃ 2天15~25℃ 6小时贮存在-20℃的冻融血浆必须在37℃10分钟内溶解，在2小时内完成检测。

不能多次冷冻。

使用未稀释的标本。

室内质量控制每次校准和每天每8小时应运行2种质控物（1份为正常范围，另一份为病理范围）。

质控物必须和标本一样处理。

每个实验室应建立自身质控范围，即采用厂商提供的质控物的靶值和范围的均值，或者实验室建立的均值和可信范围。

如果质控测定值超出可信范围，应核查试剂、参考曲线和血凝分析仪。

操作的局限性抗凝剂如水蛭素，会干扰AT试验结果。

预期值正常的75-125%（对于成人和3个月以上儿童）。

抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ),D－二聚体(D-D),纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物(FDP)检测与脑卒中的相关性发布时间：2022-06-02T05:28:11.629Z 来源：《中国结合医学杂志》2022年5期作者：夏正君[导读] 目的：研究抗凝血酶Ⅲ、D－二聚体、纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物与脑卒中的相关性。

夏正君达州市中西医结合医院，四川达州，635000【摘要】目的：研究抗凝血酶Ⅲ、D－二聚体、纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物与脑卒中的相关性。

方法：选取本院接收的脑卒中患者42例，另选取同期健康体检者42例（2021年4月-2022年2月），将42例脑卒中患者设为观察组，42例健康体检者设为对照组，检测两组AT-Ⅲ、D－二聚体、FDP水平，比较治疗前后两组AT-Ⅲ、D－二聚体、FDP水平变化情况。

结果：治疗前，相比于对照组，观察组FDP、D-D 等指标明显更高（P<0.05）。

结论：与正常者相比，脑卒中患者D-D与FDP水平明显更高，AT-III差异不明显，因此在脑卒中诊断、治疗及预后改善中，D-D、FDP检测具备良好的参考价值。

【关键词】抗凝血酶Ⅲ；D－二聚体；纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物；脑卒中脑卒中是急性脑血管疾病的一种，发病原因主要是血液循环障碍或脑血管破裂，该病会危及患者生命安全。

相关部门统计显示，近些年，我国脑卒中发病率逐年提升，具备较高的致残率与致死率。

因此，探究快速精准诊断该病的措施是提高该病救治率的关键。

部分研究指出，在脑卒中发病期间，机体血液的抗凝或纤溶酶原水平、凝血功能均具备一定作用，因此，通过对D-D、FDP、AT-III检测实验的完善，寻找可预警早期脑卒中进展的因子，对脑卒中的诊断、治疗及预后改善具备极为重要的临床价值[1]。

本次研究对比分析抗凝血酶Ⅲ、D－二聚体、纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物与脑卒中的相关性。

1资料与方法1.1一般资料选取本院接收的脑卒中患者42例，另选取同期健康体检者42例（2021年4月－2022年2月），将42例脑卒中患者设为观察组，42例健康体检者设为对照组。

易栓症组合：1) 蛋白C活性测定2) 蛋白S活性测定3) 抗凝血酶III活性测定4) 纤溶酶原活性测定5) 狼疮抗凝物检测（dRVVT试验）6) 狼疮抗凝物检测（SCT试验）样本要求：2.7ml蓝色帽抗凝管2管。

出报告时间：组合中除蛋白S外当天出结果，蛋白S两周后出结果。

结果解释：1.蛋白C活性测定蛋白C是一种维生素K依赖的丝氨酸蛋白酶原，通过灭活FVa和FVIIIa来调节凝血酶的产生。

遗传性杂合子蛋白C缺陷是静脉血栓（VTE）形成的中等危险因素；而严重的纯合子蛋白C缺陷与致命的中枢神经系统事件、视网膜血栓形成事件和新生儿紫癜爆发有关。

获得性蛋白C缺陷比遗传性蛋白C缺陷常见，原因可分为以下3类：a) 合成减少：肝脏疾病、维生素K 缺乏、维生素K拮抗剂（华法令）b) 消耗增多：急性血栓形成、DIC、急性内科疾病、创伤c) 血液稀释：出血后晶体液复苏、血浆置换后2.蛋白S活性测定蛋白S是不具有酶活性的辅因子，可以加速活化蛋白C（APC）水解FVa和FVIIIa。

蛋白S主要在肝脏合成，需要维生素K存在才能合成有功能的蛋白S。

大约60%的蛋白S与补体调节蛋白C4b结合不具有活性；另外游离存在的40%的非结合蛋白S才具有活性。

蛋白S遗传性杂合子缺陷被认为是VTE的轻、中度危险因素；严重的遗传性蛋白S缺陷被报道与新生儿紫癜爆发有关。

与蛋白C一样，获得性蛋白S缺陷比遗传性常见，减低原因可分为三类，与蛋白C相同（见上蛋白C减低的原因）。

此外，蛋白S活性减低还可见于口服避孕药、激素替代治疗和怀孕的中后期（详见后附的孕期凝血系统的变化）。

3．抗凝血酶活性测定抗凝血酶（AT）灭活Xa、凝血酶（FIIa）和其他丝氨酸蛋白酶。

遗传性杂合缺陷是VTE的主要危险因素，纯合突变未见报道。

获得性抗凝血酶缺陷见于肾病综合征（丢失大于合成），肝衰竭爆发、末期肝脏疾病和DIC。

怀孕相关的AT变化很小。

普通肝素输注可诱导AT缺陷，而低分子肝素治疗不会。

ATIII检测的临床意义ATIII检测的临床意义一、A T-III抗凝系统在凝血过程中的作用抗凝血酶III (AT-III )抗凝系统：AT-III抗凝系统是抗凝血系统(ATIII、PC、PS)的一个重要的组成部分，是体内主要的凝血酶抑制物，对其他丝氨酸蛋白酶( F X a、F X a、F幻a、F刘a)也有抑制作用，AT缺陷症导致血栓形成机制主要与其抗凝活性和肝素结合能力降低有关。

AT- m是血浆生理性抑制物中最主要的抗凝物质，对维持凝血与抗凝血的动态平衡有着重要的作用。

AT- m的减少、缺乏与异常可引起凝血酶灭活减少，凝血功能亢进，增加血栓形成的风险。

在临床上是发生静脉血栓与肺栓塞的常见原因之一，血液中AT- m浓度或活性降低，主要原因有合成障碍、消耗过多、丢失增加等获得性AT- m缺乏。

临床上血浆中AT- m的活性变化与多种疾病密切相关。

二、临床上常见的疾病遗传性抗凝血酶HI (AT-III )缺陷症，于1965年由Egeberg首次报道。

据统计，美国麻省的发病率高达1: 2000;在英国，本病的发生率可达人群中的0.2%-0.4%。

我国大陆AT-III缺陷症只有零星报道，香港的发生率达静脉血栓形成中的9.6%，台湾省的发生率为2.3%。

可见本病在我国的发生率并不低。

获得性抗凝血酶HI (AT-III )缺陷症见于DIC、肾病综合症、肝胆疾病和L-天冬酰胺治疗。

AT-III缺乏的女性患者，在妊娠、分娩期及口服避孕药时，容易发生血栓性疾病。

同时，AT-III是肝素抗凝血过程的必需物质，当AT-III 活性降低时，肝素的抗凝血活性明显降低或失去活性，所以在肝素的治疗监测中，必须需要了解AT-III的水平，以预防不必要的且危险的大剂量治疗。

1、遗传性AT- m缺乏：是一种常染色体显性遗传性疾病，据估计本病约为1/5000,发病多在10-25岁,患者常在手术、床上、感染、妊娠或产后发生静脉血栓，并可反复发生血栓。

抗凝系统的临床检测发表时间：2011-02-16T11:18:58.653Z 来源：《中外健康文摘》2010年12月第34期供稿作者：闫珍维[导读] 用于防治血管内栓塞或血栓形成的疾病，预防中风或其它血栓性疾病闫珍维 (黑龙江省尚志市妇幼保健院 150600) 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2010）34-0138-02【摘要】用于防治血管内栓塞或血栓形成的疾病，预防中风或其它血栓性疾病。

是通过影响凝血过程中的某些凝血因子阻止凝血过程的药物。

正常人由于有完整的血液凝固系统和抗凝及纤溶系统，所以血液在血管内既不凝固也不出血，始终自由流动完成其功能，但当机体处于高凝状态或抗凝及纤溶减弱时，则发生血栓栓塞性疾病。

【关键词】抗凝血类型检测 (一)抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)测定 1．原理测定方法有多种，常用的有活性测定和定量测定法，此处介绍发色底物法定量测定。

发色底物法测定AT-Ⅲ的原理是将待测的血浆中加入过量的凝血酶，在37℃条件下孵育一定时间，使血浆中的AT-Ⅲ与凝血酶结合，形成1：1的复合物。

然后加入显色底物并继续孵育，剩余的凝血酶作用于显色底物，裂解出显色基团对硝基苯胺(PNA)。

反应体系的显色强度与剩余凝血酶的活性呈正相关，与待测血浆中的AT-Ⅲ活性呈负相关。

2．试剂(1)标准血浆。

(2)底物S2238，浓度为5×10-7mmol／L。

(3)凝血酶溶液牛凝血酶用生理盐水配成7.5～7.7U／ml，每，10ml溶液中加入聚乙二醇6000(PEG 6000)0.8 g混合。

(4)Tris肝素缓冲液0.05mol／L，7.5×10-3mol／L EDTA-Na2，1.75×10-4mmol／L氯化钠，用1mol／L盐酸调节pH至8.4，每升缓冲液中含肝素3万U。

3．操作(1)将标准血浆及待测血浆进行一系列稀释。

(2)将一系列稀释的标准血浆及待测标本与Tris肝素缓冲液混合，于37℃温育5分钟。

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抗凝血酶Ⅲ(antithrombin Ⅲ, AT-Ⅲ)
单位μg/L
AT-III主要由肝细胞和血管内皮细胞分泌，是人体血浆中主要的生理性抗凝物质，约占血浆总抗凝血酶活性的50%-70%[9]。

在正常情况下AT-III与肝素结合后抑制凝血酶，纤溶酶及多种凝血因子的活性，维持血液平衡，是防止血栓形成的主要生理物质[10]。

AT-III可灭活极大部分的凝血酶，减少血栓形成的风险；当血浆中AT-III活性低于70%时，血栓形成的危险性就会大大增加[11]。

本实验中模型组血浆中AT-III含量的降低，考虑由于三氯化铁化学腐蚀法造成血管内皮细胞的损伤，可以使内皮细胞表面的AT-III减少，致使凝血酶活性增强，大量凝血酶形成的同时伴有AT-III消耗的增加，导致AT-III 含量的降低。

由于我们测定的血浆AT-III和PC含量反映的是血浆中剩余的AT-III和PC含量，从而使血浆中残存的AT-III和PC减少。

血府逐瘀汤高、中、低剂量组均可以抑制血栓形成，不同程度的降低AT-III含量，且AT-III含量显著低于模型组，推测可能通过与AT-III 结合使AT-III活化发挥抗凝血作用，从而使游离的AT-III含量降低，为此我们推测其抗动脉血栓的可能机制为通过增强AT-III的活性而增强动脉血栓模型抗凝系统活性。

阿司匹林阳性对照组同样可以减轻血栓重量，但是AT-III含量与模型组比较没有统计学意义，表明其抗血栓作用的环节可能不是通过抗凝系统实现的，其抗栓作用可能与其抑制血小板聚集和释放有关。

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精品。

ATIII检测的临床意义一、AT-III抗凝系统在凝血过程中的作用抗凝血酶III（A T-III）抗凝系统：A T-III抗凝系统是抗凝血系统（A TIII、PC、PS）的一个重要的组成部分，是体内主要的凝血酶抑制物，对其他丝氨酸蛋白酶（FⅨa、FⅩa、FⅪa、FⅫa）也有抑制作用，A T缺陷症导致血栓形成机制主要与其抗凝活性和肝素结合能力降低有关。

二、临床上常见的疾病遗传性抗凝血酶III（AT-III）缺陷症，于1965年由Egeberg首次报道。

据统计，美国麻省的发病率高达1：2000；在英国，本病的发生率可达人群中的0.2%-0.4%。

我国大陆AT-III缺陷症只有零星报道，香港的发生率达静脉血栓形成中的9.6%，台湾省的发生率为2.3%。

可见本病在我国的发生率并不低。

获得性抗凝血酶III（AT-III）缺陷症见于DIC、肾病综合症、肝胆疾病和L-天冬酰胺治疗。

A T-III缺乏的女性患者，在妊娠、分娩期及口服避孕药时，容易发生血栓性疾病。

同时，A T-III是肝素抗凝血过程的必需物质，当A T-III活性降低时，肝素的抗凝血活性明显降低或失去活性,所以在肝素的治疗监测中，必须需要了解A T-III的水平，以预防不必要的且危险的大剂量治疗。

三、AT-III活性测定的临床意义A T-III活性增高：见于血友病，口服抗凝剂等。

A T-III活性降低：见于DIC、肝病、术后、心肌梗塞、心绞痛、脑血管疾病、肾病、深静脉血栓、反复原因不明的血栓形成、肺梗塞、妊高症等疾病。

常规凝血四项是体内凝血因子水平正常与否的综合体现，仅能用于出血性疾病的筛查。

对于高凝状态病人的筛查，常规四项往往是正常的，如果结合A T-III检测，一旦四项正常，而A T-III降低，这样的病人发生血栓的风险就会加大，尤其是加上手术创伤等其它刺激因素，风险进一步加大，最终可导致血栓发生，需要临床医生及早发现并预防处理。

VIII因子检测的临床意义血浆中因子VIII:C水平增高：主要见于高凝状态和血栓性疾病，尤其是静脉血栓形成性疾病，如深静脉血栓形成、肺栓塞、肾病综合征、口服避孕药、妊娠高血压综合征、恶性肿瘤等，肝病时VIII:C升高。

AT-Ⅲ（抗凝血酶Ⅲ）的临床应用一、AT-Ⅲ概述：A T-Ⅲ是抗凝系统中最重要的成分，它由肝脏和内皮细胞合成，为凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸蛋白酶抑制物，具有强大的抗凝活性，占血浆抗凝酶活性的70%。

当肝素与抗凝血酶Ⅲ结合时，抗凝血酶Ⅲ的抗凝活性增强1000倍以上。

此外AT-Ⅲ对血小板聚集也有一定抑制作用。

AT-Ⅲ水平的高低主要反映凝血酶的活性强弱，其水平降低可发生血栓或DIC。

因此，AT-Ⅲ的水平对维持凝血与抗凝血的动态平衡有着重要的作用。

二、AT-Ⅲ的临床应用：1、在DIC中的应用DIC是一种复杂的病理生理过程和严重的获得性、全身性血栓-出血综合征，其特点是体内凝血和抗凝机制失衡，导致弥漫性小血管内血栓形成和继发性纤溶亢进。

DIC中，AT-Ⅲ大量消耗，早期即有明显减少，对DIC早期的诊断有较高的临床价值。

2、在DVT中的应用深静脉血栓形成（DVT）是临床常见病、多发病，其危害大，远期并发症发生率高，例如常遗留血栓形成后综合征（PTS），严重影响患者生活质量。

部分患者因并发肺动脉栓塞（PE）造成猝死。

对AT-Ⅲ进行动态监测对于早期预测手术、骨折、分娩后产生的深静脉血栓具有重要的临床价值。

3、在心血管疾病中的应用AT-Ⅲ缺乏是发生静脉血栓的常见原因之一，亦与动脉血栓形成有关。

研究发现，冠心病患者体内AT-Ⅲ活性明显低于健康者，而其与凝血酶形成的复合物含量却显著升高，提示冠心病患者存在凝血亢进，抗凝减弱。

AT-Ⅲ的检测对心血管疾病的预测、治疗、预后起着重要作用。

4、在脑血管系统中的作用血栓栓塞性疾病是危害中老年人健康的常见病和多发病，研究表明其发生与多种因素有关。

其中抗凝血酶水平降低可导致血液的高凝状态。

监测血浆中AT-Ⅲ水平，对于临床的抗凝治疗具有重要的指导意义。

5、在肝脏疾病中的应用血浆中70%的抗凝作用由AT-Ⅲ发挥，其合成部位主要在肝脏，内皮细胞也有部分合成。

故各类肝病致肝功能受损时，AT-Ⅲ呈获得性减少。

北医三院易栓症组合结果解释易栓症组合：1) 蛋白C活性测定2) 蛋白S活性测定3) 抗凝血酶III活性测定4) 纤溶酶原活性测定5) 狼疮抗凝物检测（dRVVT试验）6) 狼疮抗凝物检测（SCT试验）样本要求：2.7ml蓝色帽抗凝管2管。

出报告时间：组合中除蛋白S外当天出结果，蛋白S两周后出结果。

结果解释：1.蛋白C活性测定蛋白C是一种维生素K依赖的丝氨酸蛋白酶原，通过灭活FVa和FVIIIa来调节凝血酶的产生。

遗传性杂合子蛋白C缺陷是静脉血栓（VTE）形成的中等危险因素；而严重的纯合子蛋白C缺陷与致命的中枢神经系统事件、视网膜血栓形成事件和新生儿紫癜爆发有关。

获得性蛋白C缺陷比遗传性蛋白C缺陷常见，原因可分为以下3类：a) 合成减少：肝脏疾病、维生素K 缺乏、维生素K拮抗剂（华法令）b) 消耗增多：急性血栓形成、DIC、急性内科疾病、创伤c) 血液稀释：出血后晶体液复苏、血浆置换后2.蛋白S活性测定蛋白S是不具有酶活性的辅因子，可以加速活化蛋白C（APC）水解FVa和FVIIIa。

蛋白S主要在肝脏合成，需要维生素K存在才能合成有功能的蛋白S。

大约60%的蛋白S与补体调节蛋白 C4b结合不具有活性；另外游离存在的40%的非结合蛋白S才具有活性。

蛋白S遗传性杂合子缺陷被认为是VTE的轻、中度危险因素；严重的遗传性蛋白S缺陷被报道与新生儿紫癜爆发有关。

与蛋白C一样，获得性蛋白S缺陷比遗传性常见，减低原因可分为三类，与蛋白C相同（见上蛋白C减低的原因）。

此外，蛋白S活性减低还可见于口服避孕药、激素替代治疗和怀孕的中后期（详见后附的孕期凝血系统的变化）。

3．抗凝血酶活性测定抗凝血酶（AT）灭活Xa、凝血酶（FIIa）和其他丝氨酸蛋白酶。

遗传性杂合缺陷是VTE的主要危险因素，纯合突变未见报道。

获得性抗凝血酶缺陷见于肾病综合征（丢失大于合成），肝衰竭爆发、末期肝脏疾病和DIC。

怀孕相关的AT 变化很小。

普通肝素输注可诱导AT缺陷，而低分子肝素治疗不会。

抗凝血酶ⅲ（atⅲ）的检测法
抗凝血酶本身是一种比较小的蛋白质分子，可以对于凝血系统之中的一些酶成分进行灭活，而其产生是通过肝来进行的，而组成成分有四百多个氨基酸。

对于其中的一种类型，抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）来说，则是通过肝脏进行合成的一种球蛋白，在与因子等方面进行一定的结合之后，会形成共价复合物，而进行这些因子的灭活，从而形成体内比较强的物质类型。

抗凝血酶也被称作是抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ），在血浆之中，大概有三天左右的半衰期，而浓度大概为每毫升0.12克，人们已经从其他生物之中提取了这种物质，在抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）的检测法过程中，可以发现很多的内容，如果说这个方面的含量比较低的话，那么血液的凝血功能比较强，而如果说比较高也就是表示凝血功能比较弱。

在理论上来说，对于过量的凝血酶，纤维蛋白可以进行一定的中和，并对于血管之中的凝血起到一定的缓解作用。

而临床上来说，只有抗凝血酶3是有一定的意义的。

正常的抗凝血酶三通常是有每升二百六十毫克到三百二十毫克之间的，而如果说化验结果相对于正常值来说比较高的话，那么可能会有血友病的发生，这时候应当加强注意或者进行进一步的检测。

不过如果说口服抗凝剂或者注射了黄酮体的话也有可能会导致这个指标一定程度的升高。