牙周膜干细胞的研究进展_0

[文章编号] 1674-8603(2016)01-0054-03大鼠牙周膜干细胞分离㊁培养及应用的研究进展刘 努1,李 萌2,赵 盼2,刘 琪1*(1.遵义医学院附属口腔医院牙周科,贵州遵义563003;2.第四军医大学口腔医院组织工程研究中心,军事口腔医学国家重点实验室,陕西西安710032)[摘要] 大鼠牙周膜干细胞的分离㊁培养方法与人牙周膜干细胞有着不同之处,分离㊁培养大鼠牙周膜干细胞存在磨牙小㊁牙周膜组织来源少以及拔牙困难等难点㊂然而,在基础研究中,大鼠牙周炎模型的建立应用广泛,分离㊁培养大鼠牙周膜干细胞用以探讨牙周炎致病机制,明确机体内环境改变是否通过影响牙周膜干细胞的生物学性能导致牙周组织破坏严重与修复困难具有重要作用;另一方面,大鼠牙周膜干细胞分离㊁培养方法建立后,可以尝试从干细胞水平为治疗牙周病与促进牙周组织再生提供可靠的理论依据㊂因此,综述分离㊁培养大鼠牙周膜干细胞的可行方法有着十分重要的意义,有十分可观的应用前景㊂[关键词] 牙周膜干细胞;牙周炎;大鼠[中图分类号] R780.2 [文献标识码] A [doi ] 10.3969/j.issn.1674-8603.2016.01.013基金项目:国家自然科学基金资助项目(81360168)*通信作者:刘 琪 Email:liuqi1964@牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)是牙周组织工程与口腔再生医学中一种重要的种子细胞[1]㊂目前国内外对人PDLSCs 的培养方法已经成熟,主要采用人第三磨牙或正畸患者拔除的前磨牙的牙周膜组织,进行体外分离㊁培养的方式而获得[1-3]㊂由于受到临床取材数量以及医学伦理等方面的限制,无法有效㊁快速㊁大量的获取人PDLSCs 已成为限制口腔再生医学和相关基础研究进程的瓶颈㊂大鼠牙周疾病模型应用广泛,探索分离㊁培养大鼠PDLSCs 的技术,并在此基础上鉴定大鼠PDLSCs 的生物学性能,将为进一步的机理性实验与应用性研究奠定基础㊂本综述就大鼠PDLSCs 的分离㊁培养方法,细胞的生物学性能,以及应用前景做一回顾总结㊂1 大鼠PDLSCs 分离㊁培养大鼠PDLSCs 的分离㊁培养方法远不及人PDLSCs 方便㊁简单㊂最初的研究尝试利用大鼠的磨牙培养PDLSCs,然而大鼠磨牙甚小㊁牙周膜组织少,且拔牙较为困难,使得获取大鼠磨牙的牙周组织成为挑战[4-6]㊂此外,鼠类属于低等哺乳类动物㊂研究表明,低等动物组织细胞的分离㊁培养过程中,细胞不易存活,且状态不佳[7]㊂因此,鼠类PDLSCs 的分离㊁培养较为困难,大鼠PDLSCs 培养过程中对获取的牙周膜组织要求更严格㊁培养条件要求极高㊂近年来,学者提出大鼠门齿相比于大鼠磨牙存在诸多优势:数目较多(4个),体积较大,牙周膜面积大,能获取牙周膜组织较多;大鼠的门齿不断生长,咀嚼行为能刺激牙周膜组织的再生,获取的PDLSCs 的活性可能较好㊂利用大鼠门齿来获取大鼠PDLSCs 成为热点探讨的方法[8-9]㊂当前,利用门齿进行大鼠PDLSCs 的分离㊁培养步骤可归纳如下:拔取年轻大鼠的4个门齿(要求门齿无牙周疾病㊁拔除门齿需完整以及去除牙龈牙槽骨等其他软硬组织),立即置于含3%胎牛血清的无菌PBS 缓冲液中;用无菌拔髓针除尽牙髓组织,并用PBS 反复冲洗髓腔与根面,直至冲洗后的液体清亮为止;刮取门齿根中1/3的牙周膜组织并修剪成1mm 3大小的组织块,使用0.3%Ⅰ型胶原酶与Dispase 酶等量混合在37ħ培养箱中消化60min (每15min 震荡一次);加入等量的含血清培养液终止消化,1000r /min 离心5min,弃上清液;少量培养液重悬组织后,均匀致密铺板于直径较小的培养皿中,加入含有15%胎牛血清的α-MEM 培养液,置于37ħ㊁5%CO 2培养箱中培养㊂隔日观察,3天换液,等待细胞长至皿底面积的80%时进行消化和传代[8-9]㊂这种大鼠PDLSCs 的分离㊁培养方法的主要特点可总结如下:首先,大鼠磨牙小㊁拔牙困难,则采取拔取大鼠门齿的方法,多个门齿的牙周膜组织共同分离㊁消化后同时置于小型无菌塑料培养皿中,利用组织密集性来获取原代PDLSCs;其次,由于门齿的根端呈开放型,为了保证细胞的纯度和活力,需去净牙髓组织再分离牙周膜组织,消化后大鼠牙周膜组织铺板时需具有致密性;最后,大鼠牙周膜组织的消㊃45㊃口腔生物医学2016年3月(第7卷第1期) Oral Biomedicine,Vol.7,No.1,Mar.2016化体系为Ⅰ型胶原酶与Dispase酶的等量混合液,消化时间在人PDLSCs的分离基础上需适当延长,选择使用塑料器皿使之有利于PDLSCs的贴壁生长[8-9]㊂2 大鼠PDLSCs的生物学特性分析使用上述方法分离㊁培养的大鼠PDLSCs与人PDLSCs形态相似:大多数细胞呈现梭形,少数为带刺突或触角的不规则形,细胞胞体较小㊁包浆丰满,种系来源之间无明显差异[10]㊂大鼠PDLSCs与人PDLSCs和大鼠骨髓来源间充质干细胞(bone mar-row mesenchymal stem cells,BMMSCs)功能相近:具备不断增殖更新以及多向分化的潜能,并且具有间充质干细胞干性的生物学特征[10-11]㊂相对来讲,大鼠PDLSCs的增殖能力较人PDLSCs稍弱㊂大鼠PDLSCs不仅在体外能够增殖和成骨㊁成脂分化,而且在体内可再生出类骨组织或牙骨质/牙周膜样组织[8-9]㊂因此,大鼠PDLSCs在大鼠单纯牙周炎以及系统性疾病伴牙周炎的治疗应用中很可能再生牙周组织并修复牙周组织缺损㊂3 大鼠PDLSCs的应用前景牙周病病因的复杂性㊁病理过程的反复性以及临床治愈的困难性一直是研究难点和关注焦点㊂人PDLSCs的发现,为基于成体干细胞治疗牙周组织缺损提供了一个全新的方法,使牙周组织再生进入了一个新的时期㊂尽管如此,复杂的牙周病发病机理仍然不甚清晰,人PDLSCs的研究受伦理以及机体内环境的改变等多方面条件制约而受限㊂为此,分离㊁培养大鼠PDLSCs的意义十分重大㊂3.1 在牙周病机理研究中的应用流行病学调查结果显示,牙周病在我国人群中患病率高于70%,并有逐年上升的趋势[12]㊂近年来临床和基础研究资料表明,牙周病与全身健康和疾病有着双向的密切关联[13-16]㊂研究表明,牙周病与糖尿病之间存在着越来越多的共同危险因素,且互为高危因素[17-19]㊂精神压力也是牙周病发生及发展的重要危险因素[12,20-21]㊂此外,牙周病与骨质疏松症有一些共同的危险因素等[22-23]㊂然而,牙周病与全身各种疾病的相关基础研究与发病机理仍缺乏相关实验研究,当前利用干细胞治疗恢复牙周组织缺损的远期效果尚难以确定,其中取材受限是导致体内实验研究证据不足的主要原因之一㊂因此,从细胞㊁基因与蛋白水平更深入地探索系统性疾病与牙周病的相互作用机制成为一种挑战,基于大鼠PDLSCs分离㊁培养的基础研究成为了临床应用必不可少的环节㊂从门齿进行大鼠PDLSCs 的分离㊁培养为后续的一系列基础实验性及应用性研究奠定了基础,使得模拟人类疾病(如糖尿病伴牙周炎㊁骨质疏松症和抑郁伴牙周病等)和后续的细胞学实验在动物模型上成为了可能㊂此外,大鼠PDLSCs也为基础性研究中提供疾病来源和基因干预的PDLSCs提供了可能㊂3.2 在牙周组织再生中的应用利用人PDLSCs的多向分化能力以及体内再生能力的特性,将人PDLSCs作为种子细胞用于组织修复和细胞治疗的研究已经成为当前研究的热点㊂为了适应基础性研究㊁减少科研成本以及降低免疫排斥反应等,科研工作者们已从鼠类分离㊁培养了多种间充质干细胞,其中以BMMSCs应用最为广泛[24-25]㊂然而,在牙周组织再生中,BMMSCs并不能替代PDLSCs㊂Akizuki等[26]学者将BMMSCs和PDLSCs细胞膜片移植入大鼠或比格犬的牙周组织缺损处,6周后取材结果表明,虽然BMMSCs细胞膜片形成的骨样硬组织多于PDLSCs,但是BMMSCs形成骨样组织不能将软硬组织与牙齿联为一个整体,而只有PDLSCs形成的细胞膜片植入牙周缺损后,能形成牙周附着这种独特的组织结构㊂Dan等[27]和Hasegawa等[28]研究结果也显示,PDLSCs再生形成复杂的牙周膜样组织的能力显著高于其他组织来源的干细胞㊂因此,大鼠PDLSCs将会成为牙周组织工程与再生医学的重要种子细胞,分离㊁培养得到的大鼠PDLSCs有着不可替代的作用㊂4 总结与展望综上所述,通过分离大鼠门齿牙周膜组织,可成功获取㊁培养大鼠PDLSCs,并具有良好的再生应用相关的生物学特性㊂尽管分离㊁培养大鼠PDLSCs 过程较复杂,但是获取的大鼠PDLSCs有着重要的意义:从临床疾病发病的角度来分析,可进一步探索机体内环境的变化如何介导PDLSCs功能变化来影响牙周组织的损伤与再生;从牙周组织再生的角度来研究,大鼠PDLSCs是研究牙周病中牙周缺损和再生的合适种子细胞㊂大鼠PDLSCs的妥善分离㊁培养将给予基础和临床研究以新的希望㊂[参考文献][1] Seo BM,Miura M,Gronthos S,et al.Investigation of multipotentpostnatal stem cells from human periodontal ligament[J].Lancet, 2004,364(9429):149-155.㊃55㊃刘努,等.大鼠牙周膜干细胞分离㊁培养及应用的研究进展[2] Gao LN,An Y,Lei M,et al.The effect of the coumarin-like deriva-tive osthole on the osteogenic properties of human periodontal liga-ment and jaw bone marrow mesenchymal stem cell sheets[J].Bio-materials,2013,34(38):9937-9951.[3] 崔晓霞,杨琨,伍燕,等.糖基化终末产物介导的牙周膜干细胞成骨分化过程中Wnt经典信号通路相关作用机制的研究[J].牙体牙髓牙周病学杂志,2013,23(9):564-568. 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牙周膜细胞功能研究总结牙周膜是位于牙根和牙槽骨之间的一种结缔组织，其中的细胞成分在维持牙周组织的健康和稳定方面发挥着至关重要的作用。

牙周膜细胞主要包括成纤维细胞、成骨细胞、破骨细胞、成牙骨质细胞以及牙周膜干细胞等。

对这些细胞功能的深入研究，有助于我们更好地理解牙周疾病的发生机制，以及开发新的治疗策略。

成纤维细胞是牙周膜中最丰富的细胞类型，它们合成和分泌胶原蛋白、弹性纤维等细胞外基质成分，为牙周组织提供支持和韧性。

成纤维细胞还参与牙周组织的修复和再生过程，当牙周组织受到损伤时，成纤维细胞会增殖并迁移到损伤部位，合成新的基质以促进愈合。

此外，成纤维细胞还能通过分泌细胞因子和生长因子，调节其他牙周膜细胞的功能。

成骨细胞负责骨的形成和矿化，在牙周膜中，它们参与牙槽骨的重塑和修复。

成骨细胞能够合成骨基质蛋白，如骨钙素和Ⅰ型胶原蛋白，并在骨基质矿化过程中发挥关键作用。

当牙周组织受到炎症刺激或机械损伤时，成骨细胞的活性会受到影响，导致牙槽骨吸收和破坏。

破骨细胞则与成骨细胞的功能相反，主要负责骨的吸收和降解。

在正常的生理过程中，破骨细胞和成骨细胞协同工作，维持牙槽骨的动态平衡。

然而，在牙周疾病中，破骨细胞的过度活化会导致牙槽骨的快速破坏和吸收，加重病情。

成牙骨质细胞是形成牙骨质的主要细胞类型，它们能够合成和分泌牙骨质基质，将牙根固定在牙槽骨中。

成牙骨质细胞的功能异常可能导致牙骨质的形成障碍，影响牙齿的稳定性和牙周组织的健康。

牙周膜干细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体。

它们可以分化为成纤维细胞、成骨细胞、成牙骨质细胞等牙周膜细胞类型，为牙周组织的再生提供了细胞来源。

近年来，对牙周膜干细胞的研究成为了牙周组织工程领域的热点，通过体外培养和扩增牙周膜干细胞，并将其移植到受损的牙周组织中，有望实现牙周组织的完全再生。

在研究牙周膜细胞功能的过程中，科学家们采用了多种实验技术和方法。

例如，细胞培养技术可以在体外模拟牙周膜细胞的生长环境，研究细胞的增殖、分化和功能；免疫组织化学和原位杂交技术可以用于检测细胞中特定蛋白和基因的表达；动物实验则可以在体内观察牙周膜细胞在生理和病理状态下的行为和作用。

牙周膜干细胞论文：牙周膜干细胞的培养和鉴定【中文摘要】本研究从离体牙的牙周膜上分离出牙周膜细胞群,并对其进行纯化；在此基础上,对纯化后的细胞进行鉴定。

证实该细胞为“干细胞性”细胞,为后续牙周组织工程研究提供实验基础。

方法：1.分离纯化人牙周膜干细胞收集临床因正畸或阻生拔出的无龋病、无牙周病的恒牙,取根中1/3的牙周膜,采用酶解组织块法分离到牙周膜细胞群,然后有限稀释克隆法对牙周膜细胞群进行纯化,通过MTT法分析牙周膜细胞群与纯化后的牙周膜细胞的生长情况。

2.牙周膜来源干细胞的初步鉴定采用流式细胞仪分析细胞周期和细胞表面标记物,经成骨诱导液诱导细胞,对细胞进行初步鉴定。

结果：1.有限稀释克隆纯化后的细胞呈长梭形,通过MTT检测,证明该细胞是慢增殖周期的细胞。

2.流式细胞仪检测纯化后的细胞的周期特点和细胞表面标志物,证实其符合干细胞特性。

3.诱导纯化后的细胞成骨分化,细胞出现单极化,其间有针尖大小的钙结节形成,证实纯化后的细胞具有分化潜能。

结论：1.酶解组织块法有效分离到人牙周膜细胞群,有限稀释克隆纯化获得的牙周膜干细胞保持了其生物学特性。

该细胞具有干细胞周期特点,且有成骨分化潜能。

2.培养出牙周膜干细胞,可为组织工程提供基础。

【英文摘要】:Periodontal ligament cell populations were isolated from the periodontal membrane of extracted teeth and were purified; On this basis, the purified cells wereidentified. This paper confirmed that the cells were “stem cells” cells, to provide a basis for follow-up study of periodontal tissue engineering experimental.Methods:1. Separation and purification of human periodontal ligament stem cells Collecting the permanent teeth removal, without caries and periodontal disease, was indicated in the clinical cases due to orthodontic or impacted. Take the periodontal membrane on the middle 1/3 of the root surface. We separated cells within the periodontal tissue membrane by enzymatic, purified cells by limiting dilution cloning. The growth of periodontal ligament cell populations and purified periodontal ligament cells were analyzed by MTT.2. preliminary identification of Periodontal ligament stem cells:Cell cycle and cell surface markers were detected by flow cytometry. Osteogenic medium induced cells to identified cells.Results:1. Cells purified by limiting dilution cloning appeared Spindle. The results show that the cell is a slow proliferation cycle stem cells by MTT detection.2. The cells purified were detected cell surface markers and cell cycle characteristics by flow cytometry. The result demonstration that the cells accordance with characteristics of stem cell.3. Purified cells were induced by osteogenic medium, cells were unipolar, there have been needlethe size of calcium nodules, confirmed that the purified cells possess differentiation potential.Conclusion:1. Cells which maintain their biological characteristics were effectively isolated by Enzymatic and purified by limiting dilution cloning. And the cells have characteristics of stem cell cycle and potential of Osteogenic differentiation.2. Cultured periodontal ligament stem cells provide the basis for tissue engineering.【关键词】牙周膜干细胞组织工程细胞鉴定【英文关键词】Periodontal ligament stem cells Tissue Engineering Cell identification【目录】牙周膜干细胞的培养和鉴定摘要3-4ABSTRACT4-5缩略词表7-8第1章引言8-9第2章人牙周膜干细胞的分离培养和鉴定9-18第一部分分离纯化人牙周膜细胞9-13 1 材料和方法9-11 1.1 主要试剂和仪器9-10 1.2 细胞的分离和纯化10-11 2 结果11-12 2.1 细胞生长的情况11 2.2 细胞的克隆形成情况11 2.3 细胞生长曲线11-12 3 讨论12-13第二部分筛选纯化后的人牙周膜干细胞的鉴定13-18 1 材料与方法13-15 1.1 主要试剂与仪器13-14 1.2 方法14-15 2 结果15-16 2.1 流式细胞仪分析结果15 2.2 成骨分化诱导后细胞形态15-16 3 讨论16-18第3章结论与展望18-19致谢19-20参考文献20-22附图22-24攻读学位期间的研究成果24-25综述25-34参考文献32-34。

牙周膜干细胞在再生医学中的研究进展郑伟;刘朋飞;冯业童;董超;周余来【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2012(032)007【摘要】牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSC)是来源于牙周膜的一类成体干细胞,具有较强的自我更新能力,并且可以进一步分化成为多种具有不同功能特性的细胞.目前研究表明,牙周组织疾病在中老年人中具有较高的发生率,PDLSC在维持牙周膜功能稳定、修复牙源组织损伤和实现功能性细胞更新等方面具有重要意义,该类成体干细胞是牙周组织再生最为直接可靠的一类种子细胞,也是牙周组织疾病细胞治疗和基因治疗模式最为重要的细胞学基础,在组织工程与再生医学中有着重要的应用前景[1,2].【总页数】3页(P1546-1548)【作者】郑伟;刘朋飞;冯业童;董超;周余来【作者单位】通化市口腔医院,吉林通化 134000;吉林大学药学院生物工程实验中心;吉林大学药学院生物工程实验中心;吉林大学药学院生物工程实验中心;吉林大学药学院生物工程实验中心【正文语种】中文【中图分类】R781.4;Q813.1【相关文献】1.基于壳聚糖的纳米材料在骨组织工程与再生医学中的研究进展 [J], 李晓静;王新木;董研;苟中入2.冲击波在骨科-再生医学中的应用研究进展 [J], 杨以萌;张浩;廖伟雄;苏祥正;张宁;李冀;王克涛;张恭谦;朱恒;李众利;3.冲击波在骨科-再生医学中的应用研究进展 [J], 杨以萌;张浩;廖伟雄;苏祥正;张宁;李冀;王克涛;张恭谦;朱恒4.牙髓干细胞在组织工程及再生医学中的应用研究进展 [J], 王付燕;杜立群5.外胚层间充质干细胞在再生医学中的研究进展 [J], 罗玉婷;周智因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人牙周膜干细胞的分离培养及生物学特性研究目的：分离筛选人牙周膜干细胞，研究其生物学特性并进行初步鉴定。

方法：采用STRO-1为标记物以免疫磁珠分离筛选人牙周膜干细胞，观察细胞生长及克隆形成情况，流式细胞仪细胞周期、细胞表型分析，免疫细胞化学染色技术检测STRO-1、Vimentin表达，并测定细胞体外多向分化能力。

结果：免疫磁珠法可获得人牙周膜干细胞，细胞具有克隆形成能力，增殖速度低。

细胞周期分析大多数细胞处于G0/G1期,为慢周期性;细胞表型分析证实CD146、CD44高表达，CD34、CD45低表达。

STRO-1及Vimentin均为阳性染色，矿化诱导和成脂诱导证实该细胞具有多向分化能力。

结论：免疫磁珠法是有效的分离纯化牙周膜干细胞的方法。

所分离细胞具有干细胞的细胞周期、表型特点及多向分化能力。

Abstract:ObjectiveTo isolate and identify the periodontal ligament stem cells and demonstrate its bionomics. MethodsPDLSCs were isolated by immunomagnetic method. The flow cytometry and immunocytochemistry procedure were used to disclose the cell cycle and surface marker of the PDLSCs.Osteoinduction and adipoinduction were done to conform the multidirectional differentiation of PDLSCs. ResultsThe acquired cells had clonality and low proliferation. Most of the cells were in phase G0 /G1 and there were high expression of CD146 and CD44 on these cells, meanwhile, CD34 and CD45 were of low expression. The cells were Vimentin and STRO-1 positive while their multidirectional differentiation ability was confirmed in vitro. Conclusionimmunomagnetic method was an effective way to isolate and purify the PDLSCs. The acquired cells showed the characteristics of stem cells.Key words:stem cell;human periodontal ligament stem cell;immunomagnetic beads;flow cytometry;immunocytochemistry研究证实牙周膜内存在具有横向分化能力的干细胞(牙周膜干细胞)，在体外微环境作用下还可分化为成牙骨质细胞或成骨细胞[1-2]。

体外培养牙周膜干细胞促进其增殖的研究进展作者：吴玲来源：《中国保健营养·中旬刊》2014年第02期【摘要】牙周膜干细胞因高度自我更新能力和多向分化潜能能形成类似于天然牙骨质牙周膜复合体的结构，使其在临床上具有广泛应用前景，目前在牙周组织工程方面的应用研究已取得一些进展，被认为是牙周组织工程的首选种子细胞，但是牙周膜组织中干细胞含量非常少，如何用成体干细胞替代牙源性干细胞，从而获得大量种子细胞。

本文就目前体外培养牙周膜干细胞促进其增殖的研究做一综述。

【关键词】牙周膜干细胞；增殖；细胞因子【中图分类号】R748 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）02-0534-02牙周炎是一种侵犯牙周组织（牙龈、牙周膜、牙骨质和牙槽骨）的慢性炎症性疾病，是由于细菌侵犯牙龈和牙周组织而引起的牙龈发炎肿胀，牙周袋形成、牙槽骨丢失，最终导致牙齿松动脱落病变，牙周炎是成年人牙齿丧失的主要原因之一。

全球重度牙周炎患病率为5-20%。

本文就目前体外培养牙周膜干细胞促进其增殖的研究做一综述。

1.1 釉基质蛋白（EMP）由上皮根鞘内层的成釉细胞分泌，主要成分是釉原蛋白（amelogenin，Am）和非釉原蛋白（non-amelogenin）。

众多实验都已证实EMP对牙周膜干细胞和骨髓基质干细胞[7]有明显的促增殖作用，可以提高干细胞总蛋白的合成，碱性磷酸酶（ALP）的活性以及矿化结节的形成，并且作用的效果呈时间和质量浓度依赖性。

刘兰宁等用不同浓度的EMPs诱导牙周膜干细胞，得出EMPs在一定浓度下可以促进人PDLCs增殖，以100mg/L浓度最佳。

1.2 骨形成蛋白（BMP）除BMP-1外其余均属于转化生长因子-β超家族成员，在胚胎发育期间由多种上皮和间叶组织产生，诱导间叶细胞分化为软骨细胞和成骨细胞，参与软骨与骨发育，参与四肢形成及肺、肝、肾等软组织发育，与交感神经元分化有关。

在BMPs中，BMP-2的诱骨作用最强，是发现的唯一能单独诱导成骨的骨形成蛋白，存在于具有成骨潜质的细胞的细胞质中，可以诱导未分化的间充质细胞向成骨细胞和成牙骨质细胞分化，促进牙周组织新骨的形成。

牙周膜干细胞生物学研究新进展贺慧霞;刘洪臣【摘要】牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSC)是在干细胞理论和技术发展较为成熟的基础上提出的.PDLSCs具有分化形成牙槽骨、牙骨质和牙周膜的潜能,在牙周生理、病理和牙周病再生治疗中发挥极其重要的作用.对PDLSCs生物学的研究是解读这一系列事件的钥匙.本文就PDLSCs生物学作用、来源、组织学定位、分离和鉴定等方面研究的最新进展做一综述.【期刊名称】《中华老年口腔医学杂志》【年(卷),期】2010(008)003【总页数】4页(P176-179)【关键词】牙周膜干细胞;生物学;进展【作者】贺慧霞;刘洪臣【作者单位】解放军总医院口腔内科,北京,100853;解放军总医院口腔医学研究所,北京,100853【正文语种】中文【中图分类】R781.4牙周膜干细胞(periodontal ligamentstem cell,PDLSC)是牙周组织再生最直接、最可靠的种子细胞，也是牙周缺损细胞治疗和基因治疗重要的细胞学基础，在牙周病治疗、种植体周围软硬组织缺损修复、正畸牙移动过程中的修复与改建中均发挥重要作用，是近年来牙周病研究领域的焦点和热点之一。

其中关于 PDLSC的生物学作用、来源、组织学定位、分离方法、分化特性等方面研究都取得了可喜的新进展，为重新认识 PDLSC的生物学特性提供了依据。

1.PDLSC的生物学作用PDLSC是指存在于牙周膜中具有自我更新和横向分化潜能的未分化的干细胞群，是由处于不同分化层次、具有不同分化潜能的祖细胞或前体细胞组成[1]。

目前已证实 PDLSC能分化形成牙骨质、牙槽骨和牙周膜样组织，但对于牙周骨缺损修复细胞来自骨组织还是来自牙周膜一直存在不同意见。

最近有学者[2]通过 PDLSC示踪发现：表达骨髓基质干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)表面标志分子CD166、CD105的 PDLSC具有成骨潜能，当牙周损伤导致牙槽骨缺损后，这些PDLSC迁移、分化为成骨细胞修复牙槽骨缺损，而牙周膜中不存在BMSCs。

种子细胞、生长因子、支架材料是组织工程研究的三要素，其中寻找拥有理想生物学性能的种子细胞是首先需要解决的问题。

牙周膜干细胞具备高度增殖能力、自我更新能力及多向分化潜能，并且来源相对广泛，作为牙周组织再生、牙再生等研究的候选种子细胞受到越来越多的关注[1]。

牙周膜干细胞的体外培养对培养条件要求较高，原代细胞分离方法、基础培养基成分、氧气浓度、培养时间、细胞保存条件、物理和化学刺激等因素对牙周膜干细胞的生长状态及增殖、分化等特性有较大影响。

本文结合近年来研究进展，探讨多种体外培养条件对牙周膜干细胞生物学特性的影响，为优化牙周膜干细胞体外培养条件、充分发挥其干细胞多能性提供参考。

[摘要] 牙周膜干细胞是具有自我更新能力与多向分化潜能的成体干细胞，作为口腔组织工程研究的候选种子细胞备受关注。

进行体外培养过程中，原代细胞分离方法、基础培养基成分、氧气浓度、培养时间、细胞保存条件及其他物理和化学刺激的施加等培养因素可在一定程度上改变牙周膜干细胞的增殖、分化、迁移等特性，将影响其在组织工程中应用的效果。

本文围绕体外培养环境对牙周膜干细胞生物学特性的影响进行综述，为优化牙周膜干细胞体外培养条件、充分发挥其全能性提供参考。

[关键词] 牙周膜干细胞； 细胞培养技术； 生物学特性[中图分类号] Q 813.1+1 [文献标志码] A [doi] 10.7518/gjkq.2018.03.002Effects of culture conditions in vitro on the biological characteristics of periodontal ligament stem cells Jia Linglu 1,2, Wen Yong 1,2, Xu Xin 1,2. (1. School of Stomatology, Shandong University, Jinan 250012, China; 2. Shandong Province Key Laboratory of Oral Tissue Regeneration, Jinan 250012, China)This study was supported by Shandong Provincial Key Research and Development Program (2016GSF201115, 2017GSF18117), China Postdoctoral Science Foundation (2017M610432) and Shandong Pharmaceutical and Health Science Technology Development Programme (2017WS111).[Abstract] Periodontal ligament stem cell, which is a kind of adult stem cell, owns the abilities of self-renewing and multi-differentiation and has become the hot spot in the oral tissue engineering. When cultured in vitro , different culture conditions such as primary cell separation methods, culture medium composition, oxygen concentration, culture time, cell storage conditions and other physical or chemical stimulation can change the proliferation, immigration or differentiation characteristics of periodontal ligament stem cell. This paper is committed to review on the research progress regarding the effects of the culture conditions in vitro on the biological characteristics of periodontal ligament stem cell in recent years and provide theoretical reference for tissue engineering.[Key words] periodontal ligament stem cell ; cell culture technique ; biological characteristics体外培养环境影响牙周膜干细胞生物学特性的研究进展贾凌璐1,2 文勇1,2 徐欣1,21.山东大学口腔医学院 济南 250012；2.山东省口腔组织再生重点实验室 济南 250012[收稿日期] 2017-09-28； [修回日期] 2018-01-15[基金项目] 山东省重点研发计划（2016GSF201115，2017GSF181- 17）；中国博士后基金 （2017M610432）；山东省医药卫生发展计划（2017WS111）[作者简介] 贾凌璐，博士，Email ：danlingjia@ [通信作者] 文勇，副教授，博士，Email ：wenyong@·干细胞专栏·1 牙周膜干细胞的基本特性2004年，Seo等[1]采用单细胞株筛选及免疫磁珠分离技术，首次从人第三磨牙分离出牙周膜干细胞。

干细胞在牙周病学中的应用进展谢军;陆玉林;曹庆堂【摘要】牙周病是造成牙齿缺失的常见病因之一。

随着对干细胞的深入研究，牙周膜干细胞得以从牙周膜提取分离，具有分化成牙周组织细胞的能力。

通过分析近年的组织工程学文章，探讨牙周膜干细胞的应用前景。

%Periodontal disease is one of the common cause of tooth loss.With the in-depth study of stem cells,periodontal ligament stem cells isolated from periodontal ligament tissue, has the ability to differentiate into periodontal tissue cells. To analyze articles tissue engineering in recent years, this article discussed the application prospect of the periodontal ligament stem cell.【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】2页(P86-86,87)【关键词】牙周病;牙周膜干细胞;组织工程学【作者】谢军;陆玉林;曹庆堂【作者单位】内蒙古医科大学呼和浩特 010110;内蒙古医科大学第四附属医院包头014000;内蒙古医科大学第四附属医院包头014000【正文语种】中文【中图分类】R781.4牙周病是指发生在牙周支持组织的各种疾病，累及四种牙周支持组织（牙龈、牙周膜、牙槽骨和牙骨质）的慢性感染性疾病。

目前牙周病的治疗分为四阶段：基础治疗、牙周手术治疗、修复治疗以及牙周支持治疗。

非手术治疗只能消除病因，难以达到理想疗效。

为了形成新的附着，Nyman S引入引导组织再生的原理，提出用外科方法放置一个物理屏障选择性地分隔不同的牙周组织，阻止牙龈上皮和牙龈结缔组织向根面生长，造成空间，诱导具有牙周组织再生潜力的牙周膜细胞冠向移动并生长分化，实现牙槽骨、牙周膜、牙骨质的再生，形成新的附着[1]。

牙周膜细胞功能研究总结牙周膜是位于牙根和牙槽骨之间的一种结缔组织，其中的细胞对于维持牙周组织的健康和稳定起着至关重要的作用。

牙周膜细胞包括成纤维细胞、成骨细胞、破骨细胞、牙周膜干细胞等多种类型，它们各自具有独特的功能，并且相互协作，共同完成牙周组织的生理和病理过程。

成纤维细胞是牙周膜中最主要的细胞类型之一，它们合成和分泌胶原蛋白、弹性纤维等细胞外基质成分，为牙周组织提供支持和弹性。

成纤维细胞还参与炎症反应和组织修复过程。

在炎症状态下，成纤维细胞会分泌炎症介质，如细胞因子和前列腺素等，引起牙周组织的炎症和破坏。

同时，在组织损伤后，成纤维细胞会迁移到损伤部位，增殖并合成新的细胞外基质，促进组织的修复和再生。

成骨细胞负责骨组织的形成和矿化。

在牙周组织中，成骨细胞可以在牙槽骨表面形成新的骨组织，维持牙槽骨的高度和稳定性。

成骨细胞的功能受到多种因素的调节，包括激素、生长因子和机械刺激等。

例如，甲状旁腺激素可以促进成骨细胞的活性，而糖皮质激素则会抑制成骨细胞的功能。

此外，牙齿的咀嚼压力等机械刺激也可以刺激成骨细胞的增殖和分化，增强牙槽骨的强度。

破骨细胞则与骨组织的吸收和重塑有关。

在正常的生理过程中，破骨细胞会在一定程度上吸收旧的或受损的骨组织，为新骨的形成创造空间。

然而，在牙周炎等病理情况下，破骨细胞的过度活跃会导致牙槽骨的快速吸收和破坏，引起牙齿松动和脱落。

破骨细胞的活性受到多种细胞因子和激素的调节，如核因子κB 受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（OPG）的比例对破骨细胞的形成和活性起着关键的调控作用。

牙周膜干细胞是近年来牙周组织工程研究的热点之一。

这些干细胞具有自我更新和多向分化的潜能，可以分化为成纤维细胞、成骨细胞、成牙骨质细胞等多种牙周膜细胞类型。

利用牙周膜干细胞进行组织工程修复，有望为牙周炎等牙周疾病的治疗提供新的策略。

研究发现，牙周膜干细胞的数量和功能会随着年龄的增长而下降，这可能是老年人更容易发生牙周疾病且治疗效果不佳的原因之一。

［文章编号］㊀１６７４⁃８６０３（２０２０）０４⁃０２７０⁃００牙周膜干细胞在牙周组织再生中的研究新进展吴博昊１，安莹２∗（１．空军军医大学基础医学院，陕西西安７１００３２；２．军事口腔医学国家重点实验室，国家口腔疾病临床研究中心，陕西省口腔生物工程技术研究中心，空军军医大学口腔医院牙周病科，陕西西安７１００３２）［摘要］㊀牙周膜干细胞（ＰＤＬＳＣｓ）具有增殖及多向分化潜能等特性，在牙周组织再生方面具有广阔的应用前景㊂本文总结了ＰＤＬＳＣｓ的生物学特性及其在牙周组织再生中的最新应用，并对其将来的临床应用前景进行展望㊂［关键词］㊀牙周膜干细胞；牙周再生；组织工程［中图分类号］㊀Ｒ７８１．４㊀㊀［文献标识码］㊀Ａ㊀㊀［ｄｏｉ］㊀１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４⁃８６０３．２０２０．０４．０１３基金项目：国家自然科学基金（８１７００９７１）∗通信作者：安莹，Ｅｍａｉｌ：ａｎｙｉｎｇ＠ｆｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ㊀㊀牙周炎是由牙菌斑引起的牙周组织的慢性炎症，进而造成牙槽骨的破坏吸收，是导致牙齿缺失的主要原因之一㊂近期的研究表明牙周炎与一些全身系统的疾病密切相关，例如阿兹海默症［１］㊁冠心病［２］以及免疫系统疾病［３］等㊂牙周炎的传统治疗，如洁治术和刮治术等，可以控制炎症，但难以恢复牙周组织的形态和功能㊂牙周组织再生是通过组织工程的方法，在体外利用种子细胞㊁生长因子以及生物支架，搭建出三维的移植复合体，以修复和改善牙周组织的形态和功能［４］㊂种子细胞是组织工程的核心和必要成分，牙周膜干细胞（ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＰＤＬＳＣｓ）是一类有克隆增殖能力㊁多向分化潜能和免疫调控等生物学特性的成体干细胞㊂由于ＰＤＬＳＣｓ是从牙周组织中分离获取，因而也是最适宜牙周再生的种子细胞之一㊂生长因子在牙周再生中具有重要作用，适宜的生长因子可以促进干细胞的增殖㊁分化以及生成组织的能力㊂支架材料应当具有生物相容性㊁可降解性㊁高孔隙率以及良好的表面活性等特性［５］，为干细胞提供附着㊁增殖㊁分化和分泌细胞外基质的土壤㊂本文从上述角度出发，对ＰＤＬＳＣｓ生物学特性㊁牙周再生的支架材料㊁牙周再生的生物活性分子以及近年用ＰＤＬＳＣｓ进行牙周再生的临床实验作一综述㊂１㊀ＰＤＬＳＣｓ的生物学特性１．１㊀ＰＤＬＳＣｓ的来源以及表面标记牙周膜组织是连接牙根与牙槽骨的致密结缔组织，其主要生理功能是缓冲牙合力㊁稳固支持和营养等作用㊂ＰＤＬＳＣｓ是从牙周膜组织中分离出的一类干细胞㊂２００４年，Ｓｅｏ等［６］首次利用酶消化法从人的牙周膜组织中分离出ＰＤＬＳＣｓ，这种干细胞表现出类似间充质干细胞（ｍｙｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ）的生物学特性，同时也会表达ＭＳＣｓ的相关标记㊂因而，起初研究者会使用ＭＳＣｓ的相关标记物鉴别ＰＤＬＳＣｓ，如基质细胞抗原１（ｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌａｎｔｉｇｅｎ１，ＳＴＲＯ１）㊁ＣＤ１４６和粘蛋白１８（ｍｕｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＭＵＣ１８）㊂Ｔｒｕｂｉａｎｉ等［７］在ＰＤＬＳＣｓ表面检测到了更多的ＭＳＣｓ标记物，包括ＣＤ１０㊁ＣＤ２６㊁ＣＤ２９㊁ＣＤ７３和卷曲受体蛋白９（Ｆｒｉｚｚｌｅｄ⁃９，ＦＺＤ９）等；同时ＰＤＬＳＣｓ表面也会存在一些基质细胞㊁内皮细胞的标记物，如ＣＤ４４㊁ＣＤ９０㊁ＣＤ１０５㊁ＣＤ１６６㊁ＳＴＲＯ３等［８］㊂相对于外周血和脐带来源的ＭＳＣｓ，ＰＤＬＳＣｓ有更多的胚胎干细胞的标记物表达［９］，这些分子能够一定程度体现干细胞的未分化特性㊂例如：相比牙髓干细胞（ｄｅｎｔａｌｐｕｌｐｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＤＰＳＣｓ）和骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＢＭＭＳＣｓ），ＰＤＬＳＣｓ会表达更多的阶段特异性抗原４（ｓｔａｇｅ⁃ｓｐｅｃｉｆｉｃｅｍｂｒｙｏｎｉｃａｎｔｉｇｅｎ４，ＳＳＥＡ⁃４），这表明ＰＤＬＳＣｓ具有ＭＳＣｓ样的性质以及更多未分化细胞的特性［８］㊂１．２㊀ＰＤＬＳＣｓ的增殖能力ＰＤＬＳＣｓ在体外具有一定克隆增殖的能力，其增殖潜能比ＢＭＭＳＣｓ和ＤＰＳＣｓ更强［１０］，通常ＢＭＭＳＣｓ在第５０代时就已经无法继续传代，而ＰＤＬＳＣｓ在第１００代时仍然保有一定的增殖能力［１１］㊂Ｌｉｕ等［１２］发现处于咀嚼应力区的牙周组织，会表现出更强的活性和自我修复能力，这表明ＰＤＬＳＣｓ的增殖能力与机械负荷相关㊂Ｍｏｎｎｏｕｃｈｉ等［１３］发现白介素（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ，ＩＬ）⁃１１㊁血管紧缩素（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ，Ａｎｇ）Ⅱ及其２型受体（ＡｎｇⅡｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｐｅ２，ＡＧＴＲ２）参与了机械负荷对ＰＤＬＳＣｓ的增殖能力的调控，机械负荷会促进ＰＤＬＳＣｓ分泌ＩＬ⁃１１，作用于ＡｎｇⅡ／ＡＧＴＲ２通路促进ＰＤＬＳＣｓ的增殖㊂缺氧环境也会促进ＰＤＬＳＣｓ的增殖［１４］，经过音猬因子（ｓｏｎｉｃｈｅｄｇｅｈｏｇ，Ｓｈｈ）处理的ＰＤＬＳＣｓ也表现出更高的增殖能力［１５］㊂还有研究表明，在牙周病中起重要作用的炎症调控因子ＩＬ⁃１０的上调也可以促进ＰＤＬＳＣｓ的增殖［１６］㊂１．３㊀ＰＤＬＳＣｓ的多向分化潜能１．３．１㊀成骨分化能力㊀Ｓｅｏ等［６］首次发现了ＰＤＬＳＣｓ的成骨能力，他们将ＰＤＬＳＣｓ与羟基磷灰石（ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ，ＨＡ）／β⁃磷酸三钙（β⁃ｔｒｉｃａｌｃｉｕｍｐｈｏｓｐｈａｔｅ，β⁃ＴＣＰ）陶瓷的复合材料移植至大鼠体内，６ ８周后处死大鼠，茜素红染色显示生成大量矿化结节，免疫组化结果检测到大量成骨相关分子的高表达㊂ＰＤＬＳＣｓ的成骨能力也受多方面因素影响，Ｚｈａｏ等［１７］用脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）模拟ＰＤＬＳＣｓ的炎症环境，并加入了芦丁，碱性磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＡＬＰ）和茜素红染色等结果显示，芦丁可以有效地减弱炎症状态对于ＰＤＬＳＣｓ成骨的抑制㊂外泌体对ＰＤＬＳＣｓ的成骨分化也有调节作用，Ｗａｎｇ等［１８］在成骨诱导条件下的ＰＤＬＳＣｓ中加入了人脱落乳牙牙髓干细胞（ｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｒｏｍｅｘｆｏ⁃ｌｉａｔｅｄｄｅｃｉｄｕｏｕｓｔｅｅｔｈ，ＳＨＥＤ）来源的外泌体，促进了ＰＤＬＳＣｓ的成骨分化㊂骨组织的恢复是牙周组织再生的关键之一，因而ＰＤＬＳＣｓ成骨能力方面的研究，对于牙周再生有十分重要的意义㊂１．３．２㊀成脂分化能力㊀ＰＤＬＳＣｓ的成脂能力最早也是由Ｓｅｏ的团队所发现，他们在ＰＤＬＳＣｓ的培养基中加入含有胰岛素㊁地塞米松等成分的 鸡尾酒 成脂诱导液，３周后油红Ｏ染色后可见细胞内的脂滴，ＲＴ⁃ＰＣＲ检测也显示成脂分子 过氧化物酶体增殖物激活受体γ２（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒγ２，ＰＰＡＲγ２）的表达大量上调［６］㊂Ｄｅｎｇ等［１９］在２５ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖的高糖环境下培养ＰＤＬＳＣｓ，发现其成脂能力会有提升，成脂诱导７ｄ后ＲＴ⁃ＰＣＲ结果显示，ＰＰＡＲγ等成脂相关分子的ｍＲＮＡ远高于对照组，但成骨能力会受到抑制，这或许也是糖尿病患者ＰＤＬＳＣｓ修复能力明显减弱的原因之一㊂Ｙａｎｇ等［２０］用一氧化氮合成酶的抑制剂 Ｌ⁃单甲基精氨酸作用于ＰＤＬＳＣｓ，其成脂的能力明显提升，但成骨能力也受到了抑制㊂许多研究都证实了ＰＤＬＳＣｓ的成脂能力，但上文所述的成脂能力和成骨能力互相拮抗的机制或许会为如何提高ＰＤＬＳＣｓ的成骨能力，提供一种新的思路㊂１．３．３㊀其他的分化能力㊀ＰＤＬＳＣｓ可以形成Ｓｈａｒｐｅｙ纤维样的组织：Ｌｉｍ等［２１］用β⁃卡波林生物碱处理ＰＤＬＳＣｓ，将其播种至双相磷酸钙，移植到免疫缺陷小鼠的皮下，８周后ＰＤＬＳＣｓ表现出更高的矿化程度，并且形成类似Ｓｈａｒｐｅｙ纤维样的组织垂直连接矿化组织，这对牙周再生具有重要意义㊂ＰＤＬＳＣｓ还具有成牙骨质的能力：Ｊｉｎ等［２２］用纤溶酶原激活物抑制剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ⁃１，ＰＡＩ⁃１）处理ＰＤＬＳＣｓ，将其与ＨＡ／β⁃ＴＣＰ和人牙根牙本质基质制成的移植复合物移植至免疫缺陷小鼠的背部，８周后在ＨＡ／β⁃ＴＣＰ表面形成了牙骨质样物质㊂除此以外，ＰＤＬＳＣｓ还可通过短时机械应力刺激，分化为表达肌动蛋白㊁心肌肌钙蛋白Ｔ等心肌标记物的心肌样细胞［２３］；用胰岛素㊁激活素⁃Ａ㊁丁酸钠㊁２⁃巯基乙醇等可将ＰＤＬＳＣｓ诱导为可在高糖环境下分泌胰岛素的胰岛样细胞［２４］；ＰＤＬＳＣｓ还可以分化为视网膜神经节样细胞，表达神经元和视网膜的相关标记物，并且可以形成有效突触［２５］㊂由于人ＰＤＬＳＣｓ可以来源于作用较少的第三磨牙，因而除了用于骨组织和牙周组织再生，还被用于软骨组织㊁神经组织㊁心肌组织等多种组织的再生㊂２㊀生长因子对ＰＤＬＳＣｓ调控生长因子可以有效地促进ＰＤＬＳＣｓ的增殖㊁分化以及成骨能力㊂近年来，除了经典的生长因子，其他一些生物活性分子也被用于牙周再生，如微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）㊁成骨信号分子等㊂２．１㊀经典生长因子转化生长因子（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＴＧＦ）β１㊁胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ⁃ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＩＧＦ）等经典生长因子广泛存在于外周血及血小板制品中，如富血小板血浆（ｐｌａｔｅｌｅｔ⁃ｒｉｃｈｐｌａｓｍａ，ＰＲＰ）㊁富血小板纤维蛋白（ｐｌａｔｅｌｅｔ⁃ｒｉｃｈｆｉｂｒｉｎ，ＰＲＦ）等㊂因此，许多学者研究了这类血小板制品对于牙周再生的影响㊂Ｋｏｒｎｓｕｔｈｉｓｏｐｏｎ等［２６］在犬的牙周炎动物模型中采取翻瓣术并加入ＰＲＦ的方法，这种方法有效地减轻了炎症，并且有更多的Ａ１型Ⅰ型胶原（Ｃｏｌｌａｇｅｎ１Ａ１，Ｃｏｌ１Ａ１）和Ａ１型Ⅲ型胶原（Ｃｏｌｌａ⁃ｇｅｎ３Ａ１，Ｃｏｌ３Ａ１）的分泌，而Ｃｏｌ１Ａ１和Ｃｏｌ３Ａ１的分泌水平能够反映ＰＤＬＳＣｓ的成骨能力㊂Ｄｕａｎ等［２７］将ＰＲＦ与ＰＤＬＳＣｓ的复合物移植至小鼠的牙周组织，结果显示这种处理会上调移植物骨涎蛋白（ｂｏｎｅｓｉａｌｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＳＰ）㊁骨钙蛋白（ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ，ＯＣＮ）㊁Ｒｕｎｔ相关转录因子２（ｒｕｎｔ⁃ｒｅｌａｔｅｄｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ２，ＲＵＮＸ２）和ＡＬＰ的水平，且可以观察到更多的骨质的生成㊂Ａｍｍａｒ等［２８］利用水凝胶材料包裹含ＴＧＦ⁃β１㊁ＩＧＦ⁃１㊁血小板源生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）的冻干血小板浓缩液，研究表明这种材料可以有效地释放生长因子，提升ＰＤＬＣＳｓ的生物活性及增殖能力㊂这也为解决生长因子难以被缓释㊁有效递送和吸收的问题，提供了一种值得借鉴的方法㊂２．２㊀成骨相关分子成骨相关分子在组织再生的过程中起到调控和诱导成骨的作用，其中一类重要的成骨相关分子是信号分子，这是一类在细胞间或是细胞内传递信息的生物分子㊂常用于牙周再生的信号分子主要是成骨相关的信号分子，例如骨形成蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏ⁃ｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）㊂Ａｃｉｌ等［２９］研究表明ＢＭＰ⁃７可以上调ＰＤＬＳＣｓ中骨桥蛋白（ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎｅ，ＯＰＮ）和ＯＣＮ等成骨相关蛋白的表达，而且ＰＤＬＳＣｓ会被诱导为成骨细胞样／成牙骨质细胞样的细胞㊂Ｋａｎｇ等［３０］利用碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对ＰＤＬＳＣｓ的增殖能力的促进作用，将其与ＢＭＰ⁃２协同作用于ＰＤＬＳＣｓ，增强了ＰＤＬＳＣｓ的成骨及矿化能力，同时有效地弥补了ｂＦＧＦ对ＰＤＬＳＣｓ成骨的抑制作用，这种处理方法在牙周再生中值得借鉴㊂２．３㊀ｍｉＲＮＡ根据目前文献，可以促进ＰＤＬＳＣｓ成骨分化的ｍｉＲＮＡ有ｍｉＲ２２㊁ｍｉＲ２１０㊁ｍｉＲ２９９⁃５ｐ㊁ｍｉＲ５４３等，而抑制ＰＤＬＳＣｓ成骨分化能力的有ｍｉＲ１２５ｂ㊁ｍｉＲ１３２等［３１⁃３６］㊂值得注意的是ｍｉＲ２１８，虽然尚未有文献报导ｍｉＲ２１８对ＰＤＬＳＣｓ的调控，但是ｍｉＲ２１８却可以通过基质金属蛋白酶⁃９（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰ９），抑制破骨细胞的活性，缓解炎症状态，这无疑对牙周再生也是有积极意义的［３７］㊂但是，在临床上实现ｍｉＲＮＡ的有效递送和转运却极其困难㊂Ｌｉｕ等［３８］利用聚乳酸㊁聚乙二醇㊁介孔二氧化硅纳米粒子㊁聚乳酸⁃乙醇酸微球等材料，制作出一种可以携带并长时间缓释ｍｉＲＮＡ以及生长因子的纳米纤维海绵球，将这种材料复合ｍｉＲ⁃１０ａ／ＩＬ⁃２／ＴＧＦ⁃β，移植至牙周炎小鼠模型后，成骨相关分子的表达上调，再生的骨量也有明显提升㊂２．４㊀其他调控ＰＤＬＳＣｓ成骨作用的分子其他一些生物活性分子，对于ＰＤＬＳＣｓ的成骨也具有促进作用㊂Ｊｉａ等［３９］发现二甲双胍可以通过蛋白激酶Ｂ／核因子相关因子２通路，促进ＰＤＬＳＣｓ的成骨作用，并对氧化应激状态下的ＰＤＬＳＣｓ具有一定的保护作用㊂芦丁也可以有效地抵抗炎症状态下ＰＤＬＳＣｓ成骨分化受到的抑制作用［１７］㊂３㊀用于ＰＤＬＳＣｓ进行牙周再生支架材料生物支架材料为干细胞提供了适宜再生的三维微环境，良好的生物支架材料可以有效地促进细胞的附着㊁增殖㊁分化和组织生成㊂随着材料学的发展，近年也出现了更多应用于牙周再生的新材料㊂３．１㊀羟基磷灰石ＨＡ是人骨骼的主要无机成分，具有良好的生物相容性㊂Ｐａｒｋ等［４０］将ＨＡ与ＴＣＰ复合的生物材料作为支架，播种ＰＤＬＳＣｓ后移植至小鼠皮下，观察到了牙周膜样组织㊁骨样组织和牙骨质样的组织，甚至还观察到了类似Ｓｈａｐｅｙ纤维的组织，这对于实现牙周组织更全面的再生无疑有重大意义㊂Ｈｉｇｕｃｈｉ等［４１］利用超声喷涂和静电喷涂的方法，在聚合物生物膜表面修饰了一层厚度约为２ ３μｍ的纳米羟基磷灰石，涂层可以有效减缓生物膜的降解，增加生物膜的润湿度，而且细胞毒性较低㊂Ｗｉｊｅｄａｓａ等［４２］将鲷鱼和鲑鱼两种鱼鳞来源的ＨＡ，与肽纳米纤维复合成支架材料进行细胞学实验，细胞活力㊁ＡＬＰ活性和茜素红染色的结果都显示，这两种材料明显优于对照组，且鲑鱼组的细胞成骨分化能力更强㊂Ｏｕ等［４３］同样利用静电纺丝技术在一种玉米蛋白复合明胶的支架材料中加入了纳米羟基磷灰石，研制出了一种玉米蛋白／明胶／纳米羟基磷灰石复合的纳米生物支架，这种材料具有极为良好的表面润湿性，并且还可以促进人ＰＤＬＳＣｓ的附着㊁增殖和成骨的分化㊂ＨＡ具有与骨质相似的结构㊂其前体β⁃ＴＣＰ会在植入后６ ９个月内被替代㊁吸收，并在吸收的过程中提供成骨相关的钙离子㊁镁离子㊁磷酸根离子等，这些离子还会激活ＡＬＰ等成骨的关键酶，这些对于成骨及矿化至关重要的离子是其他材料所不具备的［４４⁃４５］㊂３．２㊀明胶明胶因其生物相容性㊁可降解㊁亲水等性能，近年来常作为生物支架材料用于组织再生㊂Ｙａｎｇ等［４６］研制出了一种玉米蛋白复合明胶的生物支架，这种材料具有良好的表面润湿性，并且其中的玉米蛋白有良好的生物亲和性能以及可降解性，可以有效地促进人ＰＤＬＳＣｓ的增殖和附着，但是对于ＰＤＬＳＣｓ的成骨性能并无明显的调节作用㊂Ｐａｎ等［４７］构建了一种明胶／甲基丙烯酸盐（ｇｅｌａｔｉｎｍｅｔｈ⁃ａｃｒｙｌａｔｅ，ＧｅｌＭＡ）水凝胶的包裹体系，其具有较大的溶胀比㊁良好的通透性和大量的纤维网络，可以为ＰＤＬＳＣｓ提供适宜附着㊁增殖和成骨分化的微环境㊂ＧｅｌＭＡ水凝胶包裹ＰＤＬＳＣｓ修复牙周病所造成的骨缺损，显微ＣＴ和组织学切片显示可以形成更多的骨增量，ＡＬＰ的活性也有显著提升㊂明胶可以加工成为水凝胶的形态，这种形态具有多孔结构，有利于进行细胞和分子的有效募集和递送；同时这种形态可以在募集了干细胞和生长因子后，采用注射的方式移植至缺损部位，对于骨缺损体积普遍较小的牙周组织，这种方式会有效降低手术难度［４８］㊂３．３㊀壳聚糖壳聚糖具有利于生物分子缓释的多孔结构，也是组织工程的理想材料之一㊂ＮｉｖｅｄｈｉｔｈａＳｕｎｄａｒａｍ等［４９］用静电纺丝技术制作出了聚己内酯和壳聚糖的双层复合物，这种材料具有多孔性和利于蛋白质粘附的特性，播种干细胞以后，干细胞的ＡＬＰ活性以及胶原蛋白的表达都有明显升高㊂Ｌｉ等［５０］研制了一种ＴＧＦ⁃β３和壳聚糖凝胶海绵的的复合物，可以大幅提升体外实验中人ＰＤＬＳＣｓ的增殖速率和ＡＬＰ活性，Ⅰ型胶原㊁ＡＬＰ㊁ＴＧＦ⁃βＲＩ㊁ＴＧＦ⁃βＲＩＩ等成骨相关分子也有更高的表达㊂同时壳聚糖还存在一定的免疫调节效应㊂Ｓｈｕ等［５１］将壳聚糖修饰为２⁃Ｏ，６⁃Ｎ硫酸化壳聚糖（２⁃Ｎ，６⁃Ｏ⁃ｓｕｌｆａｔｅｄｃｈｉｔｏｓａｎ，２６ＳＣＳ），２６ＳＣＳ会在移植的初期短时地活化巨噬细胞，并促进炎症反应，这种反应会逐渐转变为对炎症反应的抑制，他们推测这种免疫调节能力可能形成良好的免疫微环境，这种微环境在成骨的过程中会增强干细胞与免疫细胞间的交流，有利于成骨的过程，并且２６ＳＣＳ还会通过成骨相关的通路促进干细胞的成骨能力㊂Ｌｉ等［５２］还将壳寡糖进行磺酸化处理，磺化壳寡糖可以与ｂＦＧＦ产生更紧密的结合㊂ｂＦＧＦ可以有效促进人ＰＬＤＳＣｓ的体外增殖，抑制其成骨分化，但磺化壳寡糖可以缓解ｂＦＧＦ对于ＰＤＬＳＣｓ的成骨分化抑制，表明磺化壳寡糖可能存在一定的促进成骨能力㊂Ｇｅ等［５３］将壳聚糖涂布于纳米羟基磷灰石，在其表面培养的ＰＤＬＳＣｓ表现出更高的成活率，更高的ＡＬＰ活性以及ＢＳＰ㊁ＯＰＮ㊁ＯＣＮ等成骨相关蛋白的表达㊂壳聚糖的独特优势在于其抗菌特性，这种特性在有菌的口腔环境下具有独特优势；同时壳聚糖还可以加工成与上述明胶类似的水凝胶形态支架材料㊂但壳聚糖的缺点是灭菌过程会降低其分子量㊁黏度和凝胶化程度，这可能会导致其对细胞的募集能力下降［５４⁃５５］㊂如上文所述，不同材料具有不同的生物学特性，各有优劣，因而可以结合各种材料优势，研制出多种材料复合的㊁具有良好生物学特性㊁理化性质以适宜的微观表面结构的材料，或许是未来牙周组织再生的关键㊂４㊀ＰＤＬＳＣｓ用于牙周再生的动物实验及临床研究关于ＰＤＬＳＣｓ应用于牙周再生的动物实验前文已有所叙述，但许多动物模型并不是牙周炎模型，未将细胞移植至颌骨内㊂Ｉｗａｓａｋｉ等［５６］在免疫缺陷小鼠的第一磨牙处通过手术建立了Ⅱ度骨缺损的牙周炎模型，以人的羊膜为支架移植入人ＰＤＬＳＣｓ，结果显示在牙周膜间隙内形成更加粗大的胶原束，几近垂直的连接着新形成的类牙骨质层与新生骨组织㊂Ｎｕñｅｚ等［５７］则在犬的上颌第一磨牙通过手术建立了牙周炎模型，但实验结果却显示ＰＤＬＳＣｓ对于牙周组织再生无影响，其原因可能是手术破坏较深，达到了根分叉以下，移植的细胞数量可能不足，而且未使用生物膜㊂这提示在牙周再生中，移植与缺损量相匹配的ＰＤＬＳＣｓ以及维持ＰＤＬＳＣｓ的相对稳定，都是十分重要的㊂鉴于干细胞疗法安全和伦理学问题一直存在争议，近年来ＰＤＬＳＣｓ用于临床研究十分有限㊂Ｃｈｅｎ等［５８］采用单中心随机实验的方法将３０名有骨缺损的牙周炎患者分为两组，实验组用自体ＰＤＬＳＣｓ＋引导组织再生（ｇｕｉｄｅｄｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＧＴＲ）＋人工骨粉，而对照组仅用ＧＴＲ＋人工骨粉，虽然实验结果显示两组的临床疗效并无统计学差异，然而却证实了自体ＰＤＬＳＣｓ移植的安全性㊂Ｓｈａｌｉｎｉ等［５９］将２８名中重度牙周炎患者随机分为两组，比较了在翻瓣手术中移植自体ＰＤＬＳＣｓ与仅实施翻瓣术两种治疗方法的疗效㊂ＰＤＬＳＣｓ从患者自身智齿获取，与其周围的细胞外基质一同迅速与明胶支架材料混合，植入骨缺损；术后３㊁６㊁９㊁１２个月，相对于对照组，实验组牙周袋深度明显降低，骨缺损区的骨密度明显增加㊂Ｉｗａｔａ等［６０］则是挑选了牙周袋深度超过了４ｍｍ的患者，利用患者自体智齿获取的ＰＤＬＳＣｓ，在体外用自体ＰＤＬＳＣｓ与β⁃ＴＣＰ支架和可降解的聚乙二醇酸网制成的细胞膜片移植至牙周缺损的区域；６个月后，相比对照组，实验组患者牙周袋深度㊁临床附着丧失和骨高度都得到了明显地改善㊂上述研究结果表明，使用自体ＰＤＬＳＣｓ治疗牙周炎，目前为止是相对安全的㊂然而目前对于此种疗法的适应证（如牙周袋深度㊁牙齿松动度㊁骨缺损度等）和根分叉病变等牙周炎并发症是否也适用此种疗法，并没有文献报道㊂目前已报道的文献是以需翻瓣治疗甚至植骨的中重度牙周炎作为此种疗法的适应症㊂临床的有效性方面，目前只有文献证明对于牙周袋超过４ｍｍ的中重度牙周炎患者，ＰＤＬＳＣｓ自体移植的治疗可能是有效的［６０］㊂因而还需要大样本量的临床研究，以进一步探究其临床的有效性和具体适应症㊂５　展望组织工程技术的飞速发展，为牙周再生这一新型治疗方法打下了更深厚的基础，但牙周再生需要面临诸多方面的问题和挑战㊂首先是干细胞的大量获取，作为最适宜牙周再生的干细胞之一的ＰＤＬＳＣｓ，人体来源极其单一，尤其是患有重度牙周病的患者㊂近年来细胞编程技术的出现可以提供解决思路，即用成体细胞诱导为诱导多能干细胞（ｉｎ⁃ｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ｉＰＳＣｓ），进而诱导为所需的细胞［６１］㊂Ｈａｍａｎｏ等［６２］曾将真皮成纤维细胞诱导为ｉＰＳＣｓ，进而诱导为ＰＤＬＳＣｓ㊂其次是如何便捷地制作出适宜ＰＤＬＳＣｓ生长分化，可以递送各种生长因子的支架材料，这类支架材料应当具有良好的生物相容性㊁可降解㊁亲水性，适宜的微观表面形貌和多孔结构，能够与一些包裹生长因子的载体紧密的结合㊂最后，ＰＤＬＳＣｓ应用于牙周再生的安全性和有效性还需要大样本量的临床实验来证明㊂［参㊀考㊀文㊀献］［１］㊀ＴｏｎｓｅｋａｒＰＰ，ＪｉａｎｇＳＳ，ＹｕｅＧ．Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｄｉｓｅａｓｅ，ｔｏｏｔｈｌｏｓｓａｎｄｄｅｍｅｎｔｉａ：Ｉｓｔｈｅｒｅａｌｉｎｋ？Ａｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗ［Ｊ／ＯＬ］．Ｇｅｒ⁃ｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ，２０１７，３４（２）：１５１⁃１６３［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｇｅｒ．１２２６１．［２］㊀ＺａｎｅｌｌａＳＭ，ＰｅｒｅｉｒａＳＳ，ＢａｒｂｉｓａｎＪＮ，ｅｔａｌ．Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｄｉｓｅａｓｅ，ｔｏｏｔｈｌｏｓｓａｎｄｃｏｒｏｎａｒｙｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｃｏｒｏｎａｒｙａｎｇｉｏｇ⁃ｒａｐｈｙ：ａｃｒｏｓｓ⁃ｓｅｃｔｉｏｎａｌｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌｓｔｕｄｙ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＲｅｓ，２０１６，５１（２）：２２１⁃２２７［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｊｒｅ．１２３０１．［３］㊀ＭｉｃｈａｕｄＤＳ，ＦｕＺ，ＳｈｉＪ，ｅｔａｌ．ＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＤｉｓｅａｓｅ，ＴｏｏｔｈＬｏｓｓ，ａｎｄＣａｎｃｅｒＲｉｓｋ［Ｊ／ＯＬ］．ＥｐｉｄｅｍｉｏｌＲｅｖ，２０１７，３９（１）：４９⁃５８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ｅｐｉｒｅｖ／ｍｘｘ００６．［４］㊀ＬａｎｇｅｒＲ，ＶａｃａｎｔｉＪＰ．Ｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ［Ｊ／ＯＬ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９３，２６０（５１１０）：９２０⁃９２６［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１２６／ｓｃｉｅｎｃｅ．８４９３５２９．［５］㊀ＣａｒｍａｇｎｏｌａＤ，ＴａｒｃｅＭ，ＤｅｌｌａｖｉａＣ，ｅｔａｌ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄｓｃａｆｆｏｌｄｓａｎｄｃｅｌｌ⁃ｂａｓｅｄｔｈｅｒａｐｙｆｏｒｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＡｐｐｌＢｉｏｍａｔｅｒＦｕｎｃｔＭａｔｅｒ，２０１７，１５（４）：ｅ３０３⁃ｅ３１２［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．５３０１／ｊａｂｆｍ．５０００３８９．［６］㊀ＳｅｏＢＭ，ＭｉｕｒａＭ，ＧｒｏｎｔｈｏｓＳ，ｅｔａｌ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔｐｏｓｔｎａｔａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔ［Ｊ／ＯＬ］．Ｌａｎｃｅｔ，２００４，３６４（９４２９）：１４９⁃１５５［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／Ｓ０１４０⁃６７３６（０４）１６６２７⁃０．［７］㊀ＴｒｕｂｉａｎｉＯ，ＺａｌｚａｌＳＦ，ＰａｇａｎｅｌｌｉＲ，ｅｔａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅｏｆｔｈｅｅｍｂｒｙｏｎｉｃｍａｒｋｅｒｓｎａｎｏｇ，ＯＣＴ⁃４，ＳＳＥＡ⁃１，ＳＳＥＡ⁃４，ａｎｄｆｒｉｚｚｌｅｄ⁃９ｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ，２０１０，２２５（１）：１２３⁃１３１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｊｃｐ．２２２０３．［８］㊀ＷａｄａＮ，ＭｅｎｉｃａｎｉｎＤ，ＳｈｉＳ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ，２００９，２１９（３）：６６７⁃６７６［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｊｃｐ．２１７１０．［９］㊀Ｔｒｉｖａｎｏｖｉｃ＇Ｄ，Ｊａｕｋｏｖｉｃ＇Ａ，Ｐｏｐｏｖｉｃ＇Ｂ，ｅｔａｌ．Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｏｒｉｇｉｎ：Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｃａ⁃ｐａｃｉｔｙ，ｔｅｌｏｍｅｒｅｌｅｎｇｔｈａｎｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙｍａｒｋｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＬｉｆｅＳｃｉ，２０１５，１４１：６１⁃７３［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｌｆｓ．２０１５．０９．０１９．［１０］ＥｌｅｕｔｅｒｉｏＥ，ＴｒｕｂｉａｎｉＯ，ＳｕｌｐｉｚｉｏＭ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｏｍｅｏｆｈｕｍａｎｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｒｏｍｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔａｎｄｄｅｎｔａｌｐｕｌｐ［Ｊ／ＯＬ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１３，８（８）：ｅ７１１０１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００７１１０１．［１１］ＳｈｉＳ，ＢａｒｔｏｌｄＰＭ，ＭｉｕｒａＭ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｔｏｒｅｇｅｎｅｒａｔｅａｎｄｒｅｐａｉｒｄｅｎｔａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＯｒｔｈｏｄＣｒａｎｉｏｆａｃＲｅｓ，２００５，８（３）：１９１⁃１９９［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔ⁃ｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｊ．１６０１⁃６３４３．２００５．００３３１．ｘ．［１２］ＬｉｕＪ，ＬｉＱ，ＬｉｕＳ，ｅｔａｌ．ＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＬｉｇａｍｅｎｔＳｔｅｍＣｅｌｌｓｉｎｔｈｅＰｅｒｉｏｄｏｎｔｉｔｉｓＭｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔＡｒｅＳｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏＳｔａｔｉｃＭｅｃｈａｎｉｃａｌＳｔｒａｉｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＳｔｅｍＣｅｌｌｓＩｎｔ，２０１７，２０１７：１３８０８５１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１５５／２０１７／１３８０８５１．［１３］ＭｏｎｎｏｕｃｈｉＳ，ＭａｅｄａＨ，ＹｕｄａＡ，ｅｔａｌ．Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ⁃１１ｒｅｇｕｌａｔｅｓｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｃｃｅｍｅｎｔｏｂｌａｓｔｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＰｅｒ⁃ｉｏｄｏｎｔａｌＲｅｓ，２０１５，５０（２）：２３１⁃２３９［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｊｒｅ．１２２００．［１４］ＨｅＹ，ＪｉａｎＣＸ，ＺｈａｎｇＨＹ，ｅｔａｌ．ＨｙｐｏｘｉａｅｎｈａｎｃｅｓｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｖｉａｔｈｅＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ［Ｊ／ＯＬ］．ＧｅｎｅｔＭｏｌＲｅｓ，２０１６，１５（４）［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．４２３８／ｇｍｒ１５０４８９６５．［１５］ＭａｒｔｉｎｅｚＣ，ＳｍｉｔｈＰＣ，ＲｏｄｒｉｇｕｅｚＪＰ，ｅｔａｌ．Ｓｏｎｉｃｈｅｄｇｅｈｏｇｓｔｉｍ⁃ｕｌａｔｅｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＤｅｎｔＲｅｓ，２０１１，９０（４）：４８３⁃４８８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７７／００２２０３４５１０３９１７９７．［１６］ＬｉｕＹ，ＹａｎｇＪ，ＳｕｎＷ．ＵｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＩＬ⁃１０ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｓｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＢｒａｚＯｒａｌＲｅｓ，２０２０，３４：ｅ０３０［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１５９０／１８０７⁃３１０７ｂｏｒ⁃２０２０．ｖｏｌ３４．００３０．［１７］ＺｈａｏＢ，ＺｈａｎｇＷ，ＸｉｏｎｇＹ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｕｔｉｎｏｎｔｈｅｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎＬＰＳ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｎｄｔｈｅｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＭｏｌＨｉｓｔｏｌ，２０２０，５１（２）：１６１⁃１７１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００７／ｓ１０７３５⁃０２０⁃０９８６６⁃９．［１８］ＷａｎｇＭ，ＬｉＪ，ＹｅＹ，ｅｔａｌ．ＳＨＥＤ⁃ｄｅｒｉｖｅｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｅｘｏｓｏｍｅｓｅｎｈａｎｃｅｔｈｅｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＰＤＬＳＣｓｖｉａＷｎｔａｎｄＢＭＰｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ／ＯＬ］．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，２０２０，１１１：１⁃１１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｄｉｆｆ．２０１９．１０．００３．［１９］ＤｅｎｇＣ，ＳｕｎＹ，ＬｉｕＨ，ｅｔａｌ．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅａｄｉｐｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｓｔｉｍｕｌａｔｅｄｗｉｔｈｈｉｇｈｄｏｓｅｓｏｆｇｌｕｃｏｓｅ［Ｊ／ＯＬ］．ＰｌｏＳｏｎｅ，２０１８，１３（７）：ｅ０１９９６０３［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０１９９６０３．［２０］ＹａｎｇＳ，ＧｕｏＬ，ＳｕＹ，ｅｔａｌ．ＮｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｂａｌａｎｃｅｓｏｓｔｅｏｂｌａｓｔａｎｄａｄｉｐｏｃｙｔｅｌｉｎｅａｇｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｖｉａｔｈｅＪＮＫ／ＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｉｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＳｔｅｍＣｅｌｌＲｅｓＴｈｅｒ，２０１８，９（１）：１１８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１８６／ｓ１３２８７⁃０１８⁃０８６９⁃２．［２１］ＬｉｍＨＣ，ＣｈａＢＹ，ＳｏｎｇＳＵ，ｅｔａｌ．Ｈａｒｍｉｎｅｐｒｏｍｏｔｅｓｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｃｅｌｌ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｔｉｓｓｕｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＯｒａｌＤｉｓ，２０１８，２４（３）：４５６⁃４６４［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｏｄｉ．１２７７０．㊀㊀［２２］ＪｉｎＨ，ＣｈｏｕｎｇＨＷ，ＬｉｍＫＴ，ｅｔａｌ．ＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＨｕｍａｎＰｌａｓｍｉｎｏ⁃ｇｅｎＡｃｔｉｖａｔｏｒＩｎｈｉｂｉｔｏｒ⁃１ＰｒｏｍｏｔｅｓＣｅｍｅｎｔｏｇｅｎｉｃＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＬｉｇａｍｅｎｔＳｔｅｍＣｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＴｉｓｓｕｅＥｎｇＰａｒｔＡ，２０１５，２１（２３／２４）：２８１７⁃２８２８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０８９／ｔｅｎ．ＴＥＡ．２０１４．０３９９．［２３］ＰｅｌａｅｚＤ，ＡｃｏｓｔａＴｏｒｒｅｓＺ，ＮｇＴＫ，ｅｔａｌ．Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｐｅｒ⁃ｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔ⁃ｄｅｒｉｖｅｄｓｔｅｍｃｅｌｌｓｂｙｄｙｎａｍｉｃｔｅｎｓｉｌｅｓｔｒａｉｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＣｅｌｌＴｉｓｓｕｅＲｅｓ，２０１７，３６７（２）：２２９⁃２４１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔ⁃ｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００７／ｓ００４４１⁃０１６⁃２５０３⁃ｘ．［２４］ＬｅｅＪＳ，ＡｎＳＹ，ＫｗｏｎＩＫ，ｅｔａｌ．Ｔｒａｎｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｔｏ；ｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃｅｌｌｌｉｎｅａｇｅ［Ｊ／ＯＬ］．ＣｅｌｌＢｉｏｃｈｅｍＦｕｎｃｔ，２０１４，３２（７）：６０５⁃６１１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｃｂｆ．３０５７．［２５］ＮｇＴＫ，ＹｕｎｇＪＳ，ＣｈｏｙＫＷ，ｅｔａｌ．Ｔｒａｎｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｐｅｒｉｏ⁃ｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔ⁃ｄｅｒｉｖｅｄｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｔｏｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎ⁃ｌｉｋｅｃｅｌｌｓａｎｄｉｔｓｍｉｃｒｏＲＮＡｓｉｇｎａｔｕｒｅ［Ｊ／ＯＬ］．ＳｃｉＲｅｐ，２０１５，５：１６４２９［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０３８／ｓｒｅｐ１６４２９．［２６］ＫｏｒｎｓｕｔｈｉｓｏｐｏｎＣ，ＰｉｒａｒａｔＮ，ＯｓａｔｈａｎｏｎＴ，ｅｔａｌ．Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｐｌａｔｅｌｅｔ⁃ｒｉｃｈｆｉｂｒｉｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｓｃａｎｉｎｅｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＳｃｉＲｅｐ，２０２０，１０（１）：１８５０［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０３８／ｓ４１５９８⁃０２０⁃５８７３２⁃ｘ．［２７］ＤｕａｎＸ，ＬｉｎＺ，ＬｉｎＸ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｆｐｌａｔｅｌｅｔ⁃ｒｉｃｈｆｉｂｒｉｎｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｒａｔｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｔｉｓｓｕｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＣｅｌＭｏｌＭｅｄ，２０１８，２２（２）：１０４７⁃１０５５［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｊｃｍｍ．１３４６１．［２８］ＡｍｍａｒＭＭ，ＷａｌｙＧＨ，ＳａｎｉｏｕｒＳＨ，ｅｔａｌ．Ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｌｅａｓｅａｎｄｅｎｈａｎｃｅｄｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｖｉａｂｉｌｉｔｙｂｙｆｒｅｅｚｅ⁃ｄｒｉｅｄｐｌａｔｅｌｅｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｌｏａｄｅｄｔｈｅｒｍｏ⁃ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｈｙｄｒｏｇｅｌｆｏｒｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＳａｕｄｉＤｅｎｔＪ，２０１８，３０（４）：３５５⁃３６４［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｓｄｅｎｔｊ．２０１８．０６．００２．［２９］ＡçｉｌＹ，ＹａｎｇＦ，ＧｕｌｓｅｓＡ，ｅｔａｌ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａ⁃ｍｅｎｔｃｅｌｌｓａｎｄｄｅｎｔａｌｆｏｌｌｉｃｌｅｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｉｒｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏＢＭＰ⁃７ｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ／ＯＬ］．Ｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ，２０１６，１０４（２）：１２３⁃１３５［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００７／ｓ１０２６６⁃０１５⁃０１９８⁃１．［３０］ＫａｎｇＷ，ＬｉａｎｇＱ，ＤｕＬ，ｅｔａｌ．ＳｅｑｕｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｂＦＧＦａｎｄＢＭＰ⁃２ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏ⁃ｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＲｅｓ，２０１９，５４（４）：４２４⁃４３４［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｊｒｅ．１２６４４３４．㊀㊀［３１］ＹａｎＧＱ，ＷａｎｇＸ，ＹａｎｇＦ，ｅｔａｌ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ⁃２２ＰｒｏｍｏｔｅｄＯｓｔｅｏ⁃ｇｅｎｉｃＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＬｉｇａｍｅｎｔＳｔｅｍＣｅｌｌｓｂｙＴａｒｇｅｔｉｎｇＨＤＡＣ６［Ｊ／ＯＬ］．ＪＣｅｌＢｉｏｃｈｅｍ，２０１７，１１８（７）：１６５３⁃１６５８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｊｃｂ．２５９３１．［３２］ＰｉｚｚｉｃａｎｎｅｌｌａＪ，ＣａｖａｌｃａｎｔｉＭ，ＴｒｕｂｉａｎｉＯ，ｅｔａｌ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ２１０ＭｅｄｉａｔｅｓＶＥＧＦＵｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｉｎＨｕｍａｎＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＬｉｇａｍｅｎｔＳｔｅｍＣｅｌｌｓＣｕｌｔｕｒｅｄｏｎ３ＤＨｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅＣｅｒａｍｉｃＳｃａｆｆｏｌｄ［Ｊ／ＯＬ］．ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉ，２０１８，１９（１２）：３９１６［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３３９０／ｉｊｍｓ１９１２３９１６．［３３］Ｋａｎｅｄａ⁃ＩｋｅｄａＥ，ＩｗａｔａＴ，ＭｉｚｕｎｏＮ，ｅｔａｌ．ＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｃｅｌｌｓｒｅｇｕｌａｔｅｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓｖｉａｍｉＲ⁃２９９⁃５ｐｉｎｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，２０２０，１１２：４７⁃５７［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔ⁃ｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｄｉｆｆ．２０２０．０１．００１．［３４］ＧｅＹ，ＬｉＪ，ＨａｏＹ，ｅｔａｌ．ＭｉｃｒｏＲＮＡ⁃５４３ｆｕｎｃｔｉｏｎｓａｓａｎｏｓｔｅｏ⁃ｇｅｎｅｓｉｓｐｒｏｍｏｔｅｒｉｎｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔ⁃ｄｅｒｉｖｅｄｓｔｅｍｃｅｌｌｓｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｒａｎｓｄｕｃｅｒｏｆＥＲＢＢ２，２［Ｊ／ＯＬ］．ＪＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＲｅｓ，２０１８，５３（５）：８３２⁃８４１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｊｒｅ．１２５７２．［３５］杜莉，曹伟靖，田莹，等．ＭｉｃｒｏＲＮＡ⁃１２５ｂ对人牙周膜干细胞成骨分化的影响［Ｊ］．上海口腔医学，２０１８，２７（１）：１１⁃１７．［３６］ＸｕＹ，ＲｅｎＣ，ＺｈａｏＸ，ｅｔａｌ．ｍｉｃｒｏＲＮＡ⁃１３２ｉｎｈｉｂｉｔｓｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｖｉａＧＤＦ５ａｎｄｔｈｅＮＦ⁃κＢｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ［Ｊ／ＯＬ］．ＰａｔｈｏｌＲｅｓＰｒａｃｔ，２０１９，２１５（１２）：１５２７２２［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｐｒｐ．２０１９．１５２７２２．［３７］ＧｕｏＪ，ＺｅｎｇＸ，ＭｉａｏＪ，ｅｔａｌ．ＭｉＲＮＡ⁃２１８ｒｅｇｕｌａｔｅｓｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｄｉｆ⁃ｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｒｅｓｐｏｎｓｅｉｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔｉｔｉｓｒａｔｓｔｈｒｏｕｇｈＭｍｐ９［Ｊ／ＯＬ］．ＣｅｌｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１９，２１（４）：ｅ１２９７９［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｃｍｉ．１２９７９．［３８］ＬｉｕＺ，ＣｈｅｎＸ，ＺｈａｎｇＺ，ｅｔａｌ．ＮａｎｏｆｉｂｒｏｕｓＳｐｏｎｇｙＭｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓＴｏＤｉｓｔｉｎｃｔｌｙＲｅｌｅａｓｅｍｉＲＮＡａｎｄＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒｓＴｏＥｎｒｉｃｈＲｅｇｕ⁃ｌａｔｏｒｙＴＣｅｌｌｓａｎｄＲｅｓｃｕｅＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＢｏｎｅＬｏｓｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＡＣＳｎａｎｏ，２０１８，１２（１０）：９７８５⁃９７９９［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０２１／ａｃｓｎａｎｏ．７ｂ０８９７６．［３９］ＪｉａＬ，ＸｉｏｎｇＹ，ＺｈａｎｇＷ，ｅｔａｌ．Ｍｅｔｆｏｒｍｉｎｐｒｏｍｏｔｅｓｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｄａｍａｇｅｉｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｖｉａａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＡｋｔ／Ｎｒｆ２ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ［Ｊ／ＯＬ］．ＥｘｐＣｅｌｌＲｅｓ，２０２０，３８６（２）：１１１７１７［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｙｅｘｃｒ．２０１９．１１１７１７．［４０］ＰａｒｋＪＣ，ＫｉｍＪＭ，ＪｕｎｇＩＨ，ｅｔａｌ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔ（ＰＤＬ）ｓｔｅｍｃｅｌｌｓ（ＰＤＬＳＣｓ）ｆｒｏｍｔｈｅｉｎｆｌａｍｅｄＰＤＬｔｉｓｓｕｅ：ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＣｌｉｎＰｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ，２０１１，３８（８）：７２１⁃７３１［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｊ．１６００⁃０５１Ｘ．２０１１．０１７１６．ｘ．［４１］ＨｉｇｕｃｈｉＪ，ＦｏｒｔｕｎａｔｏＧ，Ｗｏｚ＇ｎｉａｋＢ，ｅｔａｌ．ＰｏｌｙｍｅｒＭｅｍｂｒａｎｅｓＳｏｎｏｃｏａｔｅｄａｎｄＥｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｅｄｗｉｔｈＮａｎｏ⁃ＨｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｆｏｒＰｅｒｉ⁃ｏｄｏｎｔａｌＴｉｓｓｕｅｓＲｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．Ｎａｎｏｍａｔｅｒｉａｌｓ（Ｂａｓｅｌ），２０１９，９（１１）：１６２５［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３３９０／ｎａｎｏ９１１１６２５．［４２］ＷｉｊｅｄａｓａＮＰ，ＢｒｏａｓＳＭ，ＤａｓｏＲＥ，ｅｔａｌ．Ｖａｒｙｉｎｇｆｉｓｈｓｃａｌｅｄｅ⁃ｒｉｖｅｄｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｂｏｕｎｄｈｙｂｒｉｄｐｅｐｔｉｄｅｎａｎｏｆｉｂｅｒｓｃａｆｆｏｌｄｓｆｏｒｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｔｉｓｓｕｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＭａｔｅｒＳｃｉＥｎｇＣＭａｔｅｒＢｉｏｌＡｐｐｌ，２０２０，１０９：１１０５４０［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｍｓｅｃ．２０１９．１１０５４０．［４３］ＯｕＱ，ＭｉａｏＹ，ＹａｎｇＦ，ｅｔａｌ．Ｚｅｉｎ／ｇｅｌａｔｉｎ／ｎａｎｏｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｎａｎｏｆｉｂｒｏｕｓｓｃａｆｆｏｌｄｓａｒｅｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｌｅａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＢｉｏｍａｔｅｒＳｃｉ，２０１９，７（５）：１９７３⁃１９８３［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０３９／ｃ８ｂｍ０１６５３ｄ．［４４］ＳｏｗｍｙａＳ，ＢｕｍｇａｒｄｅｎｅｒＪＤ，ＣｈｅｎｎａｚｈｉＫＰ，ｅｔａｌ．Ｒｏｌｅｏｆｎａｎｏ⁃ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓａｎｄｂｉｏｃｅｒａｍｉｃｓｉｎｅｎａｍｅｌ，ｄｅｎｔｉｎａｎｄｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｔｉｓｓｕｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＰｒｏｇＰｏｌｙｍＳｃｉ，２０１３，３８（１０／１１）：１７４８⁃１７７２［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｐｒｏｇｐｏｌｙｍｓｃｉ．２０１３．０５．００５．［４５］ＳｃｕｌｅａｎＡ，ＮｉｋｏｌｉｄａｋｉｓＤ，ＮｉｋｏｕＧ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｐｒｏｍｏ⁃ｔｉｎｇｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｉｎｈｕｍａｎｉｎｔｒａｂｏｎｙｄｅｆｅｃｔｓ：ａｓｙｓ⁃ｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗ［Ｊ／ＯＬ］．Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ２０００，２０１５，６８（１）：１８２⁃２１６［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１１１／ｐｒｄ．１２０８６．［４６］ＹａｎｇＦ，ＭｉａｏＹ，ＷａｎｇＹ，ｅｔａｌ．ＥｌｅｃｔｒｏｓｐｕｎＺｅｉｎ／ＧｅｌａｔｉｎＳｃａｆ⁃ｆｏｌｄ⁃ＥｎｈａｎｃｅｄＣｅｌｌＡｔｔａｃｈｍｅｎｔａｎｄＧｒｏｗｔｈｏｆＨｕｍａｎＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＬｉｇａｍｅｎｔＳｔｅｍＣｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．Ｍａｔｅｒｉａｌｓ（Ｂａｓｅｌ），２０１７，１０（１０）：１１６８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３３９０／ｍａ１０１０１１６８．［４７］ＰａｎＪ，ＤｅｎｇＪ，ＹｕＬ，ｅｔａｌ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇｔｈｅｒｅｐａｉｒｏｆａｌｖｅｏｌａｒｂｏｎｅｄｅｆｅｃｔｓｂｙｇｅｌａｔｉｎｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅｈｙｄｒｏｇｅｌｓ⁃ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＭａｔｅｒＳｃｉＭａｔｅｒＭｅｄ，２０１９，３１（１）：３［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００７／ｓ１０８５６⁃０１９⁃６３３３⁃８．［４８］ＣｈｅｎＸ，ＢａｉＳ，ＬｉＢ，ｅｔａｌ．Ｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎｏｆｇｅｌａｔｉｎｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ／ｎａ⁃ｎｏｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｍｉｃｒｏｇｅｌａｒｒａｙｓｆｏｒｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｔｉｓｓｕｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＩｎｔＪＮａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１６，１１：４７０７⁃４７１８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．２１４７／ＩＪＮ．Ｓ１１１７０１．［４９］ＮｉｖｅｄｈｉｔｈａＳｕｎｄａｒａｍＭ，ＳｏｗｍｙａＳ，ｅｔａｌ．Ｂｉｌａｙｅｒｅｄｃｏｎｓｔｒｕｃｔｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆａｌｖｅｏｌａｒｂｏｎｅａｎｄｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＢｉｏｍｅｄＭａｔｅｒＲｅｓＢＡｐｐｌＢｉｏｍａｔｅｒ，２０１６，１０４（４）：７６１⁃７７０［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｊｂｍ．ｂ．３３４８０．［５０］ＬｉＹ，ＱｉａｏＺ，ＹｕＦ，ｅｔａｌ．ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ⁃β３／Ｃｈｉ⁃ｔｏｓａｎＳｐｏｎｇｅ（ＴＧＦ⁃β３／ＣＳ）ＦａｃｉｌｉｔａｔｅｓＯｓｔｅｏｇｅｎｉｃＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＬｉｇａｍｅｎｔＳｔｅｍＣｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉ，２０１９，２０（２０）：４９８２［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３３９０／ｉｊｍｓ２０２０４９８２．［５１］ＳｈｕＹ，ＹｕＹ，ＺｈａｎｇＳ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙｒｏｌｅｏｆｓｕｌ⁃ｆａｔｅｄｃｈｉｔｏｓａｎｉｎＢＭＰ⁃２⁃ｍｅｄｉａｔｅｄｂｏｎｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．Ｂｉｏ⁃ｍａｔｅｒＳｃｉ，２０１８，６（９）：２４９６⁃２５０７［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０３９／ｃ８ｂｍ００７０１ｂ．［５２］ＬｉＹ，ＹｕＦ，ＬｉｕＹ，ｅｔａｌ．Ｓｕｌｆｏｎａｔｅｄｃｈｉｔｏｓａｎｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅａｌｌｅ⁃ｖｉａｔｅｓｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｏｎｏｓ⁃ｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ／ＯＬ］．ＪＰｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ，２０２０，９１（７）：９７５⁃９８５［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔ⁃ｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ＪＰＥＲ．１９⁃０２７３．［５３］ＧｅＳ，ＺｈａｏＮ，ＷａｎｇＬ，ｅｔａｌ．Ｂｏｎｅｒｅｐａｉｒｂｙｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｅｅｄｅｄｎａｎｏｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ⁃ｃｈｉｔｏｓａｎｓｃａｆｆｏｌｄ［Ｊ／ＯＬ］．ＩｎｔＪＮａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１２，７：５４０５⁃５４１４［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．２１４７／ＩＪＮ．Ｓ３６７１４．［５４］ＢａｂｒａｗａｌａＩ，ＭｕｎｉｖｅｎｋａｔａｐｐａＬａｋｓｈｍａｉａｈＶｅｎｋａｔｅｓｈＰ，Ｂａｎｇａｌ⁃ｏｒｅＶａｒａｄｈａｎＫ．Ａｎｏｖｅｌａｐｐｒｏａｃｈｕｓｉｎｇ１５％ｎａｔｕｒａｌｃｈｉｔｏｓａｎｇｅｌｉｎｔｈｅｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆｉｎｔｒａｂｏｎｙｄｅｆｅｃｔｓ：ａｐｉｌｏｔｓｔｕｄｙ［Ｊ／ＯＬ］．ＣｈｉｎＪＤｅｎｔＲｅｓ，２０１６，１９（４）：２３１⁃２３７［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３２９０／ｊ．ｃｊｄｒ．ａ３７１４８．［５５］ＺａｎｇＳ，ＤｏｎｇＧ，ＰｅｎｇＢ，ｅｔａｌ．Ａｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄｃｈｉｔｏｓａｎｈｙｄｒｏｇｅｌａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙｉｎａｃａｎｉｎｅｍｏｄｅｌｏｆｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ／ＯＬ］．ＣａｒｂｏｈｙｄｒＰｏｌｙｍ，２０１４，１１３：２４０⁃２４８［２０２０⁃０２⁃２２］．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｃａｒｂｐｏｌ．２０１４．０７．０１８．［５６］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牙周膜干细胞免疫调节特性的研究进展
文雯;田宇阳;谢旭东
【期刊名称】《口腔疾病防治》
【年(卷),期】2024(32)1
【摘要】牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)具有多向分化的潜能,是牙周组织再生的首选种子细胞。

近年来,大量研究证实PDLSCs还具有广泛的免疫调节特性,深入探究其具体分子机制对于牙周炎的治疗具有重要的指导意义。

本文旨在归纳总结PDLSCs对各种免疫细胞的调控以及炎症环境对PDLSCs 免疫特性影响的研究进展,以期为实现PDLSCs的异体移植提供重要理论依据,从而提升牙周组织再生的治疗效果。

现有研究表明,PDLSCs对固有免疫细胞和获得性免疫细胞均具有一定的免疫抑制作用,炎症刺激可导致其免疫调节特性受损。

然而,目前的研究主要局限于体外细胞试验,缺乏对体内环境下PDLSCs免疫调节作用的深入研究,基于细胞谱系示踪和条件性基因敲除技术的体内研究可能成为未来的主要研究方向。

【总页数】5页(P76-80)
【作者】文雯;田宇阳;谢旭东
【作者单位】口腔疾病防治全国重点实验室国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙周病科
【正文语种】中文
【中图分类】R78
【相关文献】
1.体外培养环境影响牙周膜干细胞生物学特性的研究进展
2.供体因素对牙周膜干细胞生物学特性影响的研究进展
3.牙周膜干细胞的生物学特性及其作为种子细胞在牙周组织工程中应用的研究进展
4.间充质干细胞的免疫调节特性及其应用研究进展
5.间充质干细胞免疫调节特性与临床应用的研究进展
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牙周膜干细胞的生物学特性及其作为种子细胞在牙周组织工程
中应用的研究进展
殷丽华;刘琪;余占海;秦子顺
【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》
【年(卷),期】2013(039)002
【摘要】牙周膜干细胞(PDLSCs)是牙周组织工程研究的热点问题之一.本文作者主要介绍PDLSCs的生物特性、培养分离与纯化、适合PDLSCs作为种子细胞的牙周组织工程支架材料以及其在牙周组织工程中的应用,展望PDLSCs今后的发展方向,为后续的研究提供参考依据.
【总页数】4页(P419-422)
【作者】殷丽华;刘琪;余占海;秦子顺
【作者单位】兰州大学口腔医学院修复科,甘肃兰州730000;兰州大学口腔医学院修复科,甘肃兰州730000;兰州大学口腔医学院修复科,甘肃兰州730000;兰州大学口腔医学院修复科,甘肃兰州730000
【正文语种】中文
【中图分类】R78
【相关文献】
1.不同种子细胞在组织工程膀胱构建中应用的研究进展 [J], 朱卫东;徐月敏
2.体外培养环境影响牙周膜干细胞生物学特性的研究进展 [J], 贾凌璐;文勇;徐欣
3.供体因素对牙周膜干细胞生物学特性影响的研究进展 [J], 贾凌璐;文勇;徐欣
4.牙周组织工程研究进展：问题与应用 [J], 路博闻;徐璐璐;张洋;韩光;
5.牙周组织工程研究进展:问题与应用 [J], 路博闻;徐璐璐;张洋;韩光
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生长因子对牙周膜干细胞增殖及成骨分化能力影响的研究进展牙周炎是指发生在牙齿支持组织的慢性、非特异性、感染性炎性疾病其治疗方法包括基础治疗、牙周手术等，运用组织工程的方法修复牙周组织缺损为最近研究的热点。

牙周膜干细胞是用于牙周组织再生的良好种子细胞，多种生长因子均能促进牙周组织的再生和修复。

本文就几种主要生长因子对牙周膜干细胞增殖及成骨分化的作用做一综述。

1.胰岛素样生长因子（IGF）胰岛素生长因子家族包括胰岛素、松弛肽以及IGF-1和IGF-2。

IGF以自分泌、旁分泌方式作用于细胞表面的IGF受体进而诱导细胞增殖、分化和胶原蛋白的合成。

Chen等[1]研究发现IGF-1能修复比格犬第二和第三磨牙的三度根分叉病变的骨缺损。

IGF-1能影响牙周膜干细胞的增殖及成骨。

郑巍等用25μg/L的IGF-1刺激体外培养的牙周膜干细胞能促进增殖[2]。

在牙周膜干细胞成骨诱导过程中加入25μg/L的IGF-1，通过检测成骨基因以及茜素红染色也均表明IGF-1能促进成骨分化。

进一步研究发现10-200ng/ml的IGF-1能促进牙周膜干细胞的增殖，而100μg/ml是最佳药物浓度。

其促进成骨分化主要是通过活化ERK和JNK通路。

2.成纤维细胞生长因子（FGF-2）和血管内皮生长因子(VEGF)FGF-2是成纤维细胞生长因子家族的重要成员之一，对细胞有丝分裂和分化有很强的调节作用。

VEGF是一种多功能的细胞因子,具有增加微血管通透性和促进血管内皮细胞增殖、迁移诱导血管生成的作用。

Murakami等[3]实验证实FGF-2能促进比格犬牙周缺损的再生，也能促进牙周膜干细胞的增殖以及粘附能力。

Lee等[4]进一步证实25ng/mlFGF-2和25ng/mlVEGF均能促进牙周膜干细胞的增殖，体外诱导牙周膜干细胞成骨分化发现VEGF能上调ALP活性以及成骨基因RUNX2的表达以及钙结节的形成，而FGF-2却抑制牙周膜干细胞成骨能力。