实验一 紫外分光光度法测定维生素C片中的VC含量
- 格式:doc
- 大小:39.50 KB
- 文档页数:3
紫外分光光度法测定Vc含量
1. 实验原理
维C在紫外光区(200-400nm)显示特征的吸收谱带,最大光吸收(λmax)为245nm。
因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度,测得维C含量。
2. 实验试剂
(I)1%的HAc溶液
(2)100ug/ml的Vc标准贮备液:准确称取0.010g的Vc,用1%的HAc定容至100mL。
(3)Vc标准使用液:吸取贮备液5.00mL,用1%HAc稀释至250mL(现用现配)。
(4)比色皿清洗剂
3. 实验步骤
3.1 Vc的提取
称取剪碎混匀的新鲜样品0.5 ~1.0 g 加酸研磨,多次过滤至50ml容量瓶中定容。
吸取10ml待测液溶液于试管。
3.2 标准曲线的绘制
分别吸取0.00、1.00、2.00、4.00、8.00、10.00ml维生素C标准溶液于10ml 比色管中用酸定容,用水稀释成一系列浓度分别为0.0、10、20、40、80、100μg/mL 维生素C标准溶液,分别测出其吸光度。
然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。
3.3 Vc的测定
波长245nm处测定。
紫外分光光度法测定维生素C片的含量班级:姓名:学号:前言:原理:分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些集团吸收了紫外可见辐射光后发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它说带状光谱,反应了分子中某些基团的信息。
可以用标准光图谱再结合其他手段进行定性分析,吸收曲线的形状是物质定性的主要依据,在定量分析中,可提供测定波长,一般以灵敏度较大的最大吸收波长为测定波长。
物质对紫外可见光吸收符合Lambert-Beer定律A=εcl。
仪器构造:光源、单色器、样品池、检测器、显示屏。
仪器特点:1、320*240位点阵高质量大屏幕液晶显示器,显示清晰,信息完备,充分考虑人性化设计2、强大的数据处理功能,使实验结果能得到充分的应用,使用户编辑更为简单快捷3、主要元件采用进口配置,使精度更高、速度更快、可靠性更强、兼容性更广、自动化程度更高4、丰富的应用功能,使用户随心所欲,应用更灵活、开放,使分光光度计的应用领域得到了极大的拓展5、高自动化程度,使维护方便、操作简便、效率更高维生素c的化学结构为理化性质外观:无色晶体沸点:无熔点:190~192℃酸性:维生素C分子结构中的烯二醇基,尤其是C3位OH由于受共轭效应的影响,酸性较强(pK =4.17);C2位OH由于形成分子内氢键,酸性极弱(pK =11.75)。
故维生素C一般表现为一元酸,可与碳酸氢钠作用生成钠盐。
紫外线吸收最大值:245nm荧光光谱:激发波长:无荧光波长:无药理作用维生素C为抗体及胶原形成,组织修补(包括某些氧化还原作用),苯丙氨酸、酪氨酸、叶酸的代谢,铁、碳水化合物的利用,脂肪、蛋白质的合成,维持免疫功能,羟化与羟色胺,保持血管的完整,促进非血红素铁吸收等所必需,同时维生素C还具备有抗氧化,抗自由基,抑制酪氨酸酶的形成,从而达到美白,淡斑的功效。
文献报道测定方法方法名称维生素C测定—氧化还原滴定法应用范围该方法采用滴定法测定维生素C的含量。
该方法适用于维生素C。
紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量一、本文概述本文将详细阐述使用紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量的实验方法和过程。
紫外分光光度法是一种常用的化学分析方法,通过测量物质在特定波长下对紫外光的吸收程度,可以定量测定物质的含量。
该方法在化学、生物、医学等领域有着广泛的应用,尤其在药物分析领域中,对于确定药品中有效成分的含量具有重要的实用价值。
VC银翘片是一种常见的非处方药品,主要用于治疗感冒和其他上呼吸道感染。
其主要活性成分为维生素C,具有抗氧化、增强免疫力等多种药理作用。
因此,准确测定VC银翘片中维生素C的含量对于保证药品质量和疗效至关重要。
本文首先介绍了紫外分光光度法的基本原理和实验步骤,然后详细描述了实验过程,包括样品制备、波长选择、标准曲线绘制以及结果计算等。
通过实验结果的分析和讨论,验证了该方法的准确性和可靠性。
本文旨在为药品生产和质量控制提供一种有效的维生素C含量测定方法,同时也为相关领域的研究提供参考和借鉴。
二、紫外分光光度法原理紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光的吸收特性来测定物质含量的分析方法。
在紫外区,许多有机化合物和无机离子具有吸收紫外光的特性,其吸收程度与物质的浓度成正比。
因此,通过测量待测物质在特定波长下的吸光度,可以推算出该物质的浓度。
在测定VC银翘片中维生素C含量时,紫外分光光度法利用维生素C在紫外光区具有特定吸收波长的特性。
维生素C分子中的共轭双键结构使其对紫外光具有吸收能力,且吸收峰通常出现在约245nm处。
通过制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液,并测量其在245nm波长下的吸光度,可以建立吸光度与维生素C浓度之间的标准曲线。
然后,对待测的VC银翘片提取液进行同样波长的吸光度测量,根据标准曲线即可计算出样品中维生素C的含量。
紫外分光光度法具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点,因此在药物分析、生物化学等领域得到广泛应用。
然而,该方法也受到一些限制,如对于颜色较深或浑浊的样品,可能需要进行前处理以消除干扰因素;对于某些在紫外区无吸收或吸收较弱的物质,该方法可能不适用。
紫外分光光度法测定维生素一、实验目的1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。
C片中的VC含量2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法3.掌握紫外分光光度法测定水中维生素C含量的原理与分析条件的选择。
二、实验原理维生素C是人体重要的维生素之一,它影响胶元蛋白的形成,参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。
人体不能自身制造Vc,所以人体必须不断地从食物中摄入Vc,通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。
缺乏时会产生坏血病,故又称抗坏血酸。
维生素C属水溶性维生素,分子式C6H8O6。
分子结构中具有二烯醇结构,其结构如下:它易溶于水,微溶于乙醇,不溶于氯仿或乙醚。
分子中的二烯醇基具极强的还原性,性质活泼,易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。
维生素C分子结构中有共轭双键,固在紫外光区有较强的吸收。
根据维生素C在稀盐酸溶液中,Vc吸收曲线比较稳定,在最大吸收波长处,其吸收值A的大小与维生素C的浓度c的大小成正比,符合郎伯—比尔定律:A=εbc其中A为吸收度;c为试样中维生素C的浓度,mol·L-1;b为吸收池厚度,cm;ε为摩尔吸收系数,L·mol-1·cm-1。
若在最大吸收波长下,首先绘制出维生素C在最大吸收波长下的标准曲线,然后在相同条件下测定出吸光度A,由测得的吸光度A在标准曲线上查得浓度,换算为药品中含量(mg/片)。
三、实验仪器与试剂1.仪器TU1810型紫外分光光度计。
电子天平1台,研钵1个,50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只,10mL移液管2支,100mL、1000mL烧杯2只。
2.试剂维生素C标准品(抗坏血酸),市售维生素C含片(100mg/片),冰醋酸,蒸馏水。
四、实验步骤1.配制维生素C标准贮备液500mL(浓度约为1.5×10-4mol/L):称取约0.0132g维生素C标准品于100mL的烧杯中,用超声波助溶后定容于500mL容量瓶中,摇匀,配成贮备液。
紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C(VC)是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液(维生素C水溶液在pH 5~6之间稳定)中,在245 nm 波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器:容量瓶(100 ml、1000 ml)、移液管(0.5 ml、5 ml)、烧杯、紫外分光光度计实验用品:98%浓硫酸(分析纯,1.84 g/ml)、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重(含量为99.7 %)、维生素C片(2片)、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用0.5 ml移液管移取0.27 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中,搅拌,冷却至室温后移入1000 ml容量瓶,稀释至刻度,待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中,加0.005 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
紫外分光光度法测定维生素C的含量维生素C(VitC)又名抗坏血酸,可降低毛细血管通透性,降低血脂,增强机体的抵抗能力,并有一定的解毒功能和抗组胺作用[1]。
临床主要用于坏血病、急慢性中毒、心肌炎、慢性肝炎等病症。
对于其含量测定,纵观各种质量标准均采用2,6-二氯吲哚酚滴定法等滴定分析法,该方法简便、快速、准确,中国药典(2000年版)也采用碘量法。
虽然不甚满意了。
由于维生素C易被空气中的氧所氧化,再加上制剂辅料对测定的干扰,测定前必须先做处理。
采用紫外分光光度法测定维生素C时,存在于维生素C或复合维生素制剂中的辅料一般不对测定产生干扰[2]。
所以本法既可以测定维生素C各种制剂及复合维生素片剂,也可以测定多种饮料中的维生素C的含量。
1 仪器与试剂UV-260紫外分光光度计,VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(pH=6)。
2 实验操作2.1 标准曲线的绘制精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。
然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。
2.2 样品测定取VitC20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于VitC50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度A 样。
由标准曲线查出样品的浓度C 样品[3]。
2.3 结果计算根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样。
VitC含量=C 样品/C 样或VitC含量=A 样/K×C 样注:K为标准曲线的斜率。
3 讨论维生素C的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中易被氧化。
另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。
因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。
紫外分光光度法测定维生素c的含量紫外分光光度法是一种常用的定量分析方法,可以用于测定维生素C的含量。
维生素C是一种具有还原性的物质,具有吸收紫外光的特性。
在一定波长下,其吸光度与浓度呈线性关系,因此可以利用紫外分光光度法测定维生素C的含量。
以下是测定维生素C含量的具体步骤:一、实验准备1.实验仪器:紫外分光光度计、100mL容量瓶、50mL移液管、30mL比色皿。
2.实验试剂:维生素C标准品、待测样品溶液、超纯水。
3.实验环境:室温、避光环境。
二、实验步骤1.制作标准曲线:取6个100mL容量瓶,分别加入0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL和8.0mL的维生素C标准品,用超纯水定容至100mL。
在紫外分光光度计上分别测量这6个容量瓶中溶液的吸光度,绘制吸光度与浓度之间的关系曲线,得到标准曲线。
2.测定待测样品:取30mL比色皿,加入待测样品溶液,用超纯水定容至30mL。
在紫外分光光度计上测量该溶液的吸光度。
3.数据处理:将待测样品溶液的吸光度代入标准曲线中,得出待测样品中维生素C的含量。
三、实验结果与分析1.结果记录:将待测样品溶液的吸光度代入标准曲线中,得到待测样品中维生素C的含量。
2.结果分析:通过比较待测样品中维生素C的含量与标准品中维生素C的含量,可以得出待测样品的纯度或浓度是否符合要求。
如果待测样品中维生素C的含量高于或低于标准品中维生素C的含量,则说明待测样品的纯度或浓度存在问题。
四、实验结论通过本次实验,我们成功地利用紫外分光光度法测定了维生素C的含量。
实验结果表明,待测样品中维生素C的含量符合要求,证明了紫外分光光度法的可行性和准确性。
该方法具有操作简便、快速、准确等优点,可以广泛应用于维生素C含量的测定。
需要注意的是,实验过程中要保持避光环境,避免阳光直接照射导致维生素C分解。
同时,实验操作过程中要注意卫生,避免样品污染导致测定结果不准确。
实验一-紫外分光光度法测定维生素c片中的vc含量一. 实验目的1. 学习维生素C的理化性质和紫外分光光度法测定原理;2. 掌握维生素C片中VC含量的测定方法,加深对常用分析仪器的理解和操作技能。
二. 实验原理维生素C,化学名为抗坏血酸,是一种弱酸性的有机物,化学式为C6H8O6,分子量为176.12g/mol。
维生素C在常温下为白色或淡黄色晶体或粉末,极易溶于水,难溶于乙醇、氯仿和乙醚。
维生素C具有氧化还原性,容易被氧化。
加热、酸、光线等条件都可以使其分解失效。
2. 紫外分光光度法原理紫外分光光度法是一种用于测定化学物质浓度和用于确定化学分子的结构的常用分析方法之一。
本实验以维生素C的最大吸收波长为265nm进行测定。
根据比尔-朗伯定律,紫外分光光度法可以根据化合物在特定波长下吸收的光的数量来计算化合物的浓度。
根据计算所需的吸光度和吸收系数值,可以使用比尔-朗伯定律推导出样品中所含物质的浓度。
3. 维生素C片中VC含量的测定方法本实验采用紫外分光光度法测定维生素C片中VC含量。
样品的制备包括提取和过滤,检测前需要检查仪器的性能,然后以样品的最大吸收波长(λmax)为265nm进行测定。
使用对照溶液、标准曲线和工作曲线进行测定,最后计算出样品中VC的含量。
操作步骤如下:(1)样品制备取约1.0g维生素C片粉末,将其加入50mL锥形瓶中,并据以加入3-5mL1%酒石酸溶液和40mL去离子水,摇晃均匀备用。
(2)对照溶液的制备(3)标准曲线的制备取维生素C标准品0.020g,溶于水中,定容至100mL,得到储存浓度为0.200mg/mL的维生素C标准溶液。
(5)测定样品将对照溶液、标准曲线各用0.45μm滤膜过滤,然后加入分别从10mL量筒中取出1.0mL样品溶液,水定容至10mL。
调节测试波长到265nm处。
测量对照液吸光度为A1,标准解各吸光度为A2、A3、A4、A5、A6;样品吸光度为Ax。
三. 实验步骤(1)仪器操作准备1) 打开仪器电源,拓扑显示屏显示后,启动UV-VIS1000分光光度计软件程序,并用移液管加入100μL试剂至样品池;2) 在菜单选项中选择"致动器",点击"参照制备",将10mM硝酸钾对比池放入槽中,并通过菜单项中"参照制备"对参照对比。
实验一紫外分光光度法测定维生素C片中的V C含量标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]紫外分光光度法测定维生素C片中的V C含量一、实验目的1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。
2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法3.掌握紫外分光光度法测定水中维生素C含量的原理与分析条件的选择。
二、实验原理维生素C是人体重要的维生素之一,它影响胶元蛋白的形成,参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。
人体不能自身制造Vc,所以人体必须不断地从食物中摄入Vc,通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。
缺乏时会产生坏血病,故又称抗坏血酸。
维生素C属水溶性维生素,分子式C6H8O6。
分子结构中具有二烯醇结构,其结构如下:它易溶于水,微溶于乙醇,不溶于氯仿或乙醚。
分子中的二烯醇基具极强的还原性,性质活泼,易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。
维生素C分子结构中有共轭双键,固在紫外光区有较强的吸收。
根据维生素C在稀盐酸溶液中,Vc吸收曲线比较稳定,在最大吸收波长处,其吸收值A的大小与维生素C的浓度c的大小成正比,符合郎伯—比尔定律:A=εbc其中A为吸收度;c为试样中维生素C的浓度,mol·L-1;b为吸收池厚度,cm;ε为摩尔吸收系数,L·mol-1·cm-1。
若在最大吸收波长下,首先绘制出维生素C在最大吸收波长下的标准曲线,然后在相同条件下测定出吸光度A,由测得的吸光度A在标准曲线上查得浓度,换算为药品中含量(mg/片)。
三、实验仪器与试剂1.仪器TU1810型紫外分光光度计。
电子天平1台,研钵1个,50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只,10mL移液管2支,100mL、1000mL烧杯2只。
2.试剂维生素C标准品(抗坏血酸),市售维生素C含片(100mg/片),冰醋酸,蒸馏水。
四、实验步骤1.配制维生素C标准贮备液500mL(浓度约为1.5×10-4mol/L):称取约0.0132g维生素C标准品于100mL的烧杯中,用超声波助溶后定容于500mL容量瓶中,摇匀,配成贮备液。
维生素C含量测定实验维生素C含量测定实验一般可以采用标准滴定法或紫外分光光度法。
下面是一种常见的标准滴定法实验流程:实验步骤:1.准备样品:将待测样品(如鲜橙汁)称取10g,加入50ml蒸馏水中溶解,摇匀均匀。
2.滴定液的制备:将0.1mol/L 碘酸钾溶液和1% 淀粉溶液分别配制。
3.滴定过程:用移液管将样品溶液吸入容量瓶中至刻度线,加入1 ml 淀粉溶液,然后滴加0.1mol/L 碘酸钾溶液,直至溶液变成淡蓝色,然后继续滴加碘酸钾溶液,滴至深蓝色时,立即停止加入碘酸钾溶液,记录下加入的体积,记为V1。
4.对照实验:将相同体积的蒸馏水代替样品进行同样的滴定过程,记录下加入的体积,记为V0。
5.计算维生素C含量:用下式计算维生素C的含量:C(mg/100ml)=(V1-V0)×0.1×10/10×10。
其中,0.1是碘酸钾的浓度,10是样品的稀释倍数,10是转化系数。
注意事项:1.实验过程中要保持实验器材和试剂的清洁和干燥,以避免杂质的干扰。
2.滴定过程中,要保证反应时间和加入的滴定液的体积准确无误,否则会对结果产生影响。
3.实验室操作要注意安全,避免碘酸钾溶液和淀粉溶液接触皮肤或眼睛。
4.实验结果要进行重复测定,以保证数据的可靠性。
再写一个维生素C含量测定实验还可以采用紫外分光光度法。
下面是一种常见的紫外分光光度法实验流程:实验步骤:1.准备样品:将待测样品(如橙汁)加入10ml 甲醇中,用振荡器混合均匀。
2.制备标准曲线:将维生素C标准品依次加入甲醇中,制成维生素C的浓度为0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml 的标准溶液。
3.测定吸光度:将样品和标准曲线的吸光度分别测定于245nm 波长处。
4.计算维生素C含量:利用标准曲线计算样品中维生素C的含量。
注意事项:1.实验过程中要保证实验器材和试剂的干净和干燥,以避免杂质的干扰。
2.甲醇是有毒的,实验室操作要注意安全。
1. 直接碘量法2. 紫外分光光度计二、目的要求1. 通过维生素C片的含量测定,掌握直接碘量法的原理及操作。
2. 了解测定维生素C片含量的紫外分光光度法,并与《中国药典》采用的碘量法比较。
三、实验原理维生素C是人体重要的维生素之一,它影响胶元蛋白的形成,参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。
人体不能自身制造Vc,所以人体必须不断地从食物中摄入Vc,通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。
缺乏时会产生坏血病,故又称抗坏血酸。
维生素C属水溶性维生素,分子式C6H8O6。
分子中的烯二醇基具有还原性,能被I2定量地氧化成二酮基,因而可用I2标准溶液直接测定。
简写为:C6H8O6+I2= C6H6O6+2HI使用淀粉作为指示剂,用直接碘量法可测定药片、注射液、饮料、蔬菜、水果中维生素C的含量。
由于Vc的还原性很强,较容易被溶液和空气中的氧氧化,在碱性介质中这种氧化作用更强,因此滴定宜在酸性介质中进行,以减少副反应的发生。
考虑到I - 在强酸性中也易被氧化,故一般选在pH为3~4的弱酸性溶液中进行滴定。
由于碘具有挥发性,碘离子易被空气所氧化而使滴定产生误差;又由于碘的挥发性和腐蚀性,使碘标准滴定溶液的配制及标定比较麻烦。
根据维生素C 在稀盐酸溶液中,酸度小于pH3.8时,Vc吸收曲线比较稳定,在243 nm波长处有最大吸收的特性,可建立紫外分光光度法测定维生素C 片含量的方法。
四、实验用品分析天平、酸式滴定管(50ml)、锥形瓶(250ml)、I2标准碘溶液(0.05mol/L)、HAc(2mol/L);淀粉指示剂溶液(10g/L),紫外分光光度计;容量瓶(50ml),吸量管,维生素C标准溶液:准确称取105℃干燥至恒重的维生素C 0.0500g,加10mL3molL盐酸溶解,并以蒸馏水定容到500mL。
HCl( 3mol/L)样品:市售娃哈哈维生素C含片(750mg/片)。
五、实验步骤(一)直接碘量法测定维生素C的含量:1. 测定准确称取约适量(约相当于维生素C 0.2g)研成粉末的维生素C药片,置于250ml锥形瓶中,加入100ml 新煮沸过并冷却的蒸馏水,加入10mL2mol·L-1HAc和2mL淀粉指示剂(10g/L),立即用0.05mol/L I2标准滴定溶液滴定至稳定的浅蓝色,30s 内不褪色即为终点。
紫外分光光度法研究维生素C的稳定性及蔬果和果汁中含量的测定一、本文概述维生素C,也称为抗坏血酸,是一种重要的水溶性维生素,对于维持人体健康具有至关重要的作用。
它不仅是许多生物酶的辅因子,还参与胶原蛋白的合成,有助于增强免疫力、促进铁的吸收以及抗氧化等生理功能。
然而,维生素C在食物和生物体系中的稳定性是一个重要的研究问题,因为它容易受到光照、氧气、温度等因素的影响而发生氧化降解。
因此,对维生素C的稳定性进行研究,以及准确测定食物和果汁中的维生素C含量,对于评估食品的营养价值和指导合理膳食具有重要意义。
本文旨在通过紫外分光光度法研究维生素C的稳定性,并应用于蔬果和果汁中维生素C含量的测定。
紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光的吸收特性进行定量分析的方法,具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点,广泛应用于生物、医学、食品等领域。
通过该方法,我们可以了解维生素C在不同条件下的降解规律,以及准确测定不同蔬果和果汁中维生素C的含量,为食品营养学研究和食品安全评估提供有力支持。
本文首先介绍了紫外分光光度法的基本原理和实验方法,然后详细阐述了维生素C的稳定性研究,包括光照、氧气、温度等因素对维生素C降解的影响。
接着,文章通过紫外分光光度法测定了不同蔬果和果汁中维生素C的含量,并进行了比较和分析。
本文总结了紫外分光光度法在维生素C稳定性研究和含量测定中的应用,并展望了未来的研究方向和应用前景。
通过本文的研究,我们期望能够为食品营养学、食品安全和食品加工业提供有益的参考和指导。
二、紫外分光光度法基本原理紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光的吸收性质进行定量和定性分析的方法。
其基本原理是,当紫外光通过被测物质时,物质中的某些基团会吸收特定波长的紫外光,产生光的吸收现象。
这种吸收现象与物质的浓度之间存在一定的关系,即朗伯-比尔定律:A=εbc,其中A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,b为光程长度,c为溶质摩尔浓度。
通过测量吸光度,可以推算出物质的浓度。
紫外分光光度法测定维生素C的含量班级:xxxx 姓名:xxxx 学号:xxxx前言:紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律,即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比,其应用波长范围为200~400nm的紫外光区、主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。
本次研究对象是维生素C,维生素C又称抗坏血酸,是一种含有6个碳原子的酸性多羟基化合物,分子式为C6H8O6,分子量为176.1。
化学结构:理化性质:无色晶体,熔点190~192℃酸性:维生素C分子结构中的烯二醇基,尤其是C3位OH由于受共轭效应的影响,酸性较强(pK =4.17);C2位OH 由于形成分子内氢键,酸性极弱(pK =11.75)故维生素C一般表现为一元酸,可与碳酸氢钠作用生成钠盐。
紫外线吸收最大值:245nm。
不纯或天然品维生素c容易被空气和光线氧化,其水溶液很不稳定很快氧化成脱氢抗坏血酸,尤其是在中性或碱性溶液中很快被氧化。
药理作用:体内参与糖的代谢及氧化还原过程,能促使组织产生细胞间质(缺乏时可引起坏血病),减少毛细血管通透性,加速血液的凝固,刺激造血功能,促进铁在肠内吸收,促使血脂下降,增加对感染的抵抗力,参与解毒功能,具有抗组织胺的作用及阻止致癌物质(亚硝胺)生成的作用。
文献报道测定方法:碘量测定法,HPLC法,紫外分光光度法,差示旋光法,电化学法等一、仪器与试药紫外分光光度仪(UV-2550, 日本岛津),分析天平(BS 110S,梅特勒)。
维生素C对照品,维生素C片(天津市新精细化工开发中心,批号:20110725)。
维生素C样品,维生素片(国药集团新疆制药有限公司,批号:20150870)溶剂: 0.1mol/L盐酸。
二、方法与结果2.1 溶液的配制2.1.1 对照品溶液的配制精密称取维生素C对照品10mg,加0.1mol/L HCl溶解,定容到25ml。
紫外光度法测定维生素C实验报告Company number:【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C(VC)是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变 ,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液(维生素C水溶液在pH 5~ 6之间稳定)中,在245 nm 波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器:容量瓶(100 ml、1000 ml)、移液管( ml、5 ml)、烧杯、紫外分光光度计实验用品:98%浓硫酸(分析纯,1.84 g/ml)、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重(含量为 %)、维生素C片(2片)、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用 ml移液管移取 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中,搅拌,冷却至室温后移入1000 ml容量瓶,稀释至刻度,待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中,加 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的1.学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;2.熟练紫外-可见分光光度计的操作。
二、实验原理维生素C(VC)是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。
维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。
维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。
在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。
具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达104-106数量级。
利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。
根据维生素C在稀硫酸溶液(维生素C水溶液在pH 5~6之间稳定)中,在245 nm 波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。
三、实验仪器及试剂实验仪器:容量瓶(100 ml、1000 ml)、移液管(0.5 ml、5 ml)、烧杯、紫外分光光度计实验用品:98%浓硫酸(分析纯,1.84 g/ml)、维生素C对照品系以原料药经105 ℃干燥至恒重(含量为99.7 %)、维生素C片(2片)、去离子水四、实验步骤1. 0.005 mol·L-1硫酸溶液的配制用0.5 ml移液管移取0.27 ml 98%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中,搅拌,冷却至室温后移入1000 ml容量瓶,稀释至刻度,待用。
2. 0.5 g·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50 mg置100 ml量瓶中,加0.005 mol·L-1硫酸溶液制成0.5 g·L-1对照品溶液。
实验一紫外分光光度法测定维生素C片中的V C含量
一、实验目的
1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。
2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法
3.掌握紫外分光光度法测定水中维生素C含量的原理与分析条件的选择。
二、实验原理
维生素C是人体重要的维生素之一,它影响胶元蛋白的形成,参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。
人体不能自身制造Vc,所以人体必须不断地从食物中摄入Vc,通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。
缺乏时会产生坏血病,故又称抗坏血酸。
维生素C属水溶性维生素,分子式C6H8O6。
分子结构中具有二烯醇结构,其结构如下:
它易溶于水,微溶于乙醇,不溶于氯仿或乙醚。
分子中的二烯醇基具极强的还原性,性质活泼,易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。
维生素 C分子结构中有共轭双键,固在紫外光区有较强的吸收。
根据维生素C 在稀盐酸溶液中,Vc吸收曲线比较稳定,在最大吸收波长处,其吸收值A的大小与维生素C的浓度c的大小成正比,符合郎伯—比尔定律:
A=εbc
其中A为吸收度;c为试样中维生素C的浓度,mol·L-1;b为吸收池厚度,cm;ε为摩尔吸收系数,L·mol-1·cm-1。
若在最大吸收波长下,首先绘制出维生素C 在最大吸收波长下的标准曲线,然后在相同条件下测定出吸光度A,由测得的吸光度A在标准曲线上查得浓度,换算为药品中含量(mg/片)。
三、实验仪器与试剂
1.仪器TU1810型紫外分光光度计。
电子天平1台,研钵1个,50mL容量瓶7只和500mL容量瓶1只 , 10mL移液管2支,100 mL、1000 mL烧杯2只。
2.试剂维生素C标准品(抗坏血酸),市售维生素C含片(100mg/片),冰醋酸,蒸馏水。
四、实验步骤
1. 配制维生素C标准贮备液500mL(浓度约为1.5×10-4m ol/L):
称取约0.0132g维生素C标准品于100mL的烧杯中,用超声波助溶后定容于500mL容量瓶中,摇匀,配成贮备液。
2. 配制标准系列:
分别吸取上述贮备液1.00、2.00、4.00、8.00、16.00mL于50mL容量瓶中,用蒸馏水定容。
3. 确定最大吸收
以蒸馏水为参比,在320~220nm范围内测出维生素C的吸收光谱,并确定最大吸收波长。
4. 绘制标准曲线
λ处分别测出吸光度,并绘制以蒸馏水为参比,用上述标准系列溶液在
m ax
标准曲线。
5.样品测定
取3片Vc片剂研细,准确称取0.02g于100mL烧杯中,以去离子水稀释至
λ处测吸光度。
500mL。
移取样品溶液5.00mL于50mL容量瓶中,定容。
在
m ax
五、实验结果和讨论
1. 绘制吸收曲线,确定最大吸收波长。
2. 以标准溶液浓度为横坐标,相应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线图。
3. 在标准曲线的纵坐标上找到试液的吸光度,然后在横坐标处查得相应VC 的浓度。
4. 计算维生素片剂中VC的含量。
六、注意事项
1. 维生素C会缓慢氧化成脱氢抗血酸,所以每次实验时必须配制新鲜溶液,并滴加几滴醋酸。
2. 使用石英比色皿。
3. 实验结束时,先关氘灯,再关主机电源开关。
七、思考题
1. 具有哪些结构特征的有机物常在紫外光区有吸收?
2. VC结构中有哪些生色团?那些助色团?。