小儿胆汁淤积性肝病的病因学特征

Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ
ａｎｄ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ
Ｕｎｗｅｒｓ毋Ｇｒａｄｕａｔｅ＆ｈｏｄ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｄｅｎｔａｌ＆妇，蹦，Ｋａｇｏｓｈｉｍａ
ｄｉｓｅａｓｅ（ＣＬＤ）
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ．ａｎｄ
ｔｏ
Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ
ｍｊｏｒ
Ｏｌｌｒ
Ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
ｏｎ
６３ ＣＬＤ
ｃａ即ｓ ｄｉａｇｎｏｓｅｄ ｆｒｏｍ ０ｃＬ ２００３
ｗｅｒｅ
Ｍ毗２００９
ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ３６ ｍａｌｅｓ ａｎｄ ２７ ｆｅｍａｌｅｓ．Ｔｈｅｉｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄａｔａ
ｗｅｌ＇ｅ
ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．ａｎｄ
ｇｅｎｅ ｗｅｒｅ ｗｅｒｅ
ｅｔｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｅｈｏｌｅｓｔａｔｉｅ ｌｉｖｅｒ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
ｏｆ妣５Ａ１３
ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ＣＬＤ．
Ｍｅｔｈｏｄ
ｔｏ
Ａ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｒｏｓｓ．ｓｅｃｔｉｏｎａｌ ｉｎｖｅｓｉｔｇａｔｉｏｎ ｉｎ
ｄｕｐ。
【关键词】胆汁淤积，肝内；线粒膜转运蛋白质类；突变；钙结合蛋白质类；有机阴离子
转运子
Ｃｉｔｒｉｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｓ
ａｎ
ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｅｔｉｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｃｈｏｌｅｓｔａｆｉｃ Ｈｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ
’Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
ｓｏＮＧ Ｙｕａｎ－ｚｏｎｇ‘．
ｇｒｏｕｐ．Ｓｅｖｅｒａｌ
ｍｕｔａｔｉｏｎｓ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｄｉｒｅｃｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｅｔｉｏｌｏｇｉｅｓ
ｗｅｒｅ
ａｍｐｌｉｆｉｅｄ
ｂｙ
ｇｅｎｏｍｉｃ ＤＮＡ・ＰｅＲ．Ｒｅｓｕｌｔ
ｃａｓｅ８
Ｎｏ ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ
ｗｅｒｅ
ｉｎ ２４
ｏｎ
Ｃａｓｅｓ．Ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ３９
ｃａｎ
ＮＩＣＣＤ ｉｎ
ｐａｒｔｉｃｕｌａｒ，ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅ
ｃｏｎｌ／ｎｏｎ
ｃａｕｓａｔｉｖｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ＣＬＤ．Ｍｏｓｔ ｏｆ ｔｈｅ ＣＬＤ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｓｏｍｅ
ｂｅ
ｉｍｐｒｏｖｅｄ，ｅｖｅｎ ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ，ａｌｔｈｏｕｇｈ
ｃａｓｅｓ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｗｉｔ｝ｌ ｐｏｏｒ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．Ｓｅｙｅｎ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ
Ｓ麟Ａ１３
ｇｅｎｅ
ｗｅｒｅ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ，ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ。
８５１．８５４ｄｅｌ．ＩＶＳ６＋５Ｇ＞Ａ。ＩＶＳｌ６ｉｎｓ３ｋｂ ａｎｄ １６３８．１６６０ｄｕｐ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｌｅａｄｉｎｇ ｆｏｕｒ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｃｈｏｌｅｓｔａｓｉｓ，ｉｎｔｍｈｅｐａｔｉｃ；Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ Ｃａｌｃｉｕｍ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ；
ｏｎ
７
ｂｉｌｉａｒｙ ａｔｒｅｓｉａ，Ｃａｒｏｌｉ
ｓ
ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｇａｌｌｂｌａｄｄｅｒ ｐｏｌｙｐ，ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ．Ｔｅｎ ｏｆ ｔｈｅ ５５
ｃｓｓｅｓ
ｐａｔｉｅｎｔｓ
ｆｏｌｌｏｗ—ｕｐ ｈａｖｅ ｐａｓｓｅｄ ａｗａｙ，ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｒｅｍａｉｎｉｎｇ ４５
ｗｅｒｅ
ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ（ＮＩＣＣＤ，２１ ｃａｓｅｓ），ｔｒａｎｓｉｅｎｔ
ｇａｌａｃｔｏｓｅｍｉａ，ｔｙｒｏｓｉｎｅｍｉａ
Ｉ，ｇａｌａｃｔｏｓｅ
ｋｉｎａｓｅ
Ｉ，ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ
ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｏｍｉｔｈｉｎｅ ｃａｒｂａｍｏｙｌ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ ｇｌｙｃｏｇｅｎ ｓｔｏｒａｇｅ ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｑｕｉｒｅｄ ｃａｕｓｅｓ（７ ｃａｓｅｓ ｉｎ ｔｏｔａｌ），ｓｕｃｈ ａｓ ｔｏｔａｌ ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
ｅｔｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｂｙ ｍｅｓ．ｉｉｓ
ａｎａｌｙｚｅｄ ａｎｄ ｓｕｍｍａｒｉｚｅ＆Ｔｈｉｒｔｅｅｎ ｂｙ
ｏｎｒ
ｔＯ
１７
ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ＳＬＣ２５Ａ１３ ＳＬＣ２５Ａ１３
ｏｆ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ ｏｆ ＤＮＡ ｆＴａｇｍｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ６３
ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ＮＩＣＣＤ）是ＳＬＣ２５Ａ１３基因突变导致肝型 天冬氨酸／谷氨酸载体ｅｉｔｒｉｎ功能缺陷而形成的一 种ＣＬＤ∞］。２００６年国内文献报道经突变分析确诊 的ＮＩＣＣＤ患儿以来ＨＪ，我国儿科界对本病临床和实 验室特征的认识逐步深入Ｋ。３Ｉ。我们进一步总结 ２００３年１０月至２００９年３月间我科诊治的６３例 ＣＬＤ患儿的主要病因学特征，并探讨ＳＬＣ２５Ａ１３基 因突变在ＣＬＤ的分子流行病学分布特点。 对象与方法 一、研究对象 参照国内外文献［１４一１７］，符合以下两条标准之 一者入选ＣＬＤ研究对象：（１）临床不同程度的黄 疸，尿色深黄而大便颜色变浅，总胆红素高于 ８５Ⅳｎｏｌ／Ｌ，且结合胆红素／总胆红素比值高于 ２０％；（２）临床黄疸不明显，但血结合胆红素高于
作者单位：５１０６３０广州，暨南大学附属第一医院儿科（宋元宗）；日本鹿儿岛大学医齿学缝合研究科分子病戆生 化学教研室（宋元宗、牛饲美晴、小林圭子）；日本德岛文理大学健康科学研究所（佐伯武赖）
万方数据
生堡』Ｌ整盘盔！Ｑ螋生§旦箍垒２鲞筮！期垦堕！』旦ｉ选：叁竖塾！Ｑ塑：！些兰！ｔ翼垒！
ｉｎ
ｔｏｔａｌ），ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ
Ｏｒｇａｎｉｃ ａｎｉｏｎ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ
ｍｅｍｂｌｉｍｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｐｒｏｔｅｉｎｓ；Ｍｕｔａｔｉｏｎ；
胆汁淤积性肝病（ｃｈｏｌｅｓｔａｔｉｃ
ｌｉｖｅｒ
ｄｉｓｅａｓｅ，
象中有４４例患儿接受ＳＬＣ２５Ａ１３基因突变分析。 常规筛查目标为日本人中最先发现的１３～１７种突 变类型，所用的方法ＰＣＲ／ＰＣＲ．ＲＦＬＰ，基因扫描和 ＳＮａＰｓｈｏｔ，均为课题组已建立的成熟方法；对于筛查 仅发现一个突变的患儿，用基因组直接测序法分析 ＳＬＣ２５Ａ１３基因的全部１８个外显子及其侧翼序列， 寻找另外一个突变类型［３，ｓ４ ０’１８］。研究内容及其意 义已告知患儿父母，并请其签署知情同意书。 结 一、ＣＬＤ病因及预后 如表１所示，本组６３例ＣＬＤ患儿中有２４例未 能明确病因，占３８％，而病因明确者共３９例，占 ６２％。在已明确的ＣＬＤ病因中，遗传代谢病居首 位，包括６种代谢病２７例患儿，占全部ＣＬＤ患儿总 数的４３％，其中ＮＩＣＣＤ最多见，共２１例。其次是获 果
ＣＬＤ
（２３／４０），ＩＶｓ６＋５Ｇ＞Ａ（６／４０），ＩＶＳｌ６ｉｎｓ３ｋｂ（３／４０），１６３８－１６６０ｄｕｐ（２／３０），Ａ５４ｌＤ（１／３０）， Ｂ３１９Ｘ（１／３０）ａｎｄ Ｇ３３３Ｄ（１／３０），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｏｔｈｅｒ ３ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ（３伽）ｓｔｉｌｌ ｎｅｅｄｉｎｇ
ＵｓＨｌＫ蛆Ｍｉｈａｒｕ。ＫＯＢＡ ＹＡＳＨＩ Ｋｅｉｋｏ。ＳＡＨＥＫＩ Ｔａｋｅｙｏｒｉ．
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｋａｇｏｓｈｉｍａ
ｏｆ
ｐｅｄｉｄｌ＾ｃｓ．Ｆｉｒｓｔ
Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ
ａｎｄ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６３０，Ｃｈｉｎａ ａｎｄ ８９０・８５４４，Ｊａｐａｎ
－６２４・
．临床研究与实践・
小儿胆汁淤积性肝病的病因学特征
宋元宗牛饲美晴小林圭子佐伯武赖 【摘要】
目的研究胆汁淤积性肝病（ＣＬＤ）患儿的主要病因学特在ＣＬＤ的分子流行病学分布。方法２００３年１０月至２００９年３月阃我科诊治的ＣＬＤ患儿 ６３例，其中男３６例，女２７例。采用临床横断面研究，收集整理研究对象的临床资料，分析总结其病 因及临床转归；应用课题组已建立方法常规筛查ＳＬＣ２５Ａ１３基因的１３—１７种突变类型；在部分患儿中
ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｍａｉｎｉｎｇ ３ ａｌｌｅｌｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｈｏｗｅｖｅｒ．ｉｎｈｅｆｉｔｅｄ Ｔｈｅ ｅｔｉｏｌｏｇｉｅｓ ｆｏｒ ＣＬＤ ｉｎ ８０ｍｅ
ｃａｓｅｓ
ｃａｒｌ
ｎｏｔ
ｂｅ
ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ。ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ
ＣＬＤ）包括肝细胞胆汁形成异常或胆汁自肝细胞经 肝内胆管或肝外胆道流出受阻的一组数量众多的疾 病…。在实际临床工作中由于实验室条件等因素 限制，相当部分ＣＬＤ患儿的病因目前仍难以明 确【２ Ｊ。ｃｉｔｒｉｎ缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症 （ｎｅｏｎａｔａｌ
ｉｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃ ｃｈｏｌｅｓｔａｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｃｉｔｒｉｎ
２０
得性因素，包括全胃肠道外营养相关胆汁淤积症、巨 细胞病毒肝炎和先天性梅毒，占１１％。再次为先天 性胆道畸形，包括胆道闭锁、Ｃａｒｏｌｉ病和胆囊息肉， 仅占８％。本组６３例ＣＬＤ患者中有８例失随访， 无法确定最终预后。５５例随访患者中１０例已经夭
ｗｅｒｅ
ｉｍｐｒｏｖｅｄ
ｏｒ
ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ．
ＳＬＣ２５Ａ１３ ｇｅｎｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
泐５Ａ１３
ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ４４
ｔｏ
ａｌｌｅｌｅｓ ｉｎ
ｔｏｔａｌ）ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ
ｈａｖｅ
ｓｕｂｊｅｃｔｓ ａｎｄ ２１ ｏｆ ｔＩｌｅｍ ｆｒｏｍ ２０ ｆａｍｉｌｉｅｓ（ｗｉｔｈ ４０ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ。ａｎｄ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｗｅｒｅ ８５ １－８５４ｄｅｌ