霉菌的形态观察
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霉菌的形态观察一、实验目的1、掌握观察霉菌形态的基本方法,观察常见几种霉菌的菌丝形态2、学会霉菌浸片的制作方法二、实验原理霉菌菌丝观察不能用水作介质制片,因为菌丝会因渗透作用而膨胀,目前,霉菌制片时最理想的介质是乳酸苯酚油。
制片时常用乳酸石炭酸棉蓝作染色液。
此染色液制成的霉菌浸片除有一定染色效果外,细胞不变形,还具有杀菌防腐作用,且不易干燥,能保持较长时间。
霉菌和放线菌相似,由于其菌丝较粗,形成的菌落较疏松,呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状,一般比细菌菌落大几倍到几十倍。
菌落的表面和培养基背面往往呈现不同的颜色。
霉菌菌落中,处于菌落中心的菌丝菌龄较大,位于边缘的则年幼。
三、实验器材曲霉(Aspergillus sp.)、青霉(Penicillium sp.)、根霉(Rhizopus sp.)和毛霉(Mucor sp.)的马铃薯培养基斜面乳酸石炭酸棉蓝染色液、20%甘油、马铃薯培养基、无菌吸管、显微镜、载玻片、盖玻片、U形棒、、滤纸、接种钩、酒精灯、、大头针、玻璃纸、镊子、刀片四、方法与步骤1、制作霉菌浸片观察于清洁载玻片上,滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液,。
取生长好的霉菌平板,用两根大头针小心挑取含少量孢子的菌丝少许,并在乳酚棉蓝液上摊开,小心盖上盖玻片,注意不要产生气泡。
用低、高倍镜观察。
对于根霉和毛霉的培养物,可轻轻打开培养皿,将皿盖(有菌的一面朝上)置于显微镜低倍镜下直接观察,或将皿底(有菌的一面朝上)置于显微镜低倍镜下,观察皿边缘的菌丝。
2、载玻片观察法(1)将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内,再放上U形玻棒,其上放一洁净的载玻片,然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端,盖上皿盖,把数套(根据需要而定)如此装置的培养皿叠起,包扎好,灭菌后备用。
图14-1 载玻片培养示意图1 平皿2 U型玻璃棒3 载玻片4 培养物5 盖玻片6 滤纸(2)在上述载玻片的一边滴加融化的马铃薯培养基,点种孢子,并将盖玻片盖与其上,要求中央的培养基直径不大于0.5cm,盖、载玻片间距离不高于0.1mm。
霉菌的形态观察实验报告
实验目的,通过观察霉菌的形态特征,了解霉菌的生长规律和形态特点。
实验材料和方法,将霉菌培养基均匀涂抹在培养皿上,接种霉菌,放置在25摄氏度下培养一周。
观察霉菌的生长情况,记录下霉菌的形态特征。
实验结果,经过一周的培养,我们观察到霉菌在培养皿上呈现出不同的形态特征。
首先,我们发现霉菌的生长呈现出不规则的菌丝状,有的呈现出圆形,有的呈现出分枝状,有的呈现出丝状。
其次,霉菌的颜色也各不相同,有的呈现出白色,有的呈现出绿色,有的呈现出黑色。
最后,我们还观察到霉菌在培养基上形成了孢子,孢子的形态也各异,有的呈现出囊状,有的呈现出杆状,有的呈现出球状。
实验分析,通过观察和记录,我们发现霉菌的形态特征具有多样性,不同的霉菌在不同的培养条件下呈现出不同的形态特征。
这些形态特征与霉菌的生长环境、营养条件、气候等因素密切相关。
霉菌的形态特征对其生长繁殖、传播途径等具有重要意义,也为我们研究霉菌的生物学特性提供了重要的参考。
实验结论,通过本次实验,我们对霉菌的形态特征有了更深入的了解。
霉菌的形态特征具有多样性和变异性,这为我们研究霉菌的分类、鉴定和防治提供了重要的依据。
同时,我们也意识到了霉菌的生长环境对其形态特征的影响,这对我们预防和控制霉菌的生长具有一定的指导意义。
总结,本次实验通过对霉菌的形态特征进行观察和记录,增加了我们对霉菌的认识,也为我们今后的研究工作提供了重要的参考。
希望通过我们的努力,能够更好地认识和理解霉菌,为人类的健康和生活环境做出更大的贡献。
实验十八霉菌的形态观察目的要求学习霉菌的标本制备方法, 观察根霉、毛霉、青霉、曲霉、白地霉的形态构造。
材料1.菌种: 白地霉(Ceotrichum candidum)摇瓶培养液;根霉(Rhizopus sp. )、毛霉(Mucorsp. )、曲霉(Aspergillus sp. )、青霉(Penicilli—um sp.)平板。
2.染料: 乳酸石炭酸棉蓝液。
3.其他:显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、解剖针、培养皿、玻璃棒、滤纸、20%甘油。
原理霉菌菌丝较大, 细胞容易收缩变形, 孢子容易飞散, 在制备霉菌标本时, 常用乳酸石炭酸溶液作为介质, 具有不使细胞变形, 可杀菌防腐, 不易干燥, 能保持较长时间等优点, 若加入棉蓝, 又具有一定染色效果。
霉菌的有些结构在制片过程中易被破坏, 影响观察, 可采用载玻片培养法。
此法便于直接显微镜下观察, 尤其适用于根霉的假根, 曲霉的足细胞及分生孢子链等结构的生长情况的观察, 并且还可在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。
方法1. 白地霉的观察取一块干净的载玻片, 加一滴白地霉培养液, 加盖玻片制成水浸标本片, 在显微镜下观察白地霉菌丝及节孢子的形态。
2. 其他霉菌观察(1)一般观察法: 加一滴乳酸石炭酸棉蓝液于洁净的载玻片中央, 用解剖针从菌落的边缘处挑取少量带有孢子的菌丝, 放入乳酸石炭酸棉蓝液中, 再细心地把菌丝挑散开, 加盖玻片, 注意不要有气泡产生。
置于显微镜下观察, 菌丝呈蓝色, 颜色的深度随菌龄的增加而减弱。
观察根霉时, 注意观察其菌丝(无横隔)、假根、孢子囊柄(与假根相对着生)、孢子囊、囊轴、囊托、孢子囊孢子及厚垣孢子。
观察毛霉时, 注意观察其菌丝(无横隔)、孢子囊柄、囊轴、孢子囊孢子及厚垣孢子。
观察曲霉时, 注意观察其菌丝(有横隔)、足细胞, 分生孢子梗、顶囊、小梗(形状、层数及在顶囊上的着生情况), 分生孢子的着生情况。
观察青霉时, 注意观察其菌丝(有横隔), 分生孢子梗, 带状枝(小梗的轮数及对称性), 分生孢子的着生情况。
实验八霉菌的形态观察一、实验原理霉菌的营养体是分枝的菌丝体。
霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
菌丝分为营养菌丝与气生菌丝,营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料,从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系,可分化出产生孢子的结构。
菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。
菌丝在显微镜下观察呈管状,有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞,有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。
霉菌的菌落形态较大,质地较疏松,颜色各不相同。
霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。
菌丝、孢子及菌落等特征,因霉菌的种类而异,因而为种类鉴定非常重要的依据。
由于霉菌的菌丝体较粗,而且孢子容易飞散,若在水中溶易变形,显微测量时与实际值存在人为偏差,故观察时将其置于棉蓝乳酚油中,既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用,还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用,真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。
二、主要仪器及设备曲霉(Aspergillus sp.),青霉(Penicillium sp.),根霉(Rhizopus sp.);棉蓝乳酸油染色液,载玻片,盖玻片,解剖针,滤纸,显微镜等。
三、操作步骤1、取95%酒精浸泡的载玻片1块,火焰烧去酒精;2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴;3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中;4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开;5、将1洁净的盖玻片盖于染液上,以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液;6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。
四、注意事项1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开;2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下,否则在盖上异形成气泡。
五、实验报告1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。
3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同?II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察一、实验原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。
实验五霉菌的形态观察、微生物的测微与计数一.实验目的1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法,初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据。
2.学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。
3.了解血球计数板的构造和使用方法。
学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。
4.总结并掌握细菌、放线菌和霉菌的鉴别方法。
二、实验原理1. 霉菌定义及用途⏹霉菌不是真菌分类中的名词,而是丝状真菌的统称。
⏹霉菌在自然界中广泛分布,与食品的关系密切,是人类在实践活动中最早利用的一种微生物,如早期进行的酱和酱油的制作等。
⏹霉菌也可以使食品发生腐败变质或产生毒素,影响人体健康甚至危及生命。
2.霉菌特征⏹霉菌可产生分支的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。
⏹菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
⏹霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多(约3-10um),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。
因此,用低倍镜即可观察。
3.霉菌的菌落⏹松:由于霉菌的菌丝较粗较长,菌丝体疏松,因而形成的菌落也比较疏松,呈绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状;⏹大:菌落形态较大,一般比细菌和放线菌的菌落大几倍到几十倍,有时会长满整个培养皿;⏹干:外观干燥,不透明;⏹挑:菌落与培养基间的连接紧密,不易挑取;⏹颜色:由于基内菌丝、气生菌丝、孢子颜色不同,不同的霉菌菌落表面呈现不同的颜色,菌落正反面、边缘与中心颜色常不一致。
同一种霉菌在不同的培养基上或不同的培养条件下所形成的菌落特征可能有所不同。
但同一种霉菌在相同的培养条件下和培养基上所形成的菌落特征相对稳定。
菌落特征是霉菌鉴定的重要依据之一。
4、霉菌的菌丝形态⏹构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。
菌丝的宽度一般为3-10μm,比放线菌菌丝宽很多倍,其菌可伸长并产生分枝。
许多分枝的菌丝相互交织在一起,称为菌丝体。
⏹一部分菌丝存在于培养基质中吸收营养,称为基内菌线或营养菌丝。
实验2 霉菌的形态观察一、实验目的1. 学会对霉菌的制片方法。
2.了解和熟悉毛霉、根霉、曲霉、青霉的形态构造。
二、实验原理霉菌除少数为单细胞外,基本构造都是分枝或不分枝的菌丝。
菌丝体无色透明或呈暗褐色至黑色;或呈现鲜艳的颜色。
在固体培养基上长成绒毛状或棉絮状。
菌丝内部构造在显微镜下观察时皆呈管状。
低级的霉菌其丝状管道中无横隔,因此其菌丝体内含有许多细胞核。
而在一些比较高等的霉菌丝状管道中皆有横隔,由横隔将菌丝隔成许多细胞。
霉菌的繁殖方式很多,有各种各样无性及有性的繁殖方式,是分类时的重要依据,另外菌丝体与菌落形态的特征也是鉴别的依据。
霉菌菌丝和孢子通常比细菌和放线菌粗得多。
常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此用低倍镜即可观察。
观察霉菌形态有多种方法,常用的有以下三种:(1)直接制片观察法:是将培养物置于乳酸石炭酸溶液中,制成霉菌制片镜检。
用此溶液制成的霉菌制片的特点是:细胞不变形、具有防腐作用、不易干燥、能保持较长时间、能防止孢子分散等。
必要时,还可用树胶封固,制成永久标本长期保存。
(2)载玻片培养观察法(如下图):用无菌操作将少量培养基琼脂置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片与盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后,将载玻片上的培养物置显微镜下观察。
这种方法可以保持霉菌的自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。
(3)玻璃纸培养观察法:霉菌与放线菌的玻璃纸培养观察方法相似。
该方法用于观察不同生长阶段的霉菌的形态,也可获得良好的效果。
三、实验试剂与仪器1. 菌种:毛霉、根霉、曲霉、青霉等。
2. 溶液或试剂:乳酸石炭酸液3. 仪器或其他用具:显微镜、擦镜纸、接种环、接种钩、载玻片、盖玻片等。
四、实验步骤霉菌形态的观察——直接制片观察法观察霉菌时,除直接观察斜面或平皿的菌落外,制取霉菌标本时,由于菌丝粗大而且孢子很容易分散,放在水中观察细胞容易变形,因此,在制作标本时不用水,而用乳酸石炭酸溶液。
霉菌形态观察注意事项
霉菌形态观察是一项微生物实验中常用的方法,用于观察霉菌的外观特征和结构。
在进行这一观察时,需要注意以下几点:
1. 器材消毒:在进行霉菌形态观察前,需要对使用的培养皿、显微镜和架子等器材进行消毒处理,以避免外界的污染。
2. 防护措施:霉菌会散发出一种特殊的气味,且有些霉菌可能对人体健康有害,因此在进行观察时,应佩戴手套、口罩和实验室专用的防护眼镜,以保护自己的安全。
3. 无菌操作:在取样过程中,应采取无菌操作,使用已经灭菌的工具,避免细菌和其他霉菌的污染影响观察结果。
4. 使用显微镜:将取得的霉菌样品放置在显微镜干净的玻璃片上,用适当的显微镜镜头进行观察。
可以根据需要调整显微镜的放大倍数,以获得清晰的观察结果。
5. 观察条件:在观察霉菌时,室温和湿度是需要特别注意的条件。
霉菌的生长往往需要一定的湿度和温度,因此在观察前应控制好这些条件,以促进霉菌的生长和形态表现。
6. 观察时间:霉菌的形态会随着时间的推移而发生变化,因此在进行观察时,要选择适当的时间点,以展示出较完整和准确的形态特征。
7. 观察记录:在观察过程中,应及时记录所观察到的形态特征,
并尽可能使用图片或短视频等方式进行保存,以便于后续分析和比较。
总之,霉菌形态观察需要在无菌条件下、注意安全、控制好观察条件和时间等方面进行正确操作,以获得准确和可靠的观察结果。
实验三、霉菌的形态观察一、实验目的:(1)观察霉菌的群落特征(2)观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态(3)掌握霉菌的制片方法二、实验原理:霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。
在超市的条件下,霉菌可以生长出丝状,绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
单个菌丝在显微镜下观察呈管状,有的霉菌其菌丝有横隔膜,将菌丝分割为多细胞,成为有隔菌丝。
有点霉菌,其菌丝没有横隔膜,称为无隔菌丝。
菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。
菌落形态较大,质地较疏松,其疏松程度不等,颜色各异。
菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。
在观察时,要注意菌丝直径大小,菌丝体有无横隔膜,营养菌丝有无假根,无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。
由于霉菌的菌丝较大,而且孢子容易飞散,如将菌丝体制与水中易变形,故观察时用浸片法将其置于乳酸石碳酸棉溶液中、菌丝和孢子染成蓝色,保持菌丝体圆形,使细胞不易干燥,并有杀菌作用。
三、实验材料:(1)菌种:产黄青霉、黄曲霉、黑根霉(2)时间和溶液:乳酸石炭酸棉溶液(3)仪器和其他物品:显微镜、接种环、载片、擦镜纸等四、实验内容:产黄青霉:顶囊分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黄曲霉:分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黑根霉:假根匍匐枝孢子顶囊孢子囊舟孢子囊孢子囊孢子五、实验结果:六、讨论(1)霉菌的无性繁殖和有性繁殖的孢子各有几种?无性繁殖——无形孢子:游动孢子、包囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子、芽孢子掷孢子有性繁殖——有性孢子:卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子(2)细菌、放线菌、霉菌菌落特征如何识别?。
实验八霉菌的形态观察一、实验原理霉菌的营养体是分枝的菌丝体。
霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
菌丝分为营养菌丝与气生菌丝,营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料,从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系,可分化出产生孢子的结构。
菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。
菌丝在显微镜下观察呈管状,有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞,有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。
霉菌的菌落形态较大,质地较疏松,颜色各不相同。
霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。
菌丝、孢子及菌落等特征,因霉菌的种类而异,因而为种类鉴定非常重要的依据。
由于霉菌的菌丝体较粗,而且孢子容易飞散,若在水中溶易变形,显微测量时与实际值存在人为偏差,故观察时将其置于棉蓝乳酚油中,既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用,还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用,真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。
二、主要仪器及设备曲霉(Aspergillus sp.),青霉(Penicillium sp.),根霉(Rhizopus sp.);棉蓝乳酸油染色液,载玻片,盖玻片,解剖针,滤纸,显微镜等。
三、操作步骤1、取95%酒精浸泡的载玻片1块,火焰烧去酒精;2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴;3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中;4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开;5、将1洁净的盖玻片盖于染液上,以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液;6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。
四、注意事项1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开;2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下,否则在盖上异形成气泡。
五、实验报告1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。
3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同?II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察一、实验原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。
实训七霉菌的形态观察一、实验目的1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法;2、了解常见霉菌如青霉、黑曲霉、毛霉、根霉的基本形态特征;3、学会用直接制片观察法和载玻片培养法观察霉菌形态。
二、实验原理(一)霉菌形态特征霉菌是真核微生物,由复杂的菌丝体组成。
菌丝体为无色透明或暗褐色至黑色,或呈现鲜艳的颜色。
菌丝较粗大,皆呈管状,分枝或不分枝。
固体培养基上的霉菌菌丝可分为营养菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝。
①营养菌丝,深入培养基内吸收营养物质;②气生菌丝,向空中生长的营养菌丝;③繁殖菌丝,部分气生菌丝发育到一定阶段,分化为繁殖菌丝,产生孢子。
繁殖菌丝及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
根据菌丝中是否存在隔膜,可把霉菌菌丝分成无隔膜菌丝和有隔膜菌丝两类。
低等真菌的菌丝无隔膜,整团菌丝体就是一个单细胞,其中含有多个细胞核。
高等真菌的菌丝有隔膜,被隔膜隔开的一段菌丝就是一个细胞,菌丝体由很多个细胞组成,每个细胞内有一个或多个细胞核。
隔膜上有一至多个小孔,使细胞间的细胞质和营养物质可以相互沟通。
(二)霉菌菌落特征霉菌的菌落较疏松,常呈绒毛状(曲霉)、棉絮状(毛霉)、蜘蛛网状(根霉)或毡毯状(青霉)的菌落。
通常菌落大小比细菌和放线菌菌落大几倍到几十倍。
在固体培养基上菌落最初通常是白色或浅色,长出各种颜色的孢子后,根据孢子的不同形状、构造和颜色,菌落表面呈不同结构和色泽,如黄、绿、青、黑、橙等。
有些霉菌的培养基正面和反面呈现不同的颜色,这是因为菌丝分泌一些水溶性色素扩散到培养基内。
在不同成分的培养基上,同一霉菌可形成不同特征的菌落,但不同霉菌在固定的培养基上形成菌落的形状、大小、颜色等特征是稳定的,因此菌落特征是鉴定霉菌的重要依据之一。
(三)霉菌的形态观察方法霉菌的菌丝较粗大,细胞易收缩变形,而且孢子容易分散,所以常用乳酸石炭酸棉蓝染色液制片,可使细胞不变形。
染液呈蓝色,可增强反差,同时具有防腐作用,且不易干燥,防止孢子飞散,并能保持较长时间。
霉菌的形态观察
一、【实验目的】
1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法
2、了解四类常见霉菌(曲霉、毛霉、青霉、根霉)的基本形态特征
二、【实验原理】
1、霉菌
霉菌可产生复什分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约3~10μm ),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。
2、PDA培养基
PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它是一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
3、载玻片培养观察法(小室培养法)
观察霉菌的形态有多种方法,常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)。
载玻片培养观察法:用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌记载载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后,将载玻片上的培养物置显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期培养物。
三、【实验器材】
1、菌种:曲霉 ( Aspergillus sp. ) ,青霉,根霉 ( Rhizopus sp. ) ,
毛霉( Mucor sp. ),培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物
2、培养基:马铃薯培养基(简称PDA)(配方见附表)
3、仪器或其他用具:平皿,载玻片,盖玻片,无菌吸管,U 型玻棒,
解剖刀,镊子,50%乙醇,20%甘油,显微镜,接种环,
酒精灯等
四、【操作步骤】
1.配置PDA培养基:
按配方配置马铃薯培养基200ml,其做法是先将马铃薯洗净去皮,再切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即马铃薯块可),先用一层纱布过滤,再用六层纱布过滤,取滤液,加热,加入葡萄糖补水至200ml。
将其分为两份各100ml,取其中一份加入琼脂,加热搅拌至琼脂融化,稍冷却均匀倒入20只试管中(每只约5ml),将剩余100ml与等量琼脂倒入100ml锥形瓶中。
加塞,包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出冷却备用。
2、载玻片培养观察法(小室培养法)
(1)、培养小室的灭菌:
如图1,将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内,再放上U形玻棒,其上放一洁净的载玻片,然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端,盖上皿盖,把数套(根据需要而定)如此装置的培养皿叠起,包扎好,于110℃灭菌20~30分钟,烘干后备用。
图1 载玻片培养示意图
1 平皿
2 U型玻璃棒
3 载玻片
4 培养物
5 盖玻片
6 滤纸
(2)、琼脂薄片的制作:
取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6~7ml 注入另两个灭菌平皿中,使之凝固成薄层。
通过无菌操作,用无菌刀片将其切成 1cmx1cm的琼脂块,用已用酒精灭过菌的镊子轻轻夹起琼脂块放在已灭菌的培养皿内的载玻片上,每片上放置2块
(3)、接种:
通过无菌操作,用接种环从斜面培养物上挑取(肉眼可见的)少量霉菌孢子,轻轻点在琼脂块的边缘上,用无菌镊子夹着立在载玻片旁的盖玻片盖在琼脂块上,再盖上皿盖
(4)、培养:
通过无菌操作,在培养小室中的圆滤纸上加 2~3ml 灭菌的20 %的甘油(用于保持平皿内的湿度 ) ,盖上皿盖,28 ℃正置培养一周。
(5)、镜检:
根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察,必要时换高倍镜。
五、【注意事项】
载玻片培养观察中,注意无菌操作,接种量要少,同时尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上,否则培养后菌丝过于稠密影响观察。
六、【实验结果及绘图】
曲霉根霉毛霉青霉
四种霉菌形态特征图
菌种曲霉根霉毛霉青霉
形态特征营养菌丝具
有分隔;气
生菌丝的一
部分形成长
而粗糙的分
生孢子梗,
顶端膨大成
球状顶囊,
表面辐射出
一层或两层
小梗,小梗
上着生成串
的球形分生
孢子。
分生
孢子梗生于
足细胞上,
并通过足细
胞与营养菌
丝相连。
菌丝无隔、
多核、分枝
状,有匍匐
菌丝和假
根。
在假根
的上方直立
地生长出一
至数根孢囊
梗,其顶端
膨大成球形
孢子囊。
囊
的基部有囊
托,中间有
球形或半球
形囊轴。
囊
内产大量孢
囊孢子,有
性生殖时由
不同性别的
菌丝或匍匐
菌丝上生出
配子囊,配
子囊双双异
宗配合形成
一接合孢
子。
菌丝无隔、
多核、分枝
状,无假根
或匍匐菌
丝。
菌丝体
上直接生出
单生、总状
分枝或假轴
状分枝的孢
囊梗。
各分
枝顶端着生
球形孢子
囊,无囊托。
菌丝有横
隔,分生孢
子梗亦有
横隔,光滑
或粗糙。
基
部无足细
胞,顶端不
形成膨大
的顶囊,其
分生孢子
梗经过多
次分枝,产
生几轮对
称或不对
称的小梗,
形如扫帚,
称为帚状
体。
小梗顶
端有孢子。
四种霉菌形态特征表
【摄影】
青霉菌 10x10 根霉菌 10x10
曲霉10x10
帚状分支假根
足细胞
【绘图】
马铃薯去皮,切成块煮沸20~30min,然后用1层及6层纱布过滤,再加糖及琼脂,溶化后补水至所需量,110℃灭菌20~30min。
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