漆酶活性检测试剂盒说明书 微量法

乳酸脱氢酶（LDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC0685规格：100T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体7mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入1.3mL双蒸水充分溶解备用，配好后可分装成小管-20℃保存，可保存两周，禁止反复冻融；试剂三：液体7mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体25mL×1瓶，4℃保存；丙酮酸钠标准液：液体1mL×1支，4℃保存，2μmol/ml。

产品简介：LDH（EC 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着NAD+/NADH之间互变。

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：1.细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2.血清（浆）样品：直接检测。

3.丙酮酸钠标准液：取100μL标准液，倍比稀释至1、0.5、0.25、0.125、0μmol/mL，用2、1、0.5、0.25、0.125、0μmol/mL做标准曲线。

本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！-上海液质检测技术有限公司第1页共2页酸性转化酶（AI ）活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4153规格：100T/48S微量法产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶4℃保存试剂一液体40mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体20mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入20mL 试剂一充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；2、标准品：10mg 葡萄糖，临用前加入1mL 蒸馏水溶解，制备10mg/mL 葡萄糖标准液备用。

产品说明：蔗糖转化酶（Invertase ，Ivr ）催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。

根据最适pH ，Ivr 分为酸性转化酶（AI ）和中性转化酶（NI ）两种类型。

AI(EC 3.2.1.26)主要存在于细胞液泡或自由空间中，最适pH 为4.5~5.0（酸性），通过降解液泡中蔗糖，调节液泡中蔗糖的利用和果实内糖类的积累。

AI 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在540nm 有特征光吸收，在一定范围内540nm 光吸收增加速率与AI 活性成正比。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）按照组织质量（g ）：提取液体积（mL ）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。

吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC4105规格：100T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加入5mL蒸馏水备用。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加入3mL蒸馏水备用。

试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存。

临用前加入5.71mL50%乙醇（乙醇（V）：HO（V）=1：1）溶解备用。

2可以分装后-20℃保存，避免反复冻融。

试剂四：液体30mL×1瓶，4℃保存。

试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加入15mL试剂四溶解。

O（V）标准品：粉剂×1支，-20℃保存，10mg吲哚乙酸。

临用前加入1.14mL50%乙醇（乙醇（V）：H2=1：1）溶解制成50μmol/mL的标准溶液。

可分装后-20℃保存。

产品说明：吲哚乙酸（IAA）在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破坏失去活性。

IAA氧化酶能调节植物体内吲哚乙酸的的水平，从而影响植物的生长。

作用生成红色产物，在530nm下有最大吸收峰。

酶活力的大小可用破坏IAA IAA在无机酸条件下与FeCl3的速率表示。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、乙醇、冰和蒸馏水。

测定操作：1、样本处理：第1页，共3页（1）组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。

12000g4℃离心15分钟，取上清，置冰上待测。

（2）细胞或微生物样品的制备：先收集细胞或微生物样品到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。

12000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。

2、操作步骤：（1）可见分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至530nm。

过氧化氢酶（CAT）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC0205规格：100T/96S 产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体125μL×1瓶，4℃保存。

产品说明：CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H 2O 2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。

H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解H 2O 2，使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔（UV 板）、研钵、冰和蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

二、测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上，调节波长至240nm，蒸馏水调零。

2、CAT 检测工作液的配制：用时在试剂二中加入25mL 试剂一，充分混匀，作为工作液。

3、测定前将CAT 检测工作液在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min 以上。

4、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL 样本和190μL 工作液，立即混匀并计时，记录240nm 下初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2。

计算ΔA＝A1-A2。

三、CAT 活性计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1、血清（浆）CAT 活力的计算:单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。

微量法土壤脲酶（S-UE）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：UPLC-MS-4045规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体2mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂四A液液体1mL×1支2-8℃保存试剂四B液液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体0.3mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯；2、试剂二：临用前取1瓶加入2.7mL蒸馏水，充分溶解待用，用不完的试剂2-8℃保存4周；3、试剂四：临用前将A液和B液按体积比1：4混合待用；用多少配多少；4、试剂五：液体置于试剂瓶内EP管中，使用前需先离心。

临用前加入5.7mL蒸馏水，混匀，待用；用不完的试剂2-8℃保存两周；5、标准品：1mg/mL氮标准液。

产品说明：S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。

土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。

土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。

Urea S-U E NH4++H2CO3NH4++ClO-+Phenol Alkaline solution Indophenol Blue(630nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC0635规格：100T/48S产品内容：试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体1mL×1瓶，-20℃保存。

试剂四：液体35mL×1瓶，4℃保存。

试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存。

试剂六：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入4.5mL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。

产品说明：NOX（EC1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD。

该酶不仅参与NAD的再生，而且与免疫反应密切相关。

NOX能够将NADH氧化为NAD，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水操作步骤：一、样品测定的准备：1、组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：2、准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

3、将匀浆600g，4℃离心5min。

4、将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。

5、将上清液转移至另一EP管中，用于线粒体中泄露NOX活性测定。

6、沉淀即为线粒体，加入200uL试剂二和2uL试剂三，用于NOX活性测定。

7、NOX总酶活即为上清中NOX活性与沉淀中NOX活性之和。

二、测定步骤和加样表：1、可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。

2、试剂四37℃保温放置。

试剂名称（µL）测定管对照管试剂四175175试剂五2525样本1010蒸馏水40试剂六40-将上述试剂按顺序在微量玻璃比色皿/96孔板中操作，加入试剂六后立即混匀，同时开始计时，在600nm 波长下记录20秒时的初始吸光度A1，迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃水浴中，准确反应1分钟。

抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC0225规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体60mL×2瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加3mL 蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体3mL×1瓶，4℃保存。

产品说明：APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。

APX 具有多种同功酶，分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上。

APX 催化H 2O 2氧化AsA，是植AsA 的主要消耗者。

APX 的活性直接影响到AsA 的含量，APX 与AsA 具有一定的负相关性。

APX 催化催化H 2O 2氧化AsA，通过测定AsA 氧化速率，来计算得APX 活性。

自备仪器用品：低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV 板、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g 样品，加1mL 试剂一，冰上充分研磨，13000g4℃离心20min，取上清液。

二、测定：1.分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长到290nm，用蒸馏水调零。

2.试剂一在25℃中预热30min 以上。

3.空白管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL 蒸馏水、140μL 预热的试剂一、20μL 试剂二和20μL 试剂三，迅速混匀后在290nm 测定10s 和130s 光吸收A1和A2，△A 空白管=A1-A2。

4.测定管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL 上清液、140μL 预热的试剂一、20μL 试剂二和20μL试剂三，迅速混匀后在290nm测定10s和130s光吸收A3和A4，△A测定管=A3-A4。

三、APX活性计算：a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下（1）按蛋白浓度计算活性单位定义：每毫克蛋白每分钟氧化1μmol AsA为1U。

β-半乳糖苷酶（β-GAL）活性检测试剂盒说明书微量法UPLC-MS-4225100T/48S试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2支-20℃保存试剂二液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体15mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用取1支加入1.25mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融（1瓶粉剂溶解后可做100T，为了延长使用时间，此产品多给1瓶粉剂）。

2、标准品：5μmol/mL的对硝基苯酚溶液。

β-GAL(EC3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能够催化β-半乳糖苷化合物中β-半乳糖苷键水解，此外还具有转半乳糖苷的作用。

β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量，还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解，释放自由的半乳糖。

β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。

p-Nitrophenylβ-D-Galactopyranosideβ-GAL p-Nitrophenol(400nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞的处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），15000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。

中性蛋白酶（NP）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC2295规格：100T/48S产品内容：提取液：液体55mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加4mL蒸馏水溶解。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。

临用前加入4mL提取液，沸水浴中磁力搅拌溶解。

试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂四：液体4mL×1瓶，4℃保存。

标准品：液体1mL×1支，0.25μmol/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存。

产品说明：NP在一定的温度和中性pH条件下，催化水解蛋白质。

由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点，中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。

中性条件下，NP催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。

试验所需自备仪器和用品：研钵、台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5mL EP管和蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：称约0.1g组织，加入1ml提取液，冰上充分研磨，10000rpm4℃离心10min，取上清，即粗酶液，置冰上待测。

或直接称取0.1g酶制品，加入1mL提取液，置冰上待测。

二、测定：1.分光光度计预热30min以上，调节波长到680nm，蒸馏水调零。

2.试剂一、试剂二和试剂三置于30℃水浴保温30min以上。

3.样本测定（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）试剂名称（µL）对照管测定管空白管标准管粗酶液2020试剂一40试剂二40混匀后30℃水浴保温10min试剂一40试剂二40混匀后10000rpm4℃离心10min，取上清上清4040蒸馏水40标准品40试剂三200200200200试剂四40404040混匀后30℃水浴保温20min取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板，于680nm测定光吸收，分别记为A对照管、A测定管、A空白管、A标准管，并计算△A测定=A测定管-A对照管、△A标准=A标准管-A空白管。

土壤碱性磷酸酶（S-AKP/ALP）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：UPLC-MS-4053规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体42mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体 2.5mL×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×2支2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1.试剂二：临用前加100mL蒸馏水充分溶解，2-8℃保存8周；2.试剂四：临用前取1支加576μL无水乙醇（自备），24μL蒸馏水充分溶解。

用不完的试剂2-8℃保存一周（变褐色后不能再使用，一瓶即可以实验100T，为延长反应时间故多给一瓶）；3.标准品：0.5μmol/mL苯酚标准液。

产品说明：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。

土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

碱性环境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-A KP/ALP活性。

S-AKP/ALP，OH-Phenyl Disodium Phosphate Phenol+Na2HPO4Alkaline conditionsPhenol+2,6-Dibromobenzoquinone Chlorimide Indoxyl(660nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、研钵、蒸馏水、30-50目筛、乙醇和甲苯（不允许快递）。

酶活力检测方法（愈创木酚法）1 酶活力定义于30℃, pH=4.5 条件下，1分钟催化氧化1umol愈创木酚所需酶量即为1个酶活力单位，以 U表示。

2 试剂和溶液2.1 愈创木酚基础反应液：2.1.1 取137.4μL愈创木酚用蒸馏水溶解，2.1.2 再称取4.5g丁二酸，2.1.3 然后用0.1mol/L的NaOH溶液调pH至4.5，最后定容至1000mL3 仪器和设备3.1 分光光度计，1cm比色皿3.2 恒温水浴 30士0.2 ℃3.3 秒表3.4 试管4 分析步骤4.1 将待测酶液稀释到吸光度值在0.2—0.8范围内4.2 取稀释后酶液0.6mL加入到试管中，再加入2.4mL愈创木酚基础反应液；4.3 将加完酶液和反应液的试管放置在30℃水浴锅中，水浴30min；4.4 水浴完毕，用分光光度计在465nm下测其吸光度5 计算酶活（U/L）=n×A×13.89，式中:A——吸光度n——稀释倍数13.89——换算系数酶活力检测方法（ABTS法）1 酶活力定义于30℃, pH=4.0 条件下，1分钟催化氧化1umolABTS所需酶量即为1个酶活力单位，以 U表示。

2 试剂和溶液2.1 ABTS溶液：0.25gABTS溶于30ml超纯水中，装于棕色试剂瓶中待用。

2.2 酒石酸钠缓冲溶液（0.1M，pH=4.0）：2.3g酒石酸钠溶用超纯水溶解（用1mol/L 的丁二酸将pH调至4.0）定容至100ml容量瓶，放试剂瓶中待用3 仪器和设备3.1 分光光度计，1cm比色皿3.2 恒温水浴 30士0.2 ℃3.3 秒表3.4 试管4 分析步骤4.1 将待测酶液稀释到吸光度值在0.2—0.8范围内4.2 取酒石酸钠缓冲溶液2.85ml+ABTS溶液0.1ml+稀释后的酶液0.05ml于试管内；4.3 将加完酶液和反应液的试管放置在30℃水浴锅中，水浴30min；4.4 水浴完毕，用分光光度计在420nm下测其吸光度5 计算酶活（U/L）=n×A×55.56，式中:A——吸光度n——稀释倍数55.56——换算系数。

漆酶（Laccase）试剂盒使用说明货号：BC1630规格：50T/48S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存。

工作液：粉剂×2瓶，4℃避光保存，临用前加15mL试剂一溶解。

产品说明：漆酶（CE1.10.3.2）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

漆酶分解产物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增长速率，可计算得漆酶的活性。

自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。

操作步骤：一、酶液提取1、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500-1000:1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率30％或300W，超声3s，间隔7s，总时间3min），12000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积（ml）为1:5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆；10000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、培养液：直接待检。

二、测定操作表对照管测定管样本（mL）0.1煮沸样本（mL）0.1工作液（mL）0.60.660℃，3min，测定420nm处吸光值A，△A=A测定管-A对照管三、酶活性计算公式：1．按照蛋白浓度计算酶活性定义：每毫克蛋白每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位（U）漆酶活性（U/mg prot）=△A÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr)÷T=65×△A÷Cpr 2．按照样本质量计算酶活性定义：每克样品每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位（U）漆酶活性（U/g）=△A÷(ε×d)×V反总÷(V样×W)÷T=65×△A÷W3．按照细胞数量计算酶活性定义：每104个细胞每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位（U）漆酶活性（U/104cell）=△A÷(ε×d)×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总)÷T=65×△A÷细胞数量4．按照液体体积计算酶活性定义：每104个细胞每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位（U）漆酶活性（U/L）=△A÷(ε×d)×V反总÷V样÷T=65000×△Aε：ABTS毫摩尔消光系数；36L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.7mL；V样：反应中样本体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T:反应时间，3min注意事项：1.工作液需临用前配制，并且尽快使用，4℃保存一周，若变色则不能使用。

植酸酶活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC3145规格：100T/48S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。

缓冲液：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2支，4℃保存，临用前加缓冲液4mL配制，现用现配。

试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。

显色剂：粉剂×6瓶，4℃保存，临用前根据用量每瓶加0.4mL双蒸水溶解，再加1.6mL试剂三混匀。

样本处理产品说明：植酸酶（phytase）是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸（盐）的一类酶的总称，属磷酸单酯水解酶，它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷，降低粪便中的磷含量，减轻对环境的污染，改善营养成分的吸收和利用，因此具有极其广泛的研究和应用价值。

测定原理植酸酶在一定温度和pH值条件下，水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物，无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物，在700nm处有特征吸收峰，根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。

自备实验用品及仪器天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅，超声溶解器，回旋式振荡器。

操作步骤：1.酶制剂：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：500~1000的比例（建议称取约0.001g，加入1mL提取液）第1页，共4页加入提取液，在超声波溶解器上溶解15min，再用回旋式振荡器振荡15min，待测。

2.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，在超声波溶解器上溶解15min，再用回旋式振荡器振荡15min，4℃，4000g离心10min，取上清待测。

3.饲料样品：饲料烘干粉碎，过40目筛，按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，在超声波溶解器上溶解15min，再用回旋式振荡器振荡15min，4℃，4000g离心10min，取上清待测。

中性木聚糖酶（NEX）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC2595规格：100T/48S试剂组成和配制：缓冲液：液体65mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

产品介绍：木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX一般分离自最适生长pH为6-8的微生物。

NEX在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算NEX活力。

自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

操作步骤一、粗酶提取：1.发酵液：发酵液于8000g，4℃，离心15min，取上清，作为待测样品。

2.酶干粉：称约0.1mg，加缓冲液1mL，震荡溶解待测。

二、测定操作表：第1页，共3页1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至540nm。

2、操作表对照管测定管样品（μL）6060缓冲液（μL）9090试剂一（μL）60试剂二（μL）90混匀，盖紧瓶盖，50℃水浴，反应30min，立即沸水浴10min灭活。

(注意不要让盖子爆开，以免进水，改变了反应体系)试剂一（μL）60试剂二（μL）90混匀，沸水浴显色5min，取200µL于微量石英比色皿/96孔板中，对照管调零，测定A540。

计算公式：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=1.6904x+0.0058，R2=0.99891.发酵液NEX活力计算酶活定义：50℃，pH6.0条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生1nmol还原糖所需的酶量为一个中性木聚糖酶的活力单位。

脂肪酸合成酶（FAS）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC0555规格:100T/96S产品内容：试剂一：液体×1瓶，－20℃保存。

用前1d取出置于4℃充分解冻后混匀。

试剂二：粉剂×1瓶。

临用前加入440μL试剂四，充分溶解。

试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加入440μL试剂四，充分溶解。

试剂四：液体×1瓶,4℃保存。

试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存。

临用前加入840μL试剂四，充分溶解。

产品说明：FAS是脂肪酸合成关键酶，催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。

FAS普遍表达于各种组织细胞中，在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。

FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+；NADPH在340nm有吸收峰，而NADP+没有；通过测定340nm光吸收下降速率，计算FAS活性。

试验中所需的仪器和试剂：研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、可调式移液枪和蒸馏水。

操作步骤：一、粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积（mL）为1:5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。

16000rpm，4℃离心40min，取上清置于冰上待测。

2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000:1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3分钟）；然后16000rpm，4℃离心40min，取上清置于冰上待测。

二、FAS测定操作：1.分光光度计预热30min，调节波长到340nm，蒸馏水调零。

2.试剂四置于40℃水浴中预热30min以上。

3.空白管：在500μLEP管中依次加入20μL蒸馏水、4μL试剂二、4μL试剂三、164μL试剂四和8μL试剂五，迅速混匀后于340nm处测定吸光值，记录第30s和90s时吸光值，分别记录为A1和A2。

过氧化氢酶（CAT）活性检测试剂盒说明书（钼酸铵法）微量法货号：UPLC-MS-4535规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体75mL×1瓶4℃保存试剂一液体15mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×2瓶4℃保存标准品液体0.5mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前取1瓶试剂二加入12.5mL蒸馏水，充分溶解，用不完的试剂4℃保存一周。

2、30μmol/mL标准液的配制：标准品置于试剂瓶内EP管中，使用前需先离心。

本试剂盒所提供标准品为1mmol/mL H2O2标准溶液，临用前取0.15mL标准品加入4.85mL试剂一稀释或者根据样本量按照比例配制，充分混匀，即为30μmol/mL标准液，现配现用。

产品说明：CAT(EC1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。

H2O2可与钼酸铵反应形成稳定的黄色复合物，在405nm处有强烈吸收峰，且其吸光值大小与过氧化氢浓度成正比。

通过测定反应体系中剩余的H2O2量，得出被CAT催化分解的H2O2量，进而反映CAT的活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、恒温水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备：a、细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率200W，超声3s，间隔9s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

糖原磷酸化酶b(GPb)活性检测试剂盒说明书微量法货号：UPLC-MS-4184规格：100T/48S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1支2-8℃保存试剂三粉剂×1支2-8℃保存试剂四粉剂×1支-20℃保存试剂五粉剂×2支-20℃保存试剂六粉剂×2支-20℃保存试剂七粉剂×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入0.5mL蒸馏水，充分混匀；2、试剂三：临用前加入0.5mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；3、试剂四：临用前加入1.25mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；4、试剂五：临用前每支加入1mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；一支即可做100T，为延长试剂盒使用时间故多给一支。

5、试剂六：临用前每支加入1mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；一支即可做100T，为延长试剂盒使用时间故多给一支。

6、试剂七：临用前加入2mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；7、工作液的配制：临用前根据实验所需用量，按照试剂一：试剂二：试剂三：试剂四=148μL:4μL:4μL:4μL（1T的量）的比例，充分混匀，现用现配。

产品说明：糖原磷酸化酶是糖原分解代谢中的关键酶，催化糖原的磷酸化反应。

该酶分为有活性的糖原磷酸化酶a （Glycogen phosphorylase a,GPa）和无活性的糖原磷酸化酶b（Glycogen phosphorylase b,GPb）两种形式。

糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a的催化下进行。

未添加激活剂时，糖原磷酸化酶a催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH，在340nm下测定NADPH上升速率，即可反映糖原磷酸化酶a活性。