香根草外植体的选择及植株再生试验
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外植体选择的原则外植体选取的原则是什么?1、选择优良的种质无论是离体培养繁殖种苗,还是进行生物技术研究,培养材料的选择都要从主要的植物入手,选取性状优良的种质或特殊的基因型。
对材料的选择要有明确的目的,具有一定的代表性,以提高成功的几率,增加其实用价值。
2、选择健壮的植株选取发育正常的器官或组织,再生能力强,组培易成功。
组织培养用的材料,最好是从生长健壮的无病虫的植株上选取发育正常的器官或组织。
因为这些器官或组织代谢旺盛,再生能力强,培养后比较容易成功。
此现象可能是由于外植体内部的植物激素水平能够在接种后得以维持所致。
3、选择适宜的部位植物组织培养几乎在植物体的各个部位都获得了成功,这些部位包括茎尖、茎段、皮层及维管组织、髓细胞、表皮、块茎的储藏薄壁细胞、花瓣、根、茎、子叶、鳞茎、胚珠和花药等。
但是不同种类的植物以及同一植物的不同器官对诱导条件反应是不一致的,有的部位诱导分化率高,有的部位很难脱分化,或者再分化频率很低。
4、选择适当的时期组织培养选择材料时,要注意植物的生长季节和生长发育阶段,对大多数植物而言,应在其开始生长或生长旺季采样,此时材料内源激素含量高,容易分化,不仅成活率高,而且生长速度快,增殖率高。
若在生长末期或已进入休眠期时采样,则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。
花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材,这时比较容易形成愈伤组织。
百合在春夏季采集的鳞茎、片,在不加生长素的培养基中,可自由地生长、分化;而其他季节则不能。
叶子花的腋芽培养,如果在1~2月采集,则腋芽萌发非常迟缓;而在3~8月采集,萌发的数目多,萌发速度快。
对于大多数植物而言,应在其生长季节开始时采样。
在生长末期或已进入休眠期时取样,外植体可能对诱导反应迟钝或无反应,较难成活。
5、考虑器官的生理状态和发育年龄一般认为,生理年龄小的幼嫩组织较生理年龄大的成熟衰老组织具有较高的形态发生能力。
随着组织年龄的增加,器官的再生能力逐渐减弱甚至完全失去再生能力。
香根草的种子繁殖方法既栽培技术(1)适时采种:在中国广东省吴川市香根草原产地,每年11月中旬,即时采收种子,采种时将香根草整穗采下装入通风的布袋内,晾干,制种备用;(2)种子发芽:将香根草种子经1-2‰HgCl2溶液消毒10分钟,然后在常温下用自来水浸泡1-6天,之后将种子置于铺有2-3层滤纸的培养皿内,洒水,之后再放置于培养箱内,培养温度控制在20℃-35℃,培养15-16天;(3)幼苗移栽与管理:当已发芽的小苗长到1-2cm时,将其移栽至上面铺有3-5cm的沙子花盆中,盆内土壤为沙壤土,7-10天后,小苗扎限生长,此时少量浇施1‰的硝酸铵;花盆应放在有漫射光照的室内或略微遮荫的窗台上,不宜曝晒;30天左右,幼苗长到10-15cm,小心移栽至苗圃。
栽培技术虽然香根草是一种典型的热带植物,对气候条件的适应范围较广,但它可在年降雨量为300至6000毫米、气温为一12℃至50℃的地区生长。
香根草对土壤要求不严,在非常贫瘠、紧实、强酸性或强碱性的土壤中都能生长。
香根草既耐旱又耐涝,在连续干旱几个月的情况下能保持生长,在部分茎叶被水淹的条件下也能生长发育。
香根草的适应性广,抗逆性强,易种植,易成活,易管理,极少受病虫侵害。
种植时可每丝单株或2至3株栽植,香根草对磷肥需求较高,施磷肥可促进早生块发和加速分蘖。
香根草很耐旱,南方地区一年四季都可种植。
但为了保证成活率,最好是在早春雨季3至5月间种植。
种后10天左右开始返青生长,成活率一般可达95%至100%。
个别死亡造成的缺株应及时补种,以保证日后能形成完整致密的“生物坝”。
香根草一般无需复杂的管理,定植成活后即能较快生长分蘖,即使遇秋旱天气,也无需淋水。
但为促进“生物篱笆”的尽早形成,应及时追肥。
移栽的第一年至少应追肥2至3次,可分别在生长旺季的5至9月间进行。
条件允许时,可在每年春秋各刈割一次,春季刈割促进香根草早春的萌发,秋季刈割能增加美观度,并注意在抽穗之前进行,以减少养分损失。
一、实验目的1. 掌握植物组织培养的基本操作步骤;2. 学习植物再生培养过程中的关键环节;3. 了解植物细胞全能性的表现;4. 通过实验观察植物再生培养的效果。
二、实验材料1. 植物材料:选取生长状况良好的某植物叶片或茎段;2. 培养基:MS培养基;3. 营养液:1/2 MS培养基;4. 无菌器械:剪刀、镊子、移液器、培养皿、培养箱等;5. 其他:酒精、无菌水、消毒液、滤纸等。
三、实验方法1. 植物材料预处理:将植物材料洗净,用70%酒精消毒30秒,再用无菌水冲洗3次,然后用无菌滤纸吸干水分。
2. 外植体切割:用无菌剪刀将植物材料切割成适当大小的外植体,一般选择茎段或叶片。
3. 培养基配制:按照MS培养基配方,配制含有不同激素比例的培养基,如1/2 MS培养基、1/4 MS培养基等。
4. 外植体接种:将处理好的外植体接种到不同激素比例的培养基上,每个培养基接种3个外植体,共接种9个外植体。
5. 培养过程:将接种好的培养皿放入培养箱中,保持温度25℃、光照强度1500lx,每天光照12小时。
6. 观察记录:定期观察外植体的生长状况,记录愈伤组织形成、芽分化、根分化等过程。
四、实验结果与分析1. 愈伤组织形成:经过一段时间培养,部分外植体在培养基上形成了愈伤组织,愈伤组织呈现出白色、颗粒状、质地柔软等特点。
2. 芽分化:在愈伤组织形成的基础上,部分愈伤组织逐渐分化出芽,芽呈现出绿色、细长、具有叶绿素等特点。
3. 根分化:在芽分化过程中,部分芽逐渐分化出根,根呈现出白色、细长、具有根毛等特点。
4. 植株再生:经过一段时间培养,部分芽和根分化完整的植株,植株呈现出绿色、生长旺盛等特点。
5. 激素比例对再生效果的影响:通过对比不同激素比例的培养基,发现1/2 MS培养基具有较高的再生效果,愈伤组织形成、芽分化、根分化等过程较为明显。
五、实验结论1. 植物再生培养是一种有效的方法,可以实现对植物材料的繁殖和保存;2. 植物细胞具有全能性,可以通过适当的培养条件,使细胞分化成不同类型的组织和器官;3. 激素比例对植物再生培养效果有显著影响,合理选择激素比例可以提高再生效果。
鱼腥草再生体系建立及不同居群综合性状比较研究
的开题报告
一、研究的背景与意义
鱼腥草是一种常见的食用和药用植物,在我国东南部和华南地区广泛种植。
然而,在过去的几十年中,由于环境污染和分布范围的缩小,鱼腥草的种群数量迅速减少,甚至有些地区已经灭绝了。
为了保护鱼腥草这一重要的农业资源和自然遗产,需要建立起鱼腥草的再生体系,以恢复和增加鱼腥草的种群。
同时,需要对不同地区和种群的鱼腥草进行综合性状比较研究,了解它们之间的差异和特点,从而为鱼腥草的保护和利用提供科学依据。
二、研究的主要内容和目标
1.建立鱼腥草的再生体系,研究适宜的生长条件和管理方法,以扩大种群数量和保证种群的健康。
2.在不同地区和种群中,对鱼腥草的生长状况、药用价值、适应性等方面进行综合性状比较研究,以了解它们之间的差异和特点。
3.根据研究结果,提出鱼腥草的保护和利用建议,为鱼腥草的可持续发展和管理提供科学支持。
三、研究的方法和步骤
1.采集不同地区和种群的鱼腥草样品,进行野外观察和测量,记录生长状况和环境条件。
2.在实验室中,对鱼腥草的药用成分、适应性和耐受性等方面进行深入研究,利用现代分析仪器和技术手段进行检测和分析。
3.基于实验室和野外调查的结果,对不同地区和种群的鱼腥草进行数据分析和比较,得出相应的结论和建议。
四、预期结果和意义
1.建立鱼腥草再生体系,保护和恢复鱼腥草的种群,提高它的种植和利用效益。
2.通过对不同地区和种群的鱼腥草进行综合性状比较研究,了解它们之间的差异和特点,为鱼腥草的保护和利用提供科学依据。
3.提出鱼腥草的保护和利用建议,为鱼腥草的可持续发展和管理提供支持,促进当地经济和社会发展。
外植体差异对植物组培苗无性快繁的影响摘要:植物组培养技术一般用在植物的繁殖或再生中,外植体的选择,对于植物组培会产生直接影响,所以需要明确所具有的具体影响,从而对培养方式与技术进行优化。
外植体的种类差异,会对外植体灭菌率、诱导率、褐化率以及后期愈伤组织产生影响,其年龄会对植物组培的诱导效果产生影响,依据这些影响能够对培育技术进行创新。
因此,本文将在外植体差异对植物组培苗无性快繁的影响方面进行深入地研究与分析,并结合实践经验总结一些措施,希望可以对植物组培工作及相关研究有所帮助。
关键词:外植体差异;植物组培苗;无性快繁;影响分析植物组培技术在现代商业领域中具有重要的作用,能够高效、快速地繁殖植物或培育新植物,在经济植物、观赏植物等方面具有良好的效果,还可以用于其他植物的微繁殖中。
植物组培技术相比于育种技术而言,能够保留母本的优良性状,还能够提升育种效率,在稀有植物育种方面具有良好的作用[1],同时在果树脱毒育苗、转基因等技术中具有良好的效果,其中一项关键要点为外植体的选择,所以需要明确其具有的影响,从而对育苗技术进行调整。
1植物组织培养与外植体概述植物组织培养,是指在人为构建灭菌环境下,采用细胞的全能性为基础,利用植物叶片、根系等器官或组织,在合适的环境下进行离体培养新的愈伤组织,最后进行生根培养、获得完整植株的技术手段。
植物在进行无性组织培养过程中,一般选择植物的外植体进行无性快繁培养,比如植物的叶片、种子以及根茎等,采用诱导分化的方式进行处理。
禾本科水稻类植物一般采用成熟的胚与幼穗,玉米一般采用幼胚或成熟胚胎,小麦一般采用幼胚与幼穗;乔木植物一般采用茎或叶片;杜仲一般采用茎尖作为外植体,杨树多采用茎段或叶片作为外植体[2]。
2外植体差异对于培苗物性快繁的影响分析在植物组织培养过程中,外植体的选择对其具有直接影响,其具体影响包括如下几项:2.1外植体材料消毒效果差异的影响外植体的消毒处理,是植物组织培养中的关键环节,会对愈伤组织的褐化率与诱导率产生影响,进而会影响组培苗的存活率。
植物组织培养实务--外植体的选择与消毒1、外植体的选择外植体是指植物组织培养中的各种接种材料。
从理论上讲,植物细胞都具有全能性,能够再生新植株,任何器官、任何组织、单个细胞和原生质体都可以作为外植体。
但实际上,不同品种、不同器官之间的分化能力有巨大差异,培养的难易程度不同。
为保证植物组织培养获得成功,选择合适的外植体是非常重要的。
(1)选择优良的种质及母株无论是离体培养繁殖种苗,还是进行生物技术研究,培养材料的选择都要从主要的植物入手,选取性状优良的种质、特殊的基因型和生长健壮的无病虫害植株。
尤其是进行离体快繁,只有选取优良的种质和基因型,离体快繁出来的种苗才有意义,才能转化成商品;生长健壮无病虫害的植株及器官或组织代谢旺盛,再生能力强,培养后容易成功。
(2)选择适当的时期组织培养选择材料时,要注意植物的生长季节和生长发育阶段,对大多数植物而言,应在其开始生长或生长旺季采样,此时材料内源激素含量高,容易分化,不仅成活率高,而且生长速度快,增殖率高。
若在生长末期或已进入休眠期时采样,则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。
花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材,这时比较容易形成愈伤组织。
百合在春夏季采集的鳞茎、片,在不加生长素的培养基中,可自由地生长、分化;而其他季节则不能。
叶子花的腋芽培养,如果在1月至翌年2月间采集,则腋芽萌发非常迟缓;而在3-8月间采集,萌发的数目多,萌发速度快。
(3)选取适宜的大小培养材料的大小根据植物种类、器官和目的来确定。
通常情况下,快速繁殖时叶片、花瓣等面积为5mm2,其他培养材料的大小为0.5~1.0cm。
如果是胚胎培养或脱毒培养的材料,则应更小。
材料太大,不易彻底消毒,污染率高;材料太小,多形成愈伤组织,甚至难以成活。
(4)外植体来源要丰富为了建立一个高效而稳定的植物组织离体培养体系,往往需要反复实验,并要求实验结果具有可重复性。
因此,就需要外植体材料丰富并容易获得。
(5)外植体要易于消毒在选择外植体时,应尽量选择带杂菌少的器官或组织,降低初代培养时的污染率。
一、实验目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和方法。
2. 学习再生植物实验的操作流程。
3. 观察并分析再生植物的生长发育过程。
4. 了解植物细胞的全能性。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性,将植物的器官、组织或细胞在无菌条件下培养在人工配制的培养基上,使其生长发育成完整植株的过程。
通过植物组织培养,可以快速繁殖优良品种,改良植物性状,研究植物生长发育规律等。
三、实验材料与仪器1. 材料:烟草、MS培养基、植物激素、无菌水、无菌滤纸、镊子、剪刀、酒精灯、超净工作台、培养箱、显微镜等。
2. 仪器:超净工作台、培养箱、显微镜、酒精灯、剪刀、镊子、培养皿、无菌水等。
四、实验方法1. 材料准备:选取健康的烟草植株,将其切成约1cm长的茎段。
2. 无菌操作:将茎段在70%酒精中浸泡30秒,然后在无菌水中漂洗3次。
3. 培养基配制:按照MS培养基配方,配制含有不同植物激素浓度的培养基。
4. 接种:将处理好的茎段接种到培养基上,每个培养基接种10个茎段。
5. 培养与观察:将培养皿放入培养箱中,保持温度25℃、光照强度1500lx、光照时间12小时/天。
6. 数据记录:定期观察茎段的生长情况,记录其生根、发芽、长叶等过程。
五、实验结果与分析1. 结果(1)生根情况:在含有生长素和细胞分裂素的培养基中,茎段生根速度较快,根粗壮。
(2)发芽情况:在含有生长素和细胞分裂素的培养基中,茎段发芽速度较快,发芽率较高。
(3)长叶情况:在含有生长素和细胞分裂素的培养基中,茎段长叶速度较快,叶片绿色、饱满。
2. 分析(1)生长素和细胞分裂素在植物组织培养中具有重要作用。
生长素能促进茎段生根,细胞分裂素能促进茎段发芽和长叶。
(2)不同植物激素浓度对再生植物的生长发育有显著影响。
在一定浓度范围内,随着激素浓度的增加,茎段的生根、发芽和长叶速度逐渐加快。
(3)植物细胞具有全能性,可以在适宜的条件下分化成不同器官。
六、实验结论通过本实验,我们掌握了植物组织培养的基本原理和方法,学习了再生植物实验的操作流程。