植物组织培养-外植体的选择与建立
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植物组织培养的一般流程一个完整的植物组织培养过程一般包括以下几个步骤:1)准备阶段(然根据已成功培养的相近植物资料,结合实际制订出切实可行的培养方案。
查阅相关文献,并经高压灭菌或过后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基,滤除菌后备用。
2)外植体选择与消毒(将消毒后的外然后进行消毒处理。
选择合适的部位作为外植体,采回后经过适当的预处理,接种到初代培养基上。
植体在无菌条件下切割成一定大小的小块,或剥离出茎尖,挑出花药,)初代培养(3促使外植体中已分化的细胞脱分化形成愈伤接种后的材料置于培养室或光照培养箱中培养,然后将愈伤组织转移到分化培养基分化成不同的器官组织,或顶芽、腋芽直接萌发形成芽。
原基或形成胚状体,最后发育形成再生植株。
(4)继代培养当芽苗繁殖到一分化形成的芽、原球茎数量有限,采用适当的继代培养基经多次切割转接。
进行脱毒苗培养的需提前定数量后,再将一部分用于壮苗生根,另一部分保存或继续扩繁。
进行病毒检测。
5)生根培养(提高生长素浓多数无根,此时可降低细胞分裂素浓度或不加,刚形成的芽苗往往比较弱小,度,促进小苗生根,提高其健壮度。
6)炼苗移栽(选择生长健壮的生根苗进行室外炼苗,待苗适应外部环境后,再移栽到疏松透气的基质中,注意保温、保湿、遮荫,防止病虫危害。
当组培苗完全成活并生长一定大小后,即可移向大田用于生产。
P P 1 、二、单项选择题1. 在衡量杂种优势(H )时,超中优势的计算方法为([F 1 -(P 1 +P A. H =2 分别表示两亲本的性状平均值,F 1 为杂种一代的性状平均值):[F 1 -(P 1 +P 2 )/2]/(P 1 +P 2 )/2 D. H =2 )/2]/(P 1 -P 2 )/2 B. H =(F 1 -P 1 )/P 1 C. H =(F 1 -P 2 )/P 2层细胞发生突变,则下列器官或组织会发L II 2. 根据植物梢端组织发生层学说,如果生变异的是:中柱C. 不定根D. .表皮A B. 种子3. 对于孢子体型自交不亲和而言,下列基因型的杂交组合能产生后代的是:S 1 S 2 B .S 1 S 2 ×S 1 S 3 C .S 1 S 2 ×.A S 1 S 2 ×S 2 S 3 D .S 1 S 2 ×S 3 S44. 原始群体性状差异较大的异花授粉园林植物,实生选种时一般采用:A .一次单株选择B .一次混合选择C .混合-单株选择D .单株-混合选择5. 现有两种菊属植物,其染色体组类型分别为AABB 和CC ,则将它们进行体细胞杂交获得的谐和细胞杂种染色体组类型应该为: A. AABB B. ABC C. AABBCC D.CC6. 下列射线中,哪一种属于可以引起物质电离的电磁波?A .X 射线B .β射线C .紫外线D .激光7. 园林植物的多倍体与二倍体相比,一般会表现为:A .气孔增多B .花大色艳C .适应性减弱D .结实率增加8. 常用的化学诱变剂EMS (甲基磺酸乙酯)是一种:A .碱基类似物B .烷化剂C .抗生素D .生长调节物质9. 在下列有性杂交方式中,被称为双交的是:A .(A ×B) ×(C ×D)B .[(A ×B) ×B] ×BC .A ×BD .[(A ×B) ×C] ×D10. 对于繁殖系数较高的草花而言,有时为了加速其选种进程,下列哪个程序或圃地可以省略?A .株系圃B .品种比较预备试验圃C .品种比较试验圃D .区域试验三、填空题(每空0.5 分,共15 分)1. 园林植物品种应具备的三个基本特征是:___ 、___ 和___。
《植物组织培养技术》讲义一、植物组织培养技术的概述植物组织培养技术是一种在无菌条件下,将植物的离体器官、组织或细胞培养在人工配制的培养基上,使其生长、分化并发育成完整植株的技术。
这项技术具有广泛的应用前景,如快速繁殖优良品种、脱毒苗的培育、植物新品种的选育、植物次生代谢产物的生产等。
植物组织培养的基本原理是植物细胞的全能性,即每个植物细胞都具有发育成完整植株的潜在能力。
然而,在自然条件下,由于细胞受到各种分化信号的影响,这种全能性通常无法表现出来。
通过组织培养技术,提供适宜的营养和环境条件,解除细胞的分化抑制,使其重新恢复分裂和分化的能力。
二、植物组织培养的基本设备和条件(一)实验室设计植物组织培养实验室通常包括准备室、接种室和培养室。
准备室用于器具的清洗、干燥和培养基的配制;接种室要求无菌环境,进行外植体的接种操作;培养室则为培养物提供适宜的温度、光照和湿度条件。
(二)设备和器具1、超净工作台:提供无菌操作的工作区域。
2、高压灭菌锅:对培养基、器具等进行灭菌处理。
3、培养箱:精确控制温度、光照和湿度。
4、天平:用于称量化学试剂。
5、显微镜:观察细胞和组织的形态结构。
(三)培养基的成分1、大量元素:包括氮、磷、钾、钙、镁等。
2、微量元素:如铁、锰、锌、铜等。
3、有机成分:如维生素、氨基酸、糖类等。
4、植物生长调节剂:如生长素、细胞分裂素等,对细胞的分裂、分化和生长起着重要的调节作用。
(四)无菌操作技术无菌操作是植物组织培养成功的关键。
操作人员需经过严格的培训,在操作过程中,使用酒精消毒双手和工具,在超净工作台中进行操作,避免微生物的污染。
三、植物组织培养的基本过程(一)外植体的选择和处理外植体的选择要考虑植物的种类、部位和生理状态。
一般选择生长旺盛、无病虫害的部位,如茎尖、叶片、花药等。
外植体在接种前需进行表面消毒,常用的消毒剂有酒精、次氯酸钠等。
(二)初代培养将消毒后的外植体接种到初代培养基上,诱导其脱分化形成愈伤组织或直接分化出芽和根。
植物组织培养的完整过程1.选择适宜的母体植物:选择具有优良性状和抗病虫害能力的母体植物,从中选择健康的叶片、茎段等组织作为外植体。
2.外植体的准备:将母体植物采集的叶片或茎段进行无菌处理,去除表面杂菌和泥沙,然后用75%酒精或漂白粉消毒外表。
3.外植体的切割:将无菌环境下的外植体切割成小片,大小约为0.5-1cm,同时尽量保持外植体的干燥,以防止外植体内部水分过多。
4.外植体的接种:将切好的外植体小片接种在含有植物生长激素的无菌培养基上。
培养基通常由无机盐溶液、有机源、糖和植物生长激素等组成,植物生长激素的种类和浓度会影响到后续培养过程中的分化和增殖。
5.分化:外植体接种到培养基后,会经历分化阶段,外植体的组织逐渐增殖和分化为不同种类的细胞,形成生长点。
6.增殖:通过定期的次级培养,子培养、分生器、病毒消除等手段,将外植体中的细胞不断分化和增殖,以便大量生产幼苗。
7.再分化:经过增殖后的外植体,可以再次进行分化,形成茎尖、腋芽或花蕾等器官,以便进一步培养和繁殖。
8.根的诱导:在合适的培养条件下,外植体可以诱导生成根系,这是为了使外植体脱离体外培养环境,继续生长的必要步骤。
9.移栽:当幼苗的根系已经发达足够,可以将外植体移栽到含有适宜营养成分的固体培养基上或直接移植到土壤中,进行实地管理和生长。
10.过程控制:在整个培养过程中,要控制好环境条件,例如温度、湿度和光照等,以保证培养的成功率。
11.病毒清除:植物组织培养中经常伴随着病毒感染问题,可以通过不同的方法对外植体和培养基进行检测和清除,以保证获得健康的植株。
总的来说,植物组织培养是一个复杂的过程,需要严格的无菌操作和合适的培养条件。
它广泛应用于植物的繁殖、遗传改良、新品种选育以及病毒和细菌的清除工作中,对推动植物学研究和农业生产具有重要的意义。