HAP-1在慢性复合应激大鼠肾上腺的表达

HABP1在肾癌中的表达及对肾癌细胞趋化运动作用的研究-12xx）》填写。

六.项目期限一般为1-2 年。

七.项目申报书限用 A4 纸双面打印，左侧装订成册。

-360357712 手机138xx2452项目负责人E-mail yuedan1980@姓名专业技术职务工作单位签字刘运德教授天津医科大学医学检验学院指导教师岳丹讲师天津医科大学医学检验学院姓名学号项目分工签字王春晴xx081129 免疫组化.免疫荧光共聚焦检测穆婷xx081128 趋化运动.迁移实验. 黏附实验李娜xx081135 Western blotting. Real-time PCR项目组其他成员-41 活化的分子机理；探讨 HABP1 与YB-1 的相互作用对下游PI3K/Akt/mTOR 等信号传导通路的作用机制。

工作基础：目前研究小组已完成54 例肾癌组织和11 例癌旁组织切片的免疫组化染色，统计学相关性分析发现，HABP1 随着肿瘤恶性程度增高而表达降低；Western blotting 及 Real-time PCR 检测发现，HABP1 在肾癌组织的表达水平低于癌旁组织；HABP1 在肾癌细胞中的表达低于肾上皮细胞；已构建 pLKO.1-shHABP1 的慢病毒载体，成功建立了 HABP1 降表达的稳定细胞系。

小组成员长期参与指导老师的实验研究工作，熟练掌握分子生物学技术，在学院举办的实验技能大赛中均获得优异成绩，并于xx 年3 月参加了天津市第二届“挑战杯”大学生课外学术科技作品竞赛。

本项目以医学检验学院科研中心和天津医科大学基础医学研究中心为基地，具备完善的实验设施。

-51 在肾癌中的表达与癌转移的相关性。

2.通过建立的 HABP1 降表达的稳定细胞系，研究 HABP1 降表达对 EGF 诱导的细胞趋化运动.迁移.黏附及 F-actin 聚合能力的影响。

3.利用免疫荧光共聚焦显微镜检测 HABP1.YB-1 的表达定位，及 HABP1 降表达对 YB-1 的活化.蛋白质转位的影响。

享廷顿蛋白结合蛋白1对胰岛β细胞胰岛素分泌和L型钙通道Cav1.2胞内运输的影响亨廷顿蛋白结合蛋白1(huntingtin-associated protein1, HAP1)是最早发现的能与亨廷顿病(Huntington’s disease, HD)基因产物亨廷顿蛋白(huntingtin, Htt)相互结合的蛋白质。

HAP1具有HAP1A和HAP1B两种剪接体,既在神经元中表达,也在分泌含氮激素激内分泌细胞中表达。

在神经元内,HAP1参与细胞器和分子的运输、膜受体转运与再循环。

HAP1可通过与驱动蛋白(kinesin)轻链(KLC)和重链(KHC)、驱动蛋白家族运动蛋白5(KIF5)、动力蛋白激活蛋白复合物的亚单位P150Glued等微管相关运动蛋白相互作用,参与或调控神经元内囊泡、神经营养因子、受体等基于微管的运输。

HAP1的胞内运输功能受自身磷酸化程度的影响,HAP1A羧基末端PKA磷酸化位点(T598)的磷酸化能显著减少其与P150Glued和KLC的结合,抑制其参与的胞内运输活动,去磷酸化后则相反。

HAP1可能通过神经元内物质运输对神经元的生长发育、存活、递质释放起调节作用。

在大鼠、小鼠胰岛内,HAP1选择性表达于分泌胰岛素的β细胞内：MIN6. NIT-1、INS-1等胰岛β细胞瘤细胞系也表达HAP1；抑制MIN6和NIT-1细胞的HAP1表达能显著抑制其胰岛素的分泌；胰岛β细胞HAP1选择性敲除的小鼠,其糖耐量能力下降,葡萄糖刺激后的胰岛素分泌减少。

由此表明,HAP1与胰岛p细胞胰岛素的分泌有关。

电位门控钙通道(voltage gated calcium chennel, Cav)参与调控葡萄糖刺激引起的胰岛β细胞胰岛素的分泌,葡萄糖浓度的升高可促进β细胞对葡萄糖的摄入和代谢,增加ATP-ADP的转化和抑制K+通道活性,使细胞膜去极化并由此使Cav开放,大量钙离子内流最终引发胰岛素的分泌。

大鼠肾脏α1-肾上腺素受体和血管紧张素Ⅱ受体亚型表达水平随增龄的改变曹晓菁;李艳芳【期刊名称】《首都医科大学学报》【年(卷),期】2008(29)6【摘要】目的研究a1-肾上腺素受体(α1-adrenergic receptor,α1-AR)和血管紧张素Ⅱ受体(angiotensin Ⅱ receptor,ATR)各亚型在增龄过程中蛋白水平的变化.方法采用蛋白质免疫印迹(Western blotting)分别对3月龄(青年组)、12月龄(中年组)、18月龄(老年前期组)和24月龄(老年组)Wistar大鼠肾脏a1-AR和ATR亚型蛋白水平进行测定.结果在α1-AR的哑型中,a1A-AR的表达水平随增龄逐渐下调(P＜0.01);α1Br-AR和α1D-AR的表达在各年龄组差异无统计学意义.在ATR的哑型中,AT1-R表达水平在老年前期组和老年组均较青年组显著下调(P＜0.01),中年组与青年组相比差异无统计学意义;AT2R的表达水平在老年组较青年组显著上调(P ＜0.01),青年组、中年组和老年前期组之间差异无统计学意义.结论肾脏α1-AR和ATR的表达水平随增龄而变化,α1A-AR的下调可能与肾脏在衰老过程中的功能减退相关;AT1R下调可能有利于肾脏在衰老过程中维持其正常的牛理功能;AT2R在老年期表达上调,有利于拮抗AT1R的作用、消除随增龄出现的血管收缩功能增强的不利影响.【总页数】4页(P728-731)【作者】曹晓菁;李艳芳【作者单位】首都医科大学附属北京安贞医院心内科;首都医科大学附属北京安贞医院心内科【正文语种】中文【中图分类】R544.1【相关文献】1.激动β3肾上腺素受体对老年载脂蛋白E基因敲除小鼠肾脏血管紧张素受体各亚型表达水平影响的研究 [J], 宋俊迎;李艳芳;蒋志丽;郭彦青2.心力衰竭大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ受体各亚型表达的改变 [J], 刘飞;李艳芳;曹芳芳;张玲姬;白雪源;吕杨3.不同水平抑制肾素-血管紧张素系统对大鼠肾脏增龄性改变的影响 [J], 张利;陈香美;刘航;彭丽霞;张雪光;洪权4.心力衰竭大鼠肾脏α1及β肾上腺素受体各亚型表达的改变 [J], 刘飞;李艳芳;曹芳芳;张玲姬;白雪源;吕杨5.不同周龄高血压鼠及正常Wistar大鼠主动脉β肾上腺素受体亚型舒张作用的改变 [J], 王英慧;解军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠主动脉α1肾上腺素受体收缩效应的两成分分析
韩启德;陈咏梅
【期刊名称】《北京医科大学学报》
【年(卷),期】1992(024)002
【摘要】本文观察大鼠主动脉a_1肾上腺素受体激动时引起的收缩效应,分析其时相特征、与细胞内Ca^(2+)动力学的关系以及受体亚型基础。

结果显示收缩可分成快速相与持续相两种成分。

无Ca^(2+)灌流可阻断大部分持续相收缩,但对快速相收缩的影响很小。

两时相收缩受硝苯吡啶的影响都很小,但都受选择性a_(1B)受体拮抗剂CEC的显著抑制,且浓度—抑制曲线一致。

上述结果提示快速相收缩主要由细胞内储存Ca^(2+)动员引起,持续相收缩主要由细胞外Ca^(2+)通过非双氢吡啶敏感性钙通道进入引起。

大鼠主动脉中主要含a_(1B)受体,两种时相的收缩主要均为a_(1B)受体激动引起。

【总页数】3页(P100-102)
【作者】韩启德;陈咏梅
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R966
【相关文献】
1.大鼠慢性低氧肺动脉高压对氯化钾收缩离体肺主动脉环效应影响 [J], 薛必成;范小芳;陈少贤
2.二甲基氨氯吡咪对高钾预收缩大鼠胸主动脉环的效应及其机制研究 [J], 宋俊丽;张军;武冬梅
3.Janu2亚型酪氨酸激酶在环匹阿尼酸触发的大鼠主动脉血管环收缩效应中的作用[J], 林默君;关永源;贺华
4.尾加压素Ⅱ对自发性高血压大鼠胸主动脉的收缩效应及其对血管平滑肌细胞内ERK1/2磷酸化的影响 [J], 石莹;王艳霞;姚泰;朱依纯
5.α_2-肾上腺素受体介导大鼠主动脉收缩的特性 [J], 吕志珍;张幼怡;董尔丹;韩启德
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大鼠脊神经节、脑神经节HAP1染色概说亨廷顿病(HD)由亨廷顿蛋白的多聚谷氨酰胺(polyQ)扩增所致，因此我们可以得知，亨廷顿蛋白是由于亨廷顿病而得名，而亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAPl)是用酵母双杂交技术鉴定的第一个与亨廷顿蛋白相互作用的蛋白质，因与变异的亨廷顿蛋白有较强作用而得名。

在神经系统中，Min Liao等报道HAPl 较高水平表达在大鼠脊神经节、脑神经节（三叉神经节等）与感觉有关的神经节中。

已有研究表明：HAPl免疫反应选择性分布于神经元内，神经胶质细胞内未见HAPl表达；HAP1免疫反应产物为棕色，HAPl在胞浆内，胞核为阴性；HAPl 免疫反应阳性神经元呈圆形、椭圆形或多角形。

因此通过对HAP1在脊神经节、脑神经节及内脏神经节的表达情况进行观察，对于我们研究神经节有一定的帮助。

HAP1免疫组织化学染色步骤 (1)抗原修复：将切片浸入枸橼酸盐缓冲液(pH 6．O)，微波修复10分钟，控制温度在95~100℃之间；(2)封闭液(博士德公司)室温封闭20 min；(3)加入兔抗HAPl血清(1：4000)，4℃，湿盒中孵育过夜。

(4)O．01mol／L PBS漂洗3次，每次5 min；(5)生物素化的羊抗兔IgG(1：200)，室温孵育3小时。

(6)O．01mol／L PBS漂洗3次，每次5 min：(7)ABC(1：200)室温孵育3小时。

(8)0．0lmol／L PBS漂洗3次，每次5 min：(9)含O．03％DAB和0．006％H：0。

的TriS盐酸缓冲液(TB，Ph7、6)室温下显色10min：(10)反应结束后，切片脱水、透明、树胶封片：(11)显微镜观察参考文献1．Li XJ，Li SH，Sharp AH，et a1．A Huntingting-associtated protein enriched in brain with implications for pathology．Nature，1995，378：398—402 2．Gutekunst CA，Li SH，Yi H，et a1．The cellular and subcellular localization of huntingtin—associated protein 1(HAPl)：Comparison with huntingfin inrat and human．J Neuroscience，1998，18(19)：7674—76863．Liao M，Shen J，Zhang Y，et a1．Immunohistochemical localization of huntingtin-associated protein 1 in endocrine system of the rat．J Histochem Cytochem，2005，53(12)：1517-244．Loannis Dragatsis，Paula Dietrich，Scott Zeitlin．Expression of the Huntingtin-associated protein 1 gene in the developing and adult mouse Neuroseience Letters，2000，282：37-405．Baluk P，Oabella G Some Parasympathetic neurons in the guinea pig heart express aspects of the catecholaminergic phenotype in vivo．Cell Tissue Res，1990；261(2)：275-285。

临床探索3讨论近年来，以超声为代表的可视化技术在麻醉学领域迅速发展起来。

超声下可以观察到局麻药的动态扩散过程，随时调整穿刺针位置和深度，从而保证局麻药的准确注入，同时也避免损伤神经或引起局麻药毒性反应等的发生。

对于外周神经病变和解剖结构变异或者病态肥胖患者而言，超声引导尤其能发挥其优势。

超声引导下股神经阻滞在膝关节部位实施手术麻醉和术后镇痛，已成为麻醉研究的重点内容，而股神经阻滞技术的应用是镇痛和麻醉的关键[2]。

髌骨手术后的疼痛还给患者带来了巨大的心理伤害，严重降低了患者对手术康复训练的依从性，影响了治疗效果，加大了围手术期风险。

显著缓解髌骨术后患肢的静息痛和运动痛，有利于患者进行主动关节锻炼。

因此，如何有效控制疼痛成为治疗过程中必须有效解决的问题，而CFNB能够很好地解决这些问题。

首先，CFNB减少了术后静脉辅助镇痛药物的应用，同时该镇痛方式采用便携式二维超声扫描，依托超声引导的精确性，使置管和穿刺各种可能有创的操作更加安全化，避免对组织、血管或神经的伤害，减少并发症的发生。

其次，CFNB可以利用超声技术将麻醉药物精准推送到神经周围，减轻术后静息疼、运动疼或并发症的发生，有利于术后的康复。

本次研究静息状态下6、18、24、48 h，试验组VAS评分低于对照组，术后24、48 h股四头肌等长收缩下，试验组VAS 评分低于对照组，试验组不良发生率也较低，提示CFNB可以缓解疼痛，提高康复效果。

综上所述，将超声引导下CFNB应用在髌骨骨折术后患者中，安全有效，值得应用。

参考文献[1] 刘松华,方懿,曹理言,等.右美托咪定联合超声引导股神经与股外侧皮神经阻滞在髌骨骨折内固定取出术中的应用[J].中国现代医学杂志,2020,30(1):77-81.[2] 周飞人,蓝英年.超声引导下股神经联合侧入路腘窝坐骨神经阻滞应用于下肢手术的临床效果观察[J].广西医科大学学报,2018,35(8):93-95.慢性应激刺激对大鼠血压相关代谢物的影响李娜，赵红霞 （上海大学医学院，上海 200444）摘要：目的：检测慢性应激高血压大鼠头端延髓腹外侧区组织中腺苷、cAPM含量的变化，探讨慢性应激下高血压的病理机制。

胰岛素抵抗性高血压大鼠α1肾上腺素受体亚型的改变孙晓光【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】1998(000)002【摘要】目的和方法：用高糖喂养复制胰岛素抵抗性高血压（insulin-resistant hypertension,IRH)大鼠模型，用放射配体结合实验和离体左心房及主动脉收缩功能实验。

观察IRH大鼠α1肾上腺素受体（α1-adrenoceptor,α1-AR)及其3种亚型在心脏和主动脉的改变。

结果和结论：IRH大鼠与同龄SD大鼠相比；（1）心脏α1-AR密度下降48%（P<0.05)，而介导的正性变力效应不变。

（2）心脏-α1-AR3种亚型占α1-AR总数的比例和在介导心脏正性变力效应中的作用表现为α1B-AR增加，α1D-AR减少，而α1A-AR不变。

（3）介导主动脉收缩的α1-AR及各亚型对激动剂的敏感性及最大收缩效应均无明显改变。

【总页数】1页(P113)【作者】孙晓光【作者单位】北京医科大学第三医院血管医学研究所，北京100083;北京医科大学第三医院血管医学研究【正文语种】中文【中图分类】R544.1【相关文献】1.12月龄自发性高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体亚型的改变 [J], 易永梅2.中年自发性高血压大鼠主动脉α1肾上腺素受体亚型的改变 [J], 吕志珍3.自发性高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体及其亚型的改变 [J], 孙晓光4.48周龄自发性高血压大鼠心脏β肾上腺素受体及其亚型的改变 [J], 李艳芳;刘厚孝5.4月龄自发性高血压大鼠主动脉功能性α_1肾上腺素受体亚型没有改变 [J], 孙晓光;张幼怡;吕志珍;韩启德因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。