大鼠去甲肾上腺素

去甲肾上腺素对大鼠心肌细胞凋亡的影响心肌细胞凋亡是许多心血管疾病的主要病理学基础，对于预防和治疗这些疾病至关重要。

凋亡是一种程序性细胞死亡方式，它能够保证机体内部的内部平衡，避免不必要的炎性反应和肿瘤发生。

然而，在某些情况下，凋亡途径可能会变得过度激活，导致细胞死亡，这对于心脏和其他器官的功能和健康都会造成严重影响。

去甲肾上腺素（NE）是一种主要的交感神经递质，广泛存在于机体内。

在机体内，NE可通过α1-、α2-、β1-和β2-肾上腺素能受体进行信号传递。

然而，过度激活的交感神经系统会导致NE的过度释放，可能会引发一系列心脏疾病的发生和发展。

因此，研究NE对心肌细胞凋亡的影响，有望为预防和治疗心脏疾病提供一定的理论依据。

在研究中，大鼠心肌细胞被分离并培养。

随后以不同的NE剂量处理心肌细胞，观察其细胞凋亡情况。

结果发现，与对照组相比，NE可以显著提高心肌细胞凋亡率。

此外，这种效应是与NE剂量和时间相关的，即NE剂量越高，作用时间越长，心肌细胞凋亡率越高。

为了探讨NE诱导心肌细胞凋亡的机制，研究人员进一步研究了NE对心肌细胞胞内钙离子水平的影响。

结果表明，NE可以显著提高心肌细胞内游离钙离子的水平，这可能是导致心肌细胞凋亡的主要机制之一。

此外，研究人员还观察到，NE可以显著影响心肌细胞线粒体功能，促进线粒体膜电位的下降，导致线粒体内钙离子的释放。

综上所述，NE可以增加大鼠心肌细胞凋亡率，并通过增加心肌细胞内钙离子水平和影响线粒体功能来实现。

这项研究结论有望为研发新的预防和治疗心脏疾病的方法提供理论基础。

未来，需要进一步深入研究NE诱导心肌细胞凋亡的分子机制和信号通路，以寻找更有效的治疗心脏疾病的方法。

同时，需要注意NE的剂量和应用时间，以减少其对心脏健康的不良影响。

大鼠去甲肾上腺素（NE）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中去甲肾上腺素（NE）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠去甲肾上腺素（NE）水平。

用纯化的大鼠去甲肾上腺素（NE）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入去甲肾上腺素（NE）,再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的大鼠去甲肾上腺素（NE）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠去甲肾上腺素（NE）浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

去甲肾上腺素和肾上腺素对大鼠急性重度失血性休克的作用比较黎渝;于飞;陈序【摘要】目的:比较去甲肾上腺素及肾上腺素对大鼠急性重度失血性休克的作用,寻找合适的血管活性药物.方法:建立急性重度失血性休克大鼠模型,将大鼠分为3组,生理盐水组(NS组,n=20)、去甲肾上腺素组(NE组,n=20)及肾上腺素组(E组,n=20),复苏期初期NE组与E组分为4个剂量阶段给药(A=10 μg/kg,B=50μg/kg,C=l00 μg/kg,D=500 μg/kg),NS组则推注与E组,NE组相同容积的生理盐水,记录这3组大鼠的血流动力学的变化.结果:①在特定观察时间(90 min)末,E组大鼠存活例数(n=6)较NE组(n=0)、NS组(n=0)存活例数多,差异有统计学意义(P＜0.05).②大鼠模型失血量大于50％并逐渐增大时,NS组大鼠很快死亡,NE组血压较E组下降更明显,E组用药仍然可以维持有效血压低值.结论:在急性重度失血性休克期,大剂量肾上腺素能更好的维持有效血压低值.【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2014(031)006【总页数】3页(P923-925)【关键词】失血性休克;去甲肾上腺素;肾上腺素;大鼠【作者】黎渝;于飞;陈序【作者单位】广西医科大学第一附属医院麻醉科南宁 530021;广西医科大学第一附属医院麻醉科南宁 530021;广西医科大学第一附属医院麻醉科南宁 530021【正文语种】中文【中图分类】R605.971据文献报道，严重创伤引起的大量失血的死亡率高达50%[1]。

因此，对严重创伤后出现大量出血的患者采取适当的治疗措施成为近年来的一个研究热点[2,3]。

在严重创伤导致失血性休克时，血管活性药物的使用能有效地维持血压，可为外科医生止血及液体复苏争取时间。

去甲肾上腺素被认为是抗休克治疗的一线血管活性药物，但在临床工作中发现[4]，在一些创伤大、止血困难，输血输液供给不足的紧急情况下，肾上腺素能更好地维持有效血压，其作用和机制有待评估。

文章编号:1008-9926(2002)03-0143-03 中图分类号:R927.1 文献标识码:AHP LC-电化学检测法测定大鼠脑内的去甲肾上腺素和52羟吲哚乙酸刘建芳①,侯艳宁,吴红海,刘会臣(中国人民解放军白求恩国际和平医院,临床药理室　河北　石家庄　050082)摘　要:目的　建立大鼠脑内单胺递质及其代谢产物的测定方法。

方法　大鼠脑组织匀浆液用高氯酸沉淀蛋白后,上清液直接用于HP LC分析。

采用Irregular2H C18色谱柱,流动相组成为0.1m ol・L-1NaH2PO42甲醇20.01m ol・L-1E DT A-0.2m ol・L-1辛基磺酸钠(87∶15∶1∶2.5,pH3.7),流速为0.8ml/min,温度为35℃,电化学检测器工作电压为0.8V。

结果　去甲肾上腺素和52羟吲哚乙酸分别在6.8～680ng・ml-1和3.8～380ng・ml-1范围内线性关系良好,去甲肾上腺素测定的日内和日间的RSD分别为7.5%和8.1%,52羟吲哚乙酸测定的日内和日间的RSD分别为2.0%和7.5%,两者回收率分别为103.0%和61.6%,检测限分别可达2ng・ml-1和1ng・ml-1。

结论　本法用于脑内单胺递质及其代谢物的测定,快速、简便、准确。

关键词:高效液相;电化学;去甲肾上腺素;52羟吲哚乙酸Determination of N orepinephrine and52hydroxyindoleacetic Acid in R at Brain by HPLC with E lectrochemical DetectionLI U Jian2Fang,H OU Y an2Ning,W U H ong2Hai,LI U Hui2Chen(Department of Clinical Pharmacology,Bethune International Peace H ospital of P LA,Shijiazhuang　050082,Hebei)ABSTRACT:Aim T o develop a HP LC method to determine m onoamine and its metabolites in rat brain.Methods The supernatants of protein2precipitated rat brain tissue hom ogenates by HClO4were directly injected into the chromatographic system.Irregular2H C18column was used for separation,a mixture of0.1m ol・L-1NaH2PO4,methanol,0.01m ol・L-1E D2 T A and0.2m ol・L-1s odium octylsulfonate(87∶15∶1∶2.5)was used as m obile phase,the flow rate was0.8ml/min,the column tem perature was35℃and the detector potential was0.8V.R esults N orepinephrine and52hydroxyindoleacetic acid have g ood linearity within the range of6.8～680ng・ml-1and3.8～380ng・ml-1respectively.Within2day and be2 tween2day precisions of the method were7.5%and8.1%for norepinephrine,2.0%and7.5%for52hydroxyin2 doleacetic acid,respectively.The recoveries of norepinephrine and52hydroxyindoleacetic acid were103.0%and61.6%, the detection limit was2ng・ml-1and1ng・ml-1,respectively.Conclusion The method is fast,sim ple and accurate in the determination of m onoamine and its metabolites in the brain.KE Y WOR DS:HP LC;Rat brain;N orepinephrine;52hydroxyindoleacetic acid 单胺类递质去甲肾上腺素(NE)和52羟色胺(52 HT)在大脑许多功能的控制调节中起重要作用。

大鼠去甲肾上腺素（NA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：4.7pg/ml-300pg/ml最低检测限：2pg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠去甲肾上腺素，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中去甲肾上腺素含量。

说明1.试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗去甲肾上腺素抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗去甲肾上腺素抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的去甲肾上腺素呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。

2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）。

7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）。

8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

去甲肾上腺素是从副肾髓质和肾上腺素一起被提取出来的激素（广义）。

在哺乳动物中，它从交感神经的末端作为化学传递物质被分泌出来。

是从肾上腺素中去掉N-甲基的物质。

牛的副肾髓质里去甲肾上腺素和肾上腺素的含量是1∶4（1份去甲肾上腺素，4份肾上腺素）。

市售的肾上腺素含有10—20％的去甲肾上腺素。

其作用如表所示与肾上腺素类似，但在量上和或质上均稍有差别。

去甲肾上腺通过转甲基作用，变成肾上腺素，这种转甲基作用的反应，需要有副肾内的酶和ATP的存在。

髓质以外的很多嗜铬组织，也能分泌出去甲肾上腺素。

去甲肾上腺素去甲肾上腺素是一种血管收缩药和正性肌力药。

药物作用后心排血量可以增高，也可以降低，其结果取决于血管阻力大小、左心功能的好坏和各种反射的强弱，例如颈动脉压力感受器的反射。

去甲肾上腺素经常会造成肾血管和肠系膜血管收缩。

严重低血压(收缩压<70mmHg)和周围血管低阻力是其应用的适应症，其应用的相对适应症是低血容量。

应该注意该药可以造成心肌需氧量增加，所以对于缺血性心脏病患者应谨慎应用。

去甲肾上腺素渗漏可以造成缺血性坏死和浅表组织的脱落。

去甲肾上腺素的具体用法：将去甲肾上腺素4mg或重酒石酸去甲肾上腺素8mg(2mg重酒石酸去甲肾上腺素效价与1mg去甲肾上腺素相同)加入250ml含盐或不含盐的平衡液中，产生16ug/mL去甲肾上腺素液或32ug/mL 重酒石酸去甲肾上腺素液。

去甲肾上腺素起始剂量为0.5-1.0ug/分钟，逐渐调节至有效剂量。

顽固性休克患者需要去甲肾上腺素量为8-30ug/分钟。

需要注意的是给药时不能在同一输液管道内给予碱性液体，后者可以使药物失活。

如果发生药物渗漏，尽快给予含5-10mg酚妥拉明的盐水10-15ml，以免发生坏死和组织脱落。

编辑本段肾上腺素和去甲肾上腺素的区别血液中的肾上腺素和去甲肾上腺素主要由肾上腺髓质所分泌，两者对心和血管的作用，既有共性，又有特殊性，这是因为它们与心肌和血管平滑肌细胞膜上不同的肾上腺素能受体，结合能力不同所致。