2021年环氧乙烷灭菌残留量检测规程

环氧乙烷残留量检验南京科捷分析仪器有限公司提供的GC5890F型气相色谱仪可对消毒设备中环氧乙烷残留量检验。

环氧乙烷残留量检验方法：1. 环氧乙烷残留量检验原理在一定温度下，用水萃取样品中所含环氧乙烷，用顶空气相色谱法测定环氧乙烷含量。

2. 环氧乙烷残留量检验气相色谱仪条件氢焰鉴定器:灵敏度不小于2X 1 0-11g/s(苯，二硫化碳(CS2)〕色谱柱:所用色谱柱应能使试样中杂质和环氧乙烷完全分开，并有一定的耐仪器各部位温度：a) 气化室200摄氏度；b) 检测室250摄氏度。

气流量:a) 氮气15m L/min-30m l-/min;b) 氢气30m L/min;c) 空气300 mL/mina3. 环氧乙烷残留量检验标准贮备液的配制取外部干燥的50m 工容量瓶，加人约30m 1水，加瓶塞，称重，精确到。

0.1 m g。

用注射器注入约0. 6 mL环氧乙烷，不加瓶塞，轻轻摇匀，盖好瓶塞，称重，前后两次称重之差，即为溶液中所含环氧乙烷重量。

加水至刻度再将此溶液稀释成1 X 10-' g/L作为标准贮备液。

4. 环氧乙烷残留量检验制备4.1 试验样制备应在取样后立即进行，否则应将供试样品封于由聚四氟乙烯密封的金属容器中保存。

4.2 将样品截为5 mm长碎块，取2. 0 g放人萃取容器中，加10 mL水，顶端空间40 mL，容器内压力为常压，在恒温水浴60 C士1'C中放置20 min.。

5. 环氧乙烷残留量检验步骤5 .1 用贮备液配制1X10-3g/L—1X102g/L六个系列浓度的标准溶液。

各取10mL按4 .2方法处理。

用玻璃注射器依次从平衡后的标准样和试样中迅速取1mL上部气体，注人进样器.记录环氧乙烷的峰高(或面积)。

注1: 在一个分析中尽量一人操作，并使用同一只1m L玻璃注射器注2: 注射器预先恒温到样品相同温度注3: 每次注意环氧乙烷保留时间的变化，以防进样汽化垫漏气注4: 每个样品(包括标样)在尽可能短的时间内分析三次，三次分析中必须有两次结果相差不大于5%，否则此样品应重新进行分析。

环氧乙烷残留检测环氧乙烷残留量：比色分析法2.6.1 仪器：721型分光光度计量瓶比色管吸管2.6.2 试剂及溶液配制：A) 0.1mol/L盐酸：取9ml盐酸稀释至1000ml；B) 0.5%高碘酸溶液：称取高碘酸0.5克,稀释至100ml；C) 1%硫代硫酸钠溶液:称取硫代硫酸钠1克,稀释至100ml；D) 10%亚硫酸钠溶液:称取无水亚硫酸钠10克,溶解后稀释至100ml；E) 品红—亚硫酸试液：称取品红0.1克，加入热120ml溶解，冷却后加入10%亚硫酸溶液20ml、盐酸2ml置暗处，试液应无色，若发现有微红色，应重新配制。

F) 乙二醇标准溶液的制备：取一外部干燥清洁的50ml量瓶，加水约30ml精确称重，移取0.5ml乙二醇，迅速加入量瓶中，摇匀，精确称重.两次称重之差即为溶液中所含的重量(w)，加水至克度，摇匀，作为贮备液.其浓度(c)以环氧乙烷计为：C=W/50×1000。

式中：C---乙二醇标准贮备液浓度，g/L;W---溶液中乙二醇重量，g.G) 临用前，精密量取乙二醇标准贮备液1.0ml用水稀释至1000ml摇匀，作为环氧乙烷标准溶液.其浓度(c1)=cx10-3。

H) 以上所用试剂均为分析纯。

2.6.3 原理：环氧乙烷在酸性条件下水解成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛与品红—亚硫酸试液反应产生紫红色化合物，通过比色分析法可求得环氧乙烷含量。

2.6.4 样品采集：于环氧乙烷灭菌后,立即从同一灭菌批号的三个大包装中随机抽取一定量小包装样品采样量至少应满足两次测试用(留一次量在必要时进行复测用)分别于环氧乙烷灭菌后（24－48）小时及以后每隔数天进行残留量测定。

2.6.5 供试液的制备：A) 供试液制备应在取样后立即进行，否则应将试样密封容器中保存备用。

B) 至少取一个小包装产品，将其剪开为5mm碎块.随机称取2g，置于容器中加入盐酸10ml，充分摇匀，室温放置1h若制备的供试液浓度过浓，应继续稀释止供试液的浓度为左右。

环氧乙烷残留量检测作业指导书一．检验液的制备制备检验液应尽量模拟产品使用过程中所经受的条件。

推荐在表1中选择检验液制备方法。

表1序号检验液制备方法适用产品举例1、取三套样品和玻璃烧瓶连成一循环系统，加入250ml水并保持在37±1℃；通过一蠕动泵作用于一段尽可能短的医用硅橡胶管上，使水以1L/h的流量循环2h，收集全部液体冷至室温作为检验液。

取同体积水置于玻璃烧瓶中，不装样品同法制备空白对照液。

使用时间较长的体外管路制品，如输液器、输血器等。

2、取样品切成1cm长的段，加入玻璃容器中，按样品的内外总表面积（cm2）与水（ml）的比为2:1的比例加水，加盖后，在37±1℃下放置24h，将样品与液体分离，冷至室温，作为检验液。

取同体积水置于玻璃容器中，同法制备空白对照液。

使用时间较长的体内导管3、取样品的厚度均匀部分，切成1cm2的碎片，用水洗净后晾干，然后加入玻璃容器中，按样品的内外总表面积（cm2）与水（ml）的比为5:1(或2:1)的比例加水,加盖后置于压力蒸汽灭菌器中，在121±1℃加热30min，加热结束后将样品与液体分离，冷至室温作为检验液。

取同体积水置于玻璃容器中，同法制备空白对照液。

使用时间很长的产品，如血袋等。

4、样品中加水至公称容量，在37±1℃下恒温8h或1h将样品与液体分离，冷至室温，作为检验液。

取同体积水置于玻璃容器中，同法制备空白对照液。

使用时间很短的容器类产品，如注射器等。

二．检验项目及分析方法1．浊度和色泽的测定按《中华人民共和国药典2000版》澄明度检查法测定浊度。

用正常视力或矫正视力检测试验液的色泽。

2．还原物质（易氧化物）2.1方法一-----直接滴定法2.1.1原理高锰酸钾是强氧化剂，在酸性介质中，高锰酸钾与还原物质作用，MnO4-被还原成Mn2+：MnO4- + 8H+ +5e = Mn2+ + 4H2O2.1.2溶液的配制a.稀硫酸（20%）：量取128ml硫酸，缓缓注入500ml水中，冷却后稀释至1000ml。

环氧乙烷灭菌残留量检测操作规程1.0 目的连同生物试验一起，证明经环氧乙烷灭菌的医疗器械产品是否可用2.0 适用范围适合经环氧乙烷灭菌的产品经解析后的环氧乙烷残留量检测。

3.0检测依据GB/T 16886.7-2001 医疗器械生物学评价第七部分ISO 10993.7-2008 EO 灭菌残留量4.0 规程4.1 使用仪器4.2 操作过程4.2.1样品处理：将样品透析包装打开，选取易于拆卸、剪取及不易于环氧乙烷解析处的部位，将样品剪成5mm长碎块，取1.0g样品1份，放入20mL顶空进样瓶，加纯水5mL，密封，放入恒温60 C±「C水浴中浸提40min 。

4.2.2 抽样频次从每个灭菌批次的产品中随机抽样。

一般情况下，每个灭菌批次随机抽样数量为5只。

4.2.3 环氧乙烷标准贮备液的制备取外部干燥的50 mL容量瓶，加水20〜30 mL ,加瓶塞，称重，精确到0.1mg。

用注射器注入约0.1mL环氧乙烷，不加瓶塞，轻轻摇匀，盖好瓶塞，称重，前后两次称重之差，即为溶液中所含环氧乙烷的重量。

计算出贮备液浓度，4C 以下保存备用。

4.2.4标准工作液制备各取1mL 贮备液分别配制1 x i0-3g/L、2 x i0-3g/L、4 x i0-3g/L、6 x i0-3g/L、8 x i0-3g/L、l X l0-2g/L六个系列浓度的标准溶液。

密封，备用。

各取5mL按4.1方法处理。

4.5 气相色谱仪操作4.5.1将氮氢空一体机打开电源，将右侧氮气放气阀打开至少30min，闭合使氮气和氢气气压恢复至0.4MPa 。

4.5.2将气体净化阀打开。

4.5.3 打开气相色谱仪电源和工作站软件，待气压和流速平衡后，按点火按钮，观察基线变化及FID检测口是否产生蒸汽。

4.5.4参数设定4.5.5 将样品与实验用标准品放置于60 C±「C水浴中，平衡至少40min 。

4.5.6 用玻璃注射器从平衡后的标准品和样品中迅速抽取1mL上部气体，插入毛细管柱进样口，进样，然后点击操作面板上的“确定”按键（进样时应注意进样速度，防止气体逸散及回退）。

详细说说环氧乙烷残留量分析仪的操作规程随着现代工业的不断发展，环氧乙烷残留量分析仪在制药行业、医疗领域、化妆品行业等领域得到广泛应用。

为确保仪器的安全、准确、高效运行，下面将详细介绍分析仪的操作规程。

一、设备准备1、检查设备是否完好，确保各个部件正常工作。

2、按照操作手册要求，完成电源、气源等的安装与连接。

3、根据仪器说明书要求，将仪器放置在符合要求的环境中。

二、试剂准备1、准备所需的化学试剂，并按照要求配置标准溶液。

2、注意试剂的保存条件，避免阳光直射、潮湿等因素影响试剂的质量。

三、校准与检验1、按照操作手册要求，使用标准溶液对仪器进行校准。

2、定期对仪器进行检验，确保检测结果的准确性。

3、在检验过程中，如发现仪器显示异常，应立即停止操作，并通知相关人员进行维修。

四、样品准备1、环氧乙烷残留量分析仪在进行样品测试前，请确保样品的纯净度、干燥度等符合要求。

2、根据样品的性质，选择合适的采样方法，如气体吸附、液体萃取等。

3、对样品进行预处理，去除样品中的杂质，保证检测结果的准确性。

五、检测过程1、将样品导入到仪器中，根据操作手册要求设置相关参数，如温度、压力、流量等。

2、开启仪器，按照操作手册要求进行检测。

3、在检测过程中，如遇到仪器故障或检测结果异常，应立即停止操作，并通知相关人员进行维修。

六、结果分析1、根据检测结果，计算环氧乙烷残留量。

2、将结果与标准值进行对比，判断样品中环氧乙烷的含量是否符合要求。

3、对检测结果进行记录，并整理成报告。

七、设备维护1、定期对设备进行清洁，保持设备的整洁。

2、按照操作手册要求，对设备进行维护与保养，确保设备的正常运行。

环氧乙烷残留量分析仪的操作规程需要严格按照相关要求进行。

在操作过程中，操作人员应保持高度的责任心和严谨的工作态度，确保检测结果的准确性与可靠性。

同时，定期对设备进行维护与保养，确保设备的安全、稳定运行。

1.试验目的检测一次性医疗器材经环氧乙烷消毒后环氧乙烷的残留量，判定是否符合国家标准规定。

2.试验原理环氧乙烷在酸性条件下水解成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛与品红-亚硫酸试液反应产生紫红色化合物，通过比色分析可求得环氧乙烷的含量。

3.试验仪器及试剂移液管，容量瓶（50ml，100ml，1000ml），量筒，烧杯，分析天平，滴管，分光光度计，纳氏比色管0.1mol/L盐酸溶液，5g/L高碘酸溶液，10g/L硫代硫酸钠，100g/L亚硫酸钠溶液，品红-亚硫酸试液，乙二醇标准储备液，蒸馏水4.试剂的配制0.1mol/L盐酸溶液：取9ml盐酸稀释至1000ml5g/L高碘酸溶液：称取高碘酸0.5g，加水稀释至100ml10g/L硫代硫酸钠：称取1.0g硫代硫酸钠，加水稀释成100ml100g/L亚硫酸钠溶液：称取10.0g亚硫酸钠，加水稀释成100ml品红-亚硫酸试液：称取0.1g碱性品红，加入120ml 80℃热蒸馏水溶解，冷却后加入100g/mL亚硫酸钠溶液20ml、盐酸2ml，置于暗处1h以上。

试液应为无色，若发现有微红色，应重新配制。

乙二醇标准储备液：取一个外部干燥、清洁的50ml容量瓶，加水约30ml，精确称重。

精确量取0.5ml乙二醇，迅速加入瓶中，摇匀后，精确称重。

两次称重之差即为溶液中所含乙二醇的重量，加水稀释至刻度，混匀。

乙二醇的浓度为：c=(m/50)×103式中：C：乙二醇标准储备液浓度，单位为克每升(g/L)m：溶液中乙二醇的重量，单位为克（g）乙二醇标准溶液（c1=c×10-3）：精确量取1.0ml标准储备液，用水稀释至1000ml5.供试液制备供试液的制备采用极限浸提法，取整个样品或样品上有代表性的部位，截为5mm长的碎块，称取2.0g置于烧杯中，加入0.1mol/L盐酸溶液10ml，室温放置1h，作为供试液。

6.试验步骤6.1取5支纳氏比色管，分别加入0.1mol/L盐酸2ml，再精确加入0.5ml、1.0ml、1.5,ml、2.0ml、2.5ml乙二醇标准溶液，再另取一支纳氏比色管，精确加入0.1ml盐酸溶液2ml作为空白对照。

文件制修订记录1、原理:环氧乙烷在酸性条件下水解成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛与品红一亚硫酸试液反应产生紫红色化合物，通过比色分析可求得环氧乙烷的含量。

2、试剂的配制0. lmol/L盐酸:取9m1盐酸稀释至1000m1。

0. 5%高碘酸溶液:称取高碘酸0. 5g稀释至100m1。

硫代硫酸钠溶液:称取硫代硫酸钠1g，释至100m1a10%亚硫酸钠溶液:称取10. 0g无水亚硫酸钠，溶解后稀释至100m1。

品红一亚硫酸试液:称取0. 1 g品红，加入120m1热水溶解，冷却后加入10%亚硫酸钠溶液20m1，盐酸2m1，置于暗处。

试液应无色，若发现有微红色，应重新配制。

乙二醇标准贮备液:取一外部干燥、清洁的50m1容量瓶，加水约30m1，精确称重。

移取0. 5m1乙二醇，迅速加入瓶中，摇匀，精密称取重量。

两次称重之差即为溶液年所含乙二醇的重量，加水至刻度，混匀，按式计算其浓度:C=(W/50)X 1000式中:C—乙二醇标准贮备液浓度，g/LW—溶液中乙二醇重量，g乙二醇标准溶液(浓度C1=C X 10-3:精确移取标准贮备液1. Oml，用水稀释至1000m1。

3、试液制备试液制备应在取样后立即进行，否则应将试样封存备用。

将样品截为5mm长碎块，称取2. 0g置于具塞的玻璃容器中，加入0. lmol/L 盐酸10m1密塞，室温放置1小时。

4、试验步骤:a、标准曲线的制备:取五支纳氏比色管，精密加入0. lmol/L盐酸2m1，再精确加入0.5m1, 1.0 ml, 1.5 ml, 2.0 ml. 2.5 ml、乙二醇标准溶液。

另一支纳氏比色管，精确加入0. lmol/L盐酸2 ml作为空白对照。

于上述各管中分加盟加入0. 5%高碘酸溶液0. 4 ml，放置1小时。

然而，分别滴加硫代硫酸钠溶液至出现的黄色恰好消失。

再分别加入品红一亚硫酸试液0. 2m1，用蒸馏水稀释至lOml，室温放置1小时，于560nm波长处以空白液作为参比，测定吸光度。

环氧乙烷残留量检测操作规程
1.检测依据：
——YBB00242005-2015《环氧乙烷残留量检测法》
2.适用范围
本法适用于环氧乙烷的药品包装材料中环氧乙烷残
留量的确认。

3.仪器、器具准备：
气相色谱仪、空气发生器、氢气发生器、水浴锅、
顶空瓶。

4.测定方法：外标法
5.实验操作：
色谱条件：色谱柱
检测器：FID检测器
注样室温度：200℃；注室温度：110℃;氢焰室温度：
200℃
环氧乙烷溶液：5mg/ml
5.1、对照品溶液制备：在20ml的顶空中先加入5ml
的水，用微量注射器精密吸取对照储备液10ul，注入
顶空瓶中，加5ml的水，密封。

5.2、样品制备：将样品取样后立即制备，将样品截为5mm的碎片，取1.0g放入20ml的顶空瓶中，加5ml 的水，密封。

5.3、将样品与对照品分别放置于60的水浴锅中，平衡20分钟，进样器预热至相同的温度，分别取1ml 的液上气体注入气相色谱仪中，记录色谱图，比较峰面积，用外标法计算相应的样品中环氧乙烷的浓度。

5.4、处理结果
根据以下公式计算
A X
含量（C X）=C R------------
A R
C X ----------所测物质含量；
A X-----------供试品峰面积；
A R-----------对照品峰面积；
C R-----------对照品浓度。

环氧乙烷残留量检测报告。

一次性使用卫生产品环氧乙烷残留量测试方法D1测试目的确定产品消毒后启用时间，当新产品或原材料、消毒工艺改变可能影响产品理化性能时应予测试。

D2样品采集环氧乙烷消毒后，立即从同一消毒批号的三个大包装中随机抽取一定量小包装样品，采样量至少应满足规定所需测定次数的量（留一定量在必要时进行复测用）。

分别于环氧乙烷消毒后24h及以后每隔数天进行残留量测定，直至残留量降至本标准4.6所规定的标准值以下。

D3仪器与操作条件仪器：气相色谱仪，氢焰检测器（FID）。

柱：Chromosorb101HP60～80目；玻璃柱长2m，φ3mm.柱温：120℃。

检测器：150℃。

气化器：150℃。

载气量：氮气：35mL/min.氢气：35mL/min.空气：350mL/min.柱前压约为108kPa.D4操作步骤D4.1标准配制用100mL玻璃针筒从纯环氧乙烷小钢瓶中抽取环氧乙烷标准气（重复放空二次，以排除原有空气），塞上橡皮头，用10mL针筒抽取上述100mL针筒中纯环氧乙烷标准气10mL，用氮气稀释到100mL（可将10mL标准气注入到已有90mL 氮气的带橡皮塞头的针筒中来完成）。

用同样的方法根据需要再逐级稀释2～3次（稀释1000～10000倍），作三个浓度的标准气体。

按环氧乙烷小钢瓶中环氧乙烷的纯度、稀释倍数和室温计算出最后标准气中的环氧乙烷浓度。

计算公式如下：式中：c――标准气体浓度，μg/mL；k――稀释倍数；t――室温，℃。

D4.2样品处理至少取2个最小包装产品，将其剪碎，随机精确称取2g，放入萃取容器中，加入5mL去离子水，充分摇匀，放置4h或振荡30min待用。

如被检样品为吸水树脂材料产品，可适当增加去离子水量，以确保至少可吸出2mL样液。

D4.3分析待仪器稳定后，在同样条件下，环氧乙烷标准气体各进样1.0mL，待分析样品（水溶液）各进样2μL，每一样液平行作2次测定。

根据保留时间定性，根据峰面积（或峰高）进行定量计算，取平均值。