苯并[a]芘的测定

生活饮用水苯并[a]芘的测定高压液相色谱法1. 适用范围本方法规定了用高压液相色谱法测定生活饮用水及其水源水中的苯并[a]芘。

本法适用于生活饮用水及其水源水中苯并[a]芘的测定。

本法最低检测质量为0.07ng，若取500mL水样测定，本法最低检测质量浓度为1.4ng/L。

2. 原理水中苯并[a]芘及其他芳烃能被环己烷萃取，萃取液经活性氧化铝吸附净化，以苯洗脱、浓缩后，可用液相色谱一荧光检测器定量。

3. 试剂所用试剂和材料应进行空白试验，即通过全部操作过程，证明无干扰物质存在。

所有试剂使用前均应采用0.45µm过滤膜过滤。

3.1 活性氧化铝：取250g100目~200目层析用中性氧化铝(A12O3)于140℃活化4h，冷却后装瓶，储于干燥器内，备用。

3.2 盐酸溶液(1+19)：取5mL盐酸(ρ20=1.19g/mL)，加至95mL纯水中，混匀。

3.3 玻璃棉：用盐酸溶液浸泡过夜，然后用纯水洗至中性。

用氢氧化钠溶液浸泡过夜，再以纯水洗至中性，于105℃烘干备用。

3.4 甲醇：HPLC级。

3.5 超纯水：电阻率大于18.0MΩ。

3.6 活性炭：取50g(20目~40目)活性炭用盐酸溶液浸泡过夜，用纯水洗至中性，于105℃烘干。

再用环己烷浸泡过夜，滤干后在氮气流下于400℃活化4h，冷后储于磨口瓶中备用。

3.7 环己烷：通过活性炭层析柱后重蒸馏，取此环己烷70mL浓缩至1.0mL，浓缩液必须测不出苯并[a]芘的存在，方可使用。

3.8 苯：重蒸馏。

3.9 无水硫酸钠：40℃烘烤4h，冷却后储于磨口瓶中备用。

3.10 氢氧化钠溶液：称取5g氢氧化钠，用纯水溶解，并稀释至100mL。

4. 仪器4.1 髙压液相色谱仪：4.1.1 荧光检测器。

4.1.2 记录仪。

4.1.3 色谱柱。

A色谱柱类型：不锈钢柱，长150mm，内径3.9mm。

B 填充物：用Spherisorb C18(5µm)。

4.2 微量注射器：25µL，针头锥度为90度。

食品中苯并（a）芘的测定前言苯并（a）芘是一种多环芳香族碳氢化合物，是已发现的200多种多环芳烃中最主要的环境和食品污染物，是一种强烈的致癌物质，对机体各器官，如对皮肤、肺、肝、食道、胃肠等均有致癌作用。

被国际癌症研究机构列为I类致癌物。

苯并（a）芘在食物中也有，谷类食物、蔬菜、脂肪和油类是摄入苯并（a）芘的主要膳食来源，食物在高温、长时间烹调中会产生苯并（a）芘我们按照国标《GB 5009.27-2016食品安全国家标准食品中苯并（a）芘的测定》中提供的食品中苯并（a）芘检测的方法对黄豆样品进行苯并（a）芘的测定。

使用LabTechSePRO全自动高通量柱膜通用固相萃取系统和MV5多通道平行浓缩仪来代替传统的手动净化和浓缩，不仅实现了净化、浓缩过程的全自动化，省却了大量的手动工作，提高效率，而且减少了人为误差，实现了高回收率和良好的实验重复性。

关键词SePRO全自动高通量柱膜通用固相萃取系统；MV5多通道平行浓缩仪；食品；苯并（a）芘；GB 5009.27-20161、仪器设备及试剂1.1仪器设备SePRO全自动高通量柱膜通用固相萃取系统（莱伯泰科公司）；MV5多通道平行浓缩仪（莱伯泰科公司）；LC600 二元高压梯度高效液相色谱：配有荧光检测器（莱伯泰科公司）；萃取柱：MIP-BAP 苯并(a)芘专用SPE小柱，500mg 6mL（CNW公1.2试剂二氯甲烷，正己烷，乙腈（色谱纯 FISHER Chemical）；苯并（a）芘标准储备液：100ug/mL，乙腈，国家标准物质；苯并（a）芘标准工作液：取100μL的标准储备液与10mL的容量瓶中，用乙腈定容，得到浓度为1μg/mL的标样工作液。

2、实验过程2.1 样品预处理取一定量的黄豆，将其磨碎成均匀的样品，储于洁净的样品瓶中，于室温下保存。

2.2 提取称取1g（精确到 0.001g）试样，加入 5 mL 正己烷，旋涡混合 0.5 min，40℃下超声提取10min，4000r/min离心5min，转移出上清液。

高效液相色谱法测定水中苯并(a)芘刘明延【摘要】苯并(a)芘属于多环芳烃中毒性最大的一种强烈致癌物.为降低苯并(a)芘对土壤、空气、水等多种环境介质的不良影响,建立了液液萃取-高效液相色谱法测定水样中苯并(a)芘的分析方法.选用二氯甲烷为萃取剂,w(乙腈)∶w(水)=85∶15为流动相,流速1 mL/min,柱温25℃的条件下,在1L空白水样中添加低浓度的苯并(a)芘(加标量为0.5 μg),测定平行样品7份.结果表明,苯并(a)芘加标回收率为85.2％～86.6％,标准偏差为0.5％;当萃取体积为1L,浓缩至1 mL,进样量为10 μL时,苯并(a)芘的方法检出限为0.008μg/L.【期刊名称】《洁净煤技术》【年(卷),期】2016(022)005【总页数】3页(P127-129)【关键词】液液萃取;高效液相色谱;苯并(a)芘【作者】刘明延【作者单位】陇南市环境监测站,甘肃陇南746000【正文语种】中文【中图分类】O652.1苯并(a)芘又称3,4-苯并芘，是日常生活或工业生产过程中产生的副产物，属于多环芳烃中毒性最大的强烈致癌物。

主要由煤炭、石油、天然气、木材等不完全燃烧而产生，在土壤、空气、水等多种环境介质中广泛存在。

人体和动物摄入该物质后，可诱发皮肤、肺和消化道癌症，对健康造成很大威胁[1]。

目前，苯并(a)芘的测定方法主要有乙酰化滤纸层析荧光分光光度法[2]、薄层色谱法、高效液相色谱法[3-6]、气相色谱法[7-8]、气相色谱-质谱联用等方法[9]。

本文采取液液萃取-高效液相色谱法，选用二氯甲烷为萃取剂，w(乙腈):w(水)=85∶15为流动相，在流速1 mL/min，柱温25 ℃条件下成功测定了水中苯并(a)芘含量。

采样选用棕色玻璃瓶灌装，采样时水样应充满采样瓶并加盖密封，防止空气进入，样品在4 ℃下避光保存。

仪器：配有四元梯度泵和荧光检测器(FLD)的液相色谱仪(Aglient 1200)、液相色谱柱Discovery@C18(15 cm×4.6 mm，5 μm)、分液漏斗(1 000 mL)、氮吹仪(N-EVAP 111)、有机相滤头(津隆，有机，0.22 μm)。

高效液相色谱法测定生活饮用水中的苯并[a]芘贺光秀;贾瑞宝;邓长江【摘要】建立高效液相色谱二极管阵列检测器检测生活饮用水苯并[a]芘的测定方法。

采用C18反相色谱柱(150 mm×4.6 mm，5μm)，在流动相为甲醇-水(体积比为90∶10)、流量1.0 mL/min、检测波长295 nm、柱温35℃、进样体积20μL的条件下测定生活饮用水中苯并[a]芘。

该方法检出限为6 ng/L，线性范围0～100 ng/mL，加标回收率为88.1%～93.4%，测定结果的相对标准偏差为1.06%(n=9)。

该法样品预处理简单，分离度高，分析时间短，适用于生活饮用水中苯并[a]芘的准确定性定量测定。

%A method was developed for determining benzo [a] pyrene in drinking water by HPLC-PDA detector. With column of C18(150 mm×4.6 mm,5μm),the mobile phase of methanol-water(volume ratio was 90∶10) and the flow rate of 1.0 mL/min,the determine wavelength of 295 nm,the column temperature of 35℃,and the injection volume of 20μL, the concentration of benzo [a] pyrene in drinking water was detected. The limit of detection was 6 ng/mL. The linear plots were obtained between 0-100 ng/mL. Overall recoveries were between 88.1%and 93.4%,and the relative standard deviation of determination results was 1.06%(n=9). This method has advantages of simple process of sample treatment, good isolation and short analysis time,and is suitable for the quantitative and qualitative determination of Benzo [a] pyrene in drinking water.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】3页(P50-52)【关键词】苯并a芘;高效液相色谱法;二极管阵列检测器;生活饮用水【作者】贺光秀;贾瑞宝;邓长江【作者单位】山东绿洁环境检测有限公司，济南 250101;山东省城市供排水水质监测中心，济南 250000;山东省国合循环经济研究中心，济南 250100【正文语种】中文【中图分类】O657.7苯并[a]芘(Bap)是一种公认的强致癌物质，主要由煤炭、石油、天然气、木材等不完全燃烧而产生，在土壤、空气、水等多种环境介质中广泛存在。

2020年05月液相色谱-串联质谱法快速测定食用油中的苯并(a)芘郭芳芳高宏朱成晶（江苏省理化测试中心，江苏南京210000）摘要：文章建立了食用油中的苯并(a)芘的液相色谱-串联质谱法测定方法。

食用油中的苯并(a)芘经石油醚提取后，提取液用固相萃取吸附剂净化，洗脱，浓缩定容后经液相色谱-联质谱仪检测，采用内标法定量。

研究表明：食用油中的苯并(a)芘经石油醚提取，净化后测试线性良好，其相关系数大于等于0.999，检出限为0.1μg/kg 。

该方法操作简便、快速、灵敏高，可为其他产品中的苯并(a)芘提供参考。

关键词：液相色谱-串联质谱法；大气压化学电离；苯并(a)芘目前，食用油脂中苯并(a)芘的分析方法主要有免疫学法、表面增强拉曼光谱、气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法（GC-MS ）和液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS ）等。

由于食用油成分复杂，其中苯并(a)芘含量又较低，存在着大量的干扰物质，因此灵敏度高，抗干扰强的检测方法是必要的。

GC-MS 法由于灵敏度不高，热稳定性较差，在很多时候使用受到了限制。

高效液相色谱法定性能力不够；表面增强拉曼光谱还不够成熟，应用较少，定量分析时还不够准确；免疫学检测灵敏度不高；LC-MS/MS 法却能同时提高灵敏度和提升定性能力，目前运用LC-MS/MS 测定食用油脂中苯并(a)芘鲜有报道。

文章是针对食用油中苯并(a)芘快速检测的应用研究，可用于批量样品的高通量筛查，提高工作效率，也可用于突发食品中毒分析，这些对保护人类健康具有重要的意义。

本文建立的这种液相色谱-串联质谱法测定食用油脂中苯并(a)芘的方法，快速，简便，高效，定量准确。

1实验部分1.1仪器与试剂Agilent-1260-6430液质联用仪。

石油醚，南京化学试剂股份有限公司；乙腈，德国默克有限公司。

1.2色谱条件色谱柱：C1850×2.1mm 1.8um 柱温：40℃流动相：乙腈/水＝80/20流速：0.6ml/min 进样量：20uL 1.3标准溶液的配制苯并(a)芘标准储备溶液的制备：准确移取1mL 100μg/mL 苯并(a)芘标准品于10mL 容量瓶，用乙腈定容至刻度线，-20℃保存备用。

《出口中药材中苯并芘残留量检测方法》编制说明1 任务来源根据国家认监委以国认科函[2011]54号文件下达的2011年出入境检验检疫行业标准制(修)订计划项目的通知，检验检疫行业标准计划内项目《出口中药材中苯并芘残留量检测方法》由陕西出入境检验检疫局承担起草，计划编号为2011B133。

2目的及意义苯并芘（benzopyrene）又称苯并（a）芘、3,4-苯并芘，英文缩写BaP，是一种常见的多环芳烃类高活性致癌、致畸、致突变物质，对人类身体健康有极大的危害。

苯并芘主要来源于石油、煤炭、木材等的不完全燃烧，可以吸附在粉尘颗粒上，也可溶解于水中，随着大气及水系的运动在自然界中迁移，大气、水体、土壤均是苯并芘的污染载体，并能在农作物的生长过程中被吸收，并迁移至食品中，对中药材来说，环境污染产生的苯并芘会迁移到中药材中，另外，中药材本身经过高温烘干、炒制等炮制过程也会产生苯并芘，如熟地黄中苯并芘含量往往较高（检测的样品中有超过100 μg/kg的），就主要是由于炮制过程不当造成。

而目前中药材中苯并芘残留量的检测研究较少，国内尚未有相关检测标准，不利于中药材的质量安全控制。

韩国2009年颁布的标准中规定，除矿物性韩药材（中药材）外的全部韩药材中苯并芘限量为5 μg/kg，而美国、欧盟、日本、中国均未对中药材中的苯并芘限量做出明确规定，但由于有些中药材是药食两性的，所以参考食品中苯并芘的限量，中国和日本为 5 μg/kg，欧盟有1.0（仅对婴幼儿食品）、2.0、5.0、10.0 μg/kg四种限量。

国外的限量要求对我国中药材的出口提出了更高的要求，有必要制定符合国内外限量要求的检测标准，以保证我国中药材的进出口贸易顺利进行。

目前中药材中苯并芘的检测标准仅有韩国食品药品安全厅颁布的一种检测方法，但通过验证，发现该方法并不适用于有些中药材样品，而且方法采用液相色谱-荧光检测法，不能对阳性样品进行确证分析，本标准通过对韩国检测方法进行改进，增加了检测方法的样品适用范围，并增加了可用于确证的气相色谱-串联质谱检测方法。

HJ/T 956-2018 环境空气苯并[a]芘的测定高效液相色谱法1、适用范围：环境空气和无组织排放监控点空气颗粒物中苯并[a]芘的测定2、标准物质：乙腈中苯并[a]芘(100mg/L，362433)3、使用仪器及试剂：岛津LC-20A液相色谱仪，苯并[a]芘标准物质，实验室常用试剂及器材。

4、中间液的配制准确量取80µL稀释标准品原液至4mL，得到浓度为2mg/L中间液。

一、校准曲线制作准备 5 支 1mL 容量瓶，分别加入 12.5μL、25μL、50μL、250μL、500μL、1000μL 标准溶液，用乙腈定容至刻度，得到浓度分别为 0.025μg/mL、0.050μg/mL、0.100μg/mL、0.500μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL 的标准曲线使用液。

相关系数大于0.999二、检出限和定量下限取0.025mL2ppm中间液，均匀加到滤膜上，剪碎滤膜，用乙腈完全浸润，超声提取15min，定容制5mL，理论浓度为0.010ppm由上表可知各参数符合HJ/T 956-2018中用乙腈提取时的检出限和定量下限要求。

三、精密度&准确度（1）精密度实验：用已腈超声提取低中高三个浓度点，分别测定六次，计算相对标准偏差由上列表可知，三个浓度的相对标准偏差均符合HJ/T 956-2018(10.1)精密度要求。

（2）准确度实验制样 采集空气滤膜样品18个，每6个一组，第一组直接乙腈提取进样，第二、三组滤膜均匀加标0.625mL2ppm中间液，乙腈提取(定容至5mL，得到理论浓度0.25ppm)，将第二组提取液上机分析，向剩下一组提取液中再加入0.25mL2ppm中间液（得到理论浓度0.35ppm)，混匀直接进样由上表可知各参数符合。

乙酰化滤纸层析荧光分光光度法1 主题内容与适用范围本方法规定了测定水质中苯并(a)花[以下简称B(a)P]的方法。

本标准适用于饮用水、地面水、生活污水、工业废水。

最低校出浓度为0.004µg／L。

注意：B(a)P是一种由五个环构成的多环芳烃，它是多环芳烃类的强致癌代表物。

基于B(a)P的强致癌性，按本标准方法分析时必须戴抗有机溶剂的手套，操作应在白搪瓷盘中进行(如溶液转移、定容、点样等)。

室内应避免阳光直接照射，通风良好。

2 原理水中多环芳烃及环已烷可溶物经环己烷萃取(水样必须充分摇匀)，萃取液用无水硫酸钠脱水、浓缩，而后经乙酰化滤纸分离。

分离后的B(a)P用荧光分光光度计测定。

3 试剂除另有说明外，分析时均使用分析纯试剂和蒸馏水。

3.1 B(a)P标准溶液的配制：称取5.00mg固体标准B(a)P于50mL容量瓶中[因B(a)P是强致癌物，为了减少污染，以少转移为好]，用少量苯溶解后，加环已烷至标线，其浓度为100?g／mL。

特此贮备液用环己烷稀释成10?g／mL的标准使用液，避光贮于冰箱中。

3.2 乙酷化滤纸的制备：把15×30cm的层析滤纸15至20张卷成高15cm的圆筒状，逐张放入1000mL 高型烧杯中，杯壁与靠杯的第一张纸间插入一根玻璃棒，杯中间放一枚玻璃熔封的电磁搅拌铁芯。

在通风柜中，沿杯壁慢慢倒入乙酰化剂(由苯十乙酸酐＋浓硫酸＝750mL＋250mL＋0.5mL混合配制成)，磁力恒温搅拌器的温度保持55±1℃.连续反应6h。

取出乙酰化滤纸，用自来水漂洗3～4次，再用蒸馏水漂洗2～3次，晾干。

次日用无水乙醇浸泡4h后，取出乙酰化滤纸，晾干压平，备用。

3.3 环己烷，重蒸。

用荧光分光光度计检查：在荧光激发波长367nm，狭缝10nm；荧光发射狭缝2nm，波长405nm应无峰出现。

3.4 丙酮，重蒸。

3.5 甲醇。

3.6 乙醚。

3.7 苯，重蒸。

3.8 乙酸酐。