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EASYspin 石蜡包埋组织RNA 快速提取试剂盒目录号：RN3001适用范围：适用于快速从福尔马林固定、石蜡包埋组织样品中提取总RNA ，RNA 可用于反转录PCR ，荧光定量PCR 。
❖ 试剂盒组成、储存、稳定性：本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3. 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K 为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入0.5毫升灭菌水溶解（终浓度40mg/ml ）。
因为反复冻融可能会降低酶活性，试剂盒组成 保存50次(RN3001) 裂解液PKD 室温 15 ml 结合液RBC 室温25 ml 漂洗液RW 室温10ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 蛋白酶K 粉 40mg/ml -20℃ 20mg RNase-free H 2O 室温 10 ml 基因组DNA 清除柱和收集管室温 50套 RNA 吸附柱RA 和收集管 室温 50套因此溶解后立即按照每次使用量)分装冻存，－20℃保存。
4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如不超过2个10μm厚度石蜡切片。
EASYspin Plus Bone Tissue RNA KitEASYspin Plus骨组织RNA快速提取试剂盒目录号：RN54适用范围：适用于快速提取骨组织细胞总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留，RNA可用于反转录PCR，荧光定量PCR等。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次(RN5401)裂解液CLB 室温50 mlPLANTaid 室温 5 ml裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml 基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备乙醇，研钵或者其它合适的破碎骨组织装置。
3.样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
EASYspin Plus大量组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN41目录编号包装单位RN4101 10次适用范围：适用于快速提取动物细胞和易裂解动物组织总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存10次裂解液RLT Plus 室温100 ml去蛋白液RW1 室温120 ml漂洗液RW 室温25 ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇70%乙醇室温15ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml基因组DNA清除柱和收集管室温10套RNase-free吸附柱RA和收集管室温10套本试剂盒在室温储存6个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成，使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2.3.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过100mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过6x107细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过6x107，组织不超过200mg。
将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.5.6.裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
EASYspin 组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN07目录编号包装单位RN0702 50次适用范围：适用于快速提取各种细胞组织总RNA试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液RLT 室温50 ml 去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备乙醇，一次性注射器，研钵。
3.裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.预防RNase 污染，应注意以下几方面：1)经常更换新手套。
因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2)使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3)RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解。
但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。
玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4)配制溶液应使用无RNase 的水。
OMG植物RNA提取试剂盒中文使用说明植物RNA提取试剂盒（Plant RNA Extraction Kit）是一种高效的试剂盒，用于从植物组织样品中提取RNA。
本文将详细介绍该试剂盒的使用说明，以帮助用户正确操作。
步骤一：样品的预处理1.1收集所需的植物组织样品，并将其快速冷冻在液氮中。
1.2在试验台上，用磨砂盘将样品研磨成粉末状。
使用过程中，要避免样品的过度加热以及溶液的损失。
1.3 从研磨后的样品中取出约100 mg的样品，放入2 mL离心管中。
步骤二：细胞破碎和裂解2.1向离心管中加入1mL细胞破碎液，然后快速颠倒数次，使样品均匀悬浮。
2.2将悬浮液在65摄氏度孵育30分钟，每隔5分钟振荡一次。
2.3孵育结束后，将管子在高速离心机中离心5分钟，以去除细胞残渣。
步骤三：RNA的沉淀3.1将上一步得到的上清液转移至新的2mL离心管中。
3.2加入1.5mL乙醇，轻轻颠倒数次，混合均匀。
3.3将混合液转移至RNA沉淀柱中，并在2mL收集管中储存过滤液。
3.4在6,000×g的离心机中离心柱子30秒，将上清液排除。
3.5在柱子上方放置一个新的2mL离心管，并将柱子放在上面。
3.6加入700µLRNA洗涤缓冲液，然后在6,000×g的离心机中离心柱子1分钟，将上清液排除。
3.7在同一个离心管中，再次加入700µLRNA洗涤缓冲液，然后在6,000×g的离心机中离心柱子1分钟，将上清液排除。
步骤四：RNA的洗涤和干燥4.1将柱子转移到新的2mL离心管中。
4.2加入600µL高盐洗涤缓冲液，然后在6,000×g的离心机中离心柱子1分钟，将上清液排除。
4.3在同一个离心管中，再次加入600µL高盐洗涤缓冲液，然后在6,000×g的离心机中离心柱子1分钟，将上清液排除。
4.4将柱子转移到新的1.5mL离心管中。
4.5 加入30 µL RNase-free水溶解RNA，然后在常温孵育5分钟。
EASYspin Plus Complex Plant RNA KitEASYspin Plus多糖多酚/复杂植物RNA快速提取试剂盒目录号：RN53适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留，RNA可用于反转录PCR，荧光定量PCR等。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次(RN5301)裂解液CLB 室温50 ml裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备β-巯基乙醇，乙醇，研钵(可选)。
3.样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
RNA提取实验操作步骤、注意事项及问题指南准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC处理过的水配制）。
操作步骤：1. 匀浆处理a. 植物组织:以叶片RNA提取为例.取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将叶片剪碎后直接在Trizol中研磨,研磨要迅速,最好不要超过1min.，大约100mg 叶片使用1 ml Trizol.b. 动物组织:以鼠肝脏RNA提取为例.取新鲜或-70℃冻存组织,每50-100mg组织加1ml Trizol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积一般不要超过Trizol体积的10%.c. 单层培养细胞.直接在培养板中加入Trizol裂解细胞,每10cm2面积加1ml Trizol.用取样器吹打几次.注意:Trizol加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定.如果Trizol加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染.d.细胞悬液:离心取细胞，每5-10×106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml Trizol。
加Trizol 前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。
一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪处理。
e.血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10min，10 000rpm 离心1min。
弃上清，收集白细胞沉淀。
每1ml血液收集的白细胞沉淀中加入1ml Trizol。
2. 将匀浆样品在15-30℃放置5mim，使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 可选步骤:4 ℃10 000rpm离心10min，取上清。
如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部分等，可离心去除。
离心得到的沉淀中包括细胞外膜、多糖、高分子量DNA，上清中含有RNA。
处理脂肪组织样品时，上层是大量油脂，应除去。
取澄清的匀浆溶液进行下一步操作。
4. 每使用1ml Trizol加0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈震荡15s，室温放置3min。
EASYspin Plus 细菌RNA快速提取试剂盒目录号：RN43目录编号包装单位RN4302 50次适用范围：适用于快速提取细菌总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于反转录PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次TE (PH8.0) 室温 6 ml溶菌酶4℃20 mg裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml 基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存6个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3.裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
EASYspin Plus组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN28目录编号包装单位RN2802 50次适用范围：适用于快速提取动物细胞和易裂解动物组织总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于PCR，荧光定量PCR.。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次裂解液RLT Plus 室温50 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml70%乙醇室温9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。
将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
下面是为提取小麦叶片客户专门推荐的操作步骤和方案，其它更多内容可以参考原始说明书，货号RN09 EASYspin 植物RNA提取试剂盒；RN38 EASYspin Plus植物RNA提取试剂盒；RN34DNase I 柱上消化试剂盒（RNase free）1、小麦叶片提取RNA做下游反转录荧光定量PCR按照如下步骤操作：采用RN09 EASYspin 植物RNA提取试剂盒+RN34 DNA酶柱上消化试剂盒的操作步骤(和天根的完全一样，也是加了DNA酶柱上消化的步骤)。
具体整合操作步骤如下：操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：⇨第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇!1.直接研磨法（推荐）:a. 新鲜植物组织称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵），加入10体积（1ml）RLT和1体积（100μl）PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLT立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
注：PLANTaid是提取多糖多酚次级代谢产物色素含量丰富的困难样品不可缺少成分。
提取普通植物组织可以不加PLANTaid，RNA产量可能会提高一些。
b. 将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡15秒，13,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid。
c. 取480μl裂解物上清（在不超过RNA吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。
加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积)，此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程，立即吹打混匀,不要离心。
d. 立刻接操作步骤的步骤3。
2.液氮研磨法（提取复杂，易降解样品时推荐此法）:a. 取500μl裂解液RLT，转入1.5ml离心管中，加入50μl PLANTaid混匀备用。
b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒，充分裂解。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp:// 版本号:160120EASYspin Plus Plant RNA KitEASYspin Plus植物RNA快速提取试剂盒目录号：RN38适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留，RNA可用于反转录PCR，荧光定量PCR等。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次(RN3802)裂解液RLT 室温50 ml裂解液CLB 室温8 ml裂解液RLT Plus 室温25 ml去蛋白液RW1 室温40 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml PLANTaid 室温 5 ml基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：1.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备乙醇，研钵(可选)。
3.样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。
开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4.裂解液RLT和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.关于DNA 的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本公司的EASYspin Plus RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。
个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：1)选用跨内含子的引物，以穿过mRNA中的连接区，这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3)将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。
本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup) ，请联系我们索取具体操作说明书。
4)在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱RA上进行DNase I柱上消化处理。
购买DNA酶柱上消化试剂盒(货号：RN34)前可先索取具体操作说明书。
6.仔细阅读补充说明2，如果裂解液CLB效果好，可以联系我们单独订购裂解液CLB。
以后可直接订购RN53 EASYspin Plus 多糖多酚复杂植物RNA快速提取试剂盒。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇!1.直接研磨法（提取简单植物样品推荐此法，但是简单样品也可以用液氮研磨法）:a. 新鲜植物组织称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵），加入10体积（1ml）RLT和1体积（100μl）PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLT立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
注：PLANTaid是提取多糖多酚次级代谢产物色素含量丰富的困难样品不可缺少成分。
b. 将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡15秒，13，000rpm离心5-10分钟，沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid。
c. 取480μl裂解物上清（在不超过基因组DNA清除柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。
加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积)，此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
d. 立刻接操作步骤的步骤3。
2.液氮研磨法（提取复杂，易降解样品时推荐此法）:a. 取500μl裂解液RLT，转入1.5ml离心管中，加入50μl PLANTaid混匀备用。
b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒，充分裂解。
c. 用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒)，可以剪切DNA，降低粘稠度和提高产量。
d. 将裂解物13,000 rpm离心5-10分钟，沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid。
e. 取裂解物上清（在不超过基因组DNA清除柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。
加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积)，此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程，立即吹打混匀,不要离心。
f. 立刻接操作步骤的步骤3。
注意：以上液氮研磨法用户可以根据需要加倍处理，可以提高产量。
也就是使用1ml的裂解液RLT和100μl PLANTaid和100mg的样品。
3.将混合物(每次小于720μl，多可以分两次加入)加入一个基因组清除柱中，（清除柱放入收集管中）13,000 rpm离心2分钟，弃掉废液。
确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。
4.将基因组DNA清除柱子放在一个干净2ml离心管内（不用RNAse free 或者DEPC处理，一般干净的新离心管即可。
也可使用RNA吸附柱配套的新的干净收集管），在基因组清除柱内加500μl裂解液RLT Plus，13,000 rpm离心30秒，收集滤液（RNA在滤液中），用微量移液器较精确估计滤过液体积（通常为450-500μl左右，滤过时候损失体积应该减去），加入0.5倍体积的无水乙醇，此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
5.立刻将混合物(每次小于720μl，多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000 rpm离心2分钟，弃掉废液。
确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。
6.加700μl 去蛋白液RW1，室温放置1分钟，13,000rpm 离心30秒，弃掉废液。
7.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），13,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。
加入500μl漂洗液RW，重复一遍。
8.将吸附柱RA放回空收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
9.取出吸附柱RA，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water（事先在70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。
10.如果预期RNA产量>30μg，加30-50μl RNase free water重复步骤9，合并两次洗液，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
补充说明1：一般植物种类非常复杂，不同的植物种类和部位的样品使用本试剂盒（RN38 EASYspin Plus植物RNA快速提取试剂盒）效果不同。
部分的样品在经过基因组DNA清除柱清除残留DNA的同时可能会严重降低产量。
该种情况下，建议客户可以尝试按照RN09 EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒的操作步骤进行提取。
略去基因组DNA清除柱子的步骤。
RN09和RN38相比少一个基因组DNA清除柱的步骤，部分情况下可能会提高产量。
如果RN09提高产量的同时DNA残留也增多的情况下，客户可以根据实验需要加一个DNA酶柱上消化的步骤（货号：RN34）来清除残留DNA 或者用传统的DNA酶消化来清除DNA残留。
附录1：RN09 EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒操作步骤RN09 EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒和RN38 EASYspin Plus植物RNA快速提取试剂盒的操作完全相同，就是省略了步骤3和4，在步骤1和2后直接接步骤5。
也可以找我们索取RN09 EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒详细说明书或者公司的补充说明2：有一些特别复杂的样品使用裂解液RLT提取失败或者产量很低想提高产量的情况下，可以尝试使用裂解液CLB，裂解液CLB是本公司最新研发配方，测试的松针、丹参叶、胡杨叶、番茄叶表明可以提高产量一倍甚至数倍。
附录2：RN38 EASYspin Plus植物RNA快速提取试剂盒使用新裂解液CLB操作步骤⇨第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇!⇨取1ml裂解液 CLB至离心管内(如果CLB有析出或者沉淀需先置于65°C水浴重新溶解），在裂解液CLB中加入5% β-巯基乙醇（1ml CLB加50μlβ-巯基乙醇）。
颠倒混匀后65°C水浴中预热。
1.液氮中研磨新鲜或-70°C冷冻的材料至细粉。
2.转移100-150mg细粉（水分少的样品如种子叶片等可加100mg，水分多的样品如西瓜可多加一些）加至预热的裂解液CLB（已加有ß-巯基乙醇）离心管中，立即激烈涡旋30－60秒或者用吸头吹打混匀裂解，短时放回 65°C水浴中（5 min-10 min，时间稍长一点10分钟产量可能提高一些），中间偶尔颠倒1-2次帮助裂解。
ß-巯基乙醇是裂解液CLB的关键成分，必要的时候可以提高终浓度到10-20%。
3.振荡混匀后室温13,000rpm离心10分钟。
4.取裂解物上清（在不超过基因组DNA清除柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。
加入上清体积一半的无水乙醇(0.5体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
若上清表面有漂浮物，用吸头挑开吸取下面液体即可。
5.立刻接操作步骤的步骤3。
附录3：使用RN38 EASYspin Plus植物RNA快速提取试剂盒和RN09 EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒发表的部分文章已经超过130篇：1. 桃果实、花、根、叶：Isolation, characterisation and phylogenetic analysis of resistancegene analogues in a wild species of peach (Prunus kansuensis).Canadian Journal of Plant Science, 2011, 91(6): 961-9702. 樱桃花、叶、颚等各部位：Over-expression of the PaAP1 gene from sweet cherry (Prunusavium L.) causes early floweri.Journal of Plant Physiology, 2012,Available online 1 December 20123. 洋葱根、茎、蕾、叶、雌雄蕊等各部位：Cloning and Expression Analysis of A Putative B ClassMADS-box Gene of AcPI in Onion. Scientia Agricultura Sinica, 2012, 45(23):4759-47694. 芜菁：Isolation and Functional Characterisation of the Genes EncodingΔ8-Sphingolipid Desaturase from Brassica rapa. Journal of Genetics and Genomics Volume 39, Issue 1, January 2012, Pages 47–595. 芜菁 1 ：EXPRESSION, DIVERGENCE AND EVOLUTION OF THE CALEOSIN GENEFAMILY IN BRASSICA RAPA. Arch. Biol. 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Phytopathology "F irst Look" paper • /10.1094/PHYTO-01-13-0025-R • posted 11/27/2013.38. 海棠：The Malus crabapple transcription factor McMYB10 regulatesanthocyanin biosynthesisduring petal coloration. Scientia Horticulturae 166 (2014) 42–49.39.海藻：A rapid and sensitive method for field detection of Prorocentrum donghaiense using reversetranscription-coupled loop-mediated isothermal amplification. Harmful Algae 29 (2013) 31–39.（篇幅有限，以下仅列出植物种类名称，发表文章全文可联系我们索取：40油茶，41亚洲百合，42毛泡桐，43人参,，44雪莲，45柑橘3，46菊花，47荞麦和拟南芥，48油松，49玫瑰花，50棉花和拟南芥，51棉花和拟南芥1，52白杨，53毛果杨，54葛根，55百合，56百合1，57黄鹌菜，58棉花1 ，59苹果，60毛果杨）。
