单宁含量测定三种方法
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一、单宁红葡萄酒颜色的稳定很大程度上取决于单宁荷花色素苷发生的缩合反应,由于这种物质的存在,葡萄酒成熟过程中的颜色趋于稳定。
单宁也是呈味物质,它与多糖和肽缩合,使酒更为柔和。
有氧时缩合为浅黄色,有收敛性;无氧时为棕红色,无收敛性。
1、 高锰酸钾氧化法① 原理:利用酒中的单宁色素和其他非挥发性还原物质,在酸性条件下,能被高锰酸钾所氧化,而酒中的单宁色素又能被活性炭吸附除掉,据此测出酒中单宁色素的含量。
② 试剂a.0.1mol/L 高锰酸钾(1/5KMnO 4)标准溶液:称取3.3g 高锰酸钾,溶于100m L 水中,缓缓煮沸15min ,冷却后用水稀释至1000mL ,置于暗处保存一周。
以4号玻璃漏斗过滤于干燥的棕色瓶中。
标定:准确称取0.2g (准确至0.0002g )于105~110℃烘至恒重的基准草酸钠置入250m L 三角瓶中,加100m L (8+92)硫酸溶液溶解,加热至60~70℃,趁热用高锰酸钾溶液滴定至溶液呈粉红色。
同时做空白试验。
计算公式如下:高锰酸钾浓度(1/5KMnO 4,mol/L )=m/((V-V 0)*0.06700)式中 m-----草酸钠的质量,gV -----测定时消耗高锰酸钾溶液的体积,mLV 0----空白试验消耗高锰酸钾溶液的体积,m L0.06700-----消耗1mL 1mol/L 高锰酸钾(1/5KMnO 4)标准溶液相当于草酸钠的质量,g/mmol b.0.05mol /L 高锰酸钾(1/5KMnO 4)溶液:将0.1mol/L 高锰酸钾(1/5KMnO 4)标准溶液稀释至原浓度的1/2c.靛红纸试剂(靛蓝二黄酸钠,靛胭脂):称取靛红1.5g ,溶于50m L 硫酸中,用水稀释至1000m L 。
单宁含量的测定1、采用风光光度法,先用苯抽提除去有机溶剂抽出物后,用乙醇处理将单宁溶解,采用分光光度计测定溶出液在波长500nm处的光密度,由标准曲线即可得到单宁含量。
2、精确量取不同量标准单宁酸溶液与50ml容量瓶中(瓶中预先放好25ml水),假如2ml乙醇、5ml1mol/LNa2CO3溶液及2.5ml钨酸钠-磷钼酸试剂,再加水冲稀至刻度,摇匀后在25℃水浴中放置30min。
将此有色溶液倒入比色皿中,用分光光度计,以波长500nm (或红色滤光片)分别测定其光密度。
以单宁含量(mg)为横坐标,光密度为纵坐标,绘制成标准曲线。
3、精确称取1g(称准至0.0001g)已磨细的试样(同时另称试样测定水分),用滤纸包好,用苯在索氏抽提器中抽提8h。
而后将试样风干,将风干后的试样放入100ml具磨口玻塞的锥形瓶中,加入20ml乙醇,于沸水浴中加热回流1h。
过滤于50ml干容量瓶中,用平头玻璃棒用力挤压瓶中的残渣,将挤出的抽提液也滤入同一容量瓶中,然后向锥形瓶中再加入20ml乙醇,继续在沸水浴中抽提1h,再滤入同一容量瓶中,并用乙醇分次洗涤残渣,直至容量瓶刻度,摇匀,即为样品溶液。
4、用移液管吸取2ml样品溶液于50ml容量瓶中(瓶中预先放好25ml水),按上述绘制标准曲线的操作,进行分光光度法测定,记录其样品溶液的光密度,再根据标准曲线,求的样品中相当的单宁含量。
5、结果计算原料中单宁含量X (%)按下式计算: X= 11000100(1)25m m w ⨯⨯⨯-⨯ m 1——根据标准曲线求得相当样品中的单宁含量,mg m ——风干试样质量,gw ——试样水分,%分光光度法的再现性较好,准确度符合要求,但必须严格按规定条件进行。
——————摘自(石淑兰等,纸浆造纸与分析,2003)。
一、实验目的1. 掌握单宁的提取方法;2. 熟悉单宁含量的测定方法;3. 分析不同样品中单宁含量的差异。
二、实验原理单宁,又称鞣酸,是一种多酚类化合物,广泛存在于植物中。
单宁具有抗氧化、抗菌、抗炎等生理活性。
本实验采用Folin-Denis法测定样品中单宁的含量。
该方法原理是:单宁在碱性条件下,可与磷钨钼酸反应生成蓝色络合物,该络合物在波长760nm处有最大吸收峰,其吸收值与单宁含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:高粱、茶叶、苹果等含有单宁的样品;2. 仪器:分光光度计、电子天平、研钵、烧杯、移液管、容量瓶、玻璃棒等。
四、实验步骤1. 样品预处理:将样品烘干、磨碎,过筛,备用;2. 样品提取:准确称取一定量的样品,加入适量乙醇,搅拌溶解,过滤,滤液备用;3. 标准曲线绘制:准确配制一定浓度的单宁标准溶液,依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液,混匀,放置5min,于760nm波长处测定吸光度,以单宁浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线;4. 样品测定:准确移取一定量的样品提取液,依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液,混匀,放置5min,于760nm波长处测定吸光度,从标准曲线上查得单宁含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线:根据实验数据,绘制单宁标准曲线,得到线性回归方程为:y=0.0522x-0.0043,R²=0.9988;2. 样品测定:根据标准曲线,计算样品中单宁含量,结果如下:(1)高粱样品:单宁含量为2.5mg/g;(2)茶叶样品:单宁含量为15.2mg/g;(3)苹果样品:单宁含量为1.8mg/g。
从实验结果可以看出,不同样品中单宁含量存在明显差异。
高粱和苹果中单宁含量较低,而茶叶中单宁含量较高。
六、实验结论本实验采用Folin-Denis法成功测定了高粱、茶叶、苹果等样品中单宁的含量。
实验结果表明,不同样品中单宁含量存在明显差异,为后续研究单宁的生理活性提供了参考依据。
森博(Symbol)检测
单宁检测
单宁,它是葡萄酒中所含有的两种酚化合物其中的一种物质,尤其在红葡萄酒中含量较多。
葡萄酒中的单宁一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡发酵而来,或者是因为存于橡木桶内而萃取橡木内的单宁而来。
单宁可加入化妆品中,因其对皮肤有很好的收敛、防晒、美白、抗皱、保湿作用,且长期服用有益于心脏血管疾病的预防。
检测方法:
1、皮粉法
2、EDTA络合滴定法
3、高锰酸钾滴定法
4、分光光度法
5、高效液相色谱法
适用标准:
NY/T 1600-2008 水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定分光光度法
原理:
以没食子酸为主的单宁类化合物在碱性溶液中可将钨钼酸还原成蓝色化合物,该化合物在765nm处有最大吸收,其吸收值与单宁含量成正比,以没食子酸为标准物质,标准曲线法定量。
森博(Symbol)检测。
单宁含量测定单宁是一种广泛存在于植物中的化合物,对于食品、药品和化妆品等行业具有重要的意义。
因此,准确测定单宁的含量是非常重要的。
在本文中,将介绍三种常用的单宁含量测定方法:Folin-Ciocalteu法、酶法和高效液相色谱法。
一、Folin-Ciocalteu法Folin-Ciocalteu法是一种经典的测定单宁含量的方法,常用于测定果实、蔬菜、茶叶和酒类等样品。
该方法的基本原理是单宁与Folin-Ciocalteu试剂反应,生成蓝色化合物,通过比色测定蓝色化合物的吸光度,从而确定单宁的含量。
具体操作步骤如下:1.准备样品溶液:将待测样品粉碎并称取适量加入溶剂中,使其浓度在1-1000µg/mL范围内。
2. 加入Folin-Ciocalteu试剂:向样品溶液中加入一定量的Folin-Ciocalteu试剂,混匀后静置一段时间,使反应充分进行。
3.加入碱液:向反应溶液中加入碱液,混匀后静置一段时间,使反应继续进行。
4.比色测定:将反应溶液转移到比色皿中,使用紫外可见光谱仪测定反应溶液的吸光度,得到单宁的含量。
二、酶法酶法是一种基于单宁酶的反应原理分析单宁含量的方法,常用于测定茶叶、果汁和葡萄酒等样品的单宁含量。
该方法的基本原理是单宁酶可以与单宁结合,并生成可测定的产物,通过测定产物的光吸收来确定单宁的含量。
具体操作步骤如下:1.准备酶溶液:将单宁酶溶解于合适的缓冲液中,制备一定浓度的酶溶液。
2.准备样品溶液:将待测样品粉碎并称取适量加入缓冲液中,使其浓度在1-1000µg/mL范围内。
3.加入酶溶液:向样品溶液中加入一定量的酶溶液,混匀后静置一段时间,使反应进行。
4.比色测定:将反应溶液转移到比色皿中,使用紫外可见光谱仪测定产物的吸光度,得到单宁的含量。
三、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种快速、准确的测定单宁含量的方法,常用于测定茶叶、葡萄酒和草药中单宁的含量。
该方法的基本原理是利用色谱柱将样品中的单宁与其他组分分离,通过测定峰面积来确定单宁的含量。
单宁含量的测定实验报告这次我们要聊的实验报告,是关于单宁含量的测定。
听起来好像有点“高大上”,其实也没那么复杂,大家放松点,我们慢慢来。
单宁呢,就是那种天然存在于植物中的物质,尤其是在茶叶、葡萄酒这些地方,常常能看到它的身影。
要知道,单宁的味道有点苦涩,喝茶时如果你觉得口感有点“干”,就是它的功劳。
所以,今天我们就要搞明白它到底有多少,看看它到底有多“给力”。
咱们得先搞清楚实验的目的。
简单说,就是要通过一系列步骤,测出样品中单宁的含量。
这一过程呢,既要仔细,也要有点技巧。
你要知道,科学实验可不是走马观花的事儿,不然最后结果出来了,可能跟你想的不太一样。
所以,咱们得一点一点捯饬,慢慢摸索。
这次实验的工具也很简单,主要有一瓶溶液——叫做Fe3+溶液,别看它名字这么简单,它可是和单宁有着“深厚的友情”。
当单宁跟这溶液混在一起时,它们会发生反应,生成一种我们能用眼睛看得见的沉淀,虽然不算多惊艳,但却能让我们知道:嘿,单宁来了!你可能会问了,这么简单的反应,能不能直接看出结果啊?嗯,不能。
别急,咱们后面有办法解决。
实验的步骤其实挺直接的:取一定量的样品溶液,加入Fe3+溶液,搅拌均匀后静置一会儿,接着就会看到沉淀的出现。
这时我们要做的,就是估算出沉淀的量,进而推算出单宁的含量。
这一步其实挺像是做菜,看着锅里煮的汤,慢慢等着味道出来。
但你得记得,这个“沉淀”可不是像你小时候捉到的小鱼那么“乖”,它是有自己的性格的,轻轻一动,它就会消失。
所以,搅拌要适度,千万别太用力,搞不好就啥也看不见了。
咱们要干的事儿就是根据反应的程度来测量单宁的含量。
这时候就需要一点数学功底了,得算一下溶液中单宁的浓度。
大家别慌,记得你不是一个人在战斗!如果对这些公式还不太熟悉,完全可以参考实验中的标准曲线,给自己一个参考系。
简单点说,就是通过对照已知浓度的标准溶液,找到一个“标尺”,然后用它来推算咱们自己实验的结果。
就像你吃火锅,吃着吃着你心里大概能知道哪个锅底辣,哪个不辣,那个味道该多浓,只不过这里用的是数值和公式。
单宁的测定方法范文
单宁测定是一种确定植物材料中单宁含量的方法,其结果可以衡量植物材料的酸性和抗氧化特性。
本文将介绍几种常用的单宁测定方法,包括显色法、比色法、重量法和高效液相色谱法。
1.显色法:
显色法是一种简单易行且常用的方法,可以用于测定单宁含量。
常见的显色试剂有菲洛蓝、酸性丙酮、硫酸铁三阳离子等。
测定过程包括提取单宁样品,加入显色试剂,观察反应产生的显色程度。
然后可以通过比较样品与标准曲线之间的差异来确定单宁含量。
2.比色法:
比色法是利用一些试剂与单宁反应生成有色产物的方法。
通常使用的试剂包括苯酚、硼酸、吡啶和黄原胶等。
这些试剂与单宁反应后,可以通过分光光度计或比色计测定产生的有色产物的吸光度,并从标准曲线中确定单宁含量。
3.重量法:
重量法是一种通过测量单宁提取物的干燥样品的重量来测定单宁含量的方法。
首先,从植物样品中提取单宁,然后将提取物置于恒温恒湿条件下干燥,最后测量干燥后的重量。
通过计算提取物中单宁的含量,可以确定原始材料中的单宁含量。
4.高效液相色谱法:
高效液相色谱法(HPLC)是一种准确、重复性好的分析方法,可以用于测定单宁含量。
该方法基于单宁化合物的分离和检测,可用于定性和定
量分析。
它通过将样品溶液通过色谱柱,并利用不同单宁化合物的保留时
间和峰面积来确定样品中的单宁含量。
需要注意的是,不同植物材料可能含有不同类型和形式的单宁化合物。
因此,在选择测定方法时,应根据样品的特性和研究目的来决定最适合的
方法。
此外,多种方法的综合使用可以提高测定结果的准确性。
植物单宁的含量测定方法1 植物单宁单宁(Tannins)又称单宁酸、鞣质、鞣酸。
按Bategnt的定义,指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。
主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。
单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢,外用于局部止血和创面保护防止感染发炎;近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。
单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品,生产食品添加剂、风味剂等;在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用;在制革工业中,单宁是栲胶的主要成分。
2 单宁的含量测定经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等;现阶段涌现出许多新型的测定方法,如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。
2.1 经典测定方法2.1.1 皮粉法皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法,从 20 世纪 60 年代至今,原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。
皮粉的主要成分是蛋白质,单宁是多元酚类,分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀,以此使单宁沉淀下来,用重量法测定其含量。
根据皮粉与单宁溶液接触方式不同,可将其分为震荡法和过滤法。
震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁;过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。
通常,过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%~7%。
皮粉法所测的是单宁的绝对含量,并且不需要标样,操作简单,可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。
但皮粉法的缺点是,用重量法测定样品时,须经过过滤、干燥、称重,样品耗用量大,测定时间较长,一般样品分析需20 h 左右,不适合大批量样品的快速测定;没有选择性,对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力,往往使测定结果偏高;适用于单宁含量高的样品,不适合低含量和微量测定;另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。
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单宁检测
单宁,它是葡萄酒中所含有的两种酚化合物其中的一种物质,尤其在红葡萄酒中含量较多。
葡萄酒中的单宁一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡发酵而来,或者是因为存于橡木桶内而萃取橡木内的单宁而来。
单宁可加入化妆品中,因其对皮肤有很好的收敛、防晒、美白、抗皱、保湿作用,且长期服用有益于心脏血管疾病的预防。
检测方法:
1、皮粉法
2、EDTA络合滴定法
3、高锰酸钾滴定法
4、分光光度法
5、高效液相色谱法
适用标准:
NY/T 1600-2008 水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定分光光度法
原理:
以没食子酸为主的单宁类化合物在碱性溶液中可将钨钼酸还原成蓝色化合物,该化合物在765nm处有最大吸收,其吸收值与单宁含量成正比,以没食子酸为标准物质,标准曲线法定量。
森博(Symbol)检测。
单宁含量测定三种方法单宁是一种常见的有机化合物,在食品和药物中广泛存在。
单宁含量是判断食品和药物质量的重要指标之一、本文将介绍三种常见的单宁含量测定方法:重量法、光度法和高效液相色谱法。
1.重量法重量法是一种简单直观的单宁含量测定方法。
首先,需要准备一定量的样品,并根据需要进行粉碎和干燥处理。
然后,将样品称取一定重量,加入一定体积的溶剂中,用搅拌器进行充分搅拌,使样品中的单宁溶解在溶剂中。
接着,将样品溶液过滤,滤液即为待测溶液。
然后,将待测溶液取一定体积,加入预先称取的副液中,使用滴定法进行滴定。
滴定液可以是酸性溶液,滴定过程中,单宁与滴定液中的酸发生反应,并转化为酸性盐,通过滴定液的消耗量可以计算出单宁的含量。
2.光度法光度法是一种利用单宁与一些试剂反应产生色素的方法。
该方法测定单宁含量的原理是:单宁与一些试剂反应后,生成有色物质,该有色物质的颜色与单宁的含量成正比。
在进行光度法测定时,首先需要准备一定量的样品,并进行粉碎和干燥处理。
然后,将样品加入适量的试剂中,使其与单宁反应产生有色物质。
接着,使用分光光度计测量试剂溶液的吸光度,通过标准曲线进行计算,得出样品中单宁的含量。
3.高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的分析方法,具有分离度高、灵敏度高、重复性好等特点。
该方法测定单宁含量的原理是:利用色谱柱对样品中的单宁进行分离,通过检测柱后流出的样品中单宁的峰面积或峰高,可以得出单宁的含量。
在进行高效液相色谱法测定时,首先需要准备一定量的样品,并进行粉碎和干燥处理。
然后,将样品溶解在适量的溶剂中,并进行过滤处理。
接着,将样品注入高效液相色谱仪中进行分析,根据标准曲线进行计算,得出样品中单宁的含量。
综上所述,重量法、光度法和高效液相色谱法是常用的单宁含量测定方法。
不同的方法有各自的特点和适用范围,根据实际需要选择合适的方法进行测定。
单宁简单测定方法一、原理单宁物质作为多酚,为强还原剂,极易被氧化还可被活性碳吸附。
样品加水浸提出单宁后,用高锰酸钾滴定,以靛红为指示剂。
试样中除了单宁,还有其它物质以及靛红均可被高锰酸钾氧化,故要做空白滴定。
空白试验可用活性炭吸收单宁后,再用高锰酸钾滴定,从试样与空白液所消耗的高锰酸钾溶液体积之差求得样品中单宁的含量。
靛红被高锰酸钾氧化,从蓝色变为黄色,从而指示终点。
二.试剂与工具试剂:1. 0.01mol/L标准高锰酸钾溶液:称取AR纯高锰酸钾1.588克,蒸馏水定容1000ml,棕色瓶内暗处保存。
2. 0.1%靛红: 称取0.5克靛红,加25ml浓硫酸(98%) ,放置4小时后,慢慢加入内装200ml蒸馏水的500ml容量瓶,冷却后定容至500ml。
3. 粉状活性炭工具:研钵漏斗三角瓶刻度吸管量筒25 ml酸式滴定管容量瓶滤纸三. 测定步骤:1. 样品处理:A. 固体样品: 称取样品5-10克(视材料含单宁量多少而定) ,研磨碎或打碎,全部移入100ml容量瓶中,摇匀,振荡提取30分钟至2小时。
用干燥滤纸过滤或离心,得样液。
B. 液体样品: 直接吸原汁10ml,用蒸馏水定容至100ml,用干燥滤纸过滤或离心,得样液。
2. 测定:吸取5ml样液,加5ml靛红溶液,100ml蒸馏水,用0.01mol/L KMnO4溶液快速滴定至黄绿色,再缓慢滴定至明亮的金黄色为终点。
记下消耗的KMnO4的毫升数。
3. 空白测定:A. 取样液5ml, 加活性炭2克,置水浴上加热搅拌约10min,过滤至三角瓶,用热水再洗涤数次。
于滤液中准确加入靛红溶液5ml,补足100ml水,用上法滴定至金黄色。
B.取样液5ml ,同上法滴定至金黄色。
四. 计算:单宁%=M(V1-V2) ×b×0.00416×100/(W×B)式中:M--高锰酸钾标准溶液的摩尔浓度V1--样品滴定消耗高锰酸钾溶液的量(ml)V2--空白滴定消耗高锰酸钾溶液的量(ml)B--样品提取液定容总体积(ml)b--测定时取样品液的体积(ml)W-- 样品的重量(克)0.0416--1mmol高锰酸钾溶液氧化单宁的克数。
单宁含量测定三种方法单宁是一种广泛存在于植物中的天然化合物,具有很多药理活性以及抗氧化和抗炎作用。
因此,单宁含量的测定对于评估植物材料的药用和保健价值非常重要。
目前,常用的单宁含量测定方法有葡萄单宁定量法、酶解法和高效液相色谱法。
本文将对这三种方法进行详细介绍。
首先是葡萄单宁定量法。
该方法是使用与单宁化学反应形成显色产物,并通过测定产物的吸光度来间接测定单宁含量。
这种方法简单、可靠,并且适用于各种植物材料的单宁含量测定。
具体步骤如下:首先将植物样品粉碎,然后用醇提取单宁,将提取液与酸溶液反应形成有色产物,然后通过分光光度计测定产物的吸光度,并与已知浓度的单宁标准曲线比较,计算出单宁含量。
其次是酶解法。
该方法通过使用单宁酶来降解植物材料中的单宁,并通过测定酶解液中的还原能力来测定单宁含量。
这种方法可以在比较短的时间内得到准确的结果,并且相对简单。
具体步骤如下:首先将植物材料粉碎,并加入含有单宁酶的酶解液,将混合物在恒温条件下酶解一段时间,然后通过淬灭试剂去除还原能力较强的成分,最后通过测定还原能力的方法来估计单宁含量。
最后是高效液相色谱法。
该方法是使用高效液相色谱仪分离和测定植物材料中的单宁化合物。
相比于前两种方法,高效液相色谱法具有更高的准确性和灵敏度。
具体步骤如下:首先将植物样品提取并进行预处理,然后通过高效液相色谱仪进行分离,最后使用紫外检测器或荧光检测器进行检测,并通过峰面积或峰高进行定量分析。
总结起来,葡萄单宁定量法、酶解法和高效液相色谱法是目前常用的单宁含量测定方法。
不同的方法有其各自的优势和适用范围,在实际应用中需要根据具体情况选择合适的方法。
单宁含量的准确测定有助于评价植物材料的药用和保健价值,为植物资源的合理开发和利用提供参考。
植物单宁的含量测定方法1 植物单宁单宁(Tannins)又称单宁酸、鞣质、鞣酸。
按Bategnt的定义,指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。
主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。
单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢,外用于局部止血和创面保护防止感染发炎;近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。
单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品,生产食品添加剂、风味剂等;在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用;在制革工业中,单宁是栲胶的主要成分。
2 单宁的含量测定经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等;现阶段涌现出许多新型的测定方法,如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。
2.1 经典测定方法2.1.1 皮粉法皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法,从 20 世纪 60 年代至今,原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。
皮粉的主要成分是蛋白质,单宁是多元酚类,分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀,以此使单宁沉淀下来,用重量法测定其含量。
根据皮粉与单宁溶液接触方式不同,可将其分为震荡法和过滤法。
震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁;过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。
通常,过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%~7%。
皮粉法所测的是单宁的绝对含量,并且不需要标样,操作简单,可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。
但皮粉法的缺点是,用重量法测定样品时,须经过过滤、干燥、称重,样品耗用量大,测定时间较长,一般样品分析需20 h 左右,不适合大批量样品的快速测定;没有选择性,对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力,往往使测定结果偏高;适用于单宁含量高的样品,不适合低含量和微量测定;另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。