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基础医学与临床Basic&Clinical MedicineMay2021 Vol.41No.52021年5月第41卷第5期文章编号：1001-6325(2021)05-0641-07研究论文PARP14在3种抑郁症模型小鼠海马区的表达升高及其与神经炎性反应的关系李辰，修建波，许琪*(中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室，北京100005)摘要：目的探究ADP核糖聚合酶14(PARP14)与抑郁症是否相关及其是否影响小胶质细胞的炎性反应。
方法构建抑郁症小鼠模型，通过实时定量PCR和Western blot对比了慢性束缚(CRS)模型、慢性不可预知压力(CUMS)模型和脂多糖(LPS)模型,3种抑郁症模型小鼠抑郁症相关脑区中相比于对照组PARP14的蛋白及mRNA表达水平变化。
而后在永生化小胶质细胞系BV2中检测其敲低及过表达Pa°Z4后对炎性反应的影响。
结果在3种抑郁症模型小鼠海马区均观察到了PARP4表达水平相较于对照组的升高(P<0.05),且在CRS模型组中观察到PARP14表达水平与组织中炎性反应因子的表达水平相关(P<0.05)。
LPS刺激小鼠永生化小胶质细胞系BV2后PARP14表达水平也随之升高(P<0.05)；同时过表达PARP14后的BV2细胞响应LPS刺激表达更多促炎性细胞因子(P<0.01),而敲低Parpl4或使用PARP14抑制剂处理后表现与其相反(P<0.05)。
结论抑郁模型小鼠海马区PARP14表达水平升高，这可能加剧小胶质细胞响应LPS的炎性反应,从而促使神经炎性反应水平升高。
关键词:重度抑郁症;ADP核糖聚合酶14(PARP14)；神经炎性反应;小胶质细胞中图分类号:R338.2文献标志码:APARP14is increased in the hippocampus of three mousedepression models and its relationship with neuroinflammationU Chen,XIU Jian-bo,XU Qi*(State Key Laboratory of Medical Molecular Biology,Department of Molecular Biology and Biochemistry,Institute of Basic Medical Science CAMS,School of Basic Medicine PUMC,Beijing100005,China)Abstract:Objective To explore whether ADP ribose polymerase14(PARP14)is related to depression and does it affect the inflammatory response of microglia.Methods Three kinds of mouse depression model were established to find potential relationship between the expression level of PARP14and the change in depression-related brain areas including chronic restraint(CRS)model,chronic unpredictable mild stress(CUMS)model,lipopolysaccharide (LPS)model.Then the effect of Parpl4over-expression and knockdown on inflammatory response was examined in immortalized microglia cell line BV2.Results The expression of PARP14increased in the hippocampal tissues收稿日期：2021-01-22修回日期:2021-03-20基金项目：国家自然科学基金(81625008,81930104,31970952)；国家重点研发计划(2016YFC1306700,2020YFA0804502)；北京市科技计划(Z181100001518001)；中国医学科学院创新工程项目(2016-I2M亠004)；广东省重点领域研发计划(2018B030334001)*通信作者(coiresponding author):xuqi@642基础医学与临床Basic&Clinical Medicine2021.41(5) of all three kinds of depression models,and the expression of PARP14in the CRS model group was correlated with the expression level of inflammatory response factors in the tissues.The expression level of PARP14also increased after stimulation of mouse immortalized microglia cell line BV2by LPS.At the same time,BV2cells with over-ex-pression of PARP14expressed more pro-inflammatory cytokines as a response to LPS stimulation,while those with knockdown Parpl4or treatment with PARP14inhibitor showed the opposite results.Conclusions This study shows that the expression level of PARP14in the hippocampus of depression model mice increased?which may enhance the level of neuroinflammation and aggravate depression-like phenotype by exacerbating the:PS induced inflammatory response of microglia cells・Key words:major depressive disorder；poly ADP-ribose polymerase14(PARP14)；neuroinflammation；microglia抑郁症(depressive disorder)是一种发病时表现为情绪低落、兴趣减退和愉悦感丧失等症状的精神疾病⑴。
慢性口服糖皮质激素制备大鼠抑郁症模型目的：通过慢性口服糖皮质激素制备大鼠抑郁模型，为抑郁症的研究提供有效的动物模型。
方法：选取成年SD大鼠，随机分为对照组、高剂量组和低剂量组，自由进食饮水。
对照组口服2.4%乙醇溶液，高剂量组（H组）和低剂量组（L组）分别口服皮质酮溶液。
前14 d皮质酮浓度分别为100、25 μg/mL，第15天将其浓度降为起始浓度的50%，口服3 d，第18天将其浓度再次降为起始浓度的25%，口服4 d，共21 d。
ELISA测定大鼠每周血清中糖皮质激素水平。
观察大鼠在强迫游泳，高架十字迷宫和糖水偏爱实验中的各项指标，并评价抑郁模型的效果。
结果：ELISA结果显示，口服皮质酮可以增加大鼠血清中激素浓度。
给药后，实验组在强迫游泳中的漂浮時间均较给药前增加，在高架十字迷宫闭臂所待时间延长，在开臂的时间缩短，糖水偏爱度降低。
结论：口服给予糖皮质激素可以制备理想的大鼠抑郁模型，操作简便，适合抑郁症的实验研究。
标签：抑郁症；糖皮质激素；动物模型；行为学观察；大鼠抑郁症（major depressive disorder，MDD）是一种高发病率、高复发率和高自杀率的情感障碍性精神疾病[1]。
该病患者主要表现为情绪低落、快感缺失、睡眠紊乱、注意力无法集中等症状。
抑郁症严重困扰患者的生活和工作，给患者家庭和社会带来极大负担[2]。
研究表明，约15%的抑郁症患者死于自杀。
世界卫生组织、世界银行和哈佛大学的一项联合研究表明，抑郁症已经成为中国疾病负担的第二大病[2]，抑郁症的治疗非常重要。
目前抑郁症的治疗主要是药物治疗、心理治疗及物理治疗等[3-4]，但抑郁症患者的预后并不乐观，复发率较高[5]。
因此，需要加大对抑郁症病因及机制的研究力度。
研究抑郁症的动物模型有很多，包括嗅球切除模型、强迫游泳、悬尾、习得性无助、行为绝望和慢性温和不可预知性应激[6-7]，但是很多模型不能很好地模拟临床抑郁症患者的表现。
一、实验背景抑郁症是一种常见的精神疾病，严重影响患者的身心健康。
近年来，抑郁症的发病率逐年上升，已成为全球性的公共卫生问题。
为了研究抑郁症的发病机制，寻找有效的治疗方法，本研究采用小鼠作为实验动物，通过建立小鼠抑郁模型，探讨不同抗抑郁药物的治疗效果。
二、实验材料与方法1. 实验动物：选取健康、体重相近的雄性C57BL/6小鼠，随机分为5组，每组10只。
2. 实验药物：氟西汀（氟伏沙明）、阿米替林、曲唑酮、米氮平、安慰剂。
3. 实验方法：（1）建立抑郁模型：采用慢性不可预测应激（CUMS）方法，将小鼠置于不同应激环境中，持续4周，以模拟人类抑郁症的慢性病程。
（2）实验分组：将小鼠随机分为5组，分别为氟西汀组、阿米替林组、曲唑酮组、米氮平组和安慰剂组。
（3）药物干预：从第5周开始，每组小鼠分别给予相应药物（氟西汀、阿米替林、曲唑酮、米氮平）或安慰剂，连续给药4周。
（4）行为学评估：采用悬尾实验、强迫游泳实验和糖水偏好实验，评估小鼠的抑郁样行为。
（5）组织学检测：取小鼠脑组织，进行苏木精-伊红（H&E）染色，观察神经元形态学变化。
（6）生化指标检测：取小鼠血清，检测皮质醇、神经生长因子（NGF）和脑源性神经营养因子（BDNF）水平。
三、实验结果1. 行为学评估（1）悬尾实验：与安慰剂组相比，氟西汀组、阿米替林组、曲唑酮组和米氮平组小鼠的悬尾时间明显缩短（P<0.05），表明这些药物对抑郁样行为有显著改善作用。
（2）强迫游泳实验：与安慰剂组相比，氟西汀组、阿米替林组、曲唑酮组和米氮平组小鼠的游泳不动时间明显缩短（P<0.05），表明这些药物对抑郁样行为有显著改善作用。
（3）糖水偏好实验：与安慰剂组相比，氟西汀组、阿米替林组、曲唑酮组和米氮平组小鼠的糖水消耗量明显增加（P<0.05），表明这些药物对抑郁样行为有显著改善作用。
2. 组织学检测与安慰剂组相比，氟西汀组、阿米替林组、曲唑酮组和米氮平组小鼠脑组织中的神经元形态学无明显变化。
抑郁模型是指用来研究和理解抑郁症的模型。
LPS（Learned Helplessness Paradigm）抑郁模型是其中一种经典的实验模型，它通过动物实验来探索抑郁症的产生和发展机制。
LPS抑郁模型的原理主要基于“学习无助”的概念。
学习无助是一种被描述为无法对环境中的负面刺激做出适当反应的心理状态。
在这种实验模型中，在动物实验中经历一系列无法控制的刺激或无法逃避的负面事件后，动物会表现出类似抑郁症的行为表现，例如缺乏活力、社交退缩、食欲不振等。
LPS实验模型的基本原理是通过让动物体验到无法控制的刺激或负面事件后观察到的行为改变，以模拟抑郁症的症状。
这种模型主要用于研究抑郁症的病理生理机制和寻找潜在的治疗方法。
通过观察实验动物在不同治疗条件下的行为表现，可以评估不同药物或干预手段对抑郁症的效果。
需要注意的是，LPS抑郁模型只是抑郁症研究中的一种实验模型，在实际的临床诊断和治疗中仍需综合考虑多种因素，包括环境、心理和生物等多个维度。
关于抑郁症小鼠模型创建的研究进展引言抑郁症是一种常见的精神疾病，给患者和社会造成了巨大的负担。
为了更好地理解和治疗抑郁症，研究人员广泛使用小鼠模型来研究这种疾病。
本文旨在探讨近年来有关抑郁症小鼠模型创建的研究进展。
现有的抑郁症小鼠模型目前已经存在多种抑郁症小鼠模型，其中最常用的是慢性不可逆性压力（chronic unpredictable stress, CUS）模型、慢性社会避退（chronic social defeat, CSD）模型和慢性病毒感染模型。
1. CUS模型：该模型通过连续施加不同的应激刺激，如冷水浸泡、食物禁食、隔离等，使小鼠长时间暴露在不可预测的压力之下。
这种模型能够刺激小鼠产生慢性压力反应，并表现出类似人类抑郁症的行为改变，如乏力、社交退缩等。
2. CSD模型：该模型通过让小鼠进行连续的社交失败，如与攻击性大鼠共同生活，使小鼠处于慢性社会压力状态。
这种模型能够引发小鼠产生社交退缩、情绪低落等抑郁症症状。
3. 病毒感染模型：近年来，研究人员发现抑郁症与病毒感染之间存在一定关联。
通过给小鼠注射一定的病毒，如白血病病毒或单核细胞病毒，可以模拟感染状态对其行为的影响。
新兴的研究方法随着科技的发展，研究人员不断探索新的方法来提高抑郁症小鼠模型的可靠性和可行性。
1. 基因编辑技术：利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术，可以通过修改小鼠基因来模拟抑郁症相关遗传变异。
这种方法可以更准确地模拟人类抑郁症的遗传基础。
2. 神经影像学技术：通过使用MRI、fMRI等神经影像学技术，可以对抑郁症小鼠模型的大脑结构和功能进行非侵入式的观察和分析。
这种方法有助于了解抑郁症的神经生物学机制。
3. 环境因素模拟：除了生物因素外，环境因素对抑郁症的发生也起到重要作用。
研究人员可以模拟特定的环境因素，如光周期变化、温度变化等，来观察其对小鼠行为和生理的影响。
研究挑战与展望尽管抑郁症小鼠模型在研究中起到了重要作用，但仍然存在一些挑战和待解决的问题。
