苯丙氨酸解氨酶(PAL)检测试剂盒(苯丙氨酸比色法)

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（丙氨酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。

1.1 规格试剂1:3×60 mL，试剂2:1×45 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×20 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×12 mL；试剂1:4×60 mL，试剂2:4×15 mL；试剂1:2×40 mL，试剂2:2×10 mL；试剂1:3×28 mL，试剂2:3×7 mL；试剂1: 1×4L，试剂2: 1×1L；试剂1: 2×4L，试剂2: 1×2L。

1.2 主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液。

外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度应不小于1.0（波长340nm，光径1cm）。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.004。

2.4 分析灵敏度测试100U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0025。

2.5 准确度用参考物质(GBW09177)定值的血清测定，实测值与标示值的偏差不超过±12.0％。

2.6 重复性批内变异系数（CV）应不大于5%。

2.7 线性2.7.1在[0.5，800]U/L区间内，线性相关系数r应不低于0.9900；2.7.2[0.5，96）U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±11.52U/L；[96，800]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±12%。

2.8 批间差批间差应不大于10％。

2.9 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，检测结果应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。

高效液相色谱法测定酶转化液中d-苯丙氨酸
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的鉴定和测定化合物的方法。

下面是一种用于测定酶转化液中d-苯丙氨酸的HPLC 方法：
仪器和试剂：
- 高效液相色谱仪
- C18色谱柱
- 紫外检测器
- 甲醇
- 0.1％磷酸溶液（pH 2.5）
步骤：
1. 准备样品：将酶转化液进行适当的前处理，如稀释或净化，以获得可测定d-苯丙氨酸浓度的样品。

2. 准备标准曲线：准备一系列浓度已知的d-苯丙氨酸标准溶液。

可以使用纯品的d-苯丙氨酸，或者通过其他方法制备。

3. 色谱条件设置：
- 使用C18色谱柱，柱温设定为适当的温度。

- 流动相使用甲醇和0.1％磷酸溶液（pH 2.5），以一定比例混合，并根据实验需要进行调整。

- 设定流速和检测器波长以最佳条件进行分析。

通常，流速为1 mL/min，波长为210 nm。

4. 注入样品和标准溶液：将样品和标准溶液分别注入色谱仪进行分析。

保证注入的样品和标准溶液体积足够小，以避免过度稀释。

5. 分析和计算：根据标准曲线和样品的峰面积，计算样品中的
d-苯丙氨酸浓度。

可以使用内标法或外标法进行定量。

根据不同的实验要求和仪器设置，上述方法可能需要进行调整。

在进行HPLC分析时，确保操作准确和安全，并按照相关的
实验室规定进行。

苯丙氨酸解氨酶(PAL)提取液简介：苯丙氨酸解氨酶(L－phenylalanine ammonia-lyase ，PAL)是催化直接脱掉L-苯丙氨酸上的氨而生成反式桂皮酸的酶。

该酶多存在于高等植物、酵母、菌类可溶性部分物质，是1961年J.Koukol 在大麦中发现的，推测其分子量约为30万，这是一个可把苯丙氨酸用于酚类化合物合成的酶。

在组织中的活性可随外界因素而发生显著变化，用光照、病伤害、植物激素处理等会使活性显著增加。

在多数情况下，在组织中活性增加时，酶发生失活作用，这时组织中具有活性酶的量很快就会减少，据认为这种失活是与类蛋白质物质作用有关。

Leagene 苯丙氨酸解氨酶(PAL)提取液主要用于裂解植物组织，提取样品中的苯丙氨酸解氨酶。

该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、蒸馏水2、离心管或试管3、匀浆器或研钵4、低温离心机操作步骤(仅供参考)：1、取植物组织清洗干净，切碎。

2、加入苯丙氨酸解氨酶(PAL)提取液，冰浴情况下充分捣碎或研磨。

3、离心，留取上清液。

4、冻存，用于苯丙氨酸解氨酶的检测或其他用途。

计算：组织或植物粗酶液获得率(ml)=上清液体积(ml)/组织或植物质量×100%注意事项：编号名称CS0366Storage 苯丙氨酸解氨酶(PAL)提取液500ml 4℃避光使用说明书1份1、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。

2、所测样本的值高于标准曲线的上限，应用苯丙氨酸解氨酶(PAL)提取液稀释样品后重新测定。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

相关：编号名称CC0007磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)CS0001ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DC0032Masson三色染色液DF0135多聚甲醛溶液(4%PFA)NR0001DEPC处理水(0.1%)PS0013RIPA裂解液(强)TC1167尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。

拟南芥苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因的研究进展孙海燕;全雪丽;付爽;吴松权【摘要】苯丙氨酸解氨酶(PAL)是催化苯丙烷代谢途径第1步反应的限速酶,广泛地参与植物生长发育过程中的各种生理活动.本文概述了拟南芥PAL基因的分子生物学和生理学研究进展,主要包括PAL基因的结构、表达特性、调控机制及其参与的植物生理学的意义,为进一步阐明PAL基因的功能提供参考依据.【期刊名称】《延边大学农学学报》【年(卷),期】2016(038)001【总页数】5页(P88-92)【关键词】拟南芥;苯丙氨酸解氨酶;表达;生理作用【作者】孙海燕;全雪丽;付爽;吴松权【作者单位】延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002【正文语种】中文【中图分类】Q943苯丙烷代谢途径是陆生植物生长和发育所必需的，是植物长期适应自然环境的结果[1-2]。

苯丙氨酸解氨酶(EC 4.3.1 5, PAL)催化L-苯丙氨酸(L-Phe)的非氧化脱氨基作用，生成肉桂酸，是生物合成苯丙烷类天然产物的第1步[3-4]，也是第1个被鉴定的植物“防御基因”[5]。

也是苯丙烷类代谢途径中研究最多的酶[6]。

肉桂酸是植物生长、发育和环境适应所必需的各种苯丙烷类物质的合成起始物[7]。

苯丙烷类化合物是植物中大量酚类化合物的前体，包括木质素、黄酮类、异黄酮类、香豆素、芪类和水杨酸等，它们在维持植物结构、抵御紫外线、形成花青素和植保素、保持花粉活力、信号转导与交流等方面发挥着重要作用 [1,5,8]。

自1961年Koukol和Conn首次描述PAL以来，苯丙氨酸解氨酶得到了广泛的研究[9]，它是控制苯丙烷途径生物合成去向的关键酶和限速酶[7,10]。

拟南芥是一种十字花科植物，广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究，已成为一种典型的模式植物，该植物具有个体小、生长周期快、形态特征简单、生命力强、基因组小、遗传操作简单等优点[11-12]。

生化实习报告班级：生物技术08指导教师：敖新宇、贾璐学号：姓名：日期：2009-12-19生物化学综合实验摘要：本次实验包括苯丙氨酸解氨酶的纯化及其活性测定和大玉米粉中营养成分的测定两个实验。

关键词：苯丙氨酸解氨酶、Sephadex G—25层析、DEAE纤维素层析、活力、比活力、大玉米粉、凯式定氮法、索式提取法、3，5—二硝基水杨酸比色法。

实验一苯丙氨酸解氨酶的纯化及其活性测定一实验目的1.学习掌握分离纯化生物大分子的方法；2.学习掌握酶活性的测定方法；3.了解在分离纯化过程中酶活性的变化；4.了解高速冷冻离心机的操作步骤二实验原理苯丙氨酸解氨酶（L—phenylalanine: ammonia lyase,简称PAL；EC4.3.1.5）是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶，与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关，在植物生长发育和抵制病菌侵害过程中起重要作用。

PAL催化L—苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸在290nm处有最大吸收值。

规定1h内增加0.01为PAL的一个活力单位。

酶的比活力是指样品中每毫克蛋白质所含的酶活力单位数。

在实验中将会看到随着PAL的逐步被纯化，其比活力也在逐步增加。

在蛋白质溶液中加入一定量的中性盐（如硫酸铵、硫酸钠等）使蛋白质沉淀析出称为盐析。

溶液的盐浓度通常以盐溶液的饱和度表示，饱和溶液称100%饱和度。

沉淀一种酶所需的具体浓度需要经实验确定。

Sephadex(交联葡萄糖凝胶)是有细菌葡聚糖长连，用交联剂1—氯2—，3—环氯丙烷交联而成。

凝胶商品名后面的G值表示每克干胶吸水量（毫升数）的10倍。

交联度大，网孔小；交联度小，网孔大。

交联度的大小还与凝胶颗粒的机械强度有关，交联度大，机械强度也大（硬胶），在柱层析中流速快。

根据需要，选用一定型号的的凝胶柱做柱层析介质（蛋白脱盐一般用G—25或G—50，G—100~G—200分离不同分子质量的蛋白组分）。

苯丙氨酸解氨酶（PAL）在植物中的作用及其活性测定方法生命科学实验117篇原创内容公众号苯丙氨酸解氨酶（PAL）催化 L-苯丙氨酸解氨生成反式肉桂酸，是连接初级代谢和苯丙烷类代谢、催化苯丙烷类代谢第一步反应的酶，也是苯丙氨酸代谢途径的关键酶和限速酶。

莽草酸途径产生的莽草酸通过分枝酸、预苯酸经转氨作用生成苯丙氨酸，从而进入苯丙烷类代谢途径，苯丙烷类代谢可生成反式肉桂酸、香豆酸、阿魏酸、芥子酸等中间产物，这些中间产物可进一步转化为香豆素、绿原酸，也可以形成 CoA酯，再进一步转化为木质素、黄酮、异黄酮、生物碱、苯甲酸酯糖苷等次生代谢产物。

一切含苯丙烷骨架的物质都由该代谢途径直接或间接生成。

在生物次生物质代谢中具有防紫外线伤害、抵抗病原体的侵害、保持花粉生活力及形成植物花青素等多种重要作用。

该酶在不同组织中、不同的内外因素调节下，含量水平及其基因表达的时空方式均有所不同。

1.PAL对植物生理代谢的意义植物的代谢分为初级代谢和次级代谢。

植物的次级代谢有多条途径，苯丙烷类代谢途径是其中很重要的一条。

苯丙烷类途径生成的黄酮、异黄酮、生物碱等次生代谢产物在植物的生长发育过程中起着重要的作用，所以PAL对植物的生理意义非常重大。

1.1在木质化中的作用在植物的木质化组织中含有较高的PAL活性。

用分离的百日草叶肉细胞研究了苯丙烷类代谢酶类与木质素、管状分子形成和细胞分化的关系，发现在百日草细胞分化过程中，木质素的合成及管状分子形成与PAL 活性的增加成正相关，细胞溶质中的 PAL 活性在木质化之前迅速上升，微粒体和细胞壁的 PAL 活性在木质化期间快速增加。

1.2在植物色素形成过程中的作用花色素是植物花朵、果实和叶片颜色的重要组成部分，花色素等的合成可由苯丙烷类产物反香豆酰 CoA 经过类黄酮途径生成，该过程与 PAL 密切相关。

如苋红素是中央种子目植物所特有的色素，当用白光、蓝光或红光照射尾穗苋黄化苗后，发现 PAL活性均有不同程度地上升，并有苋红素的积累。

苯丙氨酸检验操作规程1．目的：建立苯丙氨酸检验操作规程，便于检验人员规范操作。

2．范围：适用于配制各种氨基酸注射液的苯丙氨酸测定。

3．责任：质检科检验员对实施本规程负责。

4．程序：4.1性状：白色结晶或结晶性粉末，无臭、味微苦。

4.2鉴别试验本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集983图）一致。

4.3酸度（PH值）测定4.3.1测定范围：5.4-6.04.3.2配制溶液：取本品0.2g，加水20ml溶解后。

4.3.3操作步骤：同亮氨酸。

4.4溶液的透光度测定4.4.1测定范围：>99.0%4.4.2溶液配制；取本品0.5g，加水20ml水中。

4.4.3操作步骤：同亮氨酸。

4.5比旋度测定4.5.1测定范围：-33.50～-35.004.5.2需要试剂：水。

4.5.3操作步骤：取样品，精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中约含20mg的溶液，依法测定（见旋光度测定操作规程）4.6氯化物测定4.6.1测定范围：＜0.02%4.6.2试剂和试液：同亮氨酸。

4.6.3操作步骤：同亮氨酸4.7硫酸盐测定4.7.1测定范围：<0.02%4.7.2试剂和试液：同亮氨酸。

4.7.3操作步骤：同亮氨酸。

4.8铵盐测定4.8.1测定范围：<0.02%4.8.2试剂和试液：同亮氨酸。

4.8.3操作步骤：同亮氨酸。

4.9铁盐测定4.9.1测定范围：<0.001%4.9.2试剂和试液：同亮氨酸。

4.9.3 操作步骤：同亮氨酸。

4.10重金属测定4.10.1测定范围：<百万分之十。

4.10.2试剂和试液：同亮氨酸。

4.10.3操作步骤：同缬氨酸。

4.11砷盐测定4.11.1测定范围：<0.0001%4.11.2试剂和试液：同亮氨酸。

4.11.3操作步骤：同苏氨酸。

4.12其它氨基酸测定4.12.1测定范围：<0.5%4.12.2试剂和试液4.12.2.1 2%茚三酮的丙酮溶液：取茚三酮2g，加丙酮100ml溶解，即得。

苯丙氨酸定量检测试剂盒（荧光法）说明书【产品名称】通用名称：英文名称：【包装规格】【预期用途】【检验原理】【主要组成成分】【储存条件及有效期】【适用机型】【样本要求】【检验方法】【参考值（参考范围）】【检验结果的解释】【检验方法的局限性】【产品性能指标】【注意事项】【参考文献】【生产企业】【医疗器械生产企业许可证编号】【医疗器械注册证书编号】【产品标准编号】【说明书批准及修改日期】【产品名称产品名称】】通用名称：苯丙氨酸定量检测试剂盒（荧光法） 英文名称：Phenylalanine Kit （FA ） 【包装规格包装规格】】96人份/盒 480人份/盒 【预期用途预期用途】】用于定量检测采集在S&S 903# 滤纸上的新生儿全血样品中苯丙氨酸的浓度。

适用于新生儿苯丙酮尿症（PKU ）的筛查，仅用于体外检测。

苯丙酮尿症（简称PKU ）是一种较常见的常染色体隐性遗传性氨基酸代谢病，发病率约1/10,000。

本病可因苯丙氨酸羟化酶缺乏引起，也可因辅酶因子BH 4缺陷引起。

这些缺陷致使苯丙氨酸不能被转化为酪氨酸，导致大量的苯丙氨酸及其代谢产物在体内堆积，引起中枢神经系统损害。

其临床主要表现为：发育迟缓，毛发、皮肤及虹膜变浅，癫痫，进行性智力低下等。

由于本病的早期发现早期治疗，对患儿的生长发育、智力发育不受影响，因此被我国列为新生儿疾病筛查项目之一。

检测方法还有细菌抑制法、酶法等。

【检验原理检验原理】】在含有琥珀酸缓冲液、二肽溶液和茚三酮溶液的混合液中，茚三酮可以和苯丙氨酸反应，产生一种荧光物质，其中二肽可提高此荧光反应，琥珀酸缓冲液控制PH 5.8±0.1，可保证理想的荧光值和最大的特异性，加入铜溶液后可以使荧光化合物更加稳定并终止反应。

使用荧光读数仪（激发光390nm ，发射光486nm ）测定荧光物质的强弱，即可反映苯丙氨酸的浓度。

【主要组成成分主要组成成分】】名称96人份/盒 480人份/盒 包装琥珀酸缓冲液 （琥珀酸）5ml /瓶 25ml /瓶无色透明玻璃瓶 或白色塑料瓶二肽溶液 （L-leucyl-L-alanine ） 1 ml /瓶 5ml /瓶 茚三酮溶液（茚三酮）2 ml /瓶 10m l/瓶 铜溶液（碳酸钠、酒石酸钾纳、硫酸铜） 25ml /瓶 125m l/瓶96孔微孔板（透明） 1块 5块无色透明塑料袋96孔微孔板（白色）1块 5块 标准血片S 1～S6 （0.24、1.06、2.76、5.32、8.34、13.47 mg/dl ） 1份 2份 铝箔袋质控血片C1、C2 1份2份说明书 1份 质量验证单1份注：标准品或质控血片的浓度若有改变，将在试剂盒内放通知单，同时电话通知。

生防真菌与氨基寡糖素组合对烟草黑胫病和根黑腐病的防治作者：彭海莹田叶韩李晓芳张蕊王德浩梁元存高克祥来源：《中国烟草科学》2021年第01期摘要：針对烟草黑胫病和根黑腐病两种烟草土传病害日益加重的现状，利用生防真菌棘孢木霉MX菌株和产紫青霉Q2菌株分别与植物诱抗剂氨基寡糖素进行组合，在盆栽条件下测定了其分别在两种病害胁迫下的抗病效果。

结果表明，产紫青霉Q2和棘孢木霉MX对烟草黑胫病菌和根黑腐病菌均有较强的拮抗作用，其发酵滤液能有效抑制两种病原菌的生长，与氨基寡糖素组合后能够更好地促进烟草幼苗的生长，对黑胫病和根黑腐病的防治效果均达到65%以上，能显著提高发病烟草中防御酶PAL、SOD、POD的活性。

关键词：烟草黑胫病;烟草根黑腐病;棘孢木霉;产紫青霉;氨基寡糖素;生物防治Abstract： The present situation of two kinds of tobacco soil-borne diseases， black shank disease and root black rot disease， is increasing， which greatly aggravates the degree of tobacco diseases. In this study， two excellent biocontrol strains， Penicillium purpurogenum strain Q2 and Trichoderma asperellum strain MX， were used to combine with amino oligosaccharides， a plant inducer of disease resistance， respectively. Effects on tobacco growth promoting and control efficacy of tobacco black shank and black root rot have been investigated by two fungal biocontrol agents and their combination with amino oligosaccharides in the potting experiment. The results showed that P. purpurogenum strain Q2 and T. asperellum strain MX had strong antagonism against P. parasitica var. nicotianae and T. basicola， and the combination of them and amino oligosaccharides could better promote the growth of tobacco seedlings， and the control effect on the tobacco black shank and black root rot was more than 65%， which could significantly improve the activities of PAL， SOD and POD in the diseased tobacco.Keywords： tobacco black shank; tobacco black root rot; Trichoderma asperellum; Penicillium purpurogenum; amino oligosaccharide; biological control烟草黑胫病是由寄生疫霉菌烟草致病变种（Phytophthora parasitica var. nicotianae）引起的土传卵菌病害[1-3]，当环境条件有利时，任何生长阶段都可发生。