检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质实验专题
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..DOC版. 「生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验」问题解析1、鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的实验原理是什么?某些化学试剂能够使生物组织中的有关化合物产生特定的颜色反应,根据颜色反应鉴定生物组织中是否有还原糖、脂肪和蛋白质的存在。
还有,如:鉴定DNA用二苯胺(沸水浴)出现蓝色反应;鉴定染色体用0.01g/mL或0.02g/mL的醋酸洋红液(或龙胆紫溶液)出现红色(或紫色)反应。
2、做还原糖的鉴定实验,为什么选择苹果或梨?因苹果或梨含还原糖量较高,颜色为白色或近于白色,容易观察实验现象。
有些单子叶植物如韭菜、鸢尾并不将光合作用的初始产物转为淀粉,故叶子内含有大量的可溶性还原糖,但由于叶片中叶绿素较多且颜色深,对需要观察的颜色反应起着掩盖作用,因此,最好不要选用单子叶植物的叶子作为实验材料。
甘蔗的薄壁组织和甜菜的块根虽然富含近于白色的蔗糖,但蔗糖无还原性,即不能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
至于蔗糖液经稀盐酸处理后可以与斐林试剂反应产生砖红色沉淀,是因为蔗糖在酸性条件下被水解成可溶性还原性单糖的缘故。
3、为什么花生需浸泡3h~4h,黄豆需浸泡1d~2d?因为花生浸泡3h~4h,最适于切片,黄豆浸泡1d~2d后,适于研磨。
4、鉴定可溶性还原糖实验中为什么要水浴加热?直接加热是否可以?实验证明,直接加热至沸腾30s时,迅速出现砖红色沉淀;继续加热,溶液变成黑色。
所以直接加热不容易掌握加热程度,时间稍长就会使砖红色的转化为黑色的,就不能再鉴定可溶性还原糖了。
通过水浴加热可以保持反应的适宜温度,可长时间观察所需的反应颜色变化。
5、蛋白质稀释液在制备时为何要稀释?为了避免蛋白液与双缩脲试剂发生反应后粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管也不易刷洗。
生物实验生物组织中复原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验目的初步掌握鉴定生物组织中复原糖、脂肪、蛋白质的根本方法。
二、实验原理1.复原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的复原糖种类较多 ,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。
它们的分子内都含有复原性基团(游离醛基或游离酮基) ,因此叫做复原糖。
蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基 ,因此叫做非复原性糖 ,不具有复原性。
本实验中 ,用斐林试剂只能检验生物组织中复原糖存在与否 ,而不能鉴定非复原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成 ,二者混合后 ,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。
Cu(OH)2与参加的葡萄糖在加热的条件下 ,能够生成砖红色的Cu2O沉淀 ,而葡萄糖本身那么氧化成葡萄糖酸。
其反响式如下:CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O&dar r;+2H2O用斐林试剂鉴定复原糖时 ,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
2.蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时 ,常用双缩脲法 ,使用的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01 g/mL(B)的硫酸铜溶液。
在碱性溶液(NaOH)中 ,双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用 ,形成紫色或紫红色的络合物 ,这个反响叫做双缩脲反响。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键 ,因此 ,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反响。
3.脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色 ,被苏丹Ⅳ 染成红色三、实验过程(见书P18)四、实验用品(见书P18)五、注意1.关于鉴定复原糖的实验 ,在加热试管中的溶液时 ,应该用试管夹夹住试管上部 ,并放入盛开水的大烧杯中加热。
注意试管底部不要接触烧杯底部 ,同时试管口不要朝向实验者 ,以免试管内溶液沸腾时冲出试管 ,造成烫伤。
还原糖脂肪蛋白质的鉴定实验1. 还原糖的探秘说到还原糖,大家可能会想起甜甜的糖果,没错!其实,生活中很多美味的东西都跟它有关。
不过,咱们今天可不是要去做糖果,而是来进行一个实验,看看这些还原糖究竟是怎么回事。
还原糖其实就包括了葡萄糖、果糖等,它们可不简单哦,能参与到很多化学反应中呢。
1.1 实验准备首先,咱们得准备一些实验材料。
要想辨别还原糖,咱们可以用到斐林试剂,这可是个好东西,能帮助我们一探究竟!准备一个干净的试管,准备一些斐林试剂,再准备一小撮你想测试的样品,比如说葡萄、蜂蜜或者是牛奶,这些东西里可都有还原糖哦。
你要是问我,为什么牛奶也能算?嘿嘿,因为其中的乳糖也是一种还原糖。
1.2 开始实验现在,实验开始啦!先把样品放进试管里,然后加上几滴斐林试剂。
接下来,放到水浴中加热。
这个过程就像做饭一样,得耐心等待。
几分钟后,咱们就能看到试管里的颜色变化,红棕色的沉淀就说明你找到了还原糖!哇哦,是不是感觉像是发现了宝藏?这就是科学的魅力,嘿嘿!2. 脂肪的鉴定接下来,咱们要聊聊脂肪。
脂肪的鉴定可是个有趣的过程。
很多人可能觉得脂肪是个坏东西,但其实它也是咱们身体需要的营养素之一,适量摄入才能让身体健康。
2.1 实验准备准备脂肪鉴定实验,咱们需要一些实验材料。
首先是油,食用油、黄油都可以,反正能找到的都行。
然后,准备一个滤纸或是干净的白纸,记得选择那种容易吸油的哦。
接下来,咱们要准备一些酒精和水。
这些材料可不能少,不然实验就会泡汤。
2.2 开始实验把油滴在滤纸上,然后慢慢加一些酒精,等待片刻。
你会发现,纸上有一圈透明的油渍,没错,这就是脂肪的证明!像这样,咱们就能轻松辨别脂肪的存在了。
这个过程就像是在进行一次小小的侦探游戏,找到脂肪的“踪迹”。
每次看到那油渍,我都觉得特别有成就感,仿佛自己成了科学家,哈哈!3. 蛋白质的检验最后,咱们要进行蛋白质的鉴定。
蛋白质可是在生活中扮演着重要角色的营养素,像是鸡蛋、豆腐、牛肉等等,都富含蛋白质。
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质实验报告实验报告:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的本实验旨在通过生化实验的方法,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,以了解这些物质在生物组织中的分布和含量,为生物组织代谢研究提供基础数据。
二、实验原理1.糖类检测:糖类物质在生物组织中广泛存在,包括单糖、低聚糖和多糖。
其中,还原性糖如葡萄糖、果糖等可与斐林试剂发生氧化还原反应,产生砖红色沉淀。
非还原性糖如淀粉、纤维素等则不能与斐林试剂反应。
2.脂肪检测:脂肪是生物组织中重要的储能物质。
在酸性条件下,脂肪可被脂酶分解为脂肪酸和甘油,脂肪酸可与热硫酸反应生成硫酸酯,产生绿色荧光。
3.蛋白质检测:蛋白质是生物组织中功能多样性的基础。
在碱性条件下,蛋白质可与双缩脲试剂发生紫色反应。
三、实验步骤1.准备试剂和样品:分别准备斐林试剂、脂酶、硫酸、双缩脲试剂;选取具有代表性的生物组织样品,如动物肝脏、植物叶片等。
2.制备样品溶液:将生物组织样品研碎,加入适量溶剂制成样品溶液。
3.检测糖类:取样品溶液适量,加入斐林试剂,加热至沸腾,观察颜色变化。
4.检测脂肪:取样品溶液适量,加入脂酶,在酸性条件下加热一定时间,加入热硫酸,观察颜色变化。
5.检测蛋白质:取样品溶液适量,加入双缩脲试剂,搅拌均匀,观察颜色变化。
四、实验结果与分析1.实验结果:通过上述实验步骤,我们得到了生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测结果。
具体数据如下:2.结果分析:从实验结果可以看出,该生物组织中糖类含量较高,这可能与该生物组织的能量需求有关;脂肪含量相对较低,这可能与该组织的生理功能有关;蛋白质含量适中,表明该组织具备一定程度的生物活性。
此外,通过对不同物质含量的比较分析,我们可以初步推断该生物组织的代谢类型和生理功能。
五、结论本实验通过生化实验方法成功地检测了生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质含量,得到了较为可靠的实验数据。
这些数据为进一步研究生物组织的代谢过程提供了基础资料。
实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理—颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖.前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖.实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
如:葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。
2.脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理,适当提高温度(37℃—60℃)对组织切片染色效果是有好处的.脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
一、检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质
1.糖的鉴定:
原理:
(1)淀粉:遇碘液变蓝色,这是淀粉特有的颜色反应。
(2)还原性糖(单糖、麦芽糖和乳糖):与斐林试剂反应,可以产生砖红色沉淀。
材料用具:
(1)实验材料:苹果或梨匀浆,马铃薯匀浆
(2)配制:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液+乙液:0.05g/mL CuSO4溶液
使用:混合后使用,且现配现用。
条件:水浴加热
实验步骤:
实验结果分析:
(1)淀粉:如果出现蓝色,则待测样品中含有淀粉;反之,则没有。
(2)还原性糖:如果出现砖红色沉淀,则待测样品中含有还原糖,反之;则没有。
2.脂肪的鉴定:
原理:脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。
(在实验中用50%酒精洗去浮色→显微镜观察→橘黄色脂肪颗粒)
材料用具:
(1)实验材料:花生种子,花生匀浆
(2)试剂:苏丹III染液、苏丹IV染液
实验步骤
实验结果分析:如果观察到橘黄色(红色),则待测样品中含有脂肪;反之,则没有。
3.蛋白质鉴定:
原理:蛋白质与双缩脲试剂产生紫色的颜色反应
材料用具:
(1)实验材料:豆浆、鲜肝提取液
(2)双缩脲试剂:
配制:A液:0.1g/mL的NaOH溶液(2mL)和B液:0.01g/mL CuSO4溶液(3-4滴)
使用:分开使用,先加NaOH溶液,再加CuSO4溶液。
实验步骤
①浅色:不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料,防止颜色的干扰。
②还原糖含量高:不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。
含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
(2)花生种子切片为何要薄?答:只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。
(3)唯一需要加热—还原糖鉴定,且必需水浴加热,不能用酒精灯直接加热。
若不加热则无砖红色沉淀出现。
唯一需要显微镜——脂肪鉴定。
(4)若用大豆做材料,必须提前浸泡;
若用蛋清作材料,必须稀释,防止其粘在试管壁上不易涮洗;且该实验应预留部分组织样液做对比。
例1.(07小高考第40题)根据我国现行的食品质量标准,0~6个月的婴儿奶粉中蛋白质
的含量应为12%~18%。
现有一种待测婴儿奶粉,请你尝试完成鉴定实验。
(1)实验目的:鉴定该待测婴儿奶粉蛋白质的含量是否符合质量标准。
(2)实验原理:蛋白质与___________试剂发生作用,产生紫色反应。
(3)材料用具:相同浓度的标准婴儿奶粉溶液和待测婴儿奶粉溶液、0.1g/mL的NaOH溶液、0.01 g/mL的CuS04溶液、试管和滴管等。
(4)实验步骤
①取两支试管分别加人2mL的标准婴儿奶粉溶液(编号甲)和2mL的待测婴儿奶粉溶液(编号乙)。
标准婴儿奶粉溶液在本实验中起________作用。
②分别向两支试管中加人2mL的______________溶液,振荡,摇匀。
③再分别向两支试管中加人3~4滴_____________溶液,振荡,摇匀,比较颜色的变化。
(5)结果预期
_____________________________________________________________________________。
二、实验:观察植物细胞的质壁分离和复原
一、实验原理:
原生质层(细胞膜、液泡膜、两层膜之间
细胞质)相当于半透膜,
●当外界溶液的浓度大于细胞液浓度时,
细胞将失水,原生质层和细胞壁都会收缩,
但原生质层伸缩性比细胞壁大,所以原生
质层就会与细胞壁分开,发生“质壁分离”。
●反之,当外界溶液的浓度小于细胞液浓度时,细胞将吸水,原生质层会慢慢恢复原来状态,使细胞发生“质壁分离复原”。
二、材料用具:紫色洋葱表皮,0.3g/ml蔗糖溶液,清水,载玻片,镊子,滴管,显微镜等
三、方法步骤:
(1)制作洋葱表皮临时装片。
(2)低倍镜下观察原生质层位置。
(3)在盖玻片一侧滴一滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸,重复几次,让洋葱表皮浸润在蔗糖溶液中。
(4)低倍镜下观察原生质层位置、细胞大小变化(变小),观察细胞是否发生质壁分离。
(5)在盖玻片一侧滴一滴清水,另一侧用吸水纸吸,重复几次,让洋葱表皮浸润在清水中。
(6)低倍镜下观察原生质层位置、细胞大小变化(变大),观察是否质壁分离复原。
四、实验结果分析:
细胞液浓度<外界溶液浓度细胞失水(质壁分离)
细胞液浓度>外界溶液浓度细胞吸水(质壁分离复原)
五、特别提醒
(1)实验成功的关键是实验材料的选择,选择有大液泡并有颜色的植物细胞,便于在显微镜下观察。
(2)质壁分离和质壁分离复原中水分子移动是双向的,结果是双向水分子运动的差别所导致的现象。
(3)质壁分离后在细胞壁和细胞膜之间充满的是浓度降低的外界溶液,因细胞壁是全透性且有水分子通过原生质层渗出来。
(4)若用50%蔗糖溶液做实验,能发生质壁分离但不能复原,因为细胞过度失水而死亡。
(5)若用尿素、乙二醇、KNO3、NaCl做实验会出现自动复原现象,因外界物质会转移到细胞内而引起细胞液浓度升高。
(5)实验拓展:可利用本实验原理测定细胞液浓度、判断细胞的死活、说明原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性等。
例2.(11小高考第40题)为了观察植物细胞质壁分离和复原的现象,某同学设计并进行了如下实验:
材料用具:洋葱;刀片,镊子,滴管,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜;质量浓度为0.075g/mL 的胭脂红溶液(胭脂红是一种水溶性的大分子食用色素,呈红色),清水等。
方法步骤:
请回答下列问题:
(1)图中步骤B显微镜观察的目的是。
(2)假如该同学发现植物细胞持壁分离后不能复原,可能的原因有、,导致细胞过度失水而死亡。
(3)该同学在步骤D观察到了质壁分离现象,其实验结果应为下图中的(填序号)、判断的理由有_______________________________________________________________________________ ______。
三、探究影响酶活性的因素
一、酶的高效性——比较过氧化氢在不同条件下的分解
(1)实验过程分析
(2)实验注意事项
实验时必须用新鲜的、刚从活的动物体中取出的肝脏作实验材料。
肝脏如果不新鲜,肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解,使组织中酶分子的数量减少且活性降低。
二、酶的专一性
三、探究温度对酶活性的影响
(1)实验过程分析
(2)实验注意事项
①因为过氧化氢酶的反应底物过氧化氢受热会分解,所以用其做温度探究的实验,会对实验结果带来干扰。
②因为斐林试剂在使用时需要加热,这对温度探究带来干扰,而使用碘液无需加热,对实验无干扰。
四、探究pH对酶活性的影响
思考:为什么不能用淀粉酶做探究pH的实验?
答:因为淀粉在酸性条件下会分解,这对于判断淀粉酶能否使得淀粉水解出现干扰。
故不能使用。
例3.(08小高考第40题)为了探究酶的专一性,现用可溶性淀粉溶液、蔗糖溶液(两者都是非还原糖)以及淀粉酶溶液、斐林试剂等材料进行实验。
(1)实验步骤:
①取两支洁净的试管,编上号,然后按照下表中的要求进行操作。
②轻轻振荡这两支试管,使试管内的液体混合均匀,然后将试管的下半部浸到60℃左右的热水中,保持5min。
③取出试管,各加入1mL 并振荡摇匀。
④将两支试管的下半部放进50~60℃的热水中,保持2min。
⑤观察并记录两支试管内溶液发生的变化。
(2)实验结果:。
(3)结果分析:。
(4)实验结论:酶具有专一性。