大鼠缺锌模型的建立及其病理表现

锌缺乏对生长期大鼠免疫细胞凋亡的影响单延春;盛晓阳;洪昭毅;薛敏波【期刊名称】《中国儿童保健杂志》【年(卷),期】2001(9)6【摘要】【目的】研究饮食锌缺乏对生长期大鼠胸腺、脾脏淋巴细胞的影响及其与细胞凋亡的关系。

【方法】建立生长期缺锌大鼠模型 ,对免疫器官胸腺、脾脏进行大体观察 ,并用原位末端标记 (TUNEL)方法 ,利用图像分析系统对胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡进行定性和半定量研究。

【结果】缺锌组大鼠胸腺皮质萎缩 ,脾脏白髓数量、体积减少 ,淋巴细胞减少。

其胸腺、脾脏中凋亡细胞明显多于对照组和配饲组 ,并定量分析显示凋亡细胞阳性率和强阳性率明显增高 (P <0 .0 1)。

【结论】饮食锌缺乏使生长期大鼠胸腺、脾脏萎缩 ,淋巴细胞凋亡增多 ,是锌缺乏导致机体免疫力低下的机制之一。

【总页数】3页(P406-408)【关键词】锌;免疫细胞;凋亡【作者】单延春;盛晓阳;洪昭毅;薛敏波【作者单位】上海第二医科大学附属新华医院【正文语种】中文【中图分类】R591.1【相关文献】1.锌缺乏对生长期大鼠小肠黏膜形态和消化酶活性的影响 [J], 应爱娟;舒小莉;顾伟忠;黄先玫;帅向华;杨玲蓉;江米足2.不同强度长期游泳运动对生长期大鼠骨组织形态和结构力学特性的影响 [J], 陈敬;李建设;张绍岩3.锌缺乏对生长期大鼠免疫系统的影响研究 [J], 张建英;苏敏;温柏平4.锌缺乏对生长期大鼠外周血淋巴细胞表型及亚群分布的影响 [J], 单延春;盛晓阳;陈宏新;洪昭毅5.锌缺乏对生长期大鼠免疫细胞凋亡的影响 [J], 单延春;盛晓阳;洪昭毅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

第33卷 第9期北京体育大学学报V ol 33 N o 9 2010年9月Journal of Beijing Sport U niversity Sep 2010运动性贫血大鼠血液中Fe、Zn、Ca元素的变化张笑莉(洛阳理工学院体育部,河南洛阳 471023)摘 要:目的:通过递增负荷跑台实验建立运动性贫血大鼠的模型,同时观测和评定运动性贫血大鼠血清Fe、Zn和Ca的变化。

探索运动性贫血的早期发生时上述微量元素的变化规律,为竞技体育运动员大强度训练后微量元素的补充提供科学参考依据,同时为运动性贫血的早期诊断提供一定参考。

结果:运动性贫血造模过程中,对照组和造模组大鼠血液中Fe浓度随周龄增长均明显上升,对照组较造模组明显。

造模前后大鼠血液中Zn和Ca浓度造模前后没有明显改变。

关键词:运动性贫血;Fe;Zn;Ca中图分类号:G804 7 文献标识码:A 文章编号:1007-3612(2010)09-0066-04The Effect of Sports Anemia on Fe、Zn、Ca in Rats SerumZHANG Xiao li(L uoyang Institute o f Science and T echnology,Luoyang471023,Henan China)Abstract:objectiv e:T he pur pose of this resear ch was to monitor and evaluate the dynamic changes of t hese t hreeelements(Fe,Zn and Ca)per iodically by building an animal model of sports anemia T he paper studies t he reg ular ity of the changes to prov ide r eference for the diagnoses of sports anemia in the future and propose suggestions fo rthe athletes to supply some nutrient elements in the time during long ter m exhaustiv e training Results:by compar ing with the control group,the paper found that the trend of Fe,Zn and Ca in serum of rats had respectivecharacteristics:Fe in serum of rats in the spor ts anemia gr oup and t he control group increased obviously,but F e inser um of rats in the sports anemia group was less obviously compared with control gr oup,while Zn and Ca have nosignificant changesKey words:sports anemia;Fe;Zn;Ca运动性贫血的概念是1959年由日本学者Y ochimur a首先提出,是指贫血的发生与运动训练有密切关系或直接由运动训练造成的一种特殊贫血,是由于机体无法适应长时间大强度运动而引起血红蛋白浓度下降从而导致机体一系列生理、病理变化[1,2]。

大鼠ZnT1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定胡英明;梅晰凡;宋长威;李谌【摘要】Objective To establish a recombinant adenovirus vector containing rat ZnT1 gene and to express the gene efficiency in eukaryotic cells. Methods Using chemosynthesis method to synthesize the interest gene Znt1/IRES/EGFP. Adding attB recombination site to the interest gene both ends thought PCR method,the later and pDONR221 vector with attP site was create into a entry vector pDown-ZnT1 through BP recombination. The entry vector with attL site and the target vector Ad/CMV/V5-DEST with attR site were recombined together to create the expression vector pAd-ZnT1 under LR reaction. Enzyme digesting and sequencing appraisal were used to prove the expression vector,digesting with Pac I enzyme,and transferred into HEK293A cells to be packaged, then the maturated adenovirus were extracted. The recombinant adenovirus titre was measured by endpoint dilution method. The interest protein s expression was analyzed by western blotting. Results Our interest gene was transferred into target vector Ad/CMV/V5-DEST correctly with right open reading frame by LR recombination reaction,and it was confirmed by restriction enzyme analysis and sequencing appraisal. The expression clone was packaged into HEK293A cells successfully. Finally, we got maturated adenovirus particles, and virus titre was 1. 6 × 108 pfu/L. It was confirmed with high level expression by western blotting method in HEK293A cell. Conclusion In this experiment, we successfully and efficiently constructedthe rat ZnT1 gene s recombinant adenovirus vector,and laid a good foundation for the ZnT1 gene to express in spinal cord nerve cell and the relationship with BDNF/TrkB signal regulation channel.%目的利用GatewayTM技术构建含大鼠锌转运体1(ZnT1)基因重组腺病毒载体,鉴定外源基因在真核细胞中的良好表达.方法采用化学合成的方法,合成ZnT1/RES/EGFP目的基因片段,通过PCR方法在基因片段两端加入attB重组位点,与含有attP重组位点的pDonr221供体载体BP反应形成入门载体pDown-ZnT1.将含有attL重组位点的入门载体与含有attR位点目的载体Ad/CMV/V5-DEST通过LR反应形成腺病毒表达载体pAd-ZnT1.酶切和测序鉴定后,由PacⅠ酶切线性化转染HEK293A细胞包装,提取病毒颗粒.采用终点稀释法测定重组腺病毒滴度;Western blotting技术分析目的蛋白表达情况.结果目的基因按正确的方向重组入克隆载体中,重组腺病毒表达载体在HEK293A细胞中包装成功,获得成熟的腺病毒颗粒,病毒滴度为1.6×108 pfu/L,在HEK293A细胞中高表达.结论该实验采用GatewayTM技术构建了含有大鼠ZnT1基因的重组腺病毒载体,为下一步研究该基因在脊髓神经细胞中的表达以及与BDNF/TrkB信号调节通路的关系奠定了基础.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2012(041)020【总页数】5页(P2055-2057,2061,封2)【关键词】锌转运体-1;重组腺病毒,Gateway【作者】胡英明;梅晰凡;宋长威;李谌【作者单位】辽宁医学院附属第一医院骨科辽宁锦州,121000;辽宁医学院附属第一医院骨科辽宁锦州,121000;辽宁医学院附属第一医院骨科辽宁锦州,121000;辽宁医学院附属第一医院中心实验室,辽宁锦州,121000【正文语种】中文锌转运体-1(zinc transporter1，ZnT1) 是锌转运蛋白家族的重要成员之一,在调解机体锌代谢以及神经活动过程中发挥着极其重要的作用[1]。

自从Ｔｏｄｄ等人于１９３４年首次证明锌是高等动物营养所必需的元素以来，人们研究发现微量元素锌在动物和人体内具有广泛的生理生化功能，被称为“生命元素”和人类的“智慧元素”。

近年来，锌在畜牧生产和医学领域中得到了广泛的应用。

１锌在动物体内的分布锌分布于机体的所有组织器官中，各种动物体内锌的含量差异不大，正常动物体内锌的总含量为３０ｍｇ·ｋｇ－１左右，大致的分布为：骨骼２８％，肝脏和皮肤８％，血液２％～３％，其他器官０．６％～１％。

血浆中的锌３０％～４０％参与酶活性和功能，６０％～７０％与白蛋白松散结合，是体内锌的主要运输形式。

肌肉中锌的含量因其色泽和功能活性的不同而异，牛的腹侧巨肌平均含锌量为２４７ｍｇ·ｋｇ－１干脱脂物质，背最长肌为６９ｍｇ·ｋｇ－１。

猪奶中锌含量为４．９４ｍｇ·ｋｇ－１，奶中的锌与酪蛋白盐类结合存在，初乳中锌的含量是常乳的３４倍。

母猪、母牛、山羊及绵羊奶中锌的含量大约为５ｍｇ·ｋｇ－１。

毛、羽中锌的含量能客观反映日粮锌的水平，蛋中锌的含量也受日粮锌水平的影响。

动物在性成熟前，前列腺中锌的含量特别丰富，精液中也含有较多的锌［１］。

２锌在动物体内的吸收与代谢锌的吸收部位因畜种而有所不同，在单胃动物，锌主要在小肠远端被吸收；在反刍动物，约有１／３的锌在真胃吸收，其余在小肠；鸡在腺胃和小肠吸收锌。

动物体内锌的平衡状态、锌含量和吸收细胞内束缚锌的物质对锌的吸收起调节作用，动物体对锌的吸收率与日粮锌水平成反比。

被吸收的锌与血液转运蛋白结合，运送到肝脏和其他组织器官。

锌在体内以小分子可溶性物质参与代谢，吸收过程包括快速进入黏膜细胞和比较缓慢地进入血流两个阶段。

锌还可以通过胎盘从血浆转移到胎儿体内，所以胎儿的骨骼和肝脏中锌含量较高。

不同组织器官锌的累积和代谢、周转速率不同，肝脏是锌贮存和代谢的主要场所，骨骼和神经系统中的锌周转代谢速率较慢，而毛中的锌基本上不存在分解代谢。

缺锌对生长期大鼠肾脏维生素D受体及钙结合蛋白基因表达的影响程红;张芳蓉;余晓丹【期刊名称】《中国儿童保健杂志》【年(卷),期】2008(16)1【摘要】【目的】研究锌缺乏对生长期大鼠肾脏维生素D受体(vitamin Dreceptor,VDR)和钙结合蛋白(CaBP)基因表达水平的影响。

【方法】新生大鼠随机分为缺锌组(ZD)、配饲组(PF)、对照组(ZA)3窝,每窝10只;21 d断奶后每只分笼饲养,喂养至第60 d处死;取肾脏,用试剂盒抽提组织RNA,用实时荧光定量PCR 检测肾脏组织VDR mRNA及CaBP mRNA的表达。

【结果】大鼠肾脏VDR基因表达ZD组较PF组下调34.78%,PF组较ZA组下调25.81%,ZD组较ZA组下调51.61%;CaBP基因表达ZD组较PF组下调23.19%,PF组较ZA组下调13.75%,ZD组较ZA组下调33.75%。

【结论】锌缺乏通过改变生长期大鼠肾脏VDR的活性而影响VDR mRNA,从而影响靶基因CaBP转录,进而影响肾脏钙重吸收,可能是导致骨生成障碍的机制之一。

【总页数】3页(P62-64)【关键词】锌缺乏;肾脏;维生素D受体;钙结合蛋白;基因表达【作者】程红;张芳蓉;余晓丹【作者单位】深圳市儿童医院儿童保健科;上海交通大学医学院附属新华医院儿科医学研究所【正文语种】中文【中图分类】R722.1【相关文献】1.缺锌对生长期大鼠小肠黏膜维生素D受体及钙结合蛋白表达水平的影响 [J], 余晓丹;颜崇淮;余晓刚;高宇;徐健;沈晓明2.缺锌对生长期小鼠肾脏金属硫蛋白-1表达的影响 [J], 许长录;田娟;李洪秀;郭敏3.缺锌对生长期小鼠肾脏Bcl-2表达的影响 [J], 单春霞;田娟;李洪秀;郭敏4.鸭油甘油二酯与维生素D3协同对肥胖SD大鼠器官指数?血液25羟基维生素D3含量?胫骨发育指标及肝脏维生素D受体和过氧化酶体增殖物激活受体α基因表达量的影响 [J], 刘亚楠; 王宝维; 葛文华; 张名爱; 孙京新; 孔敏5.缺锌对大鼠小肠粘膜维生素D受体及钙结合蛋白基因表达的影响 [J], 余晓丹;颜崇淮;沈晓明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠缺铁性贫血模型的建立及“康富来血尔口服液”改善大鼠缺铁性贫血功能之初步研究蒋枫艳库秀娟张超潘超安钱小路许德敬指导老师：卫洪昌（上海中医药大学针推英语七年制，201203）[摘要] 目的：探索一种简单有效的建立大鼠缺铁性贫血模型的方法，并研究“康富来血尔口服液”改善大鼠缺铁性贫血（IDA）的保健作用。

方法雄性SD 大鼠38只，随机分成三组，正常组8只，模型组和血尔组各15只。

正常组以普通饲料喂养；模型组与血尔组以剪尾放血和低铁饲料喂养建立大鼠缺铁性贫血模型；血尔组每天按说明书剂量灌胃“康富来血尔口服液”，模型组和正常组每天灌胃等量生理盐水。

结果：1、血象变化：实验共进行20天。

第十九天时，模型组大鼠尾血血红蛋白量（HGB）、红细胞数目（RBC）、红细胞比容（HCT）及红细胞平均体积（MCV）等各项指标均有明显下降（P<0.01）。

血尔组大鼠尾血各项指标的下降程度明显小于模型组（P<0.01）。

正常组大鼠尾血各项主要指标略基本保持稳定（P>0.05）。

大鼠腹主动脉血各项指标，模型组与正常组有显著差异（P<0.01），血尔组与正常组稍有差异（P<0.05）。

各组大鼠血清促红细胞生成素（EPO）无明显差异（P>0.05）。

2、其他变化：正常组生长迅速，模型组与血尔组均生长缓慢，到实验第十九天，与正常组相比体重差异均显著（P<0.01），而模型组与血尔组之间无明显差异（P>0.05）。

正常组总体比模型组和血尔组进食量大，模型组与血尔组进食量没有明显差异（P>0.05）。

结论：以剪尾放血和低铁饲料喂养的方法建立大鼠缺铁性贫血模型能够获得成功；“康富来血尔口服液”能够较明显地改善缺铁性贫血大鼠的各项血液指标，能在一定程度上提高大鼠的免疫力，但对大鼠血清EPO浓度没有提高作用，对体重的增长没有明显的影响，改善食欲的效果也不明显。

[关键词]大鼠；缺铁性贫血；康富来血尔口服液；血红蛋白；红细胞；红细胞比容；红细胞平均体积1背景介绍根据现代医学理论，贫血是指外周血中单位容积内红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）含量或红细胞比容（HCT）低于正常下限的病理状态[1]。

文章编号:1006-3110(2004)02-0219-03【论　著】缺锌并补锌对大鼠睾丸及血清睾酮的影响袁秀琴,陈淑兰,谢红卫,童玲玲 摘要:　目的　为了解锌缺乏及补锌对大鼠睾丸的重量及血清睾酮的影响。

　方法　将出生后断乳一周的SD大鼠随机分为缺锌组、配喂组、对照组、补锌组和高锌组五组,缺锌组、对照组和高锌组分别用缺锌饲料(锌含量<1mg/kg)、常锌饲料(锌含量为50mg/kg)和高锌饲料(锌含量为150mg/kg)喂养8周,补锌组用缺锌饲料喂养三周后改用高锌饲料喂养五周,配喂组用常锌饲料喂养,给料量按缺锌组前一天实际进食量添加。

8周后处死,用极谱法测定血清中锌含量,用原子吸收分光光度法测定睾丸中锌含量,采用双抗体放射免疫分析法测定血清中睾酮的含量。

　结果　缺锌组大鼠睾丸及血清中锌含量降低,睾丸重量减轻。

血清中睾酮含量下降,缺锌大鼠补锌后可恢复正常。

　结论　说明锌缺乏直接影响睾丸及血清中锌的水平,从而影响大鼠睾丸的发育及睾酮的分泌与合成。

关键词:　缺锌;补锌;睾丸;睾酮中图分类号:R-33 文献标识码:AE ffect of Zinc Def iciency and Zinc R eplenishment on T estiele and T estosterone in R ats　YUAN Xiu-Qin,CHEN Shu-lan,XI E Hong-wei,et al.(School of Public Health,Nanhua University,Hengyang,Hunan421001China)Abstract:　Objective　T o study the effect of zinc deficiency and zinc replenishment on te stiele and Te stosterone in Rats.　Methods　SD rats were randomized into zinc2deficient diet(ZD)group,pair2fed(PF)group,zinc normal group(Z N), zinc supplemented(ZS)group and high zinc(HZ)group.ZD group,Z N group,and HZ group were fed up with zinc deficient dietary(content zinc<1mg/kg),zinc2normal dietary(50mg/kg)and high zinc dietary(150mg/kg)for8weeks re spec2 tively.ZS group were fed with zinc deficient dietary for3weeks,then changed to be treated with high2zincdietary for5 weeks.PF group were fed with zinc normal dietary according to the actual quantity of ZD group at the previous day.All of the rats were killed after8weeks.The concentration of Zn in serum were measured with polarography and with atomic absorption spectroscopy(AAS)in te stiele.The concentration of te stosterone in serum were measured with RI A.　R esults　The con2 centration of Zn in serum and te stiele were decreased significantly owing to zinc deficiency.The te stiele of ZD group grew slowly,the te stosterone quantity in serum were lowered but changed to nomal after zinc was supplemented.　Conclusions　Z inc deficiency decreased zinc concentration in serum and te stiele,the same time it affected the development of te stiele and synthe sis of te stosterone.K ey w ords:　Z inc deficiency;Z inc replenishment;Te stiele;Te stosterone 锌是机体必需的微量元素之一,在体内有广泛而重要的生理功能。

锌—Zn缺乏症探究作者：丁静静来源：《农民致富之友》2017年第06期[摘要] 锌—Zn是动物体必须的微量元素之一，有“生命的火花”之称。

在动物机体所需的必须微量元素中，锌的生理功能最多，作用最广，是动物生命活动不可缺少的元素。

各种动物都能因缺锌而导致疾病。

锌缺乏引起的疾病发病率高，及时补锌后能有效治疗缺锌症状，故一般无死亡率。

本文就锌在动物体内的生理功能，动物缺锌的发病机理、发病原因、锌缺乏引起的症状、防治对策，做一综述。

[关键词] 锌[中图分类号] R151 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650（2017）03-0239-011 锌在动物体内的生理功能动物体内锌的含量较多，约10-50mg/kg，多数分布于肝脏、骨骼、肾脏、肌肉、皮肤被毛等器官。

锌主要通过小肠吸收，入血后的锌与血浆蛋白结合后运送到各个组织器官，经胰液、胆汁排出后同肠道内未吸收的锌一起随粪便排出。

锌是动物体内300多种酶的组成成分或激活剂，不仅参与和影响体内蛋白质、氨基酸、核酸、碳水化合物、脂类和维生素的分泌代谢过程，而且与胰岛素、肾上腺激素等激素的分泌活动有关。

同时锌还是许多功能蛋白如金属硫蛋白、核蛋白、受体等的组成成分。

它能够促进骨骼生长发育，提高机体免疫力及繁殖能力，促进食欲，维持皮肤和黏膜的正常功能和结构。

因此，锌在动物体生长发育、生殖遗传、免疫、内分泌等重要生理过程中起着极其重要的作用。

2 发病机理当动物机体缺锌时，含锌酶活性降低，胱氨酸、蛋氨酸代谢紊乱，谷胱甘肽、DNA、RNA合成减少，细胞分裂、生长受阻，动物生长停滞，增重缓慢。

锌是味觉素的组成成分，缺锌时可使食欲下降，采食减少。

锌参与激素合成，缺锌时使性激素浓度下降，影响动物的繁殖功能。

锌作为碱性磷酸酶的辅酶成分，参与成骨过程。

锌缺乏时，动物易患骨质疏松症。

同时，缺锌使动物皮肤胶原蛋白合成减少，胶原异常交织，造成表皮角质化障碍。

锌还可促进肉芽组织生长，故缺锌时动物伤口不易愈合。

动物营养学报２０１９，３１（５）：２２４３⁃２２５３ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ㊀ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１９．０５．０３１枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠免疫性能㊁抗氧化能力以及生殖器官发育的影响黄燕萍１，２㊀王宝维１，２∗㊀刘国栋１，２㊀葛文华２㊀张名爱１，２㊀岳㊀斌２㊀王文杰１，２（１．青岛农业大学食品科学与工程学院，青岛２６６１０９；２．国家水禽产业技术体系营养与饲料功能研究室，青岛２６６１０９）摘㊀要：本试验以枯草芽孢杆菌锌为研究素材，研究其对先天性缺锌大鼠免疫性能㊁抗氧化能力以及生殖器官发育的影响，以确定枯草芽孢杆菌锌的作用效果㊂试验分为２个阶段：先天性缺锌幼龄大鼠模型建立和缺锌大鼠后天干预试验㊂模型建立阶段：选取同期怀孕雌性ＳＤ大鼠７２只，分为缺锌组和对照组，每组６个重复，每个重复６只；缺锌组大鼠从怀孕第１０天开始饲喂缺锌饲粮（锌含量为１３ｍｇ／ｋｇ），正常组饲喂正常饲粮（锌含量为３８ｍｇ／ｋｇ），持续到后代２４日龄㊂干预试验阶段：选择先天缺锌大鼠９０只，随机分成５个试验组，分别为硫酸锌组㊁缺锌组和低㊁中㊁高剂量枯草芽孢杆菌锌组，均饲喂缺锌饲粮；选择模型组中正常组１８只大鼠作对照组，继续饲喂正常饲粮，每组设３个重复，每个重复６只㊂试验期５周㊂结果表明：１）中㊁高剂量枯草芽孢杆菌锌能够促进缺锌大鼠肝脏㊁卵巢发育；提高先天性缺锌大鼠血清免疫球蛋白Ｍ（ＩｇＭ）㊁单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ⁃１）含量及铜锌超氧化物歧化酶（Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ）㊁谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ⁃Ｐｘ）活性；促进卵泡的成熟及雌二醇（Ｅ２）㊁促卵泡生成素（ＦＳＨ）㊁促黄体生成素（ＬＨ）的分泌㊂２）中剂量枯草芽孢杆菌锌在促进先天性缺锌大鼠肝脏㊁卵巢发育与提高免疫性能和抗氧化能力方面的功效优于硫酸锌㊂枯草芽孢杆菌锌能够促进先天性缺锌大鼠的肝脏㊁卵巢等器官发育，提高机体的免疫性能和抗氧化能力，从而促进缺锌大鼠生理机能的修复，且其干预效果优于同等锌含量的硫酸锌，可以降低饲粮中锌的添加剂量㊂关键词：枯草芽孢杆菌锌；大鼠；先天性缺锌；免疫性能；抗氧化能力；生殖器官发育中图分类号：Ｓ８１６．７㊀㊀㊀㊀文献标识码：Ａ㊀㊀㊀㊀文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（２０１９）０５⁃２２４３⁃１１收稿日期：２０１８－１０－３１基金项目：国家水禽产业技术体系专项基金（ＣＡＲＳ⁃４２⁃１４）；国家重点研发计划 绿色水禽高效安全养殖技术应用与示范 （２０１８ＹＦＤ０５０１５０１）作者简介：黄燕萍（１９９３ ），女，山东临沂人，硕士研究生，研究方向为营养与保健㊂Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｚｉｐｉｎｇａｎｇｅｌ＠ｑｑ．ｃｏｍ∗通信作者：王宝维，教授，硕士生导师，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｗａｎｇｂｗ＠ｑａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ㊀㊀锌是动物器官生长发育及机体酶㊁蛋白质合成的重要元素㊂锌缺乏也是常见的微量元素缺乏症之一㊂锌的缺乏会直接影响机体发育，对体型㊁毛发等产生影响［１］；研究发现，锌的缺失会对多种血清酶的活性产生影响，从而对机体功能产生影响［２］；另外，缺锌也会影响雌鼠卵子的生长和卵泡的发育，从而降低受孕率［３］㊂有机锌能够促进动物的生长发育㊁营养利用率［４］㊂枯草芽孢杆菌为动物肠道有益菌，本身具有繁殖快㊁抗逆性强㊁促进吸收和提高免疫力等特点［５］，为此，研究具有双重功能的枯草芽孢杆菌锌具有重要意义㊂Ｗｈｉｔｅ［６］和钱立群等［７］研究发现，动物饲粮中锌的缺失，会影响动物唾液蛋白形成㊁味觉素的分泌，严重缺失会导致动物采食量降低，进而影响生长发育㊂郭美荣［８］和陈丽敏等［９］研究表明，缺锌阻碍大鼠内脏和性器官卵巢的发育㊂Ｄａｒｄｅｎｎｅ［１０］和周立波等［１１］研究表明，适量的锌有助于提高血清谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ⁃Ｐｘ）活性和丙二醛㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷（ＭＤＡ）含量，从而提高机体免疫力；张伟庆等［１２］研究表明，适量的枯草芽孢杆菌有助于提高血清免疫球蛋白（Ｉｇ）Ｇ㊁ＩｇＡ㊁ＩｇＭ含量；边羽芊等［１３］研究表明，将酵母锌和酵母铜混合添加到饲粮中，不仅仅能够体现有益菌体在动物肠道的作用，还能起到补锌㊁铁的功效，显著提高饲料利用率㊂枯草芽孢杆菌作为一种有益菌种已被证实，但关于它富集微量元素锌的研究还很少，尤其是对先天性缺锌大鼠器官发育㊁免疫抗氧化力和生殖方面研究还处于空白㊂因此，本试验通过建立缺锌大鼠生长模型，探索枯草芽孢杆菌锌对缺锌大鼠器官发育㊁免疫抗氧化力和生殖的干预效果，为新型微生态制剂的开发和锌减量化使用提供理论依据㊂１㊀材料与方法１．１㊀试验材料㊀㊀枯草芽孢杆菌锌由国家水禽产业技术体系营养与饲料功能研究室提供，枯草芽孢杆菌活菌数为３ˑ１０９ＣＦＵ／ｇ，锌含量为２５１１．５５ｍｇ／ｋｇ，有机锌含量约为９５％㊂食品级硫酸锌购自湖北金铭洲化学有限公司，分析纯，七水合硫酸锌（ＺｎＳＯ４㊃７Ｈ２Ｏ）含量不少于９９．５％㊂１．２㊀基础饲粮㊀㊀基础饲粮以玉米淀粉㊁大豆分离蛋白㊁蔗糖等组成，参照ＡＩＮ－９３标准［１４］进行配制㊂经实际检测，基础饲粮锌含量为１３ｍｇ／ｋｇ，为缺锌饲粮；正常饲粮是在缺锌饲粮基础上添加硫酸锌，使锌含量达到３８ｍｇ／ｋｇ㊂基础饲粮组成及营养水平见表１㊂１．３㊀试验方法与设计㊀㊀选用健康ＳＤ大鼠，分为２个试验阶段：第１阶段建立先天性缺锌幼龄大鼠模型；第２阶段开展缺锌大鼠后天干预试验㊂１．３．１㊀建立先天性缺锌幼龄大鼠模型㊀㊀选取同期怀孕雌性ＳＤ大鼠７２只，分为缺锌组和对照组，每组６个重复，每个重复６只㊂从怀孕第１０天开始试验，缺锌组大鼠孕期饲喂基础饲粮（缺锌饲粮），对照组饲喂在基础饲粮中补加硫酸锌的正常饲粮，试验持续到哺乳期（小鼠２４日龄）结束㊂试验结束时，从缺锌组和对照组每个重复中随机抽取２只幼鼠，每组总计１２只，禁食１２ｈ，检测生长指标，取血清和相关器官，检测相关指标验证缺锌试验模型是否建立成功㊂表１㊀基础饲粮组成及营养水平（风干基础）Ｔａｂｌｅ１㊀Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌｓｏｆｔｈｅｂａｓａｌｄｉｅｔ（ａｉｒ⁃ｄｒｙｂａｓｉｓ）％项目Ｉｔｅｍｓ含量Ｃｏｎｔｅｎｔ原料Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ玉米淀粉Ｃｏｒｎｓｔａｒｃｈ４５．４０大豆分离蛋白Ｓｏｙｂｅａｎ⁃ｅｘｔｒａｃｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ３．００纤维素Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ１．００酪蛋白Ｃａｓｅｉｎ１７．００大豆油Ｓｏｙｂｅａｎｏｉｌ４．００碳酸钙ＣａＣＯ３０．６０磷酸氢钙ＣａＨＰＯ４２．７０氧化镁ＭｇＯ０．０３硫酸钾Ｋ２ＳＯ４０．０６ＤＬ－蛋氨酸ＤＬ⁃Ｍｅｔ０．６０胆碱Ｃｈｏｌｉｎｅ０．２０蔗糖Ｃａｎｅｓｕｇａｒ２３．００食盐ＮａＣｌ０．２０微量元素Ｔｒａｃｅｅｌｅｍｅｎｔｓ１）１．９１多种维生素Ｍｕｌｔｉｖｉｔａｍｉｎ２）０．３０合计Ｔｏｔａｌ１００．００营养水平Ｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌｓ３）代谢能ＭＥ／（ＭＪ／ｋｇ）１５．９４粗蛋白质ＣＰ２０．０７粗纤维ＣＦ１．５９粗脂肪ＥＥ３．８６钙Ｃａ１．０５有效磷ＡＰ０．７３锌Ｚｎ／（ｍｇ／ｋｇ）１３．００㊀㊀１）微量元素（不含锌）为每千克饲粮提供Ｔｈｅｔｒａｃｅｅｌｅ⁃ｍｅｎｔｓ（ｗｉｔｈｏｕｔＺｎ）ｐｒｏｖｉｄｅｄｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇｐｅｒｋｇｏｆｔｈｅｄｉｅｔ：Ｆｅ５．０４ｇ，Ｍｎ５．５２ｇ，Ｉ０．０５ｇ，Ｓｅ０．０１ｇ，Ｃｕ０．５１ｇ，Ｃａ２８．１４ｇ㊂㊀㊀２）多种维生素为每千克饲粮提供Ｔｈｅｍｕｌｔｉｖｉｔａｍｉｎｐｒｏ⁃ｖｉｄｅｄｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇｐｅｒｋｇｏｆｔｈｅｄｉｅｔ：ＶＡ１４０００ＩＵ，ＶＤ３１５００ＩＵ，ＶＥ１２０ＩＵ，ＶＫ５ｍｇ，ＶＢ１１２ｍｇ，ＶＢ２１２ｍｇ，烟酸ｎｉｃｏｔｉｎｉｃａｃｉｄ６０ｍｇ，ＶＢ６１２ｍｇ，生物素ｂｉｏｔｉｎ０．２ｍｇ，泛酸ｐａｎｔｏｔｈｅｎｉｃａｃｉｄ２４ｍｇ，叶酸ｆｏｌｉｃａｃｉｄ６ｍｇ㊂㊀㊀３）锌㊁代谢能为实测值，其他营养水平为计算值㊂ＺｎａｎｄＭＥｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｖａｌｕｅｓ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｏｔｈｅｒｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌｓｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄｖａｌｕｅｓ．１．３．２㊀缺锌大鼠后天干预试验㊀㊀从模型试验缺锌组的后代小鼠中随机选取９０只，分成５个试验组，分别为硫酸锌组（Ⅱ组，在缺锌饲粮中补加硫酸锌，锌含量达到正常饲粮水平）㊁缺锌组（Ⅲ组，饲喂缺锌饲粮）㊁在缺锌饲粮中添加低（Ⅳ组）㊁中（Ⅴ组）㊁高（Ⅵ组）剂量枯草芽４４２２５期黄燕萍等：枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠免疫性能㊁抗氧化能力以及生殖器官发育的影响孢杆菌锌组；另外，从模型试验对照组中的后代小鼠中随机选取１８只作为对照组（Ⅰ组），饲喂正常饲粮，每组设３个重复，每个重复６只㊂试验设计见表２，其中，Ⅳ㊁Ⅴ㊁Ⅵ组灌胃所用的枯草芽孢杆菌锌需要用去离子水稀释，灌胃量按大鼠每１０ｇ体重灌胃０．２ｍＬ／ｄ㊂试验期５周㊂试验结束时，从每个重复中随机抽取２只幼鼠，每组总计６只，屠宰后进行相关指标测定㊂表２㊀试验设计Ｔａｂｌｅ２㊀Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅｓｉｇｎ组别Ｇｒｏｕｐｓ饲粮类型Ｆｅｅｄｔｙｐｅ锌含量Ｚｎｃｏｎｔｅｎｔ／（ｍｇ／ｋｇ）灌胃类型ＧａｖａｇｅｔｙｐｅⅠ正常饲粮３８去离子水Ⅱ缺锌饲粮３８硫酸锌溶液Ⅲ缺锌饲粮１３去离子水Ⅳ缺锌饲粮１５枯草芽孢杆菌锌，２ｍｇ／ｋｇⅤ缺锌饲粮３０枯草芽孢杆菌锌，１７ｍｇ／ｋｇⅥ缺锌饲粮４５枯草芽孢杆菌锌，３２ｍｇ／ｋｇ１．４㊀饲养管理㊀㊀试验期间，大鼠自由摄食㊁饮水（去离子水），室内温度为（２２ʃ２）ħ，相对湿度为（５５ʃ５）％，室内通风良好㊂每天观察大鼠的精神状态和活动情况，记录每组的摄食量和饮水量；每周称量１次各组的体重㊂１．５㊀测试指标及方法１．５．１㊀验证缺锌试验模型相关指标的测定㊀㊀测量幼鼠体重㊁体长㊂根据南京建成生物工程研究所试剂盒说明书测定血清碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活性和金属硫蛋白（ＭＴ）含量㊂另外，将幼鼠肝脏置于冷生理盐水中洗净后，用滤纸吸干其表面液体，进行称重后干燥至恒重，采用湿法消化法进行处理，用电感耦合等离子体质谱仪（ＩＣＰ⁃ＭＳ）测定锌含量㊂１．５．２㊀生长性能的测定㊀㊀以重复为单位，准确计算每天给料量和残余剩料，计算每天每笼的采食量，统计出平均日采食量（ＡＤＦＩ）；在生长试验开始第１天，每周最后１天０８：００以重复为单位进行空腹称重，称重前１０ｈ停料，不停水，计算平均日增重（ＡＤＧ）；根据ＡＤＦＩ和ＡＤＧ，计算料重比（Ｆ／Ｇ）１．５．３㊀免疫性能的测定㊀㊀大鼠饲养５周后，禁食１２ｈ，取眼球血，３０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，取血清－８０ħ保存㊂将保存的血清于４ħ冰箱溶化后，单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ⁃１）㊁ＩｇＭ含量以及溶菌酶活性采用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法，严格按照说明书进行测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所㊂１．５．４㊀抗氧化性能的测定㊀㊀血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量及铜锌超氧化物歧化酶（Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ）㊁谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ⁃Ｐｘ）活性按照试剂盒说明书进行测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所㊂１．５．５㊀器官指数的测定㊀㊀待大鼠采血后，解剖，取心脏㊁肝脏㊁卵巢用生理盐水清洗后，用滤纸吸干其表面液体，测定湿重，并计算器官指数：器官指数（％）＝器官湿重（ｇ）／体重（ｇ）ˑ１００㊂１．５．６㊀性激素含量的测定㊀㊀血清雌二醇（Ｅ２）㊁促卵泡生成素（ＦＳＨ）㊁促黄体生成素（ＬＨ）含量采用ＥＬＩＳＡ方法按照试剂盒说明书进行测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所㊂１．５．７㊀卵巢组织学检测㊀㊀将卵巢用４％中性甲醛浸泡并存放于４ħ冰箱，４８ｈ后取出卵巢样，经过水洗㊁脱水㊁透明㊁浸蜡㊁包埋㊁切片㊁展片㊁捞片㊁烤片㊁脱蜡㊁染色㊁脱水，透明和封固后，进行显微镜观察㊂１．６㊀统计与分析㊀㊀试验数据的统计分析采用ＳＰＳＳ１７．０软件㊂模型试验缺锌组和对照组组间差异采用Ｓｔｕｄｅｎｔ⁃Ｔ检验分析㊂干预试验采用单因素方差分析（ｏｎｅ⁃ｗａｙＡＮＯＶＡ），并用ＬＳＤ法多重比较各组间差异㊂试验数据以 平均值 表示，平均标准误差以 ＳＥＭ 表示㊂Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１分别为差异显著和极显著水平㊂５４２２㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷２㊀结果与分析２．１㊀幼龄大鼠缺锌模型的建立㊀㊀由表３可知，经过缺锌饲粮干预怀孕母鼠后，缺锌组的幼龄小鼠体重㊁体长极显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），其肝脏中锌含量及血清中ＭＴ含量㊁ＡＫＰ㊁Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ活性极显著低于对照组（Ｐ＜０．０１）㊂结果表明，幼龄大鼠缺锌模型建立成功㊂表３㊀缺锌饲粮对幼龄大鼠生长性能、肝脏中锌含量及血清生化指标的影响Ｔａｂｌｅ３㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｄｉｅｔｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ｚｉｎｃｃｏｎｔｅｎｔｉｎｌｉｖｅｒａｎｄｓｅｒｕｍｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｙｏｕｎｇｒａｔｓ项目Ｉｔｅｍｓ组别Ｇｒｏｕｐｓ对照Ｃｏｎｔｒｏｌ缺锌ＺｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙＳＥＭＰ值Ｐ⁃ｖａｌｕｅ体重ＢＷ／ｇ５１．６２ａ３９．５４ｃ２．７２１＜０．００１体长ＢＬ／ｃｍ２０．３０ａ１８．３６ｃ０．４４５０．００１肝脏中锌含量Ｚｉｎｃｃｏｎｔｅｎｔｉｎｌｉｖｅｒ／（ｍｇ／ｋｇ）４２．９８ａ３２．６５ｃ２．３１３＜０．００１碱性磷酸酶ＡＫＰ／（金氏单位／ｄＬ）５０．８６ａ３８．４１ｃ２．８０７＜０．００１金属硫蛋白ＭＴ／（ｎｇ／ｍＬ）１０．１２ａ７．４８ｃ０．５９３＜０．００１铜锌超氧化物歧化酶Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ／（Ｕ／ｍＬ）２０３．６７ａ１７０．６７ｃ７．４１８＜０．００１㊀㊀同行数据肩标相邻字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５），相间字母表示差异极显著（Ｐ＜０．０１），相同或无字母表示差异不显著（Ｐ＞０．０５）㊂下表同㊂㊀㊀Ｉｎｔｈｅｓａｍｅｒｏｗ，ｖａｌｕｅｓｗｉｔｈａｄｊａｃｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５），ｗｉｔｈｉｎｔｅｒｖａｌｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒ⁃ｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｅｘｔｒｅｍｅｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０１），ｗｈｉｌｅｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｅｏｒｎｏｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒ⁃ｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅａｓｂｅｌｏｗ．２．２㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠生长发育的影响２．２．１㊀生长性能㊀㊀由表４可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ组各生长性能指标均没有显著变化（Ｐ＞０．０５），而Ⅲ组体重极显著降低（Ｐ＜０．０１），ＡＤＦＩ显著降低（Ｐ＜０．０５）㊂㊀㊀与Ⅱ组相比，Ⅲ组ＡＤＦＩ和体重极显著降低（Ｐ＜０．０１），ＡＤＧ和料重比也降低但无统计学差异（Ｐ＞０．０５）；饲粮中补加低㊁中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌后，Ⅴ组ＡＤＦＩ㊁ＡＤＧ和体重显著高于Ⅱ组（Ｐ＜０．０５），Ⅵ组ＡＤＦＩ和Ⅱ组接近（Ｐ＞０．０５），但ＡＤＧ和体重显著高于Ⅱ组（Ｐ＜０．０５）㊂各组间Ｆ／Ｇ无显著差异（Ｐ＞０．０５）㊂这表明中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌对缺锌大鼠的作用效果优于硫酸锌㊂㊀㊀与Ⅲ组相比，饲粮中补加枯草芽孢杆菌锌后，各组Ｆ／Ｇ降低但无统计学差异（Ｐ＞０．０５）；Ⅴ组体重和ＡＤＦＩ极显著高于Ⅲ组（Ｐ＜０．０１），ＡＤＧ显著增加（Ｐ＜０．０５）；Ⅵ组体重和ＡＤＦＩ极显著增加（Ｐ＜０．０１），ＡＤＧ显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂这表明一定剂量的枯草芽孢杆菌锌能够提高缺锌大鼠的采食量，促进生长，且高剂量组作用效果低于中剂量组㊂表４㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠生长性能的影响Ｔａｂｌｅ４㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ⁃ｚｉｎｃｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｒａｔｓ（ｎ＝３）项目Ｉｔｅｍｓ组别ＧｒｏｕｐｓⅠⅡⅢⅣⅤⅥＳＥＭＰ值Ｐ⁃ｖａｌｕｅ体重ＢＷ／ｇ１４６．１６ｂ１４４．６９ｂ１３２．７３ｄ１４０．５２ｃ１５５．７２ａ１５３．８７ａ１．９２６０．００７平均日增重ＡＤＧ／（ｇ／ｄ）３．１８ｂ３．２０ｂ３．０７ｂ３．１６ｂ３．７４ａ３．６８ａ０．０７１０．０４９平均日采食量ＡＤＦＩ／（ｇ／ｄ）９．０４ｂｃ９．０９ｂ８．６０ｄ８．９１ｃ９．５３ａ９．１７ｂ０．０７００．００１料重比Ｆ／Ｇ２．８５２．７４２．９９２．８４２．５４２．４９０．１５７０．２３１６４２２５期黄燕萍等：枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠免疫性能㊁抗氧化能力以及生殖器官发育的影响２．２．２㊀器官指数㊀㊀由表５可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ组心脏指数㊁肝脏指数没有显著变化（Ｐ＞０．０５）；Ⅲ组肝脏指数显著降低（Ｐ＜０．０５），卵巢指数极显著降低（Ｐ＜０．０１）㊂这表明大鼠肝脏㊁卵巢发育主要由所采食饲粮的锌含量所决定，与先天是否缺锌无显著关系㊂㊀㊀与Ⅱ组相比，Ⅲ组肝脏指数显著降低（Ｐ＜０．０５），其他指数相近（Ｐ＞０．０５）；饲粮中补加低㊁中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌后，Ⅳ组卵巢指数显著增加（Ｐ＜０．０５），Ⅴ组心脏指数㊁卵巢指数极显著高于Ⅱ组（Ｐ＜０．０１），Ⅵ组心脏指数显著高于Ⅱ组（Ｐ＜０．０５）㊂这表明中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌对缺锌大鼠的作用效果优于硫化锌㊂㊀㊀与Ⅲ组相比，Ⅳ组肝脏指数和卵巢指数极显著增加（Ｐ＜０．０１），Ⅴ组各器官指数均极显著增加（Ｐ＜０．０１），Ⅵ组显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂这表明一定剂量的枯草芽孢杆菌锌有助于缺锌大鼠相关器官的发育，且高剂量组作用效果低于中剂量组㊂表５㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠器官指数的影响Ｔａｂｌｅ５㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ⁃ｚｉｎｃｏｎｏｒｇａｎｉｎｄｅｘｅｓｏｆｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｒａｔｓ％项目Ｉｔｅｍｓ组别ＧｒｏｕｐｓⅠⅡⅢⅣⅤⅥＳＥＭＰ值Ｐ⁃ｖａｌｕｅ心脏指数Ｈｅａｒｔｉｎｄｅｘ０．４５ｃ０．４４ｃｄ０．４３ｃｄ０．４３ｄ０．５４ａ０．４９ｂ０．００７０．００１肝脏指数Ｌｉｖｅｒｉｎｄｅｘ３．０３ｂ３．０７ａｂ２．８５ｃ３．１４ａ３．１２ａ３．０２ｂ０．０１９＜０．００１卵巢指数Ｏｖａｒｉａｎｉｎｄｅｘ０．０６８ｂ０．０６２ｃｄ０．０６０ｄ０．０６７ｂ０．０７１ａ０．０６３ｃ０．００１＜０．００１２．３㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠免疫性能的影响㊀㊀由表６可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ组血清溶菌酶活性显著降低（Ｐ＜０．０５），其他指标无统计学差异（Ｐ＞０．０５）；Ⅲ组血清ＭＣＰ⁃１含量及溶菌酶活性极显著降低（Ｐ＜０．０１），ＩｇＭ含量显著降低（Ｐ＜０．０５）㊂这表明大鼠免疫力下降主要与先天机体锌含量有关㊂㊀㊀与Ⅱ组相比，Ⅲ组血清ＩｇＭ含量及溶菌酶活性显著降低（Ｐ＜０．０５），ＭＣＰ⁃１含量极显著降低（Ｐ＜０．０１）；饲粮中补加低㊁中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌后，Ⅳ组血清ＭＣＰ⁃１含量及溶菌酶活性显著增加（Ｐ＜０．０５），Ⅴ组血清ＭＣＰ⁃１含量及溶菌酶活性极显著增加（Ｐ＜０．０１），ＩｇＭ含量显著增加（Ｐ＜０．０５），Ⅵ组血清ＭＣＰ⁃１含量显著降低（Ｐ＜０．０５），溶菌酶活性极显著增加（Ｐ＜０．０１）㊂这表明饲粮中添加一定剂量的枯草芽孢杆菌锌作用效果优于硫酸锌㊂㊀㊀与Ⅲ组比较，Ⅳ组血清ＩｇＭ含量显著增加（Ｐ＜０．０５），ＭＣＰ⁃１含量和溶菌酶活性极显著增加（Ｐ＜０．０１）；Ⅴ组各血清免疫指标均极显著增加（Ｐ＜０．０１）；Ⅵ组各血清免疫指标均显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂这表明中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌有助于提高缺锌大鼠的免疫性能，但高剂量组作用效果低于中剂量组㊂表６㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠血清免疫指标的影响Ｔａｂｌｅ６㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ⁃ｚｉｎｃｏｎｓｅｒｕｍｉｍｍｕｎｅｉｎｄｅｘｅｓｏｆｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｒａｔｓ项目Ｉｔｅｍｓ组别ＧｒｏｕｐｓⅠⅡⅢⅣⅤⅥＳＥＭＰ值Ｐ⁃ｖａｌｕｅ免疫球蛋白ＭＩｇＭ／（ｇ／ｍＬ）８７１．８０ｂ８５４．３６ｂ７６７．７５ｃ８６７．２９ｂ１１６８．３５ａ８８６．４８ｂ３１．４４５＜０．００１单核细胞趋化蛋白－１ＭＣＰ⁃１／（ｐｇ／ｍＬ）６１５．４５ｃ６３４．６９ｃ４１７．５３ｅ７１９．８４ｂ８９３．７１ａ５０７．７２ｄ３６．９２９＜０．００１溶菌酶Ｌｙｓｏｚｙｍｅ／（Ｕ／ｍＬ）２２４．３３２０５．３６１７４．６１２２７．７６２４３．５３２４１．３２５．９２００．４２９７４２２㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷２．４㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠抗氧化能力的影响㊀㊀由表７可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ组各血清抗氧化指标无显著变化（Ｐ＞０．０５）；Ⅲ组血清Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ㊁ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性显著降低（Ｐ＜０．０５），ＭＤＡ含量显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂这表明缺锌会减弱大鼠抗氧化能力，主要与后天饲粮中锌含量有关㊂㊀㊀与Ⅱ组相比，Ⅲ组血清ＭＡＤ含量和ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性差异显著（Ｐ＜０．０５）；饲粮中补加低㊁中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌后，Ⅳ组血清ＭＡＤ含量和ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性差异显著（Ｐ＜０．０５），Ⅴ组血清ＭＡＤ含量和ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性差异极显著（Ｐ＜０．０１），Ⅴ组血清Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ活性显著增加（Ｐ＜０．０５），血清ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性极显著增加（Ｐ＜０．０１），Ⅵ组血清ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂这表明中剂量的枯草芽孢杆菌锌作用效果优于硫酸锌㊂㊀㊀与Ⅲ组比较，Ⅳ组血清ＭＤＡ含量和ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性有极显著差异（Ｐ＜０．０１），Ⅴ组各血清抗氧化指标均有极显著差异（Ｐ＜０．０１），Ⅵ组血清Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ㊁ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性极显著增加（Ｐ＜０．０１），ＭＤＡ含量显著降低（Ｐ＜０．０５）㊂这表明中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌有助于提高缺锌大鼠的抗氧化性能，且中剂量效果更佳㊂表７㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠血清抗氧化指标的影响Ｔａｂｌｅ７㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ⁃ｚｉｎｃｏｎｓｅｒｕｍａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｉｎｄｅｘｅｓｏｆｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｒａｔｓ项目Ｉｔｅｍｓ组别ＧｒｏｕｐｓⅠⅡⅢⅣⅤⅥＳＥＭＰ值Ｐ⁃ｖａｌｕｅ铜锌超氧化物歧化酶Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ／（Ｕ／ｍＬ）１５７．２１ｂｃ１５３．６７ｂｃｄ１５０．６５ｄ１５２．０１ｃｄ１７１．００ａ１５９．３３ｂ１．７５９０．０２５丙二醛ＭＤＡ（ｎｍｏｌ／ｍＬ）３．５０ｂ３．５９ｂ３．８３ａ３．１８ｃ２．７７ｄ３．６０ｂ０．０８５０．００２谷胱甘肽过氧化物酶ＧＳＨ⁃Ｐｘ／（Ｕ／ｍＬ）４１４．２９ｃ４０９．２６ｃ３７９．２６ｄ４１７．７０ｂ４２５．７８ａ４１６．８４ｂ３．６０１０．００２２．５㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠性激素分泌的影响㊀㊀由表８可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ组血清Ｅ２含量极显著降低（Ｐ＜０．０１），ＦＳＨ㊁ＬＨ含量差异不显著（Ｐ＞０．０５），Ⅲ组血清Ｅ２㊁ＬＨ含量极显著降低（Ｐ＜０．０１），ＦＳＨ含量显著降低（Ｐ＜０．０５）㊂这表明缺锌对性激素分泌的影响，主要与饲粮中锌含量有关，与是否先天缺锌无关㊂㊀㊀与Ⅱ组相比，Ⅲ组血清Ｅ２㊁ＦＳＨ含量显著降低（Ｐ＜０．０５），ＬＨ含量极显著降低（Ｐ＜０．０１）；饲粮中补加低㊁中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌后，Ⅳ组血清Ｅ２和ＬＨ含量显著增加（Ｐ＜０．０５），Ⅴ组血清ＦＳＨ和ＬＨ含量显著增加（Ｐ＜０．０５），Ｅ２含量极显著增加（Ｐ＜０．０１），Ⅵ组血清Ｅ２含量显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂这表明低㊁中剂量的枯草芽孢杆菌锌能够有助于缺锌大鼠的性激素分泌，且作用效果优于硫酸锌㊂㊀㊀与Ⅲ组比较，Ⅳ组血清Ｅ２和ＬＨ含量极显著增加（Ｐ＜０．０１），ＦＳＨ含量显著增加（Ｐ＜０．０５）；Ⅴ组血清性激素含量均差异极显著（Ｐ＜０．０１），Ⅵ组血清Ｅ２含量极显著增加（Ｐ＜０．０１），ＦＳＨ含量显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂这表明枯草芽孢杆菌锌在一定程度上能够促进缺锌大鼠的性激素分泌，且中剂量作用效果最佳㊂表８㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠血清性激素含量的影响Ｔａｂｌｅ８㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ⁃ｚｉｎｃｏｎｓｅｒｕｍｓｅｘｈｏｒｍｏｎｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｒａｔｓ项目Ｉｔｅｍｓ组别ＧｒｏｕｐｓⅠⅡⅢⅣⅤⅥＳＥＭＰ值Ｐ⁃ｖａｌｕｅ雌二醇Ｅ２／（ｎｇ／Ｌ）７４．５４ａ５２．１２ｃ３６．５６ｄ５５．６５ｂ７５．２０ａ５５．４９ｂ３．２６５＜０．００１促卵泡生成素ＦＳＨ／（ｍＩＵ／ｍＬ）９．８９９．６５５．７０１０．４０１１．７０９．８１０．４５６０．８９３促黄体生成素ＬＨ／（ｍＩＵ／ｍＬ）１４．７６ｂ１３．９７ｂ５．８４ｄ１９．９１ａ１９．７３ａ１１．９１ｂｃ１．１７００．００２８４２２５期黄燕萍等：枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠免疫性能㊁抗氧化能力以及生殖器官发育的影响２．６㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠卵巢组织的影响㊀㊀对大鼠卵巢组织切片进行苏木精－伊红（ＨＥ）染色，同等倍镜下观察对比卵巢发育情况㊂结果如图１和图２所示，添加中㊁低剂量的枯草芽孢杆菌锌卵巢上卵泡发育良好且卵泡膜层较厚，卵巢上黄体㊁初级卵泡和次级卵泡等数量较多，而缺锌组和枯草芽孢杆菌锌高剂量组相比正常组间质细胞较多，各级卵泡数较少㊂另外，硫酸组与正常组无明显差异㊂这表明大鼠先天性缺锌会阻碍卵巢中各级卵泡的发育，影响生殖发育，而在后天饲粮中添加低㊁中剂量枯草芽孢杆菌锌有助于缺锌大鼠卵巢的发育㊂㊀㊀图Ａ Ｆ分别为Ⅰ Ⅵ组卵巢组织切片㊂下图同㊂㊀㊀ＦｉｇｕｒｅｓＡｔｏＦｗｅｒｅｏｖａｒｉａｎｔｉｓｓｕｅｓｅｃｔｉｏｎｓｏｆｇｒｏｕｐｓⅠｔｏⅥ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｓａｍｅａｓｂｅｌｏｗ．图１㊀显微镜下各组卵巢图像Ｆｉｇ．１㊀Ｏｖａｒｙｉｍａｇｅｓｏｆｅａｃｈｇｒｏｕｐ（４０ˑ）３㊀讨㊀论３．１㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠生长发育的影响㊀㊀锌是生长发育的必需微量元素之一，ＥｌＨｅｎｄｙ等［１５］和Ｓｕｎ等［１６］研究表明，缺锌会导致大鼠食物摄入量降低，导致生长延缓㊂郭美荣等［８］通过建立不同的饲养饲粮的低锌ＳＤ大鼠模型，发现锌可以明显影响大鼠的器官发育㊂Ｓｗｉｎｋｅｌｓ等［１７］研究表明，动物饲粮中添加有机锌比无机锌能够提供更多可以被动物吸收利用的锌，并且只有被吸收的锌才可以被生物所利用㊂邝声耀等［１８］研究表明，适量的锌有助于提高动物的生长性能㊂本试验研究发现添加一定剂量的的枯草芽孢杆菌锌有助于增加缺锌大鼠的采食量，促进心脏㊁肝脏以及卵巢器官的发育，从而促进生长发育㊂另外，研究发现高剂量组作用效果低于中剂量组，其机理可能是高剂量枯草芽孢杆菌锌使机体微量营养素之间的吸收转运和利用的动态平衡失调，影响了其他营养素的吸收利用，抗体形成受到影响，从而削弱肠黏膜的抵抗能力，阻碍了大鼠生长发育［１９－２０］㊂本试验研究还发现中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌对缺锌大鼠的作用效果优于硫酸锌，表明有机锌更有利于缺锌大鼠的吸收利用［２１－２２］，这与前人研究相符，但具体机理还有待进一步研究㊂３．２㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠免疫性能的影响㊀㊀锌可以增加免疫球蛋白㊁单核细胞趋化蛋白含量和溶菌酶活性，提高它们的合成能力，增加机体的免疫功能㊂Ｖｅｒｍａ等［２３］报道，补锌可以显著９４２２㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷提高缺锌动物血清中的免疫球蛋白含量㊂Ａｈｎ等［２４］认为，血清ＩｇＧ含量受锌形式的影响很明显，蛋氨酸锌的血清ＩｇＧ含量高于氧化锌㊂Ｗａｎｇ等［２５］发现，饲粮中添加氨基酸锌不但能够促进动物免疫器官发育，还能够增强细胞与组织的免疫抗氧化能力，且与硫酸锌相比较，氨基酸锌拥有较高的生物学利用率㊂本研究发现饲粮中添加中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌能够促进缺锌大鼠的血清ＩｇＭ㊁ＭＣＰ⁃１含量和溶菌酶活性，提高免疫性能，且作用效果优于硫酸锌，但高剂量组作用效果低于中剂量组，其机理可能是高锌的直接毒性作用，使ＡＴＰ酶㊁核苷酸酶和碱性磷酸酶等含锌酶结构损伤，使肠道通透性增加，细胞代谢降低，机体免疫能力降低［２６］㊂图２㊀显微镜下各组卵巢图像Ｆｉｇ．２㊀Ｏｖａｒｙｉｍａｇｅｓｏｆｅａｃｈｇｒｏｕｐ（１００ˑ）３．３㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠抗氧化能力的影响㊀㊀ＧＳＨ⁃Ｐｘ是机体重要的含锌酶，Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ是锌依赖性酶，主要功能是防止机体过氧化，因此锌缺乏会影响ＧＳＨ⁃Ｐｘ和Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ活性，从而降低抗氧化能力［２７－２８］㊂ＭＤＡ是生物膜发生脂质过氧化的重要产物之一，其含量可间接反映细胞损伤程度㊂刘凤霞等［２９］研究发现，随着饲粮中有机锌含量的增加，蛋鸡血清和肝脏中的Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ活性提高，ＭＤＡ含量下降㊂饲粮中添加不同形式的锌元素可提高动物血清Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ活性，且添加有机锌的效果要优于无机锌㊂本试验研究发现，中㊁高剂量的枯草芽孢杆菌锌能够显著提高缺锌大鼠血清ＧＳＨ⁃Ｐｘ和Ｃｕ⁃ＺｎＳＯＤ活性，降低ＭＤＡ含量，从而提高抗氧化能力，且中剂量作用效果更佳，优于硫酸锌组㊂出现这种结果的原因可能是中剂量枯草芽孢杆菌锌足以提高缺锌大鼠抗氧化能力，当添加更多剂量时，高锌的毒性作用阻碍了缺锌大鼠的营养利用以及转运，抗氧化能力降低，最终影响了生长发育［３０］㊂３．４㊀枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠生殖器官发育的影响㊀㊀性器官卵巢的发育和性激素的含量是衡量生殖功能的重要指标㊂ＦＳＨ和ＬＨ均由垂体合成并分泌，主要作用是促进卵泡的生长发育，调节卵巢的分泌功能，能够反映卵巢的衰老㊂Ｅ２是体内主要由卵巢成熟滤泡分泌的一种天然雌激素，能促进和调节女性性器官及副性征的正常发育，Ｅ２的分泌可刺激子宫内膜的增生变厚，为受孕做准备㊂张莉等［２８］研究发现，缺锌限制卵巢组织的发育，使卵泡形状不规则，衰减卵巢的正常功能；Ｅｇｗｕｒｕｇ⁃ｗｕ等［３１］和Ｇｉｌａｂｅｒｔ等［３２］发现锌影响性激素的分泌和性器官的发育，缺锌降低大鼠Ｅ２㊁ＦＳＨ㊁ＬＨ的含量㊂梁建光［３３］研究发现有机锌可以提高ＦＳＨ㊁ＬＨ等性激素含量㊂本试验研究发现，低㊁中剂量的枯草芽孢杆菌锌能够促进缺锌大鼠的卵巢发０５２２５期黄燕萍等：枯草芽孢杆菌锌对先天性缺锌大鼠免疫性能㊁抗氧化能力以及生殖器官发育的影响育，使卵泡发育良好且卵泡膜层较厚，黄体㊁初级卵泡和次级卵泡等数量较多，血清Ｅ２㊁ＬＨ和ＦＳＨ分泌增加，且作用效果优于硫酸锌㊂这表明一定剂量的枯草芽孢杆菌锌有助于缺锌大鼠卵巢的发育，且试验结果基本符合前人研究，但激素分泌含量上存在差异，可能与所选大鼠品种㊁饲粮配方㊁饲养方式以及饲养周期等有关㊂４㊀结㊀论㊀㊀枯草芽孢杆菌锌能够促进先天性缺锌大鼠的肝脏㊁卵巢等器官发育，提高机体的免疫性能和抗氧化能力，从而促进缺锌大鼠生理机能的修复，且其干预效果优于同等锌含量的硫酸锌，可以降低饲粮中锌的添加量㊂参考文献：［１］㊀ＣＨＩＭＩＥＮＴＩＦ，ＡＯＵＦＦＥＮＭ，ＦＡＶＩＥＲＡ，ｅｔａｌ．Ｚｉｎｃｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ⁃ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｎｅｗｄｒｕｇｔａｒｇｅｔｓｆｏｒｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇｃｅｌｌｆａｔｅ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＤｒｕｇＴａｒｇｅｔｓ，２００３，４（４）：３２３－３３８．［２］㊀安利峰，胜利，范桂香．锌与生殖健康［Ｊ］．国外医学（医学地理分册），２００４，２５（１）：１４－１６．［３］㊀刘浩，成小松，崔美芝，等．缺锌对大鼠生殖功能影响的实验研究［Ｊ］．中国地方病学杂志，２００３，２２（４）：３８３．［４］㊀赵佳英，康德灿，高永峰，等．微生物富集有益元素食品的研发概况与展望［Ｊ］．食品研究与开发，２０１７，３８（１２）：２０６－２１０．［５］㊀ＬＩＷＦ，ＺＨＯＵＸＸ，ＬＵＰ．Ｂｏｔｔｌｅｎｅｃｋｓｉｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓ⁃ｓｉｏｎａｎｄｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ［Ｊ］．ＲｅｓｅａｒｃｈｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，１５５（８）：６０５－６１０．［６］㊀ＷＨＩＴＥＣＬ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｏｎｔｈｅｂｏｄｙｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｒａｔｓ［Ｊ］．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｒａｃｅＥｌｅｍｅｎｔＲｅ⁃ｓｅａｒｃｈ，１９８８，１７（１）：１７５－１８７．［７］㊀钱立群，金艳凤，刘凤莲，等．锌对大鼠生长发育和抗氧化作用的影响［Ｊ］．环境与健康杂志，２００６，２３（３）：２１７－２２０．［８］㊀郭美荣，金艳凤，钱立群．锌对大鼠生长发育影响的研究［Ｊ］．旅行医学科学，２００７，１３（１）：５－９．［９］㊀陈丽敏，王玉．维生素Ａ和锌过量摄入对雌性大鼠生殖系统的影响［Ｊ］．现代预防医学，２０１０，３７（１２）：２３０９－２３１１．［１０］㊀ＤＡＲＤＥＮＮＥＭ．Ｚｉｎｃａｎｄｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｕｒｏ⁃ｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，２００２，５６：Ｓ２０－Ｓ２３．［１１］㊀周立波，孙淑滨，景慎文．缺锌对孕鼠生长发育及其肝脏㊁胎盘中谷胱甘肽过氧化物酶及过氧化氢酶活性的影响［Ｊ］．山东医药，２００２，４２（３６）：１－３．［１２］㊀张伟庆，黄福佳，杨萧华，等．枯草芽孢杆菌工程菌（ＷＢ８００Ｎ⁃ＣＣ３１）对大鼠免疫指标的影响［Ｊ］．黑龙江畜牧兽医，２０１７（１０）：１８４－１８６．［１３］㊀边羽芊．浅析枯草芽孢杆菌研究进展与应用［Ｊ］．科学技术创新，２０１７（３０）：３３－３４．［１４］㊀ＲＥＥＶＥＳＰＧ，ＮＩＥＬＳＥＮＦＨ，ＦＡＨＥＹＧＣ．ＡＩＮ⁃９３ｐｕｒｉｆｉｅｄｄｉｅｔｓｆｏｒｌａｂｏｒａｔｏｒｙｒｏｄｅｎｔｓ：ｆｉｎａｌｒｅｐｏｒｔｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎｉｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｄｈｏｃｗｒｉｔｉｎｇｃｏｍｍｉｔ⁃ｔｅｅｏｎｔｈｅｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＡＩＮ⁃７６Ａｒｏｄｅｎｔｄｉｅｔ［Ｊ］．ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９９３，１２３（１１）：１９３９－１９５１．［１５］㊀ＥＬＨＥＮＤＹＨＡ，ＹＯＵＳＥＦＭＩ，ＡＢＯＥＬ⁃ＮＡＧＡＮＩ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｅｔａｒｙｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｏｎｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｚｉｎｃ，ｃｏｐｐｅｒ，ａｎｄｉｒｏｎｉｎｇｒｏｗｉｎｇｒａｔｓ［Ｊ］．Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２００１，１６７（２）：１６３－１７０．［１６］㊀ＳＵＮＪＹ，ＪＩＮＧＭＹ，ＷＥＮＧＸＹ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉ⁃ｅｔａｒｙｚｉｎｃｌｅｖｅｌｓｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｅｎｚｙｍｅｓ，ｗｅｉｇｈｔｓｏｆｏｒｇａｎｓ，ａｎｄｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｚｉｎｃａｎｄｃｏｐｐｅｒｉｎｇｒｏｗｉｎｇｒａｔｓ［Ｊ］．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｒａｃｅＥｌｅｍｅｎｔＲｅｓｅａｒｃｈ，２００５，１０７（２）：１５３－１６５．［１７］㊀ＳＷＩＮＫＥＬＳＪＷＧＭ，ＫＯＲＮＥＧＡＹＥＴ，ＺＨＯＵＷ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｏｆａｚｉｎｃａｍｉｎｏａｃｉｄｃｈｅｌａｔｅａｎｄｚｉｎｃｓｕｌｆａｔｅｉｎｒｅｓｔｏｒｉｎｇｓｅｒｕｍａｎｄｓｏｆｔｔｉｓｓｕｅｚｉｎｃｃｏｎ⁃ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｗｈｅｎｆｅｄｔｏｚｉｎｃ⁃ｄｅｐｌｅｔｅｄｐｉｇｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９９６，７４（１０）：２４２０－２４３０．［１８］㊀邝声耀，唐凌，张纯，等．有机锌在动物营养中的研究与应用［Ｊ］．中国畜牧兽医，２００６，３３（７）：１８－２１．［１９］㊀ＹＡＤＲＩＣＫＭＫ，ＫＥＮＮＥＹＭＡ，ＷＩＮＴＥＲＦＥＬＤＴＥＡ．Ｉｒｏｎ，ｃｏｐｐｅｒ，ａｎｄｚｉｎｃｓｔａｔｕｓ：ｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｓｕｐｐｌｅ⁃ｍｅｎｔａｔｉｏｎｗｉｔｈｚｉｎｃｏｒｚｉｎｃａｎｄｉｒｏｎｉｎａｄｕｌｔｆｅｍａｌｅｓ［Ｊ］．ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９８９，４９（１）：１４５－１５０．［２０］㊀罗治彬，吴嘉惠，史景泉，等．高锌对大鼠肠黏膜免疫的影响［Ｊ］．中国药理学与毒理学杂志，２０００，１４（１）：３６－３９．［２１］㊀王成贵．生物锌与有机锌对幼儿生长发育影响的研究［Ｊ］．中国热带医学，２００９，９（３）：５８０－５８１，４６８．［２２］㊀郝洋洋，张修修，王玉，等．有机锌和有机锰对蛋种母鸡生产性能㊁蛋品质㊁抗氧化能力和免疫功能的影响［Ｊ］．动物营养学报，２０１８，３０（１２）：４９３１－４９３８．［２３］㊀ＶＥＲＭＡＰＣ，ＧＵＰＴＡＲＰ，ＳＡＤＡＮＡＪＲ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｚｉｎｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｒｅｐｌｅｔｉｏｎｏｎｓｏｍｅｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｖａｒｉａｂｌｅｓｉｎｇｕｉｎｅａ⁃ｐｉｇｓ［Ｊ］．１５２２。