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外标法测定丹参中丹参酮ⅡA的含量外标法测定丹参中丹参酮?的含量 A参照实验六十一外标法测定丹参中丹参酮?的含量 P134A 一、目的要求1、练习使用高效液相色谱仪。
2、学会使用外标法定量分析。
二、实验原理外标法可以分为外标一点法、外标二点法及标准曲线法。
当标准曲线法的截距为零时，可用外标一点法定量。
在药物分析中，为了减少实验条件对分析结果的影响，采用随行外标一点法，即每次测定都同时进行对照品和试样溶液。
三、仪器与试剂1、美国戴安液相色谱仪(二极管阵列检测器，自动进样器)、C反相色谱柱、18棕色容量瓶50mlL、超声波提取器、滴管。
2、丹参药材、丹参酮?对照品、甲醇(色谱纯)、重蒸馏水。
A四、实验内容与步骤1、色谱条件C反相色谱柱;流动相为甲醇—水90?10;检测波长270nm;流速1mL/min;18 按丹参酮?计算n不低于2000。
A2、对照品溶液的制备精密称取丹参酮?对照品0.8mg，置于50mL棕色的容量瓶中，加入甲醇至A 刻度，摇匀，即得。
(每mL含丹参酮?16μg)。
A3、试样溶液的制备取丹参药材(过2号筛)0.3285g，精密称定置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，塞密，称定重量，超声30分钟，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，过滤，取续滤液，即得。
4、测定分别精密吸取对照品溶液与试样溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，并计算含量丹参药材中含有的丹参酮?含量X，计算公式如下: AAMP，，ybbX (%),，100%AM，by1A——丹参药材的峰面积。
yA——丹参酮?对照品的峰面积。
bAM——丹参药材的称样量，g。
yM——丹参酮?对照品的称样量，g。
bAP——丹参酮?对照品的含量，99.99%。
bA五、实验记录记录各个原始数据(共4个)，计算出丹参药材中丹参酮?的含量，附上丹A参药材的液相色谱图，实验结论(即测定的丹参药材中含有多少的，丹参酮?)。
高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量何玲玲【摘要】目的建立高效液相色谱法测定中药丹参不同部位中丹参酮IIA 的含量.方法采用反相高效液相色谱法,选择色谱柱Hypersil ODSC18 柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇∶水=75:25;流速为1.2mL/min;柱温为30℃;检测波长为268 ～ 270nm.结果丹参酮IIA 浓度在1.25 ～21.45μg/mL(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.83%,RSD=2.04%(n=6).结论采用反相高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA 的含量,该方法快速、灵敏、准确,可以为丹参的种植、品质鉴定、扩展药用部位以及控制丹参药材的质量提供测定依据.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2012(010)011【总页数】2页(P36-37)【关键词】高效液相;丹参;丹参酮IIA;色谱柱【作者】何玲玲【作者单位】佛山市中医院,广东,佛山,528000【正文语种】中文【中图分类】R282.710.3丹参（Salvia Miltiorrhiza Bunge）为唇形科（Labiatae）鼠尾草属多年生草本植物，传统以根入药。
丹参味苦，性微寒，具活血化瘀、凉血消痈、清心除烦之功效。
活性成分主要包括脂溶性成分和水溶性成分，丹参酮IIA是其脂溶性代表成分之一，相对含量较高，有扩张冠脉，抗心肌缺血等作用[1]。
目前，高效液相色谱法（HPLC）已经成为控制中药质量的最为有效的手段，而且很多资料中记录了对丹参高效液相色谱的研究[2,3]，但对丹参的根、茎、叶中丹参酮IIA的含量测定鲜有报道，本文通过对丹参各部位中丹参酮IIA含量的测定，以为今后中药丹参的采集、部位选择及加工提供一定的理论参考，现将研究结果报道如下。
1 实验材料1.1 实验仪器Waters 700高效液相色谱仪（美国 Waters公司）；Waters 700紫外检测器；色谱柱Hypersil ODSC18柱（4.6mm×250mm，5μm ）；BS110S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；干燥箱（浙江省金坛市正基仪器有限公司，型号CS-202），电热恒温水浴锅（北京长安科学仪器厂，型号：HH S11-2），超声仪（ AUTOSC I ENCE，型号：AS5150A ）。
高效液相色谱法测定五明丹胶囊中丹参酮ⅡA含量孟建升;杨文文【摘要】Objective To establish an HPLC method to determining the Tanshinone ⅡA content in Wumingdan Capsules. Methods The chromatographic system consisted of Eclipse XDB - C18 column, using methanol - water(75 : 25) as the mobile phase. The detection wavelength was 270 nm and the flow rate was 1. 0 mL/min. Results The sample size of tanshinone ⅡA in the range of 17. 2 - 154. 8 μg had a good linear relation with the peak area(r = 0.999 8). The average recovery rate was 98.74％, RSD = 1. 22％ ( n =9). Conclusion The established method is simple, highly sensitive and accuracy, which can be used for the quality control of Wumingdan Capsules.%目的建立测定五明丹胶囊中丹参酮ⅡA含量的高效液相色谱法.方法采用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),甲醇-水(75:25)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm.结果丹参酮ⅡA进样量在17.2～154.8 μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.74％,RSD=1.22％(n=9).结论该方法操作简便,专属性强,结果准确,可用于五明丹胶囊的质量控制.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2012(021)019【总页数】2页(P40-41)【关键词】丹参酮ⅡA;高效液相色谱法;含量测定【作者】孟建升;杨文文【作者单位】河南省商丘市食品药品检验所,河南商丘 476000;天狮集团有限公司,天津 301700【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0五明丹胶囊(豫药制字Z05140124)是由五味子、羚羊角、丹参、决明子加工制成的医院制剂，具有平肝潜阳、活血化瘀、软肝散结之功效，用于急慢性肝炎、肝硬化。
高效液相色谱法测定丹参片中丹参酮ⅡA 含量的方法褚晶晶【摘要】 目的 观察采用高效液相色谱法对丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量进行测定的效果。
方法 本研究检测供试品溶液以超声波提取法对丹参片进行制备, 对照品采用丹参酮ⅡA, 测定方法采用高效液相色谱法, 选择合适的色谱柱、流动相以及检测波长, 并控制适宜的流速以及进样量, 测定温度选择为室温。
结果 在0.5126~4.8700 μg/ml 范围内丹参酮ⅡA 与峰面积具有良好的线性关系, 求的回归方程为Y =1425.3X +28.75, r =0.9996, n=5；平均回收率为99.63%, RSD 值为1.46%(n=9)。
结论 采用高效液相色谱法对丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量进行测定具有操作方法简便, 测定结果稳定的优势, 适用于丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量控制, 值得推广。
【关键词】 高效液相色谱法；丹参片；丹参酮ⅡA ；含量测定DOI ：10.14164/11-5581/r.2017.12.112作者单位：123000 阜新市药品检验所业务办公室丹参片在2015年版《中国药典》中质量标准只有丹酚酸B 的含量测定, 本文采用高效液相色谱法对丹参片中丹参酮ⅡA 的含量测定方法进行了研究。
1 仪器与材料本研究采用的高效液相色谱仪为美国waters E2695高效液相色谱仪。
丹参片(批号分别为161011, 161012, 161013), 丹参酮ⅡA 对照品(中国药品生物制品检定所, 批号为0766-200201)。
本研究所用甲醇均为色谱纯, 所用水为纯化水。
2 方法与结果2. 1 色谱条件 选择规格为(4.6 mm×250 mm, 5 μm)的waters symmetry C18色谱柱, 以甲醇-水(80∶20)为流动相, 控制流速为1.0 ml/min, 选取270 nm 为检测波长, 并控制适宜的冲柱比例以及进样量。
2. 2 溶液的制备 ①对照品溶液：称取20 mg 丹参酮ⅡA 对照品, 将其放于100 ml 棕色量瓶中, 采用甲醇溶解后稀释至刻度。
高效液相色谱法对丹参中丹参酮ⅡA ，丹参酮Ⅰ和隐丹参酮的同时测定摘要 本实验采用高效液相色谱法对中药材丹参中丹参酮ⅡA ，丹参酮Ⅰ和隐丹参酮三种成分采用外标定量法进行同时测定，根据其色谱图相应保留时间的谱峰与标准曲线进行对比，可知其三种成分在该样品中的含量，通过测定可知样品中丹参酮ⅡA ，丹参酮Ⅰ和隐丹参酮三种成分的百分含量分别为0.1011%、0.0259%、0.0155%。
关键词 HPLC 丹参 参酮ⅡA 丹参酮Ⅰ 隐丹参酮 外标法1、引言丹参酮ⅡA 、丹参酮Ⅰ和隐丹参酮是从唇形科鼠尾草属植物丹参的根部提取的脂溶性二萜类物质。
其分子结构、分子式、分子量如下： O H 3C C H 3C H 3O OO O O OOOC 18H 12O 3 294.33 C 18H 12O 3 276.29 C 19H 20O 3 296.36丹参酮ⅡA 丹参酮Ⅰ 隐丹参酮本实验将采用高效液相色谱法对丹参中的三种脂溶性提取物（丹参酮ⅡA 、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮）进行同时测定。
高效液相色谱分析包括两种洗脱方式：等度洗脱和梯度洗脱。
梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗提，即在分离过程中使两种或者两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变他们之间的比例，从而使流动相的强度、极性、pH 值或离子强度相应地变化，达到提高分离效果，缩短分离时间的目的。
梯度洗脱可以使一个复杂样品中性质差异较大的组分，都能在各自适宜的分离条件（容量因子k 适宜）下实现分离。
色谱定量分析的依据是各分析组分的质量或者浓度与检测器的响应信号(色谱图上表现为峰面积A或峰高h)成正比，即m=f’错误！未找到引用源。
A(f’称为定量校正因子)。
色谱法中常用的定量分析方法有归一化法，内标法和外标法。
外标法是应用待测组分的纯物质来制作标准曲线，即配置不同质量分数（浓度）的标准溶液，取固定量标准溶液进样分析，从所得的色谱图上测出响应信号（峰高或峰面积），然后绘制峰高或峰面积对含量(质量或浓度)的标准曲线。
应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量目的：分析高效液相色谱法在中药丹参不同部位中丹参酮IIA含量测定中的应用价值。
方法：建立反相高效液相色谱测定模式，选用Hypers110DS（C18）色谱柱，以75甲醇/25水为相液流动相比例，分别检测丹参不同部位有效成分丹参酮IIA的含量，并通过实验验证这一方法的有效性、稳定性等。
结果：丹参酮IIA面积和浓度呈线性相关，在1.25-21.45yg/ml浓度范围内线性最佳；加样溶液丹参酮IIA回收率平均为99.52%，相对标准偏差值为2.02%；丹参茎、叶未含丹参酮IIA。
结论：反相高效液相色谱法，可在短时间内精准获知丹参不同部位丹参酮IIA的含量，为丹参品质鉴定、药用价值和剂量研究工作提供可靠参考资料。
标签：高效液相；丹参；丹参酮IIA；色谱柱丹参是药用价值极高的草本植物，其根部内含丹参酮，常被入药调经疏络、活血祛瘀、消肿镇痛，其中丹参酮IIA是丹参脂溶性成分的代表物质，被广泛用于冠心病防治。
但是，丹参入药采购、运输、选品等各个环节均存在危险因素，如部分不法分子试图用伪劣品以假乱真牟取利益，制药工作人员专业水平不达标不能准确鉴别真伪、优劣，严重影响了中医药学的发展。
鉴于此，本院开展了丹参不同部位丹参酮IIA含量测定研究，旨在证实高效液相色谱法的应用价值并为丹参药用研究提供参考资料。
1 材料和设备1.1 实验材料本实验研究材料包括由中国药品生物制品检定所提供的丹参酮IIA标准品，江阴祥辉化工有限公司提供的色谱纯甲醇，广州致信中药饮片有限公司提供的干燥丹参根（6个月龄）、茎和叶子，实验用超纯水。
1.2 实验设备本实验研究设备包括高效液相色谱仪（杭州汉泽仪器有限公司，型号为LC-2010HT），紫外检测器（Genesys系列）、色谱柱（Hypersi10DSC18，长度为250mm，内径为4.6mm，填料颗粒直径为Sμm）、电子分析天平（瑞士梅特勒一托利多AB-S系列）、精密可程式干燥箱（上海博迅医疗生物仪器股份有限公司，BXH-130S）、电热恒温水槽（上海精密仪器仪表有限公司，CU系列）、实验室色谱超生仪（必能信超声上海有限公司，SB2200）。
丹参中主要丹参酮的超高效液相色谱法测定摘要：建立了用超高效液相色谱法（uplc）同时测定中药材丹参中隐丹参酮、丹参酮ⅰ、丹参酮ⅱa和二氢丹参酮的超高效液相色谱法。
中药材样品中的丹参酮用高速匀浆法提取，采用waters acquity uplc beh c18（1.7um，φ2.1mm×50mm，超高效液相色谱柱为固定相，40%的乙腈（内含0.1%的磷酸）为流动相分离，检测波长为254nm，流速为0.6ml/min。
在上述色谱条件下隐丹参酮、丹参酮ⅰ、丹参酮ⅱa和二氢丹参酮在5.0min内实现基线分离，加标回收率在91.5%～98.6%之间，日内相对标准偏差为2.1%，日间相对标准偏差为2.8%，结果满意。
关键词：丹参酮；丹参；超高效液相色谱法中图分类号: r917 文献标识码：b 文章编号：1004-7484(2012)06-0123-03丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根，是一种常用的临床中药。
脂溶性丹参酮类化合物是丹参的主要有效成分，具有增加血流量和扩张冠状动脉的作用。
对心肌梗塞、心肌损害、心绞痛和冠心病具有一定疗效，因此丹参药材中丹参酮含量的测定对药材质量评价具有一定意义［1］，目前报道的丹参酮类化合物的含量测定方法主要有毛细管气相色谱法[2]、薄层扫描色谱法[3]和高效液相色变法等[4-7]，其中最常用的是高效液相色谱法，常规高效液相色谱法分离时间长、流动相消耗大。
超高效液相色谱分析比常规高效液相色谱分析速度更快、灵敏度更高，它使用1.7um颗粒度的色谱柱填料，能够获得更高的柱效，还能节省分析时间和增加峰容量[8-13]。
文献[10]报道了超高效液相色谱测定药材中的丹酚酸b和丹参酮ⅱa含量，样品处理方法采用超声提取法，但超声提取法噪音污染大，而且色谱分离也需要15min。
本文研究了用匀浆法提取，超高效液相色谱法测定中药材丹参中的隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮ⅰ和丹参酮ⅱa的方法，样品前处理速度显著加快，而且4种丹参酮在5min内可达到完全分离，大大缩短了分离时间。
高效液相色谱法测定丹参中三种丹参酮含量曾敬其;李卓玥;赵燕妮;陈向明【摘要】建立高效液相色谱测定中药丹参中丹参酮Ⅰ,隐丹参酮,丹参酮ⅡA含量的方法.方法采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈和0.2％磷酸水溶液为流动相,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温30 ℃.丹参酮Ⅰ,隐丹参酮,丹参酮ⅡA三种化合物在1.56×10-6～5×10-5 g/mL(r＞0.999)浓度范围内线性关系良好.该方法快速、灵敏、便于操作且可靠性高,适用于中药样品中丹参酮类化合物的测定.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)008【总页数】3页(P113-114,145)【关键词】高效液相色谱法;丹参;丹参酮Ⅰ;隐丹参酮;丹参酮ⅡA【作者】曾敬其;李卓玥;赵燕妮;陈向明【作者单位】滨州医学院药学院,山东烟台264003;滨州医学院药学院,山东烟台264003;滨州医学院药学院,山东烟台264003;滨州医学院药学院,山东烟台264003【正文语种】中文【中图分类】O657.7丹参为临床常用传统中药，为唇形科植物鼠尾草丹参的干燥根及根茎，具有养血安神，调经止痛，消肿止血等功效[1]。
现代药理学研究表明，丹参中主要活性成分为脂溶性的二萜醌类化合物[2]，主要有丹参酮I，丹参酮IIA，隐丹参酮等[3]。
其中丹参酮IIA的含量最高，是丹参发挥其药理活性的基础。
丹参酮类化合物的测定方法主要有分光光度法[4]和色谱法等。
高效液相色谱法具有分析速度快，检测灵敏度高，操作自动化等优点[5-7]，尤其适用于成分复杂的中药的研究和分析。
本研究采用高效液相色谱法测定了丹参饮片中丹参酮I，隐丹参酮，丹参酮IIA三种化合物的含量，为丹参药材的质量控制提供科学的研究方法。
1.1 仪器与试剂Agilent1260型高效液相色谱(配四元泵、DAD检测器、自动进样器、柱温箱、色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18)，美国Agilent；TB-215D电子天平，北京丹佛仪器有限公司。
