高效液相色谱法对丹参中丹参酮ⅡA,丹参酮Ⅰ和隐丹参酮的同时测定

／ ／ 。 别为 ６ ５ ． ３ｍ ３ ． ５ｍ ｇ和 ２ ｇ ｇ ｇ
３ 结论
本文建立了一种同 时 测 定 丹 参 制 剂 中 隐 丹 参 酮 和 丹 参 酮 Ⅱ Ａ 含 量 的 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 。 采 用 ， ） 甲醇 －水 （ 体积比 ８ 为流动相获得了良好的分离效果 。 Ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｍ ｅ ｍ ｅ ｘ Ｃ ２ ５ ０×４ ． ６ｍｍ， ５μ ｍ） ０ ∶ ２ ０ １ ８ 色谱柱 （ 结果表明 ， 所建立的反相高效液相色谱方法具有前处理简便 、 分析时间短 、 选择性好等特点 ， 适用于丹参及 其相关制剂的质量控制 。
第２ ９卷
， 甲醇 ６ 用４ 冷却后 ， 转移至 ２ 用７ ０ｍ Ｌ 密塞 ， ０ｋ Ｈ ｚ超声波清洗剂超声提取 ３ ０ｍ ｉ ｎ ５ ０ｍ Ｌ 容量瓶 ， ５％ 甲醇 稀释至刻度 ， 摇匀 ， 用０ 作为样品溶液 。 ． ４ ５μ ｍ 微孔滤膜过滤后 ， ； 流 动 相： 甲 醇 －水 （ 体积比８ １． ２． ３ 色谱分析条件 色谱柱 ： Ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｍ ｅ ｍ ｅ ｘ Ｃ ２ ５ ０×４ ． ６ ｍｍ， ５μ ｍ） ０ ∶ １ ８柱 （ ） ； ／ 柱温 ： 流速 ： 检测波长 ： 进样量 ： ２ ０ ３ ５℃ ； １ ． ０ｍ Ｌ ｍ ｉ ｎ； ２ ７ ０ｎ ｍ； ２ ０μ Ｌ。
但重现性差 ； 分光光度法虽简便易行 ， 但需先分离 、 富集 。 而液相色谱法同 时 测 定 中 成 药 中 隐 丹 参 酮 和 丹 参酮 Ⅱ Ａ 鲜 有 报 道 。 本 文 建 立 了 同 时 测 定 丹 参 制 剂 中 隐 丹 参 酮 和 丹 参 酮 Ⅱ Ａ 的 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 （ ， 可用于丹参相关制剂的质量控制 。 Ｒ Ｐ－ＨＰ Ｌ Ｃ）

高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量何玲玲【摘要】目的建立高效液相色谱法测定中药丹参不同部位中丹参酮IIA 的含量.方法采用反相高效液相色谱法,选择色谱柱Hypersil ODSC18 柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇∶水=75:25;流速为1.2mL/min;柱温为30℃;检测波长为268 ～ 270nm.结果丹参酮IIA 浓度在1.25 ～21.45μg/mL(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.83%,RSD=2.04%(n=6).结论采用反相高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA 的含量,该方法快速、灵敏、准确,可以为丹参的种植、品质鉴定、扩展药用部位以及控制丹参药材的质量提供测定依据.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2012(010)011【总页数】2页(P36-37)【关键词】高效液相;丹参;丹参酮IIA;色谱柱【作者】何玲玲【作者单位】佛山市中医院,广东,佛山,528000【正文语种】中文【中图分类】R282.710.3丹参（Salvia Miltiorrhiza Bunge）为唇形科（Labiatae）鼠尾草属多年生草本植物，传统以根入药。

丹参味苦，性微寒，具活血化瘀、凉血消痈、清心除烦之功效。

活性成分主要包括脂溶性成分和水溶性成分，丹参酮IIA是其脂溶性代表成分之一，相对含量较高，有扩张冠脉，抗心肌缺血等作用[1]。

目前，高效液相色谱法（HPLC）已经成为控制中药质量的最为有效的手段，而且很多资料中记录了对丹参高效液相色谱的研究[2,3]，但对丹参的根、茎、叶中丹参酮IIA的含量测定鲜有报道，本文通过对丹参各部位中丹参酮IIA含量的测定，以为今后中药丹参的采集、部位选择及加工提供一定的理论参考，现将研究结果报道如下。

1 实验材料1.1 实验仪器Waters 700高效液相色谱仪（美国 Waters公司）；Waters 700紫外检测器；色谱柱Hypersil ODSC18柱（4.6mm×250mm，5μm ）；BS110S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；干燥箱（浙江省金坛市正基仪器有限公司，型号CS-202），电热恒温水浴锅（北京长安科学仪器厂，型号：HH S11-2），超声仪（ AUTOSC I ENCE，型号：AS5150A ）。

高效液相色法同时测定丹参酮胶囊中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量伍庆;卢俊;陈文生;赵杨;黄俊学;梁洁;胡蓉;邹晶【期刊名称】《贵州师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2006(024)004【摘要】采用高效液相色谱法同时测定丹参酮胶囊中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量,建立丹参酮胶囊质量控制体系.采用C18 柱分离测定;甲醇:水(80:20)为流动相,检测波长:270nm;流速:1.0ml/min. 结果:隐丹参酮和丹参酮ⅡA分别在 0.20～160μg(r ＞0.999 9)、0.21～1.68μg(r＞0.999 8)质量范围内线性关系良好;回收率在98.7%～103.0%之间.【总页数】3页(P103-105)【作者】伍庆;卢俊;陈文生;赵杨;黄俊学;梁洁;胡蓉;邹晶【作者单位】贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵州省山地环境重点实验室,贵阳,550001;贵阳生产力促进中心,贵阳,550002;贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵阳中医学院,贵阳,550003;贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵州省山地环境重点实验室,贵阳,550001;贵州省山地环境重点实验室,贵阳,550001【正文语种】中文【中图分类】O6【相关文献】1.HPLC法测定宁神补心片中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA含量 [J], 袁荣高2.HPLC 测定丹参酮胶囊中隐丹参酮的含量 [J], 汪艳;徐庆辉;凌丽美3.高效液相法测定9种丹参制剂中隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮ⅡA [J], 张亮;彭朋;张新峰;刘松灿;贺敏;蒋健;裘福荣4.HPLC同时测定丹参酮含片中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量 [J], 薛克昌;史宁;谭生建;迟家平;姜莉;吴久鸿5.高效液相色谱法测定丹参滴注液中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量 [J], 田闯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

ｖ （ ｏ ． １ ％磷 酸 ）＝８ ５ ： １ ５混合 溶 液为 流动 相 ， 检 测 波长 为 ２ ５ ４ ａ ｍ， 流速 为 １ ． ０ ｍＬ ／ ｍ ｉ ｎ ． 在 上述 色谱
条件 下隐丹参酮、 丹参酮 Ｉ 和丹参酮 Ⅱ 在 １ ０ ｍ ｉ ｎ内实现有效分 离和准确测定， 加标 回收率在
ｈ ｔ ｔ ｐ： ／ ／ ｘ ｂ ． ｙ ｎ ｎ ｉ ． ｅ ｄ ｕ ．丹 参 及 其 复 方 制剂 中的 ３个 丹 参酮
马志刚 ， 曹秋娥 ， 丁 中涛
（ 云南大学 化学 科学与工程学 院 ， 教育部 自然资源药物化学 重点 实验 室 ， 云南 昆明 ６ ５ ０ ０ ９ １ ）
云南 民族大学 学报 ： 自然科 学版 ， ２ ０ １ ３ ， ２ ２ （ ６ ） ： ３ ９ １ —３ ９ ３
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２—８ ５ １ ３ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ６ ． ０ ０ １
ＣＮ ５ ３一ｌ １ ９ ２ ／Ｎ Ｉ Ｓ Ｓ Ｎ １ ６ ７ ２—８ ５ １ ３
摘要： 建立了同时测定丹参及其复方制剂 中隐丹参酮、 丹参酮 Ｉ 和丹参 酮 Ⅱ 的反相 高效液相
色谱 法． 采 用 Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ Ｓ ｐ ｈ ｅ ｒ ｉ ｓ ｏ ｒ ｂ Ｏ Ｄ Ｓ ２ （ ５ ｍ， ４ ． ６ ｍ ｍ ｉ ． ｄ ．Ｘ２ ５ ０ ｍｍ） 为 色谱 柱 ， （ 甲醇 ） ：
Ｓ ａ ｌ ｖ ｉ ａ ｍｉ ｌ ｔ ｉ ｏ ｒ ｒ ｈ ｉ ｚ ａ Ｂ ｇ ｅ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｐ ｒ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｂ ｙ ｒ ｅ ｖ ｅ ｒ ｓ ｅ ｄ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍ ａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ（ Ｒ Ｐ—

高效液相色谱法测定丹参片中丹参酮ⅡA 含量的方法褚晶晶【摘要】　目的　观察采用高效液相色谱法对丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量进行测定的效果。

方法　本研究检测供试品溶液以超声波提取法对丹参片进行制备, 对照品采用丹参酮ⅡA, 测定方法采用高效液相色谱法, 选择合适的色谱柱、流动相以及检测波长, 并控制适宜的流速以及进样量, 测定温度选择为室温。

结果　在0.5126~4.8700 μg/ml 范围内丹参酮ⅡA 与峰面积具有良好的线性关系, 求的回归方程为Y =1425.3X +28.75, r =0.9996, n=5；平均回收率为99.63%, RSD 值为1.46%(n=9)。

结论　采用高效液相色谱法对丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量进行测定具有操作方法简便, 测定结果稳定的优势, 适用于丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量控制, 值得推广。

【关键词】　高效液相色谱法；丹参片；丹参酮ⅡA ；含量测定DOI ：10.14164/11-5581/r.2017.12.112作者单位：123000　阜新市药品检验所业务办公室丹参片在2015年版《中国药典》中质量标准只有丹酚酸B 的含量测定, 本文采用高效液相色谱法对丹参片中丹参酮ⅡA 的含量测定方法进行了研究。

1　仪器与材料本研究采用的高效液相色谱仪为美国waters E2695高效液相色谱仪。

丹参片(批号分别为161011, 161012, 161013), 丹参酮ⅡA 对照品(中国药品生物制品检定所, 批号为0766-200201)。

本研究所用甲醇均为色谱纯, 所用水为纯化水。

2　方法与结果2. 1　色谱条件　选择规格为(4.6 mm×250 mm, 5 μm)的waters symmetry C18色谱柱, 以甲醇-水(80∶20)为流动相, 控制流速为1.0 ml/min, 选取270 nm 为检测波长, 并控制适宜的冲柱比例以及进样量。

2. 2　溶液的制备　①对照品溶液：称取20 mg 丹参酮ⅡA 对照品, 将其放于100 ml 棕色量瓶中, 采用甲醇溶解后稀释至刻度。

应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量目的：分析高效液相色谱法在中药丹参不同部位中丹参酮IIA含量测定中的应用价值。

方法：建立反相高效液相色谱测定模式，选用Hypers110DS（C18）色谱柱，以75甲醇/25水为相液流动相比例，分别检测丹参不同部位有效成分丹参酮IIA的含量，并通过实验验证这一方法的有效性、稳定性等。

结果：丹参酮IIA面积和浓度呈线性相关，在1.25-21.45yg/ml浓度范围内线性最佳；加样溶液丹参酮IIA回收率平均为99.52%，相对标准偏差值为2.02%；丹参茎、叶未含丹参酮IIA。

结论：反相高效液相色谱法，可在短时间内精准获知丹参不同部位丹参酮IIA的含量，为丹参品质鉴定、药用价值和剂量研究工作提供可靠参考资料。

标签：高效液相；丹参；丹参酮IIA；色谱柱丹参是药用价值极高的草本植物，其根部内含丹参酮，常被入药调经疏络、活血祛瘀、消肿镇痛，其中丹参酮IIA是丹参脂溶性成分的代表物质，被广泛用于冠心病防治。

但是，丹参入药采购、运输、选品等各个环节均存在危险因素，如部分不法分子试图用伪劣品以假乱真牟取利益，制药工作人员专业水平不达标不能准确鉴别真伪、优劣，严重影响了中医药学的发展。

鉴于此，本院开展了丹参不同部位丹参酮IIA含量测定研究，旨在证实高效液相色谱法的应用价值并为丹参药用研究提供参考资料。

1 材料和设备1.1 实验材料本实验研究材料包括由中国药品生物制品检定所提供的丹参酮IIA标准品，江阴祥辉化工有限公司提供的色谱纯甲醇，广州致信中药饮片有限公司提供的干燥丹参根（6个月龄）、茎和叶子，实验用超纯水。

1.2 实验设备本实验研究设备包括高效液相色谱仪（杭州汉泽仪器有限公司，型号为LC-2010HT），紫外检测器（Genesys系列）、色谱柱（Hypersi10DSC18，长度为250mm，内径为4.6mm，填料颗粒直径为Sμm）、电子分析天平（瑞士梅特勒一托利多AB-S系列）、精密可程式干燥箱（上海博迅医疗生物仪器股份有限公司，BXH-130S）、电热恒温水槽（上海精密仪器仪表有限公司，CU系列）、实验室色谱超生仪（必能信超声上海有限公司，SB2200）。

高效液相色谱法测定白花丹参中总丹参酮和丹参酮Ⅱ A含量齐永秀;李香;万建建;曹明亮;高允生;夏作理【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2007(26)7【摘要】目的采用高效液相色谱(HPLC)法对白花丹参总丹参酮和丹参酮ⅡA含量进行分析.方法采用乙醇超声提取法提取白花丹参中脂溶性成分,HPLC法进行测定,色谱柱为Waters symmetry shieLd RP18(105 mm×3.9 mm,5μm);测定总丹参酮以甲醇-水(90∶10)为流动相,测定丹参酮ⅡA以乙腈-水(75∶25)为流动相,流速均为0.8 mL·min-1;检测波长270 nm.结果总丹参酮在0.075～0.750 μg·mL-1浓度内与峰面积线性关系良好,线性方程为A=5.88×106C-1.99×105,r=0.9994(n=5),丹参酮ⅡA在7.5～50.00μg·mL-1内线性关系良好,线性方程为A=7.8×104C-5.41×104,r=0.999 4(n=5).结论建立的HPLC法灵敏度高,方法准确,测定结果重现性好.白花丹参中含有丰富的总丹参酮和丹参酮ⅡA.【总页数】3页(P796-798)【作者】齐永秀;李香;万建建;曹明亮;高允生;夏作理【作者单位】泰山医学院药学院,泰安,271016;泰山医学院2003级药学专升本班,泰安,271016;泰山医学院2003级药学专升本班,泰安,271016;泰山医学院药学院,泰安,271016;泰山医学院药学院,泰安,271016;泰山医学院药学院,泰安,271016【正文语种】中文【中图分类】R283.4;R927.2【相关文献】1.一测多评法测定白花丹参中丹参酮ⅡA、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量 [J], 秦增贵;柳克浩;高长青;秦超2.一测多评法测定白花丹参中丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量 [J], 秦增贵;柳克浩;高长青;秦超;3.应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量 [J], 庞谢辉4.应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量 [J], 庞谢辉5.反相高效液相色谱法测定丹参中丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA的含量 [J], 金学军;姜英子;金成赞;金将杰;金红日;南极星因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

表1 Tab. 1 图1 复方丹参对照品 （ A ） 、 复方丹参片样品 （ B ） 和阴性样
品（ CⅠ； 4 － 丹参酮Ⅱ A
Fig. 1
Chromatograms of reference standard （ A ） ， sample of
。 一测多
评法适用于对照品难得或制备成本高或不稳定的情 ［2 ］ 况下同类多成分的同时测定 。 目前一测多评法 《中国药典》 2010 年版一部收录， 用于黄连的含 已被 量测定。 复方丹参片由丹参、 三七、 冰片 3 味中药组成， 其中丹参为主要成分。丹参的活性成分按化学结构 分为两大类： 脂溶性的丹参酮类和水溶性的丹参酚 酸类， 而丹参酮类化合物中， 二氢丹参酮 Ⅰ （ dihydrotanshinone Ⅰ） 、 隐丹参酮（ cryptotanshinone ） 、 丹参酮 Ⅰ（ tanshinone Ⅰ ） 和丹参酮 Ⅱ A （ tanshinone Ⅱ A ） 的
［1 ］
［311 ］ ， 含量较高 但对光和热不稳定。 《中国药典》 2010 年版一部复方丹参片项下丹
参酮类的含量测定方法仅以丹参酮 Ⅱ A 作为单一检 测指标， 不能全面反映复方丹参片的质量。 为提高 复方丹参片的质量标准， 以更好地控制复方丹参片 的质量， 同时基于丹参酮类化合物的不稳定性 ， 本实 验以相对较稳定且标准品易得的丹参酮 Ⅱ A 为内 标， 采用一测多评法建立复方丹参片中主要活性成 分二氢丹参酮 Ⅰ、 隐丹参酮、 丹参酮 Ⅰ、 丹参酮 Ⅱ A ， 的含量测定方法 并将一测多评法与常规外标法进 分析一测多评法用于复方丹参片中丹参酮 行比较， 类成分含量测定的可行性。 1 仪器与试药 Waters 2695 高效液相 色 谱 仪 （ 美 国 Waters 公 Dionex UltiMate 3000 高效液相色谱仪， Dionex 司） ，

HPLC法测定丹参保健茶中3种丹参酮含量刘德军;张源源;苟琼心【摘要】[目的]用HPLC测定丹参保健茶中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ A的含量.[方法]色谱条件为:色谱柱为Insertsil ODS-SP(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-水(V: V=62: 38),等度洗脱;检测波长为270 nm;流速为1.0 ml/min;进样量为15 μl,柱温30 ℃.[结果]3种丹参酮成分得到较好地分离,丹参保健茶中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ A的平均回收率分别为98.2%、98.7%、98.4% (RSD 值分别为 1.20%、1.96%和1.74%,n=3);样品中3种丹参酮含量分别为1.19、0.79和2.25 mg/g.[结论] 该方法稳定可靠、简便快速,可用于丹参保健茶的质量控制.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2010(038)034【总页数】2页(P19356-19357)【关键词】丹参保健茶;隐丹参酮;丹参酮Ⅰ;丹参酮ⅡA;HPLC法【作者】刘德军;张源源;苟琼心【作者单位】江苏联合职业技术学院连云港中医药分院,江苏连云港,222006;江苏联合职业技术学院连云港中医药分院,江苏连云港,222006;江苏联合职业技术学院连云港中医药分院,江苏连云港,222006【正文语种】中文【中图分类】S567.5+3丹参保健茶是 1味传统丹参饮方,由丹参和优质绿茶按3∶1炒制而成,是一种可有效预防和缓解冠心病、高血脂、心绞痛等病症的保健饮品。

其性平,具有活血化瘀、清心化痰等功效,其中丹参具有扩张冠状动脉、活血调经、镇静安神降低血糖的作用[1],而绿茶则具有清心明目、利尿解毒、解除疲劳和强心降压等功效[2]。

丹参酮具有明显扩张血管和溶解血栓的功能[3],其含量可作为丹参保健茶的质量控制指标。

丹参保健茶中的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA的含量较高,用 HPLC法测定丹参茶类饮品中丹参酮成分含量尚未见报道。

高效液相色谱测定丹参酮ⅡA含量【原理】利用各组分在两相中的分配系数的不同而获得分离。

【仪器与试剂】1.仪器：液相色谱仪；微量注射器；C18反相色谱柱；棕色瓶（25ml，50ml）；吸量管（2ml）；超神提取器。

2.试剂：甲醇（色谱纯）；蒸馏水。

3.试药：丹参酮ⅡA对照品，单身药材。

【实验内容】色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（73：27）为流动相；检测波长为270 nm，理论塔板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000.对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含16.25ug的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称定，置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇100 ml，密塞，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，置棕色瓶中，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

【实验数据及处理】运用外标法定量分析，分别精密量取一定量的对照品和试样，分别进样相同体积的对照品溶液和试样溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测的峰面积，用下式可以计算出供试品的浓度。

C供/C对=A供/A对 => C供=（A供/A对）*C对20片总重量：0.6025gC对=16.25μg/mlA供=2999.47（mv/sec）A对=1088.09（mv/sec）C供=（A供/A对）*C对=（2999.47/1088.09）*16.25=44.80μg/mlW（%）=（M丹参酮ⅡA/M药材）×100%=（44.80×10-6g/0.6025g）×100%=0.744%20片复方丹参片中含丹参酮ⅡA量：4.48mg。

每片含丹参酮ⅡA量：0.224mg。

加样回收试验： 精密吸取已测定含量的样品（ 批号为 20110925，隐丹参酮含量为 1． 53 g / L，丹参酮ⅡA 含量为 1． 38 g / L） 溶液 5 mL，置 50 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，各精密量取 1． 0，2． 0，3． 0 mL，置 10 mL 容量瓶中，分别精密加入 2． 2 项下对 照品溶液各 3． 0，2． 0，1． 0 mL，每个质量浓度各 3 份，加甲醇稀释 至刻度，作为待测溶液，依法注入液相色谱仪。结果见表 1。
加入量( μg) 测得量( μg) 平均回收率( % )
100
94． 19
94． 2
100
2 981． 0
96． 5
100
106． 1
89． 7
100
150． 2
93． 7
100
90． 38
88． 5
100
107． 6
99． 7
100
103． 9

94． 04
45
·药物鉴定· Drug Identification
China Pharmaceuticals
2013 年 8 月 20 日 第 22 卷第 16 期 Vol． 22，No． 16，August 20，2013
1 仪器与试药 美国安捷伦 1100 型高效液相色谱仪； 隐丹参酮对照品（ 批号
为 852 － 200702） ，丹参酮ⅡA 对照品（ 批号为 110776 － 200417） ， 由中国药品生物制品检定所提供，甲醇为色谱纯，其他试剂均为 分析纯； 丹参滴注液由药剂科提供，阴性样品溶液由制剂室提供。 2 方法与结果 2．1 色谱条件
94． 0
0． 20
0． 213
106． 5

i. d. × 250 mm） ； 流动相： 甲醇 － 0. 1% 磷酸水溶液混 合物（ V （ 甲 醇） ∶ V （ 0. 1% 磷 酸） = 85 ∶ 15 ） 流 速： 1. 0 mL / min； 柱 温： 40 ℃ ； 检 测 波 长： 254 nm； 进 样 量： 20 μL． 色谱图见图 1．
（ Key Laboratory of Medicinal Chemistry for Nature Ｒesource，Ministry of Education， Yunnan University，Kunming 650091，China）
Abstract： Development of a method for the determination of cryptotanshinone，tanshinoneⅠand tanshinoneⅡA in Salvia miltiorrhiza Bge and its preparations by reversed phase high performance liquid chromatography （ ＲP － HPLC） . The separation and determination was carried out in the Waters Spherisorb ODS2 column（ 5 μ m，4. 6 mm i. d. × 250 mm） using methanol － 0. 1% phosphoric acid （ 85∶ 15，V / V） as mobile phase with the flow rate of 1. 0 mL / min and detective wavelength of 254 m. Cryptotanshinone，tanshinoneⅠand tanshinoneⅡA in Salvia miltiorrhiza Bge and its preparations such as fu － fang － dan － shen － pian and fu － fang － dan － shen － di － wan could be separated and determined availably within 10 minutes． The average recoveries were in the range of 90% to 110% . The method is simple，rapid and of high accuracy Key words： Salvia miltiorrhiza Bge； preparations； reversed phase high performance liquid chromatography

高效液相色谱法测定脑心通胶囊中丹参酮的含量摘要：目的采用高效液相色谱法测定脑心通胶囊中丹参酮含量的方法，评价脑心通胶囊的质量。

方法步长脑心通胶囊（3批次），全自动高效液相色谱检测，配置隐丹参、丹参酮I、丹参酮Ⅱ对照品以及供试品溶液，绘制线性回归曲线，进行方法学评价。

结果丹参酮（A=6285.4c＋1.301）、丹参酮Ⅰ（A=4034c-3.162）、丹参酮ⅡA（A=5018c±6.145）的高效液相色谱法检测线性方程r均＞0.995，呈现高度相关性，线性良好。

丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的高效液相色谱法重现性试验、精密度试验、回收试验相对保留时间RSD与峰面积RSD均＜3%，符合要求。

供试品种，三个批次的药品中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱa含量在0.412～0.445mg/粒、0.305～0.325mg/粒、0.351～0.561mg/粒，变异指数符合要求，批次内的质量标准达到要求，但不同批次内的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱa含量存在显著差异（P＜0.05）。

结论高效液相色谱法测定脑心通胶囊中丹参酮的效能较好。

脑心通胶囊中的丹参酮含量批间质控水平有待提高。

关键词：脑心通；丹参酮；高效液相色谱法血栓性疾病是人类死亡的常见病因，脑血栓、肺血栓、急性心肌梗死等。

脑心通胶囊是治疗血栓性、缺血性疾病的常用药物，以补阳还五汤为主方，具有益气养血、活血化瘀、扶正祛邪功效，meta分析显示相较于其他疗法，在治疗脑血栓、缺血性脑血管疾病、冠心病心绞痛方面有明显的优势可增进疗效[1-3]。

丹参酮是脑心通胶囊中主要有效成分，现已有丹参酮为主要原料的注射液应用于血栓性疾病的治疗，疗效往往也较好。

脑心通胶囊的疗效很大程度依赖于丹参酮的含量，本次研究尝试探讨采用高效液相色谱法测定脑心通胶囊中丹参酮含量的方法，评价脑心通胶囊的质量，现总结研究结果报道如下。

1材料与方法1.1 实验药品步长脑心通胶囊（3批次）。

1.2 仪器与试剂全自动高效液相色谱仪（二极管阵列检测器），Agilent工作站。

度洗脱 ， 洗脱程序见表 １ ， 流速 １ ． ０ ｍｌ Ｍｍ ｉ ｎ ； 柱温 ３ Ｏ℃ ； 检测
波长 ２ ８ ０ ｎ ｍ， 进样量 ｌ ０ Ｌ 。
表 １ 梯度洗脱程序
ⅡＡ含量为两大类成分的代表物 ， 分别测定 ， 所采用 的色谱 系 统及样 品的前处理方法等各不相同 ， 操作繁琐 ， 不能全面反映
２ 方 法 与 Βιβλιοθήκη 果 成分为丹酚酸 Ｂ 、 丹参素、 原儿茶醛 ， 脂溶性 的丹参酮类 的主 要成分为迷迭香酸、 二氢丹参酮 、 隐丹参酮 、 丹参酮 Ｉ、 丹参酮 ⅡＡ。现代药理学研究表明 ， 丹参中酚酸类 和丹参酮类成分均 具有显著 的生物活性 ， 因此 可以通过 测定这些 化合物 的 含量来全面评价丹参的质量 。《 中华人 民共 和国药典》 （ ２ ０ １ ０
版） 中对丹参 含量 的控制 方法 ， 只以丹酚酸 Ｂ含量和丹参 酮
２ ． １ 色谱条件
色谱柱 ：Ｓ ｈ ｉ ｍ ｐ ａ ｋ Ｃ ｌ ８ （４ ． ６ ｎ ｌ ｌ ｎ ×１ ５ ０ ｍ ｍ， ５ ｌ ａ ， ｍ） ； 流动
相： Ａ为 ０ ． ２ ％ 甲酸的乙腈溶液 ， Ｂ为 ０ ． ２ ％ 甲酸的水溶液 ， 梯
药材 中多个活性成分的含量 以及成分间的相关性 。本研究采
用高效液相色谱 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） 法， 建 立 以同一色谱 条件 和样 品前
处理方法 ， 同 时测定 丹参 中多 个活 性成 分 （ 丹 参素 、 原 儿 茶
醛、 丹酚酸 Ｂ 、 隐丹参 酮、 丹参酮 Ｉ和丹参酮 ⅡＡ等 ） 的分析 方 法， 操作简便 易行 ， 并对 ６个不 同产地丹参药材 中活性成分 进
脂溶性丹参 酮类 和水溶性丹 酚酸类 ， 水溶性丹 酚酸类的主要

按上述色谱条件测定，记录峰面积，以 进 样 量 （ X， μg） 为横坐标，以峰面积（ Y） 为纵坐标，绘制标准曲 线。见表 1，各标准曲线在线性范围内线性良好。
表 1 丹参药材中 4 种有效成分的标准曲线 Table 1 Standard curve of four kinds of active ingredient in Salvia miltiorrhiza
2. 1. 2 对照品溶液的制备 精密称取 4. 03 mg 丹 参酮ⅡA、2. 63 mg 丹参酮 I、2. 86 mg 二氢丹参酮Ⅰ、 2. 56 mg 隐丹参酮对照品分别置于 10 mL 棕色量瓶 中，加甲醇溶解定容，即得对照品储备液。分别精密 吸取 1 mL 丹参酮ⅡA、1 mL 丹参酮Ⅰ、1 mL 二氢丹 参酮Ⅰ、1 mL 隐丹参酮对照品储备液同置于 25 mL 棕色量瓶中，加 甲 醇 溶 解 定 容，即 得 混 合 对 照 品 溶 液，将上述混标保存于 4 ℃ 冰箱中，备用。 2. 1. 3 供试品溶液的制备 取丹参药材，粉碎，过 3 号筛，称取丹参粉末约 0. 3 g，精密称定，置具塞锥 形瓶中，精密加甲醇 50 mL，密塞，称重，超声处理 40 min，放冷，再称重，用甲醇补足失重，摇匀，滤过，取 续滤液，即得。 2. 1. 4 线性范围 精密吸取上述混合对照品溶液 0. 5，1，2，5，10，15，20，25 μL，注入液相色谱仪，
第 37 卷第 6 期 2012 年 3 月
Vol. 37，Issue 6 March，2012
一测多评法测定丹参中丹参酮ⅡA 、隐丹参酮、 丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ的含量
李倩1，2 ，刘伟2 ，罗祖良1，3 ，杨美华1*
（ 1. 北京协和医学院 药用植物研究所 中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室，北京 100193； 2. 河南中医学院，河南 郑州 450008； 3. 广西中医学院，广西 南宁 530001）

丹参中主要丹参酮的超高效液相色谱法测定摘要：建立了用超高效液相色谱法（uplc）同时测定中药材丹参中隐丹参酮、丹参酮ⅰ、丹参酮ⅱa和二氢丹参酮的超高效液相色谱法。

中药材样品中的丹参酮用高速匀浆法提取，采用waters acquity uplc beh c18（1.7um，φ2.1mm×50mm，超高效液相色谱柱为固定相，40%的乙腈（内含0.1%的磷酸）为流动相分离，检测波长为254nm，流速为0.6ml/min。

在上述色谱条件下隐丹参酮、丹参酮ⅰ、丹参酮ⅱa和二氢丹参酮在5.0min内实现基线分离，加标回收率在91.5%～98.6%之间，日内相对标准偏差为2.1%，日间相对标准偏差为2.8%，结果满意。

关键词：丹参酮；丹参；超高效液相色谱法中图分类号: r917 文献标识码：b 文章编号：1004-7484(2012)06-0123-03丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根，是一种常用的临床中药。

脂溶性丹参酮类化合物是丹参的主要有效成分，具有增加血流量和扩张冠状动脉的作用。

对心肌梗塞、心肌损害、心绞痛和冠心病具有一定疗效，因此丹参药材中丹参酮含量的测定对药材质量评价具有一定意义［1］，目前报道的丹参酮类化合物的含量测定方法主要有毛细管气相色谱法[2]、薄层扫描色谱法[3]和高效液相色变法等[4-7]，其中最常用的是高效液相色谱法，常规高效液相色谱法分离时间长、流动相消耗大。

超高效液相色谱分析比常规高效液相色谱分析速度更快、灵敏度更高，它使用1.7um颗粒度的色谱柱填料，能够获得更高的柱效，还能节省分析时间和增加峰容量[8-13]。

文献[10]报道了超高效液相色谱测定药材中的丹酚酸b和丹参酮ⅱa含量，样品处理方法采用超声提取法，但超声提取法噪音污染大，而且色谱分离也需要15min。

本文研究了用匀浆法提取，超高效液相色谱法测定中药材丹参中的隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮ⅰ和丹参酮ⅱa的方法，样品前处理速度显著加快，而且4种丹参酮在5min内可达到完全分离，大大缩短了分离时间。

高效液相色谱法测定丹参中三种丹参酮含量曾敬其;李卓玥;赵燕妮;陈向明【摘要】建立高效液相色谱测定中药丹参中丹参酮Ⅰ,隐丹参酮,丹参酮ⅡA含量的方法.方法采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈和0.2％磷酸水溶液为流动相,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温30 ℃.丹参酮Ⅰ,隐丹参酮,丹参酮ⅡA三种化合物在1.56×10-6～5×10-5 g/mL(r＞0.999)浓度范围内线性关系良好.该方法快速、灵敏、便于操作且可靠性高,适用于中药样品中丹参酮类化合物的测定.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)008【总页数】3页(P113-114,145)【关键词】高效液相色谱法;丹参;丹参酮Ⅰ;隐丹参酮;丹参酮ⅡA【作者】曾敬其;李卓玥;赵燕妮;陈向明【作者单位】滨州医学院药学院,山东烟台264003;滨州医学院药学院,山东烟台264003;滨州医学院药学院,山东烟台264003;滨州医学院药学院,山东烟台264003【正文语种】中文【中图分类】O657.7丹参为临床常用传统中药，为唇形科植物鼠尾草丹参的干燥根及根茎，具有养血安神，调经止痛，消肿止血等功效[1]。

现代药理学研究表明，丹参中主要活性成分为脂溶性的二萜醌类化合物[2]，主要有丹参酮I，丹参酮IIA，隐丹参酮等[3]。

其中丹参酮IIA的含量最高，是丹参发挥其药理活性的基础。

丹参酮类化合物的测定方法主要有分光光度法[4]和色谱法等。

高效液相色谱法具有分析速度快，检测灵敏度高，操作自动化等优点[5-7]，尤其适用于成分复杂的中药的研究和分析。

本研究采用高效液相色谱法测定了丹参饮片中丹参酮I，隐丹参酮，丹参酮IIA三种化合物的含量，为丹参药材的质量控制提供科学的研究方法。

1.1 仪器与试剂Agilent1260型高效液相色谱(配四元泵、DAD检测器、自动进样器、柱温箱、色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18)，美国Agilent；TB-215D电子天平，北京丹佛仪器有限公司。