牛促肾上腺皮质激素(ACTH)说明书
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促肾上腺皮质激素释放激素调节方法调节身体方法比较多,在对身体进行调节的时候,需要选择适当方法,这样对身体才没有损害,促肾上腺皮质激素释放激素调节方法都有什么呢,在对促肾上腺皮质激素释放激素调节上,方法也是比较多,下面就详细介绍下,使得对这类问题有一些了解,做的时候也都知道该如何做。
促肾上腺皮质激素释放激素调节方法:
CRH与腺垂体促肾上腺皮质激素细胞的膜上CRH受体结合,通过增加细胞内cAMP与Ca2+促进ACTH的释放。
为神经垂体及下丘脑中含有的能刺激促肾上腺皮质激素释
放的物质。
在垂体门脉血液中,末梢血中发现也有此类因子。
其合成部位尚不太清楚。
由于其不太稳定,影响了纯化过程。
主要作用于促垂体的促肾上腺皮质细胞受体,通过cAMP系统促进促肾上腺皮质激素的合成与释放。
其活性以下丘脑正中隆起最高。
电刺激杏仁核区下丘脑结节部、乳头部,可引起促肾上腺皮质激
素释放。
各种传入性影响主要以改变下丘脑CRH的合成和释放,来改变腺垂体-肾上腺皮质的功能。
组成下丘脑-腺垂体-肾上腺
皮质轴(HPAA)。
电刺激杏仁核,可引起CRH释放,而刺激海马则抑制CRH释放。
调节CRH的兴奋性递质主要有乙酰胆碱和5-羟
色胺,抑制性递质为儿茶酚胺和γ-氨基丁酸。
在对促肾上腺皮质激素释放激素调节方法认识后,进行促肾上腺皮质激素释放激素调节的时候,都是可以按照以上方法进行,不过要注意的是,在进行促肾上腺皮质激素释放激素调节的时候,饮食上也是要合理安排,这样对身体才不会有影响。
促肾上腺皮质激素(ACTH)标准操作规程一、目的:规范促肾上腺皮质激素测定的标准操作程序,确保促肾上腺皮质激素测定的结果准确有效。
二、适用范围:在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的促肾上腺皮质激素。
三、临床意义ACTH是脊椎动物脑垂体分泌的一种多肽类激素,含39个氨基酸,分子量为4500。
它能促进肾上腺皮质的组织增生以及皮质激素的生成和分泌。
它的生成和分泌受下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)的直接调控。
分泌过盛的皮质激素反过来也能影响垂体和下丘脑,减弱它们的活动[1]。
ACTH的分泌呈现日节律波动,入睡后ACTH分泌逐渐减少,午夜最低,随后又逐渐增多,至觉醒起床前进入分泌高峰,白天维持在较低水平,入睡时再减少。
由于ACTH分泌的日节律波动,糖皮质激素的分泌也出现相应的波动[4]。
ACTH 增高可见于原发性肾上腺皮质功能减退症、异位ACTH综合征、库欣病、Nelson综合征、先天性肾上腺皮质增生症、遗传性肾上腺皮质对ACTH不反应综合征、周期性ACTH、ADH分泌增多综合征、其他(如手术、创伤、休克、低血搪、使用SU4885等均可使ACTH分泌增多)[3]。
ACTH 降低可见于垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质腺瘤或癌、单纯性ACTH缺乏综合征、医源性ACTH减少等[2]。
四、方法原理本试剂盒采用夹心法原理进行检测。
用ACTH抗体包被磁微粒,辣根过氧化物酶标记ACTH抗体制备酶结合物。
通过免疫反应形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,该复合物催化发光底物发出光子,发光强度与ACTH的含量成正比。
五、标本的采集与处理5.1.应用正确医用技术采集患者上午7:00~10:00 EDTA血浆样本用于测定。
5.2.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果,应离心除去。
5.3.严重溶血、脂血或浑浊的样本不能用于测定。
5.4.样本收集后如果不能在1小时内检测,需将样本放置在2~8℃的冰箱中;若需24小时以上保存或运输,则应冻存于-20℃以下,避免反复冻融。
促肾上腺皮质激素(ACTH)测定试剂盒(磁微粒化学发光法)2.1外观2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;2.1.2 磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液,无明显凝集;2.1.3液体组分应无沉淀或絮状物;2.1.4包装标签应清晰,易识别。
2.2准确度回收率应在85.0%-115.0%范围内。
2.3空白限应不大于1.00 pg/mL。
2.4线性在[1.50,2000.00]pg/mL的测量范围内,试剂盒的相关系数r应≥0.9900。
2.5重复性用(50.00±10.00)pg/mL和(500.00±100.00)pg/mL的样本各重复检测10次,变异系数(CV)应不大于10.00%。
2.6批间差用三个不同批号的试剂盒分别检测(50.00±10.00)pg/mL和(500.00±100.00)pg/mL的样本,其批间变异系数应≤15%。
2.7质控品的赋值有效性质控品的测量值应在质控范围内。
2.8 校准品和质控品的批内瓶间差2.8.1 校准品的批内瓶间差校准品B~校准品F的批内瓶间差CV≤10.0%。
2.8.2 质控品的批内瓶间差质控品的批内瓶间差CV≤10.0%。
2.9 稳定性2.9.1 效期稳定性试剂盒2℃~8℃保存有效期为12个月,在有效期满后检测试剂盒的准确度、空白限、线性、重复性、质控品的赋值有效性,应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.7的要求。
2.9.2 复溶稳定性2.9.2.1 校准品和质控品开瓶复溶后,室温保存,可稳定4小时,试剂盒用新开瓶复溶的校准品和质控品定标、质控,检测室温放置5小时后的校准品和质控品,校准品B~校准品F和质控品的相对偏差应在±10%范围内。
用复溶后室温放置5小时的校准品给试剂盒定标后检测试剂准确度和线性,结果应符合2.2、2.4要求。
用复溶后室温放置5小时的质控品对试剂盒进行质控后检测试剂批内精密度和质控品的赋值有效性,结果应符合2.5、2.7要求。
2性能指标
2.1外观
试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;包装标签应清晰,准确、牢固;Ra 组分应为棕色含固体微粒的液体,无板结、无絮状物。
Rb 组分应为清澈透明的液体,无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2装量
应不少于试剂瓶的标示装量值。
2.3准确度
对具有溯源性的两个浓度水平的正确度控制品进行检测,检测结果与标定浓度的相对偏差在±10% 范围内。
2.4最低检测限
应不大于1 pg/mL。
2.5线性
试剂盒在1 pg/mL~2000 pg/mL 区间内,其相关系数(r)应不低于0.9900。
2.6重复性
变异系数CV 应≤ 6%。
2.7批间差
变异系数CV 应≤ 10%。
静滴ACTH具体操作与注意事项一、应用ACTH基础原理自20世纪五六十年代以来,促肾上腺皮质激素(ACTH)在临床上被广泛应用于儿童肾脏病的治疗,ACTH可以降低肾小球对白蛋白的通透性。
研究证实在治疗儿童肾病综合征时,不仅具有利尿、缓解蛋白尿以及稳定患儿肾功能的作用,还能降低血清胆固醇和提高血清蛋白水平而且对患儿的血电解质几乎没有任何影响。
长期的ACTH治疗可持久缓解蛋白尿和稳定肾功能,且副作用较少;并且ACTH累积剂量越大,尿蛋白改善越明显。
糖皮质激素(GC)由肾上腺皮质束状带合成与分泌;GC 的生理功能极为重要,对人体三大物质代谢及水盐代谢具有调控作用,如果这些调控作用受到干扰,有可能导致一系列症状,如水钠潴留、蛋白质和脂肪分解、血糖升高、免疫障碍、第二性征异常等。
外源性GC不论剂量高低,长期使用GC会导致肾上腺萎缩(结构变化)和GC 分泌不足(功能障碍)。
停药后会出现体内分泌器官的整体功能抑制,导致自身分泌减弱,无法满足人体生理需要。
撤除外源性GC 后,分泌器官的结构与功能也可在一定程度上逐渐恢复,但长期大剂量激素的应用可致抗利尿激素和促肾上腺皮质激素(ACTH)水平下降,肾上腺皮质萎缩,分泌功能减退,是小儿NS复发的重要因素之一。
二、ACTH分泌的规律与应用(一)ACTH或皮质醇数值的正常值与规律ACTH是一种含39个氨基酸的多肽,可刺激肾上腺皮质合成和分泌氢化可的松、皮质酮等,具有抗炎、抗过敏、抗休克、免疫抑制等多方面作用,对血液和中枢神经系统也有一定作用。
正常人体ACTH峰值在6~8AM,下午4:00左右一般为上午数值的一半,夜间12:00最低,所以临床上抽血检查与分析结果要注意时间段。
(二)肾病患儿ACTH使用的适应证(1)以下情况时应使用ACTH:减药时复发或频复发;长期使用糖皮质激素;肾上腺皮质功能抑制;糖皮质激素用量不宜减少。
(2)ACTH在以下肾病中适用:激素敏感型肾病综合征、频复发及激素依赖型肾病综合征、Ig A肾病。
促肾上腺皮质激素(ACTH)
一、概述
1、促肾上腺皮质激素(ACTH)对维持生命有重大意义,不仅能调节机体水、盐代谢和维持电解质平衡,还与糖、脂肪、蛋白质代谢和生长发育等有关。
2、ACTH的分泌受促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的调节,并受血清皮质醇浓度的反馈调节。
另外,ACTH分泌具有昼夜节律性变化,上午6~8时为分泌高峰,午夜22~24时为分泌低谷。
二、适应症
1、鉴别诊断皮质醇增多症。
2、鉴别诊断肾上腺皮质功能减退。
3、疑有异位ACTH分泌。
三、临床意义
1、促肾上腺皮质激素(ACTH)增高:常见于原发性肾上腺皮质功能减退症、先天性肾上腺皮质增生、异源性ACTH综合征、异源性CRH肿瘤等。
ACTH还可作为异源性ACTH综合征的疗效观察、预后判断及转归的指标。
2、促肾上腺皮质激素(ACTH)减低:常见于腺垂体功能减退症、原发性肾上腺皮质功能亢进症、医源性皮质醇增多症等。
ACTH以及结合其他指标可用于鉴别肾上腺皮质功能亢进症和减退症。
总的来说,促肾上腺皮质激素对于鉴别诊断肾上腺功能减退和分泌亢进很有价值。
在原发性肾上腺功能不全中,典型表现是ACTH水平升高,而低水平的ACTH通常见于垂体功能障碍继发的肾上腺功能不全。
ACTH检测还能帮助鉴别cushing 综合征中皮质醇分泌过多的原因,当皮质醇分泌过多是由肾上腺皮质病变或增生引起时,ACTH水平特征性地降低,而如果是由垂体异位生成ACTH或ACTH分泌过多引起时,ACTH水平是升高的。
ACTH(1-24) human (人促肾上腺皮质激素, 1-24)保存条件:-20ºC 或更低温度保存,至少一年有效。
由于多肽的每次冻融均会引起部分失活,所以首次配制成相应浓度的储存液后(请根据产品简介中Reconstitution 一栏的信息配制储存液),须分装后-20ºC 或更低温度冻存,以避免反复冻融。
注意事项:本产品为冻干粉,由于微量的多肽在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或不可见的多肽层,所以在打开管盖前,我们建议在离心机中约8,000-12,000g 离心10-30秒,使附着在管盖或管壁上的多肽聚集于管底。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:1. 收到产品后请立即按照说明书推荐的条件保存。
除非特别注明,碧云天相关产品均为冻干粉,由于微量的多肽在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或不可见的多肽层,所以在打开管盖前,我们建议在离心机中约8,000-12,000g 离心10-30秒,使附着在管盖或管壁上的多肽聚集于管底。
Beyotime Biotechnology 400-1683301800-8283301 e-mail *********************************** 2.请根据实验目的并按照产品简介中Reconstitution一栏中的信息配制储存液。
大多数多肽冻干粉是非常容易溶解的,一般用移液枪的枪头轻吹几下或者轻轻摇晃瓶子,即可使多肽完全溶解。
请勿用vortex剧烈振荡,以免多肽变性而失活。
3.具体的最佳工作浓度请自行参考相关文献,或者根据实验目的,以及特定细胞和动物,通过实验进行摸索和优化。
Version 2022.12.30 2 / 2 P9019ACTH(1-24) human (人促肾上腺皮质激素, 1-24) 400-1683301/800-8283301 碧云天/Beyotime。
人促肾上腺皮质激素(ACTH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中促肾上腺皮质激素(ACTH)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中ACTH水平。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入ACTH抗原、生物素化的抗人ACTH抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的ACTH呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为50ng/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释25ng/ml,12.5ng/ml,6.25ng/ml,3.12ng/ml,1.56ng/ml,0.78ng/ml,0.39ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制25ng/ml标准品:取0.5ml50ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
2.样品稀释液:1×20ml/瓶。
3.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
4.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
5.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
6.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
地塞米松抑制试验操作规范肾上腺皮质功能检查海南医学院第一附属医院(2017年版)一、促肾上腺皮质激素(ACTH)和总皮质醇水平及昼夜节律测定【适应证】评价下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能。
【方法】1. 促肾上腺皮质激素(ACTH)8:00用EDTA抗凝管取静脉血2ml,标本采集后应立即放入冰浴中低温保存,即刻送检。
2. 血皮质醇测定,于8:00、16:00及24:00点分别用普通生化管取静脉血三次送检,不需抗凝送检。
如进行午夜血清皮质醇测定,应尽量保证采血时处于睡眠状态(可静脉内预置导管)。
3. 24 h尿游离皮质醇(24 h urine free cortisol,24 h UFC)测定应至少测定2次。
:第1天早上排尿弃去,从此时开始计时留尿,将全天24 h 的每一次尿量均收集在同一个容器内,直至第2天早上的同一时间为止,记录测定的24 h总尿量,混匀后留取约5 ~10 ml 尿液送检。
【结果评价】1. 血皮质醇、ACTH正常参考值2. 一般认为血总皮质醇8:00 84 nmol/L(3.0 μg/dl)可确诊肾上腺皮质功能减退症;血总皮质醇8:00 >420 nmol/L(150 μg/L)可除外诊断。
Addison病患者即使血总皮质醇在正常范围,血浆ACTH也常≥10 pg/ml(2.2 pmol/L)。
睡眠状态下的午夜血皮质醇<50 nmol/L(1.8 μg/dl)可排除库欣综合征,清醒状态下的午夜血皮质醇>207 nmol/L(7.5 μg/dl)高度怀疑库欣综合征。
3. 库欣综合征(Cushing Syndrome)的判断标准:①节律消失(午夜值明显升高);②24h尿游离皮质醇明显升高。
4. ACTH的意义:测定ACTH可用于库欣综合征患者的病因诊断,即鉴别ACTH依赖性和ACTH非依赖性库欣综合征。
如8:00~9:00的血ACTH<10 pg/ml(2.2 pmol/L)则提示为ACTH非依赖性库欣综合征;但某些肾上腺性库欣综合征患者的皮质醇水平升高不明显,不能抑制ACTH至上述水平;如ACTH>20 pg/ml(4.4 pmol/L)则提示为ACTH依赖性库欣综合征。
050-ACTH检验标准操作规程1.⽬的:⽤于体外定量测定⼈EDTA-⾎浆样本中促肾上腺⽪质激素的含量2.适⽤机型:LIAISON分析仪。
3.测定原理:采⽤免疫夹⼼化学发光检测⽅法。
在磁微粒(固相)上包被有特异性的⿏单克隆抗体(N-端),另⼀种单克隆抗体(针对ACTH的C-端碎⽚)与异鲁⽶诺衍⽣物结合(异鲁⽶诺抗体结合物)在孵育过程中,校准液、样本或质控品中的ACTH与固相上的单克隆抗体结合,然后异鲁⽶诺抗体结合物与已结合到固相的ACTH反应。
孵育完毕后,未结合的物质会被清洗移除,最后,加⼊启动试剂,引发瞬时化学发光反应,产⽣光信号。
通过光电倍增管测出的相对光单位(RLU)指⽰异鲁⽶诺-抗体结合物的数量,从⽽得出校准品、样本或质控品中的ACTH的浓度。
4.测定步骤:4.1仪器测试准备:按LIAISON操作⼿册打开系统,进⾏每⽇使⽤前的维护。
包括清洗、光路检测等。
4.2样本的采集、原料及保存:样本中的ACTH 分⼦降解速度很快,因此在处理样本时必须严格遵循以下要求。
必须使⽤冷冻储存的⼈EDTA⾎浆样本。
采⽤静脉穿刺⽅法采集⾎样并保存在含EDTA抗凝剂的硅化玻璃试管、真空采⾎管(紫帽)或类似的容器⾥。
避免溶⾎。
样本采集后应⽴即将样本管置于冰浴中低温保存。
样本采集后120分钟内,使⽤冷冻离⼼机离⼼,并⽴即分装上清液。
分装的上清液应保存在塑料或硅化玻璃试管⾥并于-20 ° C 或以下低温冷冻。
每份分装的上清液的最⼩体积为300µL。
检测前,谨慎解冻混匀样本,检查是否有⽓泡并清除⽓泡。
解冻的样本应置于2-8℃并在6⼩时内⽤完。
⾼度溶⾎、⾼度脂⾎、含有颗粒物质或明显被微⽣物污染的样本不能⽤于检测。
禁⽌使⽤凝⾎样本。
避免反复冻融。
任何没有⽤完的分装液都应该丢弃。
检测样本⼀次需要的最⼩量为 300 µL (150 µL 样本+ 150 µL 保护体积)4.3试剂的准备:在揭开密封纸之前,先轻轻地⽔平摇晃试剂整盒(为了防⽌泡沫形成!)。
肾上腺皮质类固醇激素肾上腺皮质类固醇激素简称肾上腺皮质激素约有40余种(其中30多种为衍生物),它们多由胆固醇演变而来,其基本化学结构与胆固醇相似,故称为皮质类固醇或甾体。
在正常情况下,垂体前叶分泌促皮质素(ACTH)刺激肾上腺皮质,分泌皮质激素。
一、肾上腺素皮质的解剖和功能肾上腺位于肾脏上端,左右各一,其重量在正常人为11—18g,可分为内外两层,内层称为髓质,分泌肾上腺素和去甲肾上腺素;外层称为皮质,占肾上腺重量的90%,此由外向内分为三层——即球状带、束状带、网状带,所分泌的激素有:1、盐皮质激素:由皮质的球状带合成与分泌,其代表为醛固酮和去氧皮质酮,主要影响水、盐的代谢。
临床上仅用于治疗阿迪森病和低钠血症。
2、氮皮质激素:主要由皮质的网状带合成与分泌,其代表为睾酮和雄二醇,作用于性器官和影响蛋白质代谢,通常所指的皮质激素并不包括这类激素。
3、糖皮质激素:由皮质的束状带合成与分泌,其代表为氢化可的松(皮质醇),主要影响糖和蛋白质的代谢,对水盐代谢影响较小,在临床上有广泛的应用范围。
表1、正常人肾上腺皮质所分泌的主要激素带种类主要类固醇一日分泌量分泌调节球状带盐皮质激素醛固酮 100—150mg 血管紧张素Ⅱ11—去氧皮质酮微量束状带糖皮质激素氢化可的松 15—30mg ACTH皮质酮 2—3mg网状带雄激素类去氧异雄酮男 17mg ACTH女 12mg雄烯二酮男 1.4mg女 3.4mg11—羟雄烯二酮 0—10mg雌激素类雌二醇微量雌酮微量黄体素黄体酮 0.4—0.8mg二、糖皮质激素的主要生理作用1、对糖代谢的影响:可促进糖原异生,抑制组织对糖的分解和利用,使肝糖原增多,血糖升高,糖耐量降低,有加重或诱发糖尿病的倾向。
2、对蛋白质代谢的影响:能促进蛋白质分解和抑制蛋白质的合成,造成负氮平衡,并抑制肌肉细胞对葡萄糖和氨基酸的摄取和利用,使肌肉萎缩。
3、对脂肪代谢的影响:可加速脂肪的分解过程,使脂肪重新分布(造成躯干和面部脂肪堆积,而四肢的脂肪减少),出现向心性肥胖。