试剂配制方法详解
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常用试剂配制方法试剂是科学实验和研究中不可或缺的工具,常用的试剂包括溶液、稀释液、缓冲液、媒体液等。
在实验室中,通常需要根据具体的实验要求来配制各种试剂,合理的试剂配制方法能够确保试剂的质量和稳定性,保证实验结果的准确性和可重复性。
接下来将介绍一些常用试剂的配制方法。
1. 溶液的配制方法溶液是实验室中最常用的试剂之一,常见的溶液包括盐酸溶液、硫酸溶液、碳酸溶液、氢氧化钠溶液等。
溶液的配制主要是根据溶质的重量或体积浓度和所需的溶液体积来计算所需的溶质量或体积,并将溶质溶解在适量的水中。
以盐酸为例,盐酸的浓度通常以摩尔浓度(M)或质量浓度(%)来表示,假设需要制备500ml 1M的盐酸溶液,则按照下面的步骤进行:- 根据盐酸的摩尔质量和摩尔浓度计算出所需的盐酸质量。
- 取适量的去离子水,加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸质量,并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为500ml。
2. 稀释液的配制方法稀释液通常用于稀释浓度较高的溶液,以得到所需的浓度。
稀释液的浓度计算方法非常简单,只需要使用C1V1=C2V2的公式即可,其中C1为原液的浓度,V1为原液的体积,C2为稀释液的浓度,V2为稀释液的体积。
以盐酸溶液为例,如果需要从浓度为6M的盐酸溶液稀释出100ml 1M的盐酸溶液,则按照下面的步骤进行:- 根据C1V1=C2V2的公式,计算出需要的盐酸的体积。
- 取适量的去离子水,加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸体积,并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为100ml。
3. 缓冲液的配制方法缓冲液是用来维持溶液的pH稳定性的溶液,常用的缓冲液包括Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液等。
缓冲液的配制需要根据所需的pH值来选择相应的缓冲剂和其酸性或碱性分量,并按照一定的比例混合制备。
以Tris缓冲液为例,Tris缓冲液的pH值通常在7-9之间,如果需要制备1L pH 7.4的Tris缓冲液,则按照下面的步骤进行:- 根据Tris缓冲液的pKa值和所需的pH值计算出所需要的Tris和酸性成分的摩尔比。
高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂试剂甲:将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中,加0.5亳升硫酸,混合均匀。
试剂乙:将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。
(贮于带橡皮塞的瓶中)※临用时试剂甲与试剂乙等量混合※斐林试剂是由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。
它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀因此,斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。
2、双缩脲试剂取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。
取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。
瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。
※双缩脲试剂使用时,先向蛋白质溶液中加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,与蛋白质发生紫色反应,因此,双缩脲试剂常用于检测蛋白质的存在与否注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:(1)溶液浓度不同斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲,其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05g/ml;双缩脲试剂中NaOH溶液(双缩脲试剂A)的浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g/ml。
(2)使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。
1、裴林甲液:配制:称取五水合硫酸铜69.278g 加蒸馏水稀释到1000ml ,摇匀,即得。
标定:吸取甲液5.0ml 于250ml 碘量瓶中,加30%醋酸溶液2ml 和1.5g 碘化钾固体,充分混匀并溶解后,加盖避光放置5分钟,用装有蒸馏水的洗瓶将塞子和瓶内壁冲洗干净,之后,先用0.1mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色,加2ml0.5%淀粉指示剂,继续滴定至兰色消失出现乳白色沉淀即为终点,同时用5ml 蒸馏水做空白,裴林甲液的比值F 按下式计算:01748.05006357.0V ⨯⨯-=)(空白样品V F 0.5%淀粉指示剂配制:称取0.5000g 淀粉,放入烧杯中,先调成糊状,加入到热的沸水中,并沸腾几分钟,至溶液呈现透明,冷却至室温。
30%醋酸溶液:30ml 冰乙酸用蒸馏水稀释并定容至100ml 。
2、水中总磷的测定:钼酸铵溶液:称量6.0g 分析纯钼酸铵溶于500ml 水中,加入0.2g 酒石酸锑钾和83ml 分析纯浓硫酸,冷却后,稀释至1L 。
充分混匀后,存于棕色试剂瓶中,贮存期6个月。
硫酸溶液(C=0.5mol/L ):取30ml 分析纯浓硫酸缓缓加入适量蒸馏水中,冷却至室温,加蒸馏水稀释至1000ml ,摇匀。
24g/L 过硫酸铵溶液:称取24.0g 过硫酸铵固体,用蒸馏水溶解并稀释定容至1000ml ,充分混匀即可。
17.6g/L 抗坏血酸溶液:称取17.6g 抗坏血酸溶于适量蒸馏水中,加0.2g 乙二胺四乙酸二钠和8ml 甲酸,充分溶解和混匀后,用蒸馏水稀释并定容至1L ,混匀。
贮存于棕色瓶中,有效期为15天。
3、NaOH 标液(0.5mol/L ,0.1mol/L )配制:称取20.00g(4.00g)分析纯氢氧化钠固体,用蒸馏水溶解,并稀释定容至1000ml,混匀放置。
标定:取在105℃下烘干至恒重的邻苯二甲酸氢钾2g(0.4g),精密称定,加新沸过的冷水50ml,完全溶解,加2滴酚酞指示剂,用配好的该0.5mol/L(或0.1mol/L)NaOH标准溶液滴定至溶液显粉红色,其中每1ml的NaOH标液相当于102.1mg(或20.42mg)的邻苯二甲酸氢钾。
20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作,准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法,帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一,通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备,根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂,并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积,然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量,然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式,按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等,并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积,并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积,然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式,计算所需溶液的质量、体积,并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液,并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例,计算所需试剂的质量或体积,并进行配制。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
生物实验常用试剂配制方法
1.碘液的配制
取2g碘化钾,溶解在5mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2.斐林试剂
试剂A:将结晶硫酸铜溶于500mL水中,加硫酸,混合均匀。
试剂B:将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
(贮于带橡皮塞的瓶中)
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3.双缩脲试剂
试剂A:10%氢氧化钠试剂B:1%硫酸铜
4.苏丹Ⅲ试剂
苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中,因脂肪可溶于酒精中,因此染色脂肪不得超过10分钟。
5.二苯胺试剂:
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中,再加浓硫酸(置冰箱中可保存根6个月,使用前在室温下摇匀)。
6.醋酸洋红染液
冰醋酸45mL+55mL蒸馏水+洋红
先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸 10分钟,待冷却后,即可使用。
7.有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。
8.有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合配成染色液
9.卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定)
酒精:冰醋酸=3:1(体积比)。
实验室常用试剂配制方法实验室中,常用试剂的配制方法非常重要,准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。
以下是几种常用实验室试剂的配制方法:1.缓冲溶液的配制:缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度,常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。
以Tris缓冲液为例,其配制方法如下:1) 称取所需量的Tris氯化物(Tris-HCl)。
2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中,搅拌使其彻底溶解。
可以加热水浴促进其溶解。
3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。
可以使用酸(如盐酸)或碱(如氢氧化钠)来调节pH值,同时使用pH计监测溶液的pH值。
4)将溶液转移到容量瓶中,用去离子水稀释至最终体积。
2.浓度溶液的配制:浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。
以下以NaCl浓度溶液的配制为例:1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积,计算所需的NaCl质量。
可以使用以下公式进行计算:质量(g)=浓度(mol/L)×体积(L)×摩尔质量(g/mol)。
2)称取所需质量的NaCl。
3)加入去离子水溶解NaCl,搅拌使其溶解。
4)如果需要,通过使用pH计校正溶液的pH值。
3.酶溶液的配制:酶溶液常用于生物学实验中。
以下以酶的配制为例:1)根据酶的活力或浓度,计算所需酶的质量或体积。
2)称取所需量的酶,可以在低温环境中操作以保持酶的活性。
3)加入合适的缓冲液溶解酶,并按需添加其他辅助试剂,如辅酶等。
4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。
5)根据需要,将溶液分装至小容器中,如冰盒中保存。
4.染色剂的配制:染色剂常用于细胞培养、组织切片,或者蛋白质凝胶电泳等实验中。
以下以伯克氏液的配制为例:1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝(Methylene Blue)。
2)加入足够的去离子水,用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。
3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。
4)将溶液分装至小容器中,并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。
常用试剂配制方法氨试液取浓氨水200ml,置1000ml量杯中,加水稀释至500ml。
碱性酒石酸铜试液:配600ml。
(1)取硫酸铜结晶20.8g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml试剂瓶中备用。
(可长期保存)(2)取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml 试剂瓶中备用。
(需新鲜配制)临用前将两液等量混合,即得。
0.2%酚酞指示液:配500ml。
(可长期保存)粗称酚酞1g,置500ml量杯中,加95%乙醇500ml,使溶解,即得。
0.02mol/l氢氧化钠滴定液:配500ml。
(可长期保存)取氢氧化钠0.4g,置500ml量杯中,加水使溶解成500ml。
稀硝酸:配4000ml。
(可长期保存)取硝酸(16mol/L)210ml,置3000ml烧杯中,加水稀释至2000ml。
配2次。
标准氯化钠溶液(10ug/ml):配1000ml。
(可长期保存)精称氯化钠16.5mg,置100ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为储备液。
(100μg/ml)临用前,精密量取储备液100.0mL,置1000ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
8.硝酸银试液:配500ml。
(需新鲜配制)取硝酸银8.75g,置500ml量杯中,加水溶解至500ml。
9.稀盐酸:配3000ml。
(可长期保存)取盐酸(12.5mol/L)702ml,置5000ml烧杯中,加水稀释至3000ml。
10.标准硫酸钾溶液(100ug SO4-2/ml):配500ml。
(可长期保存)精称硫酸钾90.5mg,置100ml烧杯中,加水溶解后,转移至500ml量瓶中。
11.25%氯化钡:配3000ml。
(可长期保存,第二年如混浊,过滤)粗称BaCl2750g,置5000ml烧杯中,加水超声溶解并稀释至3000ml(澄清)。
12.标准铅溶液(10ugPb/ml):配600ml 。
常用试剂配制及显色方法详解(一)通用显色剂1.重铬酸钾--硫酸一般有机物均能显色,不同化合物显示不同颜色。
喷洒剂:5克重铬酸钾溶于100ml,40%硫酸中。
喷洒后加热至150oC斑点出现。
2.碘:检查一般有机物(1)碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色,有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可提高显色的灵敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液,取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。
3.碘--碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)。
4.5%--磷钼酸乙醇溶液:喷后120oC烤,还原性物质显兰色,再用氨气熏,则背景变为无色。
5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120oC,还原性物质显兰色。
6碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
:5%碳酸钠溶液。
溶液II溶液I和溶液II等量混合使用。
7.中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。
8.硝酸银--氢氧化铵(Tollen's--zoffaronl)试剂,喷后105oC烤5~10分钟,还原性物质显黑色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液。
溶液II:氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和溶液II以1:5混合。
注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。
9硝酸银--高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化铵溶液:2N氢氧化钠(1:1:2)。
临用前配制。
溶液II:高锰酸钾0.5g,碳酸钠1g,加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。
10.四唑试剂:还原性物质,在室温或微加热时显紫色。
溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液。
溶液II:6N氢氧化钠溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
11.铁氰化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色,再喷射2N/L盐酸溶液,则兰色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液。
溶液II:2%三氯化铁溶液。
常用试剂配制的具体操作1.HCL(1+1):在1000ml棕色瓶或白色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢加入盐酸,摇匀,密封备用。
(打开盐酸时,需要用纸,盖在瓶盖上再打开。
因为里面可能存在压力,若是直接打开,可能会因为压力过大,造成液体冲出,伤害到眼睛)也可以放置少量在白色滴瓶中待用。
2.抗坏血酸(5%):用一次性塑料杯,称取抗坏血酸1g,硫脲0.1g,加入20ml纯净水,在超声器中用玻璃棒搅匀,再倒入30ml小棕色瓶中保存。
(在实验前需要看颜色变化,如果颜色变深,则代表试剂过期)。
3.盐酸—硼酸混合酸:用一次性塑料杯称取硼酸25g,500ml量杯分2次量取900ml纯净水,清洗塑料杯,并倒入1000ml烧杯中,再加入HCL(1+1)70ml,放置在超声器中,用玻璃棒搅匀溶解,再倒入1000ml的棕色瓶中保存(也可以用500ml白色塑料瓶,插10ml刻度移液管)4.钼酸钠(6%):用一次性塑料杯称取钼酸钠30g,500ml量杯量取500ml纯净水,边清洗塑料杯边倒入500ml烧杯中,然后放置在超声器中,用玻璃棒搅匀,再倒入至500ml白色塑料瓶中,密封保存。
(插5ml刻度移液管)5.H₂O₂(1+20):全名为过氧化氢或者双氧水。
用1ml刻度移液管,吸取1ml过氧化氢至一次性塑料杯中,20ml量杯量取20ml纯净水,倒入塑料杯中,摇匀,再倒入至30ml的小棕色瓶中。
(容易失效,所以做溶液和检测时都需要速度快)6.三乙醇胺(TEA)(1+1):在1000ml棕色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢倒入500ml三乙醇胺,摇匀备用。
(也可以用白色塑料瓶,加黑色外袋保存,插5ml刻度移液管)7.H2SO4(1+1):带橡胶手套及口罩。
用500ml量杯先量取300ml纯净水,在1000ml烧杯内,先倒入300ml纯净水。
用脸盆装半脸盆自来水,将烧杯先放入脸盆中,再用500ml量杯量取300ml浓硫酸,缓缓倒入浓硫酸,并用玻璃棒不停搅拌。