实验室常规试剂的配制方法
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实验室常用试剂、缓冲液的配制1 MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1 MTris-HCI配制量1 L配制方法1.称量121.1 gTris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 咼温咼压火菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 MTris-HCl(pH8.8)组份浓度1.5 MTris-HCl配制量1 L配制方法1.称量181.7 gTris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压火菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
10 X TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度100 mMTris-HCl,10 mMEDTA配制量1 L配制方法1.量取下列溶液,置于 1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合3. 将溶液定容至1 L后,高温高压火菌。
4. 室温保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度配制量配制方法PBSBuffer 组份浓度137 mMNaCl,2.73 M琴磁柚IQO ml1. N.1OAC - 3H.OH于100-200 m:疑杯中.加人對40讪的去两子水披扌半渚孵2、加入冰酯敌讷帑pH值至43加去离子庆粕増液證容至20ml.mMKCl,10 mMNa2HPO4,2 mMKH2PO4配制量1 L配制方法1.称量下列试剂,置于 1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
常用试剂配制方法试剂是科学实验和研究中不可或缺的工具,常用的试剂包括溶液、稀释液、缓冲液、媒体液等。
在实验室中,通常需要根据具体的实验要求来配制各种试剂,合理的试剂配制方法能够确保试剂的质量和稳定性,保证实验结果的准确性和可重复性。
接下来将介绍一些常用试剂的配制方法。
1. 溶液的配制方法溶液是实验室中最常用的试剂之一,常见的溶液包括盐酸溶液、硫酸溶液、碳酸溶液、氢氧化钠溶液等。
溶液的配制主要是根据溶质的重量或体积浓度和所需的溶液体积来计算所需的溶质量或体积,并将溶质溶解在适量的水中。
以盐酸为例,盐酸的浓度通常以摩尔浓度(M)或质量浓度(%)来表示,假设需要制备500ml 1M的盐酸溶液,则按照下面的步骤进行:- 根据盐酸的摩尔质量和摩尔浓度计算出所需的盐酸质量。
- 取适量的去离子水,加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸质量,并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为500ml。
2. 稀释液的配制方法稀释液通常用于稀释浓度较高的溶液,以得到所需的浓度。
稀释液的浓度计算方法非常简单,只需要使用C1V1=C2V2的公式即可,其中C1为原液的浓度,V1为原液的体积,C2为稀释液的浓度,V2为稀释液的体积。
以盐酸溶液为例,如果需要从浓度为6M的盐酸溶液稀释出100ml 1M的盐酸溶液,则按照下面的步骤进行:- 根据C1V1=C2V2的公式,计算出需要的盐酸的体积。
- 取适量的去离子水,加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸体积,并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为100ml。
3. 缓冲液的配制方法缓冲液是用来维持溶液的pH稳定性的溶液,常用的缓冲液包括Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液等。
缓冲液的配制需要根据所需的pH值来选择相应的缓冲剂和其酸性或碱性分量,并按照一定的比例混合制备。
以Tris缓冲液为例,Tris缓冲液的pH值通常在7-9之间,如果需要制备1L pH 7.4的Tris缓冲液,则按照下面的步骤进行:- 根据Tris缓冲液的pKa值和所需的pH值计算出所需要的Tris和酸性成分的摩尔比。
20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作,准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法,帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一,通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备,根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂,并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积,然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量,然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式,按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等,并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积,并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积,然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式,计算所需溶液的质量、体积,并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液,并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例,计算所需试剂的质量或体积,并进行配制。
实验室试剂配制方法1.水溶液的配制:a.一般的水溶液配制需要使用蒸馏水或者经过高纯水处理的水。
首先,取一定体积的蒸馏水或高纯水加入容器中。
b.如果需要调节溶液的pH值,可以使用酸或碱进行调节。
首先,将所需量的酸或碱溶解在一定体积的蒸馏水中,然后将调节液缓慢滴加到待配制的水溶液中,同时用pH计监测溶液的pH值,直到达到目标值。
2.盐酸溶液的配制:a.取一定体积的蒸馏水或高纯水加入容器中。
b.缓慢滴加盐酸到水中,同时用磁力搅拌子搅拌,直到达到目标浓度。
在配制盐酸溶液时,请务必注意安全,因为盐酸是一种强酸,会对人身体和实验器材造成伤害。
3.NaOH溶液的配制:a.取一定体积的蒸馏水或高纯水加入容器中。
b.缓慢滴加NaOH固体到水中,同时用磁力搅拌子搅拌,直到固体完全溶解,达到目标浓度。
在配制NaOH溶液时,要小心避免固体氢氧化钠与水的剧烈反应,以及注意防护措施,因为氢氧化钠是一种强碱。
4.缓冲溶液的配制:a. 首先,选择合适的缓冲液体系和 pH 值。
常见的缓冲溶液体系有PBS(磷酸盐缓冲溶液)、Tris-HCl(Tris 氢氯酸盐缓冲溶液)等。
b.使用蒸馏水或高纯水加入容器中。
c.根据所需浓度,称取一定质量或体积的缓冲盐或缓冲液,溶解于水中,并用pH计调节溶液的pH值。
5.稀释液的配制:a.确定要配制的目标浓度和配制体积。
b.使用蒸馏水或高纯水加入容器中。
c.根据所需浓度和体积,计算所需的试剂质量或体积。
d.将试剂添加到容器中,并进行充分的混合。
6.细胞培养基的配制:a.根据实验需求和细胞类型选择合适的培养基配方。
b.使用蒸馏水或高纯水加入容器中。
c.按照制定的配方将培养基原料逐一称取,并加入容器中,同时进行充分的混合。
d.最后,将培养基过滤或灭菌处理,以保持无菌状态。
总结:实验室试剂的配制需要准确称量试剂,选择合适的溶剂,并严格按照实验要求进行操作。
在配制过程中,注意安全、准确、固体的溶解效果和溶液的稳定性等因素是非常重要的。
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
实验室常用试剂配制方法实验室中,常用试剂的配制方法非常重要,准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。
以下是几种常用实验室试剂的配制方法:1.缓冲溶液的配制:缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度,常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。
以Tris缓冲液为例,其配制方法如下:1) 称取所需量的Tris氯化物(Tris-HCl)。
2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中,搅拌使其彻底溶解。
可以加热水浴促进其溶解。
3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。
可以使用酸(如盐酸)或碱(如氢氧化钠)来调节pH值,同时使用pH计监测溶液的pH值。
4)将溶液转移到容量瓶中,用去离子水稀释至最终体积。
2.浓度溶液的配制:浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。
以下以NaCl浓度溶液的配制为例:1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积,计算所需的NaCl质量。
可以使用以下公式进行计算:质量(g)=浓度(mol/L)×体积(L)×摩尔质量(g/mol)。
2)称取所需质量的NaCl。
3)加入去离子水溶解NaCl,搅拌使其溶解。
4)如果需要,通过使用pH计校正溶液的pH值。
3.酶溶液的配制:酶溶液常用于生物学实验中。
以下以酶的配制为例:1)根据酶的活力或浓度,计算所需酶的质量或体积。
2)称取所需量的酶,可以在低温环境中操作以保持酶的活性。
3)加入合适的缓冲液溶解酶,并按需添加其他辅助试剂,如辅酶等。
4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。
5)根据需要,将溶液分装至小容器中,如冰盒中保存。
4.染色剂的配制:染色剂常用于细胞培养、组织切片,或者蛋白质凝胶电泳等实验中。
以下以伯克氏液的配制为例:1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝(Methylene Blue)。
2)加入足够的去离子水,用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。
3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。
4)将溶液分装至小容器中,并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。
5倍TBE储存液的配制配制1L的TBE缓冲液:Tris 54 g硼酸 27.5 g0.5 M EDTA (pH 8.0) 20 mldH2O to 1000 ml要用0.5倍的TBE缓冲液进行电泳,用5倍的TBE缓冲液进行储存常规实验所用溶液配方大全1.0.5mol/LEDTA 配制组分浓度:0.5mol/l EDTA,PH=8配制量:500ml配制方法(1)称取93.06克EDTA.Na2.2H2O,置于500 ml烧杯中(2)加入约400ml dd H2O.用热磁力搅拌器充分搅拌(3)用NaOH调节PH值到8,约用10克固体NaOH(4)在溶液冷却后,再用NaOH调节至PH=8(5)加dd H2O将溶液定容到500 ml(6)高温高压灭菌后,室温保存2.NaOH溶液的配制组分浓度:5 mol/l NaOH配制量:100 ml配制方法(1)称取固体NaOH20克于容器中(2)加入dd H2O定容到100 ml3.100 mmol/l Tris-HCl的配制组分浓度:mmol/l Tris-HCl,PH=6.4配制量:250 ml配制方法(1)称取3.025克Tris于250 ml烧杯中.(2)加入约200ml dd H2O充分搅拌溶解.(3)用浓盐酸调节PH值到6.4.所用浓盐酸约3 ml(4)将溶液定容至250ml(5)用棕色瓶分装于4度冰箱中(6)如使用,用水浴加热溶解.4.氯仿-异戊醇的配制:配制方法(1)简单的体积混合,既要求比例为24:1即可(2)储存于棕色玻璃瓶子中(3)置于4度冰箱以便日后使用5.去污剂:CTAB:可将细胞膜裂解,使DNA释放到提取液中,同时也使组织匀浆中的蛋白质变性.EDTA:能与DNase的辅助因子Mg2 结合,使DNase失去活性,不能降解从细胞中释放的DNA.6.还原剂巯基乙醇:它抑制从细胞中释放的多酚氧仿.防止植物组织发黄变褐.7.氯仿—异戊醇:它可把组织匀浆中变性的蛋白质除去,将DNA与细胞中的蛋白质、碳水化合物等分开除去.8.RNase:它可去除核酸中的RNA,只留下DNA.9.硅珠悬浮液的配制(1)称取1.2g硅珠粉,溶解于10ml无菌水中.(2)放入4℃冰箱备用.(3)使用时先涡旋使其混合均匀10. 10×TE,500ml配制如下:将100mM Tris-Hcl(PH=8.0)6.057g与10mM EDTA(PH=8.0)1.8612g溶于400ddH2O中,调PH=8.0,定容到500ml。
实验室试剂配制1、0.083M KOH:0.1M KOH稀释12倍(PH必须大于12)2、酸性半饱和硫酸铵:取硫酸铵((NH3)2SO4)400g加蒸馏水500mL.置于37℃水浴24h不时搅拌,使达饱和,再冷至25℃,搅拌一次,使过量的(NH3)2SO4析出,上清液为饱和液,取上清夜400mL加1M HCL20mL。
蒸馏水加至800mL,混匀室温保存(PH必须大于3)3、17%异丙醇溶液:17mL异丙醇加0.1mol/L Tris 缓冲液(7.4)至100mL。
PH〉7.2方可。
4、10g/L(1%)联苯胺:1.0g联苯胺溶于90mL 冰醋酸内,然后加蒸馏水至100mL,贮于棕色瓶,置冰箱内可使用数周。
5、1%H2O2:30%H2O2新鲜配制(稀释30倍)6、100g/L(10%)醋酸溶液:取10mL冰醋酸,加蒸馏水至100mL7、标准Hb溶液:取以生理盐水洗涤过三次的压积红细胞与等体积蒸馏水,0.5倍体积四氯化碳混合,剧烈振荡5min后,离心20min(2,500r/min),吸取上层Hb液,用氰化高铁Hb法准确测定其浓度,稀释成100g/L(10%)Hb浓度,于低温冰箱保存,用时取0.01mL,加生理盐水至10g/L。
即为100mg/L(10mg%)应用标准液。
8、12.5g/L亚硝酸钠—葡萄糖溶液:亚硝酸钠:1.25葡萄糖:5加蒸馏水至100mL,用棕色瓶,4℃保存一个月。
9、0.0004mol/L美蓝溶液:美蓝(次甲基蓝,亚甲基蓝)15mg,加蒸馏水100mL,室温1~2个月。
10、0.02mol/L磷酸盐缓冲液(PH7.4):Na2HPO4·12H2O:229.5mg(1.1475g)KH2PO4:52.2mg(0.261g)加蒸馏水100mL(500mL)11、PH8.5 TEB缓冲液:Tris:10.2g(5.1g)EDTA:0.6g(0.3g)硼酸:3.2g(2.6g)加蒸馏水至1000mL(500mL)12、PH8.5硼酸缓冲液:硼酸5.56g硼砂(四硼酸钠)6.87g加蒸馏水至1000mL13、0.09%丽春红:丽春红S或G:1.8g三氯醋酸:26.8g磺柳酸:26.8g加蒸馏水至100mL用前将上液以蒸馏水稀释20倍使用14、氨基黑:氨基黑10B: 0.5g甲醇50mL冰醋酸:10mL蒸馏水:40mL溶解而成贮棕色瓶内15、漂洗液:甲醇(乙醇)45mL冰醋酸:5mL蒸馏水:50mL溶解而成16、透明液:无水乙醇:70mL冰醋酸:30mL混合而成17、PH6.5磷酸盐缓冲液:KH2PO4:3.11g Na2HPO4: 1.49g(Na2HPO4·2H2O 1.87g)蒸馏水900mL校正PH后稀释至1,000mL18、0.4NaOH:1M →稀释19、0.1Tris缓冲液(PH7.4):Tris: 1.21g 0.1N HCL 40mL加蒸馏水至100mL20、1.0mol/L盐酸标准液:浓盐酸MW=36.465,比重1.18,含HCL 36%~38%。
实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。
下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方:PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)、PBST(含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液)和TBS(三氯甲烷缓冲盐溶液)。
配制PBS缓冲液:-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。
-调整pH值至7.4,采用10M氢氧化钠(NaOH)或者盐酸(HCl)。
-用去离子水稀释至1xPBS。
配制PBST缓冲液:-配制1xPBS。
- 加入0.1%(v/v)Tween-20。
-混合均匀。
配制TBS缓冲液:-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。
-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。
-调整pH值至8.0,采用盐酸(HCl)。
-用去离子水稀释至1xTBS。
2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型,一般包括凝胶和毛细管电泳。
配制凝胶电泳缓冲液:-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。
-用热板搅拌器加热,搅拌至溶解。
-冷却至室温后,调整pH值至8.3,采用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)。
-用去离子水稀释至所需浓度。
配制毛细管电泳缓冲液:-加入10mM氢氧化钠(NaOH)和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。
-调整pH值至9.2,采用盐酸(HCl)。
-加入1mM十二烷基硫酸钠。
-用去离子水稀释至所需浓度。
3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。
BCA法配制试剂:-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂(提取液A)。
-加入0.1M硫酸(提取液B)。
-混合提取液A和提取液B,即得到试剂。
Lowry法配制试剂:-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液(A液)到250mL锥形瓶中。
-混合硫酸/磷酸/酒精试剂(B液)。
-将A液倒入B液中混合,待用。
Bradford法配制试剂:-加入试剂A到450mL去离子水中。
测总汞、溶解态汞试剂配制:1、 氯化溴(BrCl ): 配制100mL 的BrCl 溶液。
取100ml 超纯盐酸(HCl)到经500C 灼烧冷却后、容积为100-150ml 的无汞烧杯里,将烧杯放到电磁搅拌器台面上,再称取1.08g KBr (精确到0.0001)加入100mL 超纯盐酸(HCl)中, 用磁力搅拌器搅拌1小时,然后边搅拌边缓慢加入1.52g 的KBrO 3(精确到0.0001),颜色变化由淡黄-红-橙-淡黄,用保鲜膜轻轻盖下再搅拌1小时,将配制好的BrCl 溶液转移到干净的200ml 硼硅玻璃采样瓶中,盖紧瓶塞常温或冷藏备用即可。
保质期长,避免污染即可。
(注意:需在通风橱操作)2、 氯化亚锡(SnCl 2): 配制100mL 的样品。
称取20gSnCl 2·H 2O 溶解在装有10mL 超纯盐酸的烧杯中(微热助溶),待完全溶解为无色透明的溶液后将溶液转移到100ml 容量瓶中,加入适量超纯水,以300mL/min 的速度用纯氮载气除汞6-8小时,用超纯水定容到100mL 盖紧瓶塞,冷藏即可。
保质期至少一周,如发现溶液变得浑浊则说明已过期,不可再用。
3、 盐酸羟胺(NH 2OH·HCl ):称取25g 的NH 2OH·HCl 溶于100mL 的超纯水中,待完全溶解加入100μL 的SnCl 2摇匀,以300mL/min 的速度用无汞氮气除汞6-8小时盖紧瓶塞即可。
此过程同上,均为现在干净的烧杯中配制,最后移入采样瓶或容量瓶。
无需冷藏,远离污染源即可。
4、 汞标准溶液配制:① 原始汞标准溶液浓度:10μg/mL用移液器取1mL 的原始汞标准溶液(稀释100倍)加入到89mL 的超纯水中,再加入10mL 的超纯盐酸即100ng/mL 标准溶液。
②配制1 ng/mL 的汞标准溶液用移液器取1mL ①配好的100ng/mL 汞标准溶液(稀释100倍)加入到89mL 的超纯水中,再加入10mL 的超纯盐酸即1ng/mL 标准溶液。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。
配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
细胞培养PBS配方PBS即磷酸盐缓冲生理盐水,都是含有H2PO4-、HPO42- 缓冲体系和NaCl,用于调节渗透压,达到与人体相当的水平,分为含钾离子和不含钾离子两种。
1、不含钾离子的PBS配方(由NaCl,Na2HPO4和NaH2PO4三种成分组成,用于其它实验缓冲和稀释用)母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4,即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
配好后加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
* 其他各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19 817.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7 .2、含钾离子的PBS配方(由NaCl,KCl,Na2HPO4和KH2PO4四种成分组成,一般用于组织培养)0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法:(免疫组化常用)称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可,高压灭菌。
实验室常用溶液的配制1mol/L亚精胺(Spermidine):溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammoniumacetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassiumacetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodiumacetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
1mol/LHCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
1mol/LMgCl2:溶解20.3gMgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-freeRNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH5.0)。
溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。
用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。
(配制过程中要戴手套)。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
实验室常用试剂配制方法一、50×TAE:称242g Tris溶于800mL 双蒸水中,加入57.1mL 冰醋酸和18.6g(或100mL 0.5mol/L,pH=8.0)EDTA,再加水定容至1L,室温保存备用。
二、1×TAE:将50×TAE加双蒸水稀释至1×使用。
三、LB液体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)和10g NaCl,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,冷却至室温后4℃保存备用。
四、100mg/mL氨苄青霉素(Amp):称取100mg粉末状氨苄青霉素(Amp)置于1.5mL 离心管中,加入800μL 无菌水使其完全溶解,定容至1mL,-20℃保存备用。
五、LA液体培养基:按照x mL培养基加入x μL的比例将100mg/mL的氨苄青霉素(Amp)加入LB液体培养基中,4℃保存备用。
六、LB固体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)、10g NaCl和15g琼脂粉,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,稍冷却后按照x mL培养基加入x μL的比例加入100mg/mL的氨苄青霉素(Amp),充分混匀后倒入培养皿中制成琼脂平板,4℃保存备用。
(1L培养基大约可以倒40个平板)七、200mg/mL IPTG:称取2g 粉末状IPTG溶于8mL 双蒸水中,再定容至10mL,配成200mg/mL 溶液,(用0.22μm滤膜过滤除菌,)分装为每份1mL,-20℃保存备用。
八、20mg/mL X-gal:将X-gal溶于二甲基甲酰胺,配成20mg/mL,分装后于-20℃避光保存。
九、DEPC水:将水加入干净玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(v/v),放置过夜,高压湿热灭菌,4℃保存备用。
实验室化学试剂配置清单
1. 引言
本文档旨在提供实验室化学试剂配置清单,以帮助实验室人员准确、安全地配置所需的化学试剂。
2. 配置清单
下面是常见化学试剂的配置清单,包括试剂名称、浓度、配制方法和注意事项:
2.1 氯化铁溶液
- 试剂名称:氯化铁(FeCl3)
- 浓度:10%(质量浓度)
- 配制方法:将20g的氯化铁溶解在200ml的去离子水中,搅拌至溶解完全。
- 注意事项:使用时需戴防护手套,避免接触皮肤和眼睛。
2.2 硫酸溶液
- 试剂名称:硫酸(H2SO4)
- 浓度:1M
- 配制方法:向800ml的去离子水中慢慢加入160ml的浓硫酸,搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:配制过程需小心操作,避免溅出。
2.3 碳酸氢钠溶液
- 试剂名称:碳酸氢钠(NaHCO3)
- 浓度:0.1M
- 配制方法:向800ml的去离子水中慢慢加入5.8g的碳酸氢钠,搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:可溶液产生二氧化碳气体,需在通风橱下操作。
2.4 硝酸银溶液
- 试剂名称:硝酸银(AgNO3)
- 浓度:0.01M(滴定用)
- 配制方法:将1.708g的硝酸银溶解在800ml的去离子水中,
搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:避免接触有机物及皮肤,避免光照。
3. 结论
本文档提供了实验室常见化学试剂的配置清单,方便实验室人员按照正确的方法配制所需的试剂。
在配置试剂时,请严格按照配制方法和注意事项操作,确保安全性和准确性。