生物实验室常用试剂的配制

分子生物学实验室常用试剂配方：医药观察之我见2. 常用试剂配方（Prescriptions of Ordinary Reagents）（高媛）. (217)(1) PBS (217)(2) 胰酶Trypin (217)(3) Tris-NH4Cl (217)(4) Running buffer (218)(5) Washing buffer (218)(6) 湿转液 (218)(7) LB培养基 (218)(8) LB培养板 (218)PBS:PBS是磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline）一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。

主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广；而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。

配置方法：NaCl : 320g 优级纯Na2HPO4. 12H2O 61.44gKCl 8gKH2PO4 8g三蒸水4L烧杯溶解后用HCl调PH为7.2-7.4，细胞用需要高温灭菌，放于超净台冷却，贴上封口膜及标签。

胰酶：Trypsin 一种胰蛋白酶，通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上和培养皿壁结合处蛋白降解，使两者分离。

细胞消化胰酶常用工作浓度为0.25%，PH为7.2-7.4，储存液放在-20冻存，使用液放在4度。

Tris-NH4Cl :红细胞裂解液，是一种从人，鼠及其他哺乳动物等体内烦人组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，应用低渗的原理，改变红细胞渗透压，使得红细胞胀大破裂。

配置方法：2L 体系：NH4Cl : 14.94g 溶于1800mL ddH2O 混匀HCl调节PH为7.2-7.4 过滤Tris : 5.15g 溶于200mL ddH2O3L体系NH4Cl : 22.41g 溶于2700mL ddH2O 混匀HCl调节PH为7.2-7.4 过滤Tris : 7.725g 溶于300mL ddH2ORunning buffer: 4L （5X）Tris: 60.6gGly: 288.3gSDS: 20gddH2O 3.78LWashing buffer: 4L (10X)Tris : 48.6gNaCl : 116.9gTween 20 : 40mLddH2O: 3.9L湿转液：4L (10X)Tris: 121.4gGly: 576.6gddH2O 3.57LLB液体培养基：名字来源于英语lysogeny broth 即溶菌肉汤，应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。

20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作，准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。

本文将介绍20几种常用的试剂配置方法，帮助实验人员更好地进行实验。

二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一，通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。

该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备，根据需要配置所需体积的试剂溶液。

三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。

该方法通过称量固体试剂，并按照比例配制溶液浓度。

四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。

通过计算反应物的摩尔量和体积，然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。

五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。

通常将两种试剂按照比例称量，然后进行混合。

六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。

通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。

七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式，按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等，并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。

八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积，并进行混合配制。

该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。

九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。

通过计算对数浓度和体积，然后反推得到所需试剂量。

十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式，计算所需溶液的质量、体积，并进行配制。

十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液，并按照一定比例配制出所需的标准溶液。

十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。

十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例，计算所需试剂的质量或体积，并进行配制。

TAKARA实验室常规试剂配制方法TAKARA实验室是一家提供生命科学研究和临床诊断解决方案的公司。

其产品线包括分子生物学试剂、细胞培养耗材、蛋白质研究试剂和临床诊断试剂等。

在TAKARA实验室产品的使用过程中，常规试剂的配制方法是非常重要的一部分。

本文将介绍一些TAKARA实验室常规试剂的配制方法。

1. Tris缓冲液的配制方法Tris缓冲液可用于蛋白质电泳，DNA和RNA电泳等实验中。

配制方法如下：1）将Tris酸粉末称取至容器中。

2）加入蒸馏水溶解，并调节pH至所需值（一般为8.0）。

3）使用0.22μm的滤器进行过滤。

2.PBS缓冲液的配制方法PBS缓冲液是一种常用的生理盐水缓冲液，在细胞培养和免疫染色实验中经常使用。

配制方法如下：1）将NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4按指定比例称取至容器中。

2）加入蒸馏水溶解，并调节pH至所需值（一般为7.4）。

3）使用0.22μm的滤器进行过滤。

3.LB培养基的配制方法LB培养基是一种常用的大肠杆菌培养基，在分子生物学实验中经常使用。

配制方法如下：1）将Tryptone、Yeast Extract和NaCl按指定比例称取至容器中。

2）加入蒸馏水溶解，并使用自动调pH仪调节pH至所需值（一般为7.0）。

3）将容器密封，并在121℃高压灭菌器中高压灭菌15-20分钟。

4. RNase-Free水的制备方法RNase-Free水在RNA实验中非常重要，保证实验的可靠性和准确性。

制备方法如下：1）将蒸馏水倒入洁净的玻璃烧杯中。

2）放入微波炉中加热，每隔一段时间取出搅拌一次，直至水沸腾。

3）冷却后，使用0.22μm的滤器进行过滤。

4）将过滤后的水贮存在RNase-Free的容器中。

5.甲醛溶液的配制方法甲醛溶液可用于细胞固定和染色实验。

配制方法如下：1）将甲醛溶液称取至容器中。

2）加入蒸馏水溶解，使浓度达到所需值（一般为4%）。

3）使用0.22μm的滤器进行过滤。

试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。

用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。

分装后高压蒸汽灭菌。

室温贮存。

注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。

（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。

PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。

加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。

如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。

并使用质量更好的Tris。

Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。

（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。

乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。

（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。

用0.22μm过滤器过滤除菌。

分装成1ml每份，-20℃贮存。

（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。

然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。

注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。

（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。

（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。

（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。

实验室常用试剂配制方法实验室中，常用试剂的配制方法非常重要，准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。

以下是几种常用实验室试剂的配制方法：1.缓冲溶液的配制：缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度，常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。

以Tris缓冲液为例，其配制方法如下：1) 称取所需量的Tris氯化物（Tris-HCl）。

2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中，搅拌使其彻底溶解。

可以加热水浴促进其溶解。

3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。

可以使用酸（如盐酸）或碱（如氢氧化钠）来调节pH值，同时使用pH计监测溶液的pH值。

4)将溶液转移到容量瓶中，用去离子水稀释至最终体积。

2.浓度溶液的配制：浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。

以下以NaCl浓度溶液的配制为例：1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积，计算所需的NaCl质量。

可以使用以下公式进行计算：质量（g）=浓度（mol/L）×体积（L）×摩尔质量（g/mol）。

2)称取所需质量的NaCl。

3)加入去离子水溶解NaCl，搅拌使其溶解。

4)如果需要，通过使用pH计校正溶液的pH值。

3.酶溶液的配制：酶溶液常用于生物学实验中。

以下以酶的配制为例：1)根据酶的活力或浓度，计算所需酶的质量或体积。

2)称取所需量的酶，可以在低温环境中操作以保持酶的活性。

3)加入合适的缓冲液溶解酶，并按需添加其他辅助试剂，如辅酶等。

4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。

5)根据需要，将溶液分装至小容器中，如冰盒中保存。

4.染色剂的配制：染色剂常用于细胞培养、组织切片，或者蛋白质凝胶电泳等实验中。

以下以伯克氏液的配制为例：1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝（Methylene Blue）。

2)加入足够的去离子水，用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。

3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。

4)将溶液分装至小容器中，并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。

一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA 的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。

1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分：牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。

2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。

另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。

将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。

蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。

从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。

迟缓反应需观察14~30d。

二、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

三、5％乳糖发酵管成分：蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。

将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。

在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。

四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。

甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。

滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。

实验室常用溶液配制管理规程一、普通试剂1、无二氧化碳的水将水注入烧瓶中，煮沸IOmin,立即用装有钠石灰管的胶塞塞紧，放置冷却。

2、中性乙醍一乙醇混合试剂将乙醵一乙醇按2：1的比例混合均匀，加酚猷指示剂，用碱液中和至恰好变为淡红色为止。

3、三氯化碳一冰乙酸混合试剂将三氯化碳（氯仿）与冰乙酸按2：3的比例混合均匀，置棕色试剂瓶中备用。

4、饱和碘化钾溶液称取14g碘化钾，溶于IOnIL水中，保持溶液中有晶体，置于棕色瓶中，须现用现配。

5、0.lmol∕L碘液称取13g碘及35g碘化钾，溶于少量水中，完全溶解后稀释，定容至1000mL,摇匀。

6、0.05mol∕L碘液称取6.5g碘及17.5g碘化钾，溶于少量水中，完全溶解后稀释，定容至1000mL,摇匀。

7、pH^5.8磷酸二氢钾一磷酸氢二钾缓冲溶液称取13.6g磷酸二氢钾，溶于蒸偏水中，定容至IOOOmL;称取16.42g磷酸氢二钾，溶于蒸储水中，定容至1000mL；吸取a液50mL、b液4∙5mL,混合后用蒸储水定容至IOOmL o8、1.5%乙酸镁乙醇溶液称取1.5g乙酸镁，溶于IoomL95%的乙醇中。

9、辂酸洗液称取25g重辂酸钾溶于50mL热水中，冷却后，边搅拌边缓慢加入浓硫酸，至总体积为50OnIL,冷却，置棕色瓶中备用。

10、氨一氯化核缓冲溶液10.lpH≈10氨一氯化锭缓冲溶液甲称取54.Og氯化铁，溶于水，加入350mL氨水，稀释至IOOOmLo10.2pH≈10氨一氯化锭缓冲溶液乙称取26.7g氯化铁，溶于水，加入36mL氨水，稀释至IOOOmL o11、氨水溶液11.12.5%氨水溶液量取103mL氨水，稀释至IOOOmLo11.210%氨水溶液量取400mL氨水，稀释至IOOOmLo12、盐酸溶液12.110%盐酸溶液量取24OmL浓盐酸，稀释至IOOonIL。

13.215%盐酸溶液量取370mL浓盐酸，稀释至1000mL。

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。

配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。