141生化药物分析及生物检定技术

生物药物分析与检验生物药物分析与检验的特点：1.需要进行相对分子质量的测定、2.需要检查生物活性3.需做安全性检查4.需做效价测定5.要用生化法确证结构终点测定法的条件：1.必须有专一地作用该被测物质的酶，并能得到它的制品；2.能够确定使这种酶反应接近进行完全的条件；3.反应中底物的减少、产物的增加、辅酶物质的改变等可以借助简便的方法进行测定高效液相色谱法的定性分析1.利用已知物质定性的方法①利用保留特性②利用不同柱比较2.色谱法与其他方法结合定性①利用化学反应定性②利用选择性检测器定性③液相色谱-质谱联用技术、液相色谱-核磁共振联用技术生物检定的范围:1.药物的效价测定2.体内微量生物活性物质的测定3.中药质量的控制4.某些有害杂质的限度检查基因工程药物的特点：1.分泌量极低而生理、药理活性极高2.具有细胞和组织特异性3.多数细胞生长因子具有多功能性4.细胞因子间存在复杂的相互作用5.具有低免疫原性特殊杂质检查方法：物理化学区分方法一、物理法“1. 臭味及挥发性的差异2. 颜色上的差异3. 溶解行为上的差异二、化学分析法1. 酸碱反应2. 呈色或沉淀反应4.氧化还原反应免疫电泳技术：将琼脂电泳与免疫扩散结合起来，即利用电场作用下带电蛋白质在琼脂凝胶中具有不同的迁移率，以及相同的蛋白质具有完整的抗原性的特点，用于分析抗原或抗体性质的一种技术。

电泳：带电颗粒在电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。

终点测定法：先借助酶反应（单独的反应或几种酶构成的偶数酶反应）使被测物质定量地进行转变，然后在转化完成后，测定底物、产物或辅酶物质（第二底物）等的变化量生物检定：利用生物体（整体动物、离体组织/器官、细胞和微生物等）的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。

质反应：当一定剂量的药物注入动物体内后，观察某一反应或反应的某一程度出现与否，只有质的变化。

量反应：药物对生物体所引起的反应随着药物剂量的增加产生的量变可以测量者。

药品生物检定技术教案一、教学目标1.知识目标：使学生掌握药品生物检定的基本概念、原理和方法，理解生物药物的质量控制和评价。

2.能力目标：培养学生进行药品生物检定的实验操作能力，提高学生的观察力、判断力和解决问题的能力。

3.情感态度和价值观目标：培养学生对药品生物检定技术的兴趣，树立正确的药品质量观念，增强责任感和使命感。

二、教学重点和难点1.教学重点：药品生物检定的基本概念、原理和方法，生物药物的质量控制和评价。

2.教学难点：药品生物检定实验操作中的技术要点和难点，如何保证实验结果的准确性和可靠性。

三、教学过程1.导入新课：通过展示一些常见的生物药物，如胰岛素、干扰素等，引导学生思考这些药物的质量如何控制和评价，从而引出药品生物检定技术的内容。

2.讲授新课：通过讲解、演示和实验相结合的方式，使学生掌握药品生物检定的基本概念、原理和方法。

同时，注重培养学生的实验操作能力和观察力、判断力。

3.巩固练习：通过小组讨论、实验操作等方式，使学生进一步巩固所学知识，提高解决问题的能力。

4.归纳小结：通过总结本节课的重点和难点，使学生明确学习目标，为后续学习打下基础。

四、教学方法和手段1.教学方法：采用讲解、演示、实验、小组讨论等多种教学方法相结合的方式，使学生更好地理解和掌握所学知识。

2.教学手段：利用多媒体课件、实验器材等手段辅助教学，提高教学效果和教学质量。

五、课堂练习、作业与评价方式1.课堂练习：通过小组讨论、案例分析等方式，使学生进一步巩固所学知识，提高解决问题的能力。

2.作业：布置与本节课内容相关的课后作业，要求学生按时完成并提交。

3.评价方式：采用平时表现（包括课堂练习和作业完成情况等）和期末考试相结合的方式，综合评价学生的学习效果。

六、辅助教学资源与工具1.教学课件：提供相关的多媒体教学课件，便于学生学习和掌握重点难点知识。

2.实验器材：提供实验所需的器材和试剂等，保证实验的顺利进行。

3.网络资源：提供相关的学习网站和资料库，便于学生自主学习和拓展知识面。

（完整版）生物药物分析重点完整版第一章绪论1.生物药物分析：是生物工程制药专业设置的一门专业课，是应用微生物学、分子生物学、免疫学、生物化学、有机化学、数学、分析化学、生化工程等学科的理论及其技术成就，检测和研究各种生物药物质量的一门综合性学科。

2.药典：是国家对药物质量标准及其检测方法所做的技术规定，是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。

3.我国的第一部药典1953年出版，从1963年版开始，中国药典分一、二部，药典内容一般包括凡例、正文、附录、索引四部分，生物药物收载在第三部分。

4. 美国药典—USP英国药典—BP日本药局方—JP英国副药典或英国准药典—BPC国际药典—Ph.Int5.基因工程药物的质量控制规则（暂时未找到）6.生物药物质量的科学管理：（5个）《良好药物实验研究规范》—GLP《良好药品生产规范》—GMP《良好药品供应规范》—GSP《良好药品临床试验规范》—GCP分析工作的质量管理—AQC第二章生物药物的杂质检查1.药物的杂质：（定义）指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。

2.药物中存在的杂质其来源主要有两个：（1）是由生产过程中引入；（2）是贮存过程中受外界条件的影响，引起药物理化性质发生变化而产生。

3.杂质限量：（定义）指药物中所含杂质的最大容许量，它通常不要求准确测定其含量，只要在杂质含量在一定限度内。

4.杂质限量检查法的特点：只需通过与对照液比较即可判断药物中所含杂质量是否符合限量规定，不需测定杂质的准确含量。

5.一般杂质的检查方法在药典附录中加以规定。

一般杂质检查项目有氯化物、硫酸盐、水分、酸、碱、硫化物、硒、氟、氰化物、铁盐、重金属、砷盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、炽浊残渣、溶液颜色与澄清度以及有机溶剂残留量等。

氯化物检查法：Cl- ┼Ag+──→AgCl↓原理：药物中微量的氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，生成氯化银的胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊程度比较，判定供试品中氯化物是否符合限量规定。

生化药物及分析生化药物是从生物体分离、纯化所得，可用于预防、治疗和诊断疾病的生化物质，其中部分现已通过化学合成或生物技术制备或重组。

一、生化药物的定义中国药典分化学药品、生化药品、抗生素、放射性药品、生物制品。

生物制品系指以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织作为起始材料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备，并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量制成的生物活性制剂。

包括疫（菌）苗、毒素、类毒素、免疫血清、血液制品、免疫球胆白、抗原、变态反应原、细胞因子、激素、酶、发酵产品、单克隆抗体、DNA重组产品、体外免疫诊断试剂等，供某些疾病的预防、治疗和诊断用。

生化药物一般是系指从动物、植物及微生物提取的，亦可用生物-化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质，如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、辅酶、多糖、核苷酸、脂和生物胺等，以及其衍生物、降解物及大分子的结构修饰物等。

二、生化药物的种类、结构和特点按结构按功能分类如下：（一）氨基酸类药物1．单氨基酸白氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、异白氨酸、丝氨酸、色氨酸、丙氨酸、赖氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸、门冬氨酸、精氨酸、苏氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、胱氨酸、酪氨酸、谷氨酸。

2．氨基酸衍生物 N-乙酰-L-半胱氨酸、L-半胱氨酸乙酯盐酸盐、S-氨基甲酰半胱氨酸、S-甲基半胱氨酸、谷胺酰胺、S-羟色氨酸、二羟基苯丙氨酸。

3．复合氨基酸注射液有3S、6S、9S、11S、13S、14S、15S、17S、18S复合氨基酸注射液。

S代表氨基酸的种类。

（二）多肽类药物1．垂体多肽促肾上腺皮质激素（39肽）、促胃液素（5肽）、加压素（9肽）、催产素（9肽）、α-促黑素（13肽）、-促黑素（18肽）、人-促黑素（22肽）。

2．消化道多肽促胰液素（胰泌素，27肽）、胃泌素（14肽，17肽和34肽三种）、胆囊收缩素（33肽和39肽、另外还有4肽和8肽）、抑胃肽（43肽）、血管活性肠肽（28肽）、胰多肽（36肽）、神经降压肽（13肽）、蛙皮肽（10肽和14肽）。

生物药物分析与检验知识分析摘要：本次课程主要讲生物药物分析与检验常用的方法，杂质与安全检查，氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析与检验，酶类药物的分析与检验，脂类药物的分析与检验，核酸类药物的分析与检验，糖类药物的分析与检验，基因工程药物质量控制，生物药物的现代分析方法与检验技术。

关键词：发展前景分析检验方法安全应用生物药物分析与检验在将来相当长的时间内也仍是研究开发的主要方面，但随着现代生物技术的研究与应用日趋成熟，生物技术制药领域将发挥越来越重要的作用。

其发展趋势主要表现在：⑴应用基因工程技术，制取天然来源少和过去难以获得的生物活性物质；⑵应用蛋白质工程技术研制新型蛋白质类药物；⑶大分子物质活性片段的制取和化学修饰；⑷发展大分子药物的新剂型。

生物药物分析与检验的基本任务和作用是：使学生掌握生物药物分析与检验的基本理论知识和生物药物基本分析检验方法，培养学生重视生物药物质量的观念，从而不断提高分析问题和解决问题的能力。

它的内容主要包括生物药物分析与检验常用的方法，杂质与安全检查，氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析与检验，酶类药物的分析与检验，脂类药物的分析与检验，核酸类药物的分析与检验，糖类药物的分析与检验，基因工程药物质量控制，生物药物的现代分析方法与检验技术。

生物药物广泛用作医疗用品，特别是在传染病的预防和某些疑难杂症的诊断和治疗上起着其他药物所不能代替的独特作用。

随着预防医学和保健医学的发展，生物药物正日益渗入到人民生活的各个领域，大大扩展了其应用范围。

（1）、治疗药物肿瘤、爱滋病、心脑血管疾病等。

（2）、预防药物传染性强的疾病，疫苗、菌苗、类毒素。

（3）、诊断药物速度快、灵敏度高、特异性强。

免疫诊断、酶诊断、放射性诊断、基因诊断试剂。

（4）、其它生化试剂、保健品、化妆品、食品、医用材料。

生物药物是指利用生物体、生物组织或器官等成分，综合运用生物学、生物化学等学科的原理与方法制得的天然生物活性物质以及人工合成或半合成的天然物质类似物。

（⼀）概述⽣物检定法是利⽤药物对⽣物体（整体动物、离体组织、微⽣物等）的作⽤以测定其效价或⽣物活性的⼀种⽅法。

它以药物的药理作⽤为基础、⽣物统计为⼯具，运⽤特定的实验设计，通过供试品和相应的标准品或对照品在⼀定条件下⽐较产⽣特定⽣物反应的剂量⽐例，来测得供试品的效价。

（⼆）⽣物检定法的应⽤范围1．药物的效价测定对⼀些采⽤理化⽅法不能测定含量或理化测定不能反映临床⽣物活性的药物可⽤⽣物检定法来控制药物质量。

中国药典收载了洋地黄、胰岛素、肝素、绒促性素、缩宫素、硫酸鱼精蛋⽩等的⽣物测定法及各种抗⽣素的微⽣物测定法。

有些天然药物、⽣物制品（包括⽣化药物）往往因结构复杂，⽽且往往⼜是由结构类似、⽐例不定的多种成份组成，很难⽤理化⽅法反映其⽣物活性；另⼀些药物，尤其是⼀些激素类药物，其结构相近，⽽⽣物活性不同；还有些药物虽可⽤理化⽅法测定含量，但含量不能完全反映效价，如天青A变⾊反应测定肝素，测定结果与抗凝⾎效价不⼀致。

因此，这些药物的质量控制都离不开⽣物检定。

2．微量⽣理活性物质的测定⼀些神经介质，激素等微量⽣理活性物质，由于其很强的⽣理活性，在体内的浓度很低，加上体液中各种物质的⼲扰，很难⽤理化⽅法测定。

⽽不少活性物质的⽣物测定法由于灵敏度⾼、专⼀性强，对供试品稍作处理即可直接测定。

如⼄酰胆碱，5-羟⾊胺等活性物质的测定。

3．中药质量的控制中药成份复杂，⼤部分中药的有效成份尚未搞清，难以⽤理化⽅法加以控制，但可⽤⼀些以其疗效为基础的⽣物测定⽅法来控制其质量。

4．某些有害杂质的限度检查如农药残留量、内毒素等致热物质、抗⽣素及⽣化制剂中降压物质的限度检查等。

由于⽣物差异的存在，⽣物检定结果误差较⼤，重现性较差，需要控制的条件较多，加上测定费时，计算繁琐，所以，⽣物检定主要⽤于⽆适当理化⽅法进⾏检定的药物，补充了理化检验的不⾜。