1168]《药品生物检定技术》
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大学《药品生物检定技术》试题及答案
大学网络与继续教育学院课程考试A卷满分：100分课程【编号】:《药品生物检定技术》【1168】类别：网教 20 年3月专业：药学考试形式：大作业一、解释题(本大题共6小题，每道题4.0分，共24.0分)1.重量折算单位重量折算单位是以特定的纯抗生素制品的某一重量为1单位而加以折算2.热原--热原（progen）——指临床上能使哺乳类动物产生体温异常升高的物质总称。
除内毒素引起发热外，还包括病毒，干扰素以及其它种种发热物质。
3.动态--4.培养基--培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
5.基因工程药物-- 所谓基因工程药物就是先确定对某种疾病有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来，经过一系列基因操作，最后将该基因放入可以大量生产的受体细胞中去（包括细菌、酵母菌、动物或动物细胞、植物或植物细胞），在受体细胞不断繁殖，大规模生产具有预防和治疗这些疾病的蛋白质，即基因疫苗或药物。
6.芽管试验--二、填空题(本大题共6小题，每道题3.0分，共18.0分)1.二剂量法是将抗生素标准品和供试品各稀释成一定浓度比例（2:1或4:1）的两种溶液，在同一平板上比较其抗药活性，再根据抗生素（浓度对数）和（抑菌圈直径）成直线关系的原理来计算供试品效价。
取含菌层的双层平板培养基，每个平板表面放置4个小钢管，管内分别放入检品高低剂量和标准品高低剂量溶液。
先测量出四点的（抑菌圈直径），按下列公式计算出检品的效价。
2.误差表示测得值x与（总体指标）之差和样本指标与（）之差两种。
误差来源包括（系统误差）和偶然误差。
3.微生物检定法可分为三类：（稀释法）、（比浊法）、（琼脂扩散法）。
4.含抑菌成分的供试品可通过（(稀释法）、（离心沉淀集菌法）、（薄膜过滤法）、中和法完成供试品的制备。
1168《药品生物检定技术》西南大学网络教育2020年秋季作业参考答案
1168 20202判断题1、铜绿假单胞菌菌在曙红亚甲基蓝琼脂平板上的菌落形态为无色至浅橙色，透明或半透明，光滑湿润的圆形菌落。
（）. A.√. B.×2、在二剂量检测抗生素效价试验中，高剂量抑菌圈直径应为20-24nm，个别可为18-24mm，高剂量与低剂量抑菌圈直径之差应大于或等于2mm。
（）. A.√. B.×3、配制供试品溶液时，操作人员按要求穿戴无菌服，进入无菌室；操作前，先用酒精棉球消毒手，再用酒精棉球消毒供试品瓶口。
（）<br< span="">. A.√. B.×4、鲎试剂在保温过程中应避免剧烈震动，导致结果出现假阴性。
（）. A.√. B.×5、鲎试剂及细菌内毒素工作标准品，应避光-20℃处贮存。
（）. A.√. B.×6、在测定抗生素效价的浊度法中，浑浊程度越高，光吸收越好，效价越高。
（）. A.√. B.×7、国家标准品系指含有单一成分或混合组分，并用国际标准品标定的用于生物检定、抗生素或生化药品中效价、毒性或含量测定的国家药品标准物质。
（）. A.√. B.×8、浊度法系将一定量的抗生素加至接种有试验微生物的液体培养基内，混匀，经长时间培养后，测量培养基浊度。
（）. A.√. B.×9、在管碟法测定抗生素效价时，琼脂含量过多影响抗生素的扩散，过少又使钢管下陷；而抗生素本身结构简单者容易扩散，分子量大的扩散就慢。
（）. A.√. B.×10、平板菌落计数法测得的供试品中的菌落数，实际为菌落形成单位数，不应理解为细菌、霉菌、酵母菌的个数。
（）. A.√. B.×11、空气洁净度检查时，对可能与产品接触的空气和表面区域以及关键区域要比非产品接触区域有更严格监督。
（）. A.√. B.×12、在实行GMP中，许多药厂对洁净环境中微生物污染监督参数使用两个水平，即警告水平和行动水平。
药品生物检定技术基础知识药品生物检定技术的基本操作(药品生物检定技术课件)
二、常用仪器
（一）玻璃类仪器 （二）橡胶类物品 （三）金属器械 （四）塑料及有机玻璃器皿
三、无菌操作
无菌技术主要指在微生物检定中，控制或防止各类微生物污染及其干扰的一系列 操作方法、手段、规则、程序等，其中包括无菌环境设施、无菌实验器材以及无菌操 作等。
（一）无菌环境
无菌环境是指人们用物理或化学的方法，在某一可控空间内使悬浮粒子、浮游菌数 量达到最低限度，接近于“无菌”的一种空间。 （二）无菌器材 （三）无菌操作
药品生物检定技术的基本操作
提纲
一、药品微生物检定技术的基本程序 二、常用仪器 三、无菌操作 四、消毒灭菌
一、药品微生物检定技术的基本程序
（一）采样 药品微生物检定的采样除了与理化分析法的抽样一样，遵循随机、客观、均匀、
合理的抽样原则外，还必须对抽样过程实施有效防止微生物污染的措施，以保证微生物 检测结果的代表性、真实性和有效性。为此，采样应由专门的无菌采样员或微生物检验 员进行具体的采样工作或实施采样的监管工作。
（三）检验记录和检验报告 检验记录是出具检验报告书的依据，是进行科学研究和技术总结的原始资要涂改，须用斜线将涂改部分划 掉，并签上涂改者的名字或盖印章，不得使用涂黑方式，以保证错误部分清晰可见。
检验报告书是对药品质量作出的技术鉴定，药检人员应本着严肃负责的态度，根据 检验记录，认真书写。检验报告应依据准确，数据无误，结论明确，文字简洁，书写清晰， 格式规范。检验报告一般包括报告编号（是报告相对于样品的惟一性标识）、样品名称、 批号、剂型、规格、包装、数量、来源、取样方法和取样日期、检验方法与依据、检验结 果和结论等。检验报告上还须有检验者、复核者和质量部门负责人的签字或盖章。
（二）样品检验前处理 抽检的样品要注意保持完整性和有效性。完整性是指检测样品的最小包装应完好无缺，
1168]《药品生物检定技术》
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1168]《药品生物检定技术》1.十六烷三甲基溴化铵是一种选择性抑菌剂，作为一种季铵盐阳离子去污剂，可以释放细菌细胞中的氮和磷，从而抑制绿脓杆菌的生长。
2.霉菌和酵母菌计数平板应倒置于23-28℃的培养箱中培养24小时。
3.在三剂量法测定抗生素效价时，双碟不得少于6个。
在每个双碟中间隔的3个不锈钢小管中分别装高、中、低标准品溶液，其余则为高、中、低供试品溶液。
4.供试品溶液配制时，若供试品为纯品或原料药品，则称量一般为50毫克，不得少于1毫克，否则误差较大。
5.配制供试品溶液时，从冰箱中取出的供试品应先回温至室温再进行称量。
6.在药品的微生物检验中，若进行摇瓶培养，则应使用15-20毫升培养基/250毫升的三角瓶，以保证通气良好。
7.在异常毒性检查项目中，选择试验豚鼠的标准为：体重250-350克，同性，健康，清洁级别在以上。
8.鲎试剂及细菌内毒素工作标准品应避光存放在-20℃处。
9.在异常毒性检查项目中，除另有规定外，应取体重17-20克的小鼠5只，按照各品种项下规定的给药途径，给予每只小鼠0.5毫升的供试品溶液。
10.在异常毒性检查项目中，选择试验豚鼠的标准为：体重250-350克，同性，健康，清洁级别在以上。
11.国家标准品是指含有单一成分或混合组分，并使用国际标准品标定的国家药品标准物质，用于生物检定、抗生素或生化药品中效价、毒性或含量测定。
12.培养细菌计数平板应倒置于25-30℃的培养箱中培养48小时。
13.细菌内毒素工作标准品在各试验稀释过程中，应先将标准品稀释至10EU/ml，然后根据所使用的鲎试剂灵敏度，将标准品稀释至所需浓度用于试验阳性对照及供试品阳性对照。
14.在二剂量检测抗生素效价试验中，应等距安置4个小钢管，相对角应为不同物质。
15.配制供试品溶液时，操作人员应穿戴无菌服进入无菌室。
操作前，应先用酒精棉球消毒手，再用酒精棉球消毒供试品瓶口。
16.经增菌培养后，涂片染色并镜检疑似破伤风梭菌，毒力实验为阳性，即可报告检出破伤风梭菌。
[1168]《药品生物检定技术》试题及答案
![[1168]《药品生物检定技术》试题及答案](https://img.taocdn.com/s1/m/2dfbd7fc998fcc22bcd10dea.png)
[1168]《药品生物检定技术》简答题（10.0 分）1. 简述药品生物检定法的主要任务有哪些。
答：生物药品包括酶、激素、细胞因子、抗生素、疫苗、血清及血液制品等。
它们在预防、治疗及诊断中占有重要地位。
由于生命科学的飞速发展，生物药品的研究、开发、质控已成为全世界关注的热点。
由于大部分生物药品具有结构不确定性，需要运用多种现代生物技术，从定量角度研究剂量与反应的关系，从而构建各种生物药品的检定方法，以阐明其疗效及毒性，所以需要药品生物检定法来检定（10.0 分）2. 简述家兔热源法的不足之处？答：目前越来越多的细菌内毒素检查用鲎试剂法，而不再选用家兔。
因为鲎试剂使用方便，更灵敏，误差也更小。
而家兔可能会因为个体的差异使热原检查有所不同。
（10.0 分）3. 一剂量法——（10.0 分）4. 比浊法——答：比浊法又称浊度测定法。
为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法，这是一种光散射测量技术本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。
这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。
当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光线的强度。
在水质监测和管理过程中，比浊法常用于测量饮用水、工业用水、废水的透明度；也用于测量空气及其他各种气体中悬浮固体的含量，是空气和水污染研究的一种工具。
在酿造工业中，比浊法常用于各种饮料澄清过程的控制和过滤过程的监控。
在分析化学上，可通过生成悬浮沉淀的反应产物来测定某些元素的浓度,例如,通过生成硫酸钡悬浮物来测定Ba2+ 或SO2-,以及在煤、焦炭、油、橡胶中的总硫量；通过生成硫化银和氯化银悬浮物来测定Ag+或Cl-；在容量分析中,浊度测量也可用于确定滴定终点，如用钙盐滴定氟化物、用银盐滴定溴化物、用钡盐滴定硫酸盐等。
1168《药品生物检定技术》西南大学网教22秋作业参考答案
1168 20222判断题1、由于使用和要求不同，标准品可分为国际、国家、工作用三级标准。
( ). A.√. B.×2、实验动物的分组不管采用什么方法，重要的是不要受到主观愿烈的影响。
（）. A.√. B.×3、处于未完全密封状态下产品的操作和转运，如产品灌装（或灌封）、分装、压塞、轧盖等应在A级或B级背景下局部A级环境下完成。
（）. A.√. B.×4、在破伤风梭菌毒力实验中，小白鼠强直性痉挛，抽搐。
呈现弓背反张，腿部强直，尾巴竖立等症状，最后死亡，即为阳性反应。
（）. A.√. B.×5、每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。
（）. A.√. B.×6、在药品的微生物检验中，若作静置培养，则100 ml培养基/250 ml的三角瓶，最多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌。
（）. A.√. B.×7、微生物限度检查应在环境洁净度为不低于D级背景下的B级单向流空气区域内进行，检验全过程需严格遵守无菌操作,防止再污染。
（）. A.√. B.×8、在控制菌检查中，白色念珠菌和黑曲霉均接入玫瑰红钠琼脂培养基中，作适应性检查。
（）. A.√. B.×9、药物微生物总数检测时，胰酪大豆胨琼脂培养基平板在30〜35 ℃培养3〜5天，沙氏葡萄糖琼脂培养基平板在20〜25 ℃培养5〜7天。
（）. A.√. B.×10、霉菌、酵母菌计数平板倒置于23-28℃培养箱中培养24 h。
（）. A.√. B.×11、单向流系沿单一方向呈平行流线并且与气流方向垂直的断面上风速均匀的气流，所以仅有垂直单向流。
（）. A.√. B.×12、空态系指洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，但是没有生产设备、原材料或人员的状态。
（）. A.√. B.×13、IMVC试验是指靛基质试验(I)、甲基红试验(M)、乙酰甲基甲醇试验(V)、枸橼酸盐试验(C)，主要用于金黄色葡萄球菌检测。
药品的生物检定法PPT课件
26
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
• ②发现：1962年，美国的一个研究员 Bang在海滩散步，发现很多鲎（也叫大 王蟹）死了，他拿针管吸了海水，注入 一个活鲎体内，发现其很快死亡，1963 年写了一篇“鲎的一种致死疾病”文章， 向研究所反应，争取一些经费以此为主 要研究方向，他的助手年轻人levin和他 一起研究，发现G-细胞壁外膜上的脂多 糖（LPS）成分引起鲎致死，共同发表 文章“鲎的酶反应机理”。
28
④检测方法区别：
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
• 凝胶法的灵敏度低：0.5 Eu/ml，规格： 0.1 ml
• 定量法高，0.06Eu/ml，工艺在凝胶法 基础上发展而来，0.6 ml，也有1.2和 3.1 ml。
29
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
11
6.检查方法
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
12
7.具体 学习目标 步骤
复习提问
静脉注入药物，观察家兔体温升 高情况，超过限度认为有热原反 应
新课大纲
新课内容
✓供试用家兔
本课小结
✓试验前的准备
课后习题
✓检查法
✓结果判断
13
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
8个管加内 毒素标准品
37
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
• ⑷生成标准曲线
• 待最后一个浓度点的反应曲线 超过0.02限值后，用鼠标点中 “手动停止检测”
• 点击“生成标准曲线”
38
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
• ②发现：1962年，美国的一个研究员 Bang在海滩散步，发现很多鲎（也叫大 王蟹）死了，他拿针管吸了海水，注入 一个活鲎体内，发现其很快死亡，1963 年写了一篇“鲎的一种致死疾病”文章， 向研究所反应，争取一些经费以此为主 要研究方向，他的助手年轻人levin和他 一起研究，发现G-细胞壁外膜上的脂多 糖（LPS）成分引起鲎致死，共同发表 文章“鲎的酶反应机理”。
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④检测方法区别：
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
• 凝胶法的灵敏度低：0.5 Eu/ml，规格： 0.1 ml
• 定量法高，0.06Eu/ml，工艺在凝胶法 基础上发展而来，0.6 ml，也有1.2和 3.1 ml。
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学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
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6.检查方法
学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
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7.具体 学习目标 步骤
复习提问
静脉注入药物，观察家兔体温升 高情况，超过限度认为有热原反 应
新课大纲
新课内容
✓供试用家兔
本课小结
✓试验前的准备
课后习题
✓检查法
✓结果判断
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学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
8个管加内 毒素标准品
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学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
• ⑷生成标准曲线
• 待最后一个浓度点的反应曲线 超过0.02限值后，用鼠标点中 “手动停止检测”
• 点击“生成标准曲线”
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学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题
药品生物检定技术
第二节 微生物限度检查
微生物限度检查法 系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受到 微生物污染程度的方法，检查项目包括细 菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。 微生物限度检查成为非规定灭菌制剂保证药 品质量的重要检查内容，也是综合评价药 品生产各环节卫生状况的一个依据。
一、常规技术要求及检验量
（一）技术要求
四、无菌检查法
（二）对照试验 2.阴性对照 不得长菌，用以检查试验过程中使用的溶剂、稀释液 、冲洗液等对微生物生长及存活无影响
四、无菌检查法
（三）检查方法 1.薄膜过滤法 通过滤膜过滤，将供试品中可能存在的微生物富集于 滤膜上，再冲洗掉滤膜上的抑菌成分后，在薄膜过滤 器滤筒内加入培养基，在所需温度下培养，观察是否 有菌生长
五、药品的微生物限度检验方法
（一）细菌、霉菌及酵母菌计数 1.计数方法的验证
用以保证方法中供试液没有抗菌活性、培养条件适宜 细菌、霉菌及酵母菌生长、制备过程中稀释剂未受微 生物干扰、供试液稀释级选择适宜。 验证试验包括试验组、菌液组、供试品对照组及稀释 剂对照组 判断指标:各试验菌每次试验的菌数回收率
五、药品的微生物限度检验方法
（二）控制菌检查 4.控制菌检查法 （2）大肠菌群 在乳糖胆盐发酵培养基管中，分别加入1∶10、1∶100 、1∶1000的供试液1ml，用稀释剂1ml作为阴性对照 ，均培养18～24小时，观察结果
五、药品的微生物限度检验方法
（二）控制菌检查 4.控制菌检查法 （3）沙门菌
一、常规技术要求及检验量
（二）检验量
一次试验所用的供试品量(g、ml或cm2)。除另有规定外，一般 供试品的检验量为10g或10ml；膜剂为100cm2；贵重药品、微 量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品， 其检验量应增加 20g或20ml。 检验时，应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，膜剂还不 得少于4片。一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小 包装单位）的3倍量供试品。
药品生物检定技术査老师
药品生物检定技术査老师一、名词解释：1、生物检定：即利用生物体对药品的特殊反应来测定药品的有效性、安全性和研究药物量效关系2、国际标准品：是由世界卫生组织（WHO）邀请有条件的国家检定机构或药厂参加协作标定的3、国家标准品：是各国制定的机构选定一批性质完全相同的药品与国际标准品进行比较，定出它的效价，统一向全国的检定、科研、教育、生产单位分发，作为检定产品效价时使用；工作标准品是由产品的生产、科研单位自己制备的，仅供内部使用。
4、双碟：在抗生素效价测定中，装有培养基和试验菌的玻璃培养皿称为双碟。
5、阳性对照试验：是检查阳性菌在加入供试品的培养基中能否生长，以验证供试品有无抑菌活性物质和试验条件是否符合要求的试验。
6、抗生素微生物检定法：是利用抗生素抑制或杀死细菌或真菌的程度作为客观指标来衡量抗生素中有效成分的效力的一种方法。
7、干扰素：是一类具有抗病毒、抑制细胞增殖和免疫调节等生物学活性的细胞因子。
8、无菌检查法：系指检查药品、敷料、缝合线、无菌器具及适用于药典要求无菌检查的其他品种是否无菌的一种方法。
9、CFU：菌落形成单位数10、GMP：药品生产质量管理规范。
它是当今国际社会通行的药品生产和质量必须遵循的基本原则，是全面质量管理的重要组成部分。
11、抗生素的效价：是衡量抗生素中有效成分的效力的相对标准。
二、判断：1、从冰箱中取出菌液，回温至室温。
2、无菌室开启紫外灯至少30min。
3、称量容器的最大质量不得超过10g。
4、阳性对照菌液一般当日使用。
5、称量供试品应与标准品用同一天平及砝码。
6、刻度吸管应从0刻度开始释放溶液。
7、洁净室内，微粒少，微生物也少。
8、调PH宜为一次性，避免反复加酸、加碱影响培养基质量。
9、玻璃双碟一定要干燥，不能有冷凝水。
10、生长激素是由垂体前叶分泌的刺激机体线性生长的激素。
三、填空：1、供试品的称量值为60.00mg，估计效价为900U/mg，则容量瓶中供试品总效价为60mg X900U/mg=（54000U），单位效价为54000∕100ml=540U/ml2、各国药典的无菌检查法都包括（薄膜过滤法）和（直接接种法）。
药品生物检定技术
1.检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内 进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 2.单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬 浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。 3.供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有 效性及对微生物无毒性。 4.细菌培养温度为30～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23～28℃；控制菌 培养温度为35～37℃。 5.检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告，特殊品种可以最 小包装单位报告。
二、样品供试液的制备
《中国药典》现行版附录中提供了液体供试品、固体 、半固体或黏稠性供试品以及需用特殊方法制备供试 液的供试品的供试液制备方法。 需用特殊方法制备供试液的供试品有：非水溶性供试 品、膜剂供试品、肠溶及结肠溶制剂供试品、气雾剂 、喷雾剂供试品及具抑菌活性的供试品。
无菌检查法 系用于检查药典要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及 其他品种是否无菌的一种方法。 将药品或材料，在严格的无菌操作条件下，接种于适合各种 微生物生长的不同培养基中，置于不同的适宜温度下培养一 定的时间，逐日观察微生物的生长情况，并结合阳性和阴性 对照试验的结果，判断供试品是否无菌。 包括薄膜过滤法和直接接种法两种方法
四、无菌检查法
（二）对照试验 2.阴性对照 不得长菌，用以检查试验过程中使用的溶剂、稀释液 、冲洗液等对微生物生长及存活无影响
四、无菌检查法
（三）检查方法 1.薄膜过滤法 通过滤膜过滤，将供试品中可能存在的微生物富集于 滤膜上，再冲洗掉滤膜上的抑菌成分后，在薄膜过滤 器滤筒内加入培养基，在所需温度下培养，观察是否 有菌生长
一、常规技术要求
二、样品供试液的制备
《中国药典》现行版附录中提供了液体供试品、固体 、半固体或黏稠性供试品以及需用特殊方法制备供试 液的供试品的供试液制备方法。 需用特殊方法制备供试液的供试品有：非水溶性供试 品、膜剂供试品、肠溶及结肠溶制剂供试品、气雾剂 、喷雾剂供试品及具抑菌活性的供试品。
无菌检查法 系用于检查药典要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及 其他品种是否无菌的一种方法。 将药品或材料，在严格的无菌操作条件下，接种于适合各种 微生物生长的不同培养基中，置于不同的适宜温度下培养一 定的时间，逐日观察微生物的生长情况，并结合阳性和阴性 对照试验的结果，判断供试品是否无菌。 包括薄膜过滤法和直接接种法两种方法
四、无菌检查法
（二）对照试验 2.阴性对照 不得长菌，用以检查试验过程中使用的溶剂、稀释液 、冲洗液等对微生物生长及存活无影响
四、无菌检查法
（三）检查方法 1.薄膜过滤法 通过滤膜过滤，将供试品中可能存在的微生物富集于 滤膜上，再冲洗掉滤膜上的抑菌成分后，在薄膜过滤 器滤筒内加入培养基，在所需温度下培养，观察是否 有菌生长
一、常规技术要求
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判断题1、铜绿假单胞菌菌在曙红亚甲基蓝琼脂平板上的菌落形态为无色至浅橙色，透明或半透明，光滑湿润的圆形菌. A.√. B.×2、在二剂量检测抗生素效价试验中，高剂量抑菌圈直径应为20-24nm，个别可为18-24mm，高剂量与低剂量抑. A.√. B.×3、配制供试品溶液时，操作人员按要求穿戴无菌服，进入无菌室；操作前，先用酒精棉球消毒手，再用酒精棉球border-box;">. A.√. B.×4、鲎试剂在保温过程中应避免剧烈震动，导致结果出现假阴性。
（）. A.√. B.×5、鲎试剂及细菌内毒素工作标准品，应避光-20℃处贮存。
（）. A.√. B.×6、在测定抗生素效价的浊度法中，浑浊程度越高，光吸收越好，效价越高。
（）. A.√. B.×7、国家标准品系指含有单一成分或混合组分，并用国际标准品标定的用于生物检定、抗生素或生化药品中效价. A.√. B.×8、浊度法系将一定量的抗生素加至接种有试验微生物的液体培养基内，混匀，经长时间培养后，测量培养基浊. A.√. B.×9、在管碟法测定抗生素效价时，琼脂含量过多影响抗生素的扩散，过少又使钢管下陷；而抗生素本身结构简单. A.√. B.×10、平板菌落计数法测得的供试品中的菌落数，实际为菌落形成单位数，不应理解为细菌、霉菌、酵母菌的个. A.√. B.×11、空气洁净度检查时，对可能与产品接触的空气和表面区域以及关键区域要比非产品接触区域有更严格监督. A.√. B.×12、在实行GMP中，许多药厂对洁净环境中微生物污染监督参数使用两个水平，即警告水平和行动水平。
（. A.√. B.×13、采用大豆酪蛋白培养基（TSA）配置的培养皿经采样后，在25℃-30℃培养箱中培养，时间不得少于2天。
. A.√. B.×14、在双碟制备时，菌层培养基应放在30℃水浴中保温。
当加入试验菌种混匀后，应尽快加注到底层培养基上. A.√. B.×15、平板菌落计数测定结果只反映在该规定条件下所生长的细菌（为一群嗜中温、需氧和兼性厌氧菌）、霉菌. A.√. B.×16、口服给药制剂，每克细菌数不得超过100 cfu，每ml不得超过1000 cfu。
（）. A.√. B.×17、凝胶限量法在实验前应复核鲎试剂产品的灵敏度和自身凝集时间。
（）. A.√. B.×18、在二剂量检测抗生素效价试验中，等距安置小钢管4个，相对角为不同物质。
（）. A.√. B.×19、在异常毒性检查项目中，选择试验豚鼠的标准为：体重250-350g，同性，健康，清洁级以上。
（）. A.√. B.×20、霉菌、酵母菌计数平板倒置于23-28℃培养箱中培养24 h。
（）. A.√. B.×21、在管碟法测定中，抑菌圈半径受多个因素的影响，如扩散时间和扩散系数。
（）. A.√. B.×22、一般细菌毒素包括内毒素和外毒素。
（）. A.√. B.×23、洁净室（区）的检验人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相应的穿戴方式，外面的衣服不能带进. A.√. B.×主观题24、外源性DNA残留量测定参考答案：外源性DNA残留量测定——基因工程药物原液的检定项目。
采用固相斑点或经国家药品检定机构认可的其他敏感方法测定25、降压物质检查法参考答案：本法原理是利用猫对组胺样物质具有较为敏感的作用，通过静脉给予一定剂量的供试品，观察对麻醉猫血压的影响，以判定26、最小不干扰稀释倍数参考答案：最小不干扰稀释倍数——即对试验不产生干扰的最小的供试品稀释倍数。
27、异常毒性检查参考答案：异常毒性检查——生物制品的非特异性毒性的通用安全试验，通过给动物注射一定剂量的供试品，在规定的期限内观察动物质以及是否存在意外的不安全因素。
28、沉降菌参考答案：沉降菌——用沉降法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。
29、空态参考答案：空态——洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，但是没有生产设备、原材料或人员的状态。
30、药品无菌检查参考答案：药品无菌检查——用于确定要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及要求无菌的其他用品是否染有活菌的一种方法。
31、生物检定法参考答案：生物检定法——利用药物对生物体(整体动物、离体组织、微生物等）的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。
它以药在一定的条件下比较供试品和相当的标准品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的计算，从而测得供试品中活性成分32、可靠性测验又称差异显著性测验。
其测验方法有三种：（只能分析两个样本之间的差异于计数资料的比较，计数资料的相关分析）。
参考答案：t测验；F测验；x2测验<\/p>33、2010版中国药典将空气洁净度分为 A、、、四级。
参考答案：B/C/D34、微生物检定法可分为三类：、、。
参考答案：稀释法、比浊法、琼脂扩散法<\/p>35、用于药品检验的常用标准物质包括、和。
参考答案：国际标准品、国家标准品、工作参照品<\/p>36、在基因工程药物质量分析时，测量蛋白含量常用、测定纯度用和。
参考答案：Lowry法、电泳法、高效液相色谱法37、《中国药典》2010年版主要用以下三种平行线测定的实验设计类型：、、。
参考答案：随机设计、随机区组设计、交叉设计38、各国药典的无菌检查法都包括和两种方法。
前者适用于有抗菌作用或大容量的供参考答案：薄膜过滤法、直接接种法、非抗菌作用39、药品无菌检查的应满足以下四原则：1）正确进行；2）严格进行菌操作工作区与工作台面必须进行验证。
参考答案：样品采集、无菌操作、洁净度40、在基因工程药物质量分析时，测量蛋白含量常用、测定纯度用和。
参考答案：Lowry法、电泳法、高效液相色谱法41、升压物质检查中使用的动物是，使用的麻醉剂乌拉坦，抗凝剂，所用标准品为。
参考答案：大鼠、肝素钠、垂体后叶标准品42、在非灭菌的各种制剂中，微生物限度检查包括染菌量、和。
其中染菌量检查的主要方法参考答案：控制菌检查、活螨检查、平板菌落计数法。
43、2010版中国药典将空气洁净度分为 A、、、四级。
参考答案：B/C/D44、葡萄球菌在血浆凝固酶试验中，阴性对照管的血浆为，阳性对照管为；参考答案：流动自如，血浆凝固，血浆凝固酶试验阳性45、热原是指临床上能总称。
除内毒素引起发热外，还包括参考答案：能使哺乳类动物产生体温异常升高的物质、病毒、干扰素46、抗生素微生物检定法可分为：（1）；（2）；（3）。
参考答案：1. （1）稀释法；（2）比浊法；（3）琼脂扩散法（管碟法和打孔法）47、简述葡萄糖酸锑异常毒性检查的方法。
参考答案：取健康无伤、体重17～25g的小鼠40只或20只,每次试验各鼠间体重相差不得超过3g，随机分为两组，每组20只或10只自尾静脉注入0.02ml标准品溶液或供试品溶液，每只应在4～5秒钟内匀速注射完毕。
立即观察15分钟，记录小鼠死亡数。
48、家兔升温法可以较为直接地反映出药品受热原污染的程度，但仍有许多不足之处，请例举出4条家兔升温参考答案：1）热原的绝对不均一性（不同细菌来源的不一致性），不知道被检测样品中存在的热原到底是哪一种，因此无法确定选择2）家兔经常处于被革兰氏细菌污染的环境中，通过吸入、食入、皮肤，感染了这些细菌，可以说每个家兔在生活中或多或3）热原检查法的灵敏度比较差，主要原因是动物个体之间对热原反应性的差异，特别是边缘产品。
<\/p>4）药品本身的药理活性干扰家兔体温。
<\/p><\/p>49、空气洁净度检查时，对采样点的设置有何要求？参考答案：答：1）可能与产品接触的空气和表面区域；关键区域要比非产品接触区域有较严格监督；3）高数量人员活动处有较严格监置，药瓶灌注线上瓶子的补充，人员常规操作涉及的瓶子的消毒5）建立定期的微生物学监督程序：工作人员接触产品可能期监督50、标准品——参考答案：标准品——与供试品同质、纯度较高、用来测定生物样品效价或活性的样品。
分为国际标准品和国家标准品。
51、如何设置无菌检查的检查项目。
参考答案：答：（1）阴性对照试验：稀释液+培养基，应无菌生长。
（2）阳性对照试验：供试品+阳性对照菌+培养基，应有菌生长。
定；无菌生长，判符合规定52、为什么即使伴随着HPLC等化学分析技术的发展，抗生素微生物检定法目前在各国药典中仍占有重要地位参考答案：答：①微生物检定法可直观、特异地反映出抗生素品种的抗菌活性；②多组分抗生素由于结构与不同活性组分生物活性的差间的关系；③许多抗生素品种由于各种原因如无特征紫外吸收等，目前没有适当的化学分析方法表征其活性，故抗生素微生分析法不可能完全取代微生物检定法。
53、热原——参考答案：热原——指临床上能使哺乳类动物产生体温异常升高的物质总称。
除内毒素引起发热外，还包括病毒，干扰素以及其它种种54、列举需要进行活螨检验的药物剂型。
参考答案：答：大蜜丸、小蜜丸、散剂、块状冲剂、液体制剂及半固体膏剂55、简述管碟法检验流程。
参考答案：a) 配制标准品溶液b) 配制样品溶液c) 制备菌悬液d) 制备平板e) 加样f) 培养g) 测定抑菌圈。
56、简述鲎试剂检测细菌内毒素的实验原理？参考答案：细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖和微量蛋白的复合物，由细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素脊椎动物）血制成用于细菌内毒素检验中与细菌内毒素产生凝集反应的试剂。
细菌内毒素（凝胶法）是通过利用鲎试剂与细法。
57、简述抗生素效价测定中的管碟法的操作步骤。
参考答案：答：1）双碟的制备；2）试品、标准品溶液的制备；3）菌层的制备；4）放置牛津杯；5）滴加抗生素溶液；6）双碟的培养58、简述药品生物检定法的主要任务有哪些。
参考答案：1）药物效价测定；2）有害杂质限度检查3）微量生理活性物质检测4）中药质量控制59、列举5个临床常见基因工程药物。
参考答案：干扰素、胰岛素、促红细胞生成素、粒细胞集落刺激因子、乙肝疫苗等60、若10－1、10－2、10－3的平板上分别长出如下菌落数，试问本次测试药品中的染菌数。
稀释10－128026010－2 29 2810－33 2参考答案：1. 平均值（270）报告数（ 270×10＝2700 ）。