新型原代细胞转染试剂

转染是将核酸导入真核细胞中的过程。

相关实验方案和技术包括转染试剂（脂质体转染、阳离子聚合物转染等）、以及化学法（DEAE-葡聚糖法、磷酸钙法等）或物理方法（如电穿孔、基因枪粒子轰击法、显微注射等）。

其中，转染试剂已然成为实验室细胞转染主流方法。

转染试剂是新一代的阳离子聚合物基因转染试剂，已被广泛应用于体外细胞转染和动物体内转染、众多原代细胞和转化细胞株转染、瞬时转染和稳定转染、贴壁细胞和悬浮细胞转染等。

具有高效转染、细胞毒性很低，不被血清清除、操作简便易行，高重复性等特点。

特点
● 转染效率高
对原代培养细胞HUV-EC有较高的转染效率，而大多数阳离子脂质体对此细胞的转染效率很低。

● 细胞毒性低
在正确的转染方法及条件下，常用的细胞存活率高于90%。

● 试剂不被血清清除，转染操作简单
新型转染试剂不被血清清除，转染时可直接将转染试剂/DNA复合物直接加到细胞培养基中，无需更换培养基质和清洗细胞，整个操作过程可在半小时内完成。

图1.与传统转染实验程序比较
● 适应于体外细胞转染和动物体内转染、众多原代细胞和转化细胞株转染、瞬时转染和稳定转染、贴壁细胞和悬浮细胞转染等。

●新型转染试剂成功转染的部分细胞株：。

lipofectamine3000转染细胞类型摘要：1.介绍Lipofectamine30002.阐述Lipofectamine3000 在转染细胞中的应用3.列举可以被Lipofectamine3000 转染的细胞类型4.总结Lipofectamine3000 在细胞转染中的优势和局限正文：Lipofectamine3000 是一种高效的细胞转染试剂，广泛应用于生物研究和基因治疗领域。

它的主要作用是通过包裹DNA 或RNA，将其有效地导入目标细胞，从而实现基因的转移和表达。

Lipofectamine3000 在转染细胞中的应用非常广泛，几乎可以适用于所有的细胞类型。

无论是常见的哺乳动物细胞，如HEK293、HELA 等，还是难转染的细胞，如神经元、肌肉细胞等，都可以通过Lipofectamine3000 实现高效的转染。

Lipofectamine3000 的使用方法也非常简单，只需要将DNA 或RNA 与Lipofectamine3000 混合，然后加入到细胞培养液中，即可实现转染。

而且，Lipofectamine3000 对细胞的毒性低，对细胞生长和代谢的影响小，因此，可以长期使用。

然而，虽然Lipofectamine3000 可以转染多种细胞类型，但其在实际应用中也有一些局限。

例如，对于一些特殊的细胞类型，如高度分化的细胞，或者对转染试剂敏感的细胞，Lipofectamine3000 可能无法实现有效的转染。

此外，Lipofectamine3000 的转染效率也会受到细胞状态、培养条件等因素的影响。

总的来说，Lipofectamine3000 是一种非常有效的细胞转染试剂，可以广泛应用于各种细胞类型的转染。

PEI细胞转染液是一种广泛应用于实验室的转染试剂，用于将外源DNA或RNA 转染到细胞中。

以下为PEI细胞转染液的标准使用方法：一、准备工作1. 细胞：选择合适的细胞类型，如HEK293、CHO等。

确保细胞状态良好，密度适中。

2. 转染试剂：PEI细胞转染液。

3. 外源DNA或RNA：需转染的基因或表达载体。

4. 实验器材：离心机、显微镜、培养皿、移液器等。

二、操作步骤1. 细胞培养：将细胞接种于适当的培养皿中，用含适当抗生素的培养基培养细胞。

将培养皿放入37℃、5% CO₂的培养箱中，进行细胞培养。

2. 转染液制备：根据实验要求，将PEI细胞转染液按照一定比例稀释。

一般情况下，可以使用10倍稀释的PEI细胞转染液。

3. 转染操作：（1）将稀释后的PEI细胞转染液与外源DNA或RNA混合均匀。

（2）用移液器将混合液滴加到细胞培养皿中，注意不要直接将液体倒在细胞上，以免破坏细胞。

（3）将培养皿轻轻摇晃，使转染液与细胞充分接触。

然后将培养皿放入培养箱中，继续培养。

4. 转染后处理：转染后的细胞需要继续培养，观察转染效果。

根据实验要求，可使用荧光显微镜、实时定量PCR等方法检测转染效果。

三、注意事项1. 操作过程中，应确保实验器材干净无菌，避免污染。

2. 转染过程中，应控制转染液的浓度和滴加速度，避免对细胞造成过度刺激。

3. 转染后，注意观察细胞状态，如出现异常情况，应立即处理。

4. 实验过程中，应遵循实验室安全规定，确保人身安全。

以上为PEI细胞转染液的标准使用方法。

实际操作过程中，可能因实验条件、细胞类型等因素而有所调整。

在实际应用中，请根据具体情况进行操作。

EndoFectin™-CHO 转染试剂■ 产品概述：EndoFectin™ CHO 转染试剂是一种具有专利的阳离子聚合物试剂，它能与核酸形成复合物，并使该复合物进入哺乳动物细胞。

EndoFectin™ CHO 转染试剂专为转染CHO 细胞，并构建稳定的细胞系而设计。

即使在有血清存在的情况下，它仍然能高效的将核酸导入细胞。

GeneCopoeia 公司提供的 EndoFectin™ CHO 转染试剂有如下优点：• 优越的转染效率• 重组蛋白的高表达水平• 与含血清的培养基相兼容• 低细胞毒性• 易于操作■ 成分及储存条件：• 每管含有经过滤除菌的EndoFectin™ CHO 转染试剂• EndoFectin™ CHO 转染试剂 可于常温下运输。

4-8℃密闭保存。

该试剂在4-8℃的条件下，可保持稳定至少12个月。

■ 质量控制：每批EndoFectin™ CHO 均经过转染测试。

我们将eGFP 表达质粒(GeneCopoeia Catalog No. EX-EGFP-Lv01)用EndoFectin™ CHO 转染试剂转入subconfluent HEK-293 细胞。

转染16小时后，超过95%的细胞表达eGFP 。

■ 实验开始前的注意事项：质粒的质量：请务必使用高质量转染级无内毒素的质粒。

通过260nm 光吸收测定DNA 浓度，260nm/280nm 比值确定DNA 纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。

如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

细胞的条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。

确保培养基没有被细菌，真菌或支原体污染。

如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

■ 瞬时转染方法：1. 接种细胞1转染前一天，用胰酶消化细胞并计数。

调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，总体积如表1所示。

每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。

2. 准备DNA/EndoFectin™复合物GeneCopoeia Inc.19520 Amaranth DriveGermantown, Maryland 20874USATel: 301-515-6982; 1-866-360-9531Fax: 301-515-6983Web: GeneCopoeiaTMExpressway to Discovery用于转染核酸到哺乳动物细胞产品套装编号： Z0103储存条件：4℃－8℃保存 产品编号Z01030A Z01030BZ01030C （A*5）包装规格1mL 0.5mL 5 mL地址:广州高新技术产业开发区广州科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器D 区8楼，510663客服电话*************电子信箱:********************网址:该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承担任何责任。

英格恩entranster转染试剂说明书一、产品概述英格恩 Entanster 转染试剂是一种用于转染外源 DNA/RNA 到细胞内的试剂。

它是经过优化的化学试剂组合，可以将外源 DNA/RNA 高效地传递到各种细胞中，并促进其定向表达。

本试剂适用于体外转染实验和基因工程研究，具有高转染效率、低细胞毒性、简单易用等优点。

二、试剂成分英格恩 Entanster 转染试剂主要成分包括转染缓冲液和转染增强剂。

转染缓冲液中包含有机溶剂、非离子表面活性剂等，用于稳定 DNA/RNA与转染剂的结合。

转染增强剂含有具有阴离子表面活性剂、脂质、蛋白质等物质，可以提高细胞膜通透性和转染效率。

三、使用说明1.储存和稀释：试剂应储存于-20℃的冰箱中，保持干燥和避光。

使用前需要将试剂溶解在适当体积的转染缓冲液中，最佳稀释比例为1：9、溶液需充分混匀，离心并去除任何沉淀物。

2.样品准备：在转染前，将目标DNA/RNA溶解在适当的缓冲液中，浓度通常在0.1-1μg/μL最佳。

确保样品充分溶解并无明显沉淀。

3.转染操作：对于已经培养至适当倍数的细胞，将细胞用预先暖和的转染缓冲液洗涤一次，并去除缓冲液。

将转染缓冲液和溶解好的目标DNA/RNA混合，稍微搅拌均匀。

与此同时，将适量的转染增强剂加入到混合物中，充分混合。

然后将混合物直接滴加到细胞上，并轻轻摇晃培养板以确保混合物均匀分布。

4.培养和检测：将含有转染混合物的培养板放回恒温培养箱中，保持恒定的温度和CO2浓度。

培养时间和温度根据需要进行调整，通常在24-48小时后可以进行下一步实验或观察。

四、注意事项1.试剂需保存在干燥、阴凉、避光的环境中，避免结冰或暴露在高温环境中。

2.操作中需佩戴手套并遵循生物安全实验操作规范。

3.使用前需充分摇匀试剂瓶，确保所有试剂成分充分混合均匀。

4.转染缓冲液中的有机溶剂可能对一些细胞有毒性，因此在选择试剂时应参考相关文献或尝试不同的浓度和时间，以确定最佳条件。

转染试剂的作用原理一、转染试剂的基本概念转染试剂是一种用于将外源基因或其他生物分子转移到目标细胞中的化学物质。

转染试剂可以通过物理或化学方法改变细胞的通透性，使外源物质能够进入细胞内，并达到转染的目的。

转染试剂在基因治疗、基因表达研究和细胞工程等领域广泛应用。

二、转染试剂的分类转染试剂按照机理和性质的不同可分为多种类型，常见的转染试剂包括：1.脂质体（Liposome）：脂质体是由磷脂双分子层构成的微小囊泡，可与细胞膜融合，将目标物质转移到细胞中。

2.内源蛋白介导的转染：通过利用特定的蛋白质，如病毒衣壳蛋白或细胞内运输蛋白，将目标物质转移到目标细胞中。

3.阳离子聚合物：阳离子聚合物具有正电荷，能够与负电荷的DNA或RNA结合形成复合物，进而转染入细胞。

4.高分子基质：高分子材料如凝胶、纤维或微球等可用于载体，将目标物质与细胞接触，实现转染。

5.电穿孔：利用电场或离子流导致细胞膜破裂，使目标物质通过细胞膜进入细胞质。

三、脂质体转染试剂的作用原理脂质体是一种常用的转染试剂，其作用原理主要包括以下几个步骤：1.与DNA结合：脂质体通过与目标DNA相互作用，形成脂质体-DNA复合物。

脂质体由于其亲油性能与DNA中的疏水部分相互作用，同时脂质体表面带有正电荷，可以与DNA的负电荷相吸引。

2.细胞摄取：脂质体-DNA复合物与细胞膜结合后，脂质体会在细胞膜上形成微囊泡。

随后，微囊泡与细胞膜融合，释放出脂质体-DNA复合物进入细胞质。

3.脱脂质体：脂质体在细胞质中逐渐失去其亲油性，释放出DNA。

由于脂质体-DNA复合物在细胞膜上的微囊泡中形成的电位差，使得DNA被吸引到细胞核附近。

4.核入：DNA由细胞质进入细胞核，最终与染色体结合或进入细胞核内的胞浆，实现转基因。

四、脂质体转染试剂的优缺点脂质体转染试剂具有一些优点和缺点，需要根据实际应用情况选择使用：优点：1.安全性：脂质体转染试剂大多采用合成非病毒载体，通常比病毒载体更安全，不会引起病毒感染及遗传毒性。

Entranster-RNA转染试剂，⾼效转染EntransterTM-R4000（⽤于将RNA转染⼊动物细胞）使⽤⼿册⼀产品介绍本品推荐⽤于将siRNA、microRNA(miRNA)、mimic、inhibitor等⼩⽚断RNA转染⼊动物细胞（包括各种细胞系、原代细胞、悬浮细胞、昆⾍细胞等）。

本品在多种细胞系的验证中均表现了很好的RNA转染效率，并有很低的细胞毒性，⽽较低的细胞毒性对RNAi实验尤其重要。

⼆重要提⽰1.由于本品细胞毒性很低，所以采⽤本品进⾏转染的细胞数量相对较少，这有助于提⾼转染效率。

2.采⽤本品进⾏转染，RNA⽤质量(ug)进⾏计量，对21nt双链的siRNA来说，1OD=3.0nmol=40ug。

3.siRNA等较短RNA请参照表1中siRNA⽤量，mRNA、shRNA等较长RNA请参照表1中mRNA⽤量。

4.如转染后需要⽤Trizol提取RNA，建议转染后6⼩时换液。

三实验过程（以24孔板siRNA转染为例）1.提前1天细胞种植贴壁细胞：提前⼀天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。

悬浮细胞：采⽤对数⽣长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进⾏转染实验。

如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就⽤2×105的细胞进⾏转染。

2.转染过程⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加⼊⼀定量⽆⾎清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25µl。

注意：⽆⾎清稀释液建议采⽤OPTI-MEM、⽆⾎清DMEM或1640。

⑵取1ul的EntransterTM-R4000，然后加⼊24ul⽆⾎清稀释液体，充分混匀，制成EntransterTM-R4000稀释液，终体积为25µl。

室温静置5分钟。

⑶将EntransterTM-R4000稀释液和RNA稀释液充分混合（可⽤振荡器振荡或⽤加样器吹吸10次以上）混合，室温静置15分钟。

polyplus转染原理
Polyplus转染试剂是一种用于将核酸递送到细胞中的高效工具。

其转染原理主要基于化学法，通过使用阳离子聚合物与核酸形成复合物，从而促进核酸进入细胞。

Polyplus转染试剂中的阳离子聚合物具有多个正电荷，能够与核酸的负电荷相互作用，形成稳定的复合物。

这种复合物能够保护核酸免受酶的降解，并促进其进入细胞。

当复合物与细胞接触时，阳离子聚合物会与细胞膜上的负电荷相互作用，使复合物能够穿过细胞膜进入细胞。

进入细胞后，复合物中的核酸会被释放出来，并进入细胞核中，从而实现基因的表达或抑制。

Polyplus转染试剂的优点在于其高效、快速、方便和易于操作。

它适用于各种细胞类型，包括原代细胞、干细胞和难转染细胞。

此外，Polyplus转染试剂还具有较低的细胞毒性，对细胞的生长和分化影响较小。

总之，Polyplus转染试剂是一种基于化学法的转染工具，通过形成稳定的复合物来促进核酸进入细胞。

其高效、快速、方便和易于操作的特点使其成为生物医学研究中常用的工具之一。

FuGENE®HD转对于表格中未列出的细胞，采用以下步骤进行实验后，可寻找到适用于您所研究细胞的最佳质粒与转染试剂的配比：FuGENE®HD 转染试剂简明操作步骤II. 准备实验所需的细胞、试剂及耗材：•细胞：在合适的培养条件下（建议采用无抗生素培养基，可以含任意比例的血清），实验前细胞系培养至长满60%-80%，原代细胞培养至适当的时间；•转染试剂：使用前，将转染试剂放至室温，颠倒混匀(FuGENE®HD转染试剂储存于4℃，如不慎将FuGENE®HD冰冻，融化后可能会看到不溶物。

这时可将试剂短暂升温至37℃，颠倒混匀后不溶物消失)；•质粒：携带报告基因或荧光蛋白的质粒，用于计算转染效率;•无菌、无血清培养基：用于配制质粒与转染试剂的混合物；•无菌的枪头、离心管，超净工作台等。

简易流程图培养细胞至60%-80%融合度配制质粒与转染试剂的混合物混合物加入培养的细胞中检测，计算转染效率I I I.操作步骤1.将无血清培养基预热至室温，按下表的比例配制质粒与转染试剂的混合物：FuGENE®HD与质粒DNA的比例4:1 3.5:13:1 2.5:12:1 1.5:1培养基100μl100μl100μl100μl100μl100μl质粒2μg2μg2μg2μg2μg2μg FuGENE®HD8μl7μl6μl5μl4μl3μl注意：FuGENE®HD应直接加入培养基中，不用沾到离心管的管壁上2.混合物室温静置10-15 min。

3.将混合物滴加至培养的细胞中，96孔板每孔加入5µl，其他孔板的加入量可以按照右侧的表格进行计算。

摇晃或吹打混匀。

继续培养24-48 hr。

4.检测转染效率。

进行报告基因检测或计数表达绿色荧光蛋白的细胞数目，确定最佳的质粒与转染试剂的比例。

注：FuGENE®HD转染试剂对细胞几乎没有毒性，遇到特别难转染的细胞，希望提高转染效率时，可以将混合物的加入量加倍至10μl/孔或15μl/孔（96孔板，其他培养板按培养面积放大）。

上海opti-mem转染试剂原理上海opti-mem转染试剂是一种常用于细胞转染实验中的试剂，它可以帮助研究人员将外源DNA分子有效地引入到目标细胞中。

该试剂采用了一种特殊的化学方法，通过改变细胞膜的通透性，使得外源DNA能够穿过细胞膜进入到细胞质中。

下面是关于上海opti-mem转染试剂原理的详细介绍：1. 上海opti-mem转染试剂的成分：上海opti-mem转染试剂主要由两部分组成：脂质体和DNA复合物。

脂质体是由一种正离子表面活性剂（如聚乙烯亚胺或脂肪酸酯化合物）和胆固醇等组分构成的，它们能够与DNA形成可逆的复合物。

DNA复合物则是由目标DNA分子与脂质体形成的复合物，通过这种复合物，外源DNA能够进入到细胞内。

2. 上海opti-mem转染试剂的作用机制：-第一步，脂质体与DNA复合物的形成：脂质体与目标DNA形成可逆的复合物，这个过程主要是通过静电相互作用来进行的。

脂质体中的正带电离子通过与DNA的负带电离子相互作用，使得DNA与脂质体相结合。

-第二步，脂质体与细胞膜的结合：通过与细胞膜上的负带电成分相互作用，脂质体能够与细胞膜上的带电成分相结合。

这种结合主要是通过静电相互作用来实现的。

-第三步，细胞膜的改变：脂质体与细胞膜结合后，会改变细胞膜的组织结构和特性，使得细胞膜的通透性增加。

这个过程中，细胞膜上的磷脂分子会发生重新排列和重新组装，从而改变了细胞膜的通透性。

-第四步，外源DNA的进入：由于细胞膜的通透性增加，外源DNA能够通过细胞膜进入到细胞质中。

一旦进入到细胞质中，外源DNA就能与细胞内的各种分子（如细胞核、细胞器等）相结合，从而实现转染。

综上所述，上海opti-mem转染试剂通过改变细胞膜的通透性，使得外源DNA能够进入到细胞中，并与细胞内的各种分子相结合。

这种转染试剂具有简单、高效、可靠等特点，被广泛应用于各种细胞转染实验中。

聚焦转染：8大品牌转染试剂强中强[选购宝典]生物通技术专评：数百万年来原核生物如大肠杆菌就经常相互分享它们的遗传物质的——受到自然的启发，出现了将DNA导入哺乳动物培养细胞的技术——这是分子生物学的又一个重要的里程碑。

也多谢这种技术的不断进步，我们终于可以在各种哺乳动物细胞中进行各种克隆化基因的表达，从而达到不同的目的－－比如，生产制备大量经过真核特有的翻译后加工的活性蛋白；研究表达蛋白的结构和生化特性；研究基因表达的调控机理；甚至调控基因的表达等等。

可以说在哺乳动物细胞中表达外源基因的2个关键：一个是选择构建合适的表达载体和表达细胞株，另一个就是选择合适的方法将克隆的基因导入培养细胞中进行表达。

转染技术的广泛使用促进了人们对外源基因在哺乳动物细胞中的表达等方面的认识，并在方法学上促进了该领域及相关领域的发展。

从磷酸钙到脂质体，到多胺，可用于转染的细胞种类已越来越多，转染试剂也不断更新换代，而转染也不再仅限于将DNA转入细胞中了，RNA，siRNA，蛋白质等等生物大分子也进入了转染的行列。

在纷纭的产品中，你会选择哪种转染试剂？生物通这个转染试剂专辑希望为大家介绍市面上主流的转染试剂和各自的个性特点和适用范围－－可以说，针对不同的细胞株，不同的转染实验目的，还有不同的转染要求，很难找到一种能满足所有的要求，十全十美的产品。

你需要一一尝试和优化条件——但是了解市面上各种产品的特点与长短，无论是对于转染新手，或者是“老革命遇到新问题”，都是有益的。

在生物通这个转染试剂专辑系列我们将分别介绍国外几个经典好用的王牌产品，以及国内物美价廉的后起之秀，以及总结一些使用心得和注意事项。

如果你有自己的心得并愿意和大家分享，欢迎投稿生物通哦:)一、打开转染之门：基本概念作为篇首还是要把老调调再弹弹。

请原谅我有点“唐僧”的回顾几种经典转染方法。

DEAE-葡聚糖（Diethylaminoethyl (DEAE)-dextran）：这个早在1965年出现的转染方法差不多是最古董级的方法之一了，直到现在竟然还有少数人坚持采用。

NeoFect是一种用于将DNA或RNA转染到真核细胞中的转染试剂。

以下是一个简化的、假设性的NeoFect转染试剂说明书的中文翻译，请注意，这不是官方翻译，仅供参考。

实际使用时，请参考随产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）。

---NeoFect转染试剂说明书【产品名称】通用名：转染试剂商品名：NeoFect【成分】主要成分为阳离子脂质体，用于促进核酸分子与细胞膜的融合。

【性状】本品为透明至微浑浊的液体，通常以小瓶或多孔板包装。

【适应症】用于科研实验中，将DNA或RNA高效转染到哺乳动物细胞中，以进行基因表达、基因沉默、基因编辑等研究。

【使用方法】1. 准备待转染的细胞和核酸溶液（DNA或RNA）。

2. 根据实验设计，将适量的NeoFect转染试剂加入无血清培养基中，轻轻混匀。

3. 将核酸溶液加入含有NeoFect的培养基中，轻轻混匀，室温孵育15-30分钟。

4. 将混合物加入到细胞培养皿中，轻轻摇晃使混合均匀。

5. 根据细胞类型和实验目的，孵育一定时间后更换为完全培养基继续培养。

【不良反应】本品仅供实验室使用，不适用于临床治疗。

【禁忌】对本品成分过敏者禁用。

【注意事项】1. 使用前请检查试剂是否清澈，如有沉淀或颜色变化请勿使用。

2. 避免反复冻融，分装后请立即使用。

3. 使用过程中请遵守实验室安全操作规程，佩戴适当的个人防护装备。

4. 请在无RNA酶和DNA酶的环境中操作RNA转染实验。

5. 转染效率受多种因素影响，如细胞状态、核酸浓度、孵育时间等，建议优化实验条件。

【贮藏】存放于4°C冰箱中，避免冷冻。

【有效期】请参考包装标签上的说明。

【生产批号】见包装标签。

【生产企业】（请填写生产企业名称和联系方式）---以上信息仅供参考，实际使用时请遵循产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）的内容。

在操作前，务必了解所有相关的安全和健康信息。

A549细胞转染操作说明货 号：11011: 0.5ml11012: 1.0ml 储存条件：-20℃11013: 1.5ml产品特点 应 用产品介绍RFect 小核酸转染试剂是国际知名科学家崔坤元博士领导我公司研发团队在美国西雅图实验室研发成功的一种新型的小核酸转染试剂。

RFect 可用来转染siRNA 、antisense RNA 、microRNA 等200bp 以内的小分子RNA 和DNA ，转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞，如一般细胞株、肿瘤细胞株等。

目前，无论国外还是国内，转染试剂的主要成分均为脂质体或聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI)，这两种成分都具有很大的细胞毒性，并且转染效果不好。

RFect 采用新型的动物源性的纳米材料，毒性很低并且拥有非常卓越的转染性能。

与其它品牌的小核酸转染试剂相比，RFect 的细胞转染阳性率一般在90%以上，Lamin A/C 基因抑制效率在95%以上，而其它品牌转染试剂的细胞转染阳性率一般不超过70%，Lamin A/C 基因抑制效率不超过75%。

RFect 细胞毒性很低，转染细胞死亡率不到10%，而其它品牌试剂的转染细胞死亡率一般在30%以上。

血清对转染效果没有影响，不必刻意添加或更换培养液。

有关RFect 小核酸转染试剂的材料合成和试剂配制我们已申请了国际专利，并通过PCT 覆盖国际上多个国家和地区。

操作步骤：本说明书适用于24孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。

A. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔 500 μl 培养基（不可加抗生素），使细胞在转染时密度在30-50% 。

B. siRNA-RFect 混合物准备：1. 6pmol siRNA 用50μl 无血清培养基稀释。

2. 2μl RFect 用50μl 无血清培养基稀释。

轻轻混匀，室温孵育5min 。

注意：确保在25 min 内执行第三步操作，不要过于延迟。

RNAi-Mate转染试剂操作详细步骤及方法RNAi-Mate转染试剂适用于核酸的体外操作,可应用于DNA,RNA,反义寡核苷酸,siRNA等转染,也可用于DNA/siRNA共转染操作。

应用领域◆原代培养细胞和转化细胞株的基因转染; ◆siRNA高通量转染试验; ◆DNA转染; ◆DNA和siRNA共转染; ◆贴壁细胞和悬浮细胞转染。

特点◆不必更换培养基,操作简便易行,重复性好,可在半小时内完成操作介导siRNA高效转染细胞; ◆在含血清培养基中也能表现高转染效率; ◆可在室温下运输,在-20℃下可长期保存; ◆适用细胞广泛:即用型试剂,可在含有抗生素的完全培养基中转染,操作简便; ◆确保无RNase污染。

体外转染方法1. 细胞培养可广泛应用于多种细胞系的DNA和siRNA转染。

已成功地应用于多种代表各种细胞类型,包括Hela(人宫颈癌细胞), MCF-7(人乳腺癌细胞), Hep3B(人肝细胞癌细胞), COS-7(猴肾细胞), Neuro-2a(鼠神经母细胞瘤细胞),NIKS(人角质化细胞),C6(鼠神经胶质瘤细胞), DLD-1(人结肠癌细胞), NIH/3T3(鼠胚胎成纤维细胞), HT-29(人结肠腺癌细胞), A549(人肺癌细胞), CHO-k1(仓鼠卵巢细胞)和293(腺病毒5 DNA转化的人胚胎肾细胞), SVRbag4细胞。

建议在转染实验开始前,将细胞培养在细胞板上,加入合适的培养基,在24小时内使细胞汇合达到70-90%。

2. 选择合适的RNAi-Mate: siRNA/DNA比例合适的siRNA(DNA):RNAi-Mate比例对核酸的高效转染有重要影响; 我们推荐的DNA:RNAi-Mate为1:0.5-1:5(μg:μl), siRNA:RNAi-Mate为1:0.01-1:0.1(pmol:μl)一般情况下, 此范围内都可获得高的转染效率。

3.贴壁细胞转染程序本程序适用于使用24孔板贴壁培养细胞的转染。

lipofectamine3000转染细胞类型在细胞学和分子生物学领域，转染是一项重要的实验技术，用于将外源基因或其他生物分子引入细胞内。

转染细胞类型的选择是研究的关键因素之一，不同的细胞类型对转染反应的敏感性和效果可能存在差异。

其中，lipofectamine3000是一种常用的转染试剂，广泛应用于多种细胞类型的转染实验中。

一、lipofectamine3000转染细胞的选择转染技术是研究重要生物过程、基因治疗等领域的基础，而转染细胞的选择决定了实验结果的准确性和可靠性。

lipofectamine3000转染具有高效、低毒性的特点，适用于多种细胞类型的转染。

1. 恶性肿瘤细胞系恶性肿瘤细胞系由癌症组织中获得，具有不受限制的增殖和转移能力。

常见的恶性肿瘤细胞系如HeLa、A549、PC-3等，是lipofectamine3000转染的理想细胞类型。

通过转染外源基因到这些细胞中，可以研究癌症相关的基因功能、信号通路等，对于阐明癌症的发生机制具有重要意义。

2. 原代细胞原代细胞是从组织或器官中直接分离和培养的细胞，更接近体内的真实情况，因此在转染实验中具有重要的应用价值。

由于原代细胞对外源分子的敏感性较低，因此lipofectamine3000转染是一种常用的转染方法。

比如，使用lipofectamine3000转染外源基因到小鼠心肌细胞中，可以研究心脏发育、心血管疾病等相关领域。

3. 干细胞干细胞具有自我更新和多向分化能力，是研究再生医学和干细胞治疗的重要对象。

通过lipofectamine3000转染外源基因到干细胞中，可以实现基因编辑、基因修饰等操作，为干细胞研究提供了有效的工具。

二、lipofectamine3000转染的优点及注意事项1. 高效转染lipofectamine3000转染技术在很大程度上改善了传统转染试剂的低转染效率问题。

它采用三元复合物形成的转染体系，能够显著提高转染效率并减少细胞毒性。

2024年转染试剂市场规模分析引言转染试剂是生物科学研究中常用的试剂之一，用于将外源基因或分子导入目标细胞中。

随着基因工程和细胞治疗的快速发展，转染试剂市场也呈现出蓬勃的增长态势。

本文将对转染试剂市场规模进行分析。

转染试剂市场现状转染试剂市场目前呈现出稳定增长的趋势。

传统的转染试剂主要包括化学转染试剂和病毒转染试剂，它们在基础生物学研究、药物筛选和基因治疗等领域得到广泛应用。

随着细胞治疗和基因编辑技术的迅速发展，转染试剂市场规模进一步扩大。

市场规模分析根据市场研究数据显示，转染试剂市场规模持续增长。

预计到2025年，全球转染试剂市场规模将达到X亿美元。

这一增长主要受到以下因素的推动：1. 科学研究的推动转染试剂在科学研究中起着重要作用，各领域的科学家需要使用转染试剂进行实验。

随着科研项目的增加和研究经费的增加，转染试剂市场也得到了良好的发展。

2. 生物制药的发展生物制药领域对转染试剂的需求日益增长。

随着生物药物的快速发展，转染试剂在药物研发和生产过程中扮演着重要角色。

生物制药企业的增多促进了转染试剂市场的扩大。

3. 医学应用的拓展基因治疗是转染试剂市场的重要驱动力之一。

随着基因治疗技术的不断革新，转染试剂在基因治疗过程中发挥着关键作用。

临床试验的进展以及基因治疗的商业化应用都为转染试剂市场带来了新的机遇。

市场前景展望转染试剂市场在未来有着广阔的发展前景。

随着基因编辑和CAR-T细胞治疗等技术的成熟，转染试剂的应用领域将进一步扩展。

此外，人工智能、高通量筛选等新技术的发展也将推动转染试剂市场的增长。

预计未来几年，转染试剂市场将保持稳定增长，并对生物科学研究和医学治疗做出更大贡献。

结论转染试剂市场正处于快速增长阶段，未来有望持续保持良好发展。

科研领域的推动、生物制药的发展以及基因治疗的应用都是市场增长的重要驱动力。

对于转染试剂制造商和相关企业来说，积极抓住市场机遇，并不断提升产品质量和研发能力，将有助于取得更大的市场份额。

转染原代BMDM细胞技术分享影响影子：IF:12.40发表期刊:TheranosticsDoi:10.7150/thno.66420原文标题：5-aza-2′-deoxycytidine potentiates anti-tumor immunity in colorectal peritonealmetastasis by modulating ABC A9-mediated cholesterol accumulation in macrophages。

背景：5-aza-2'-脱氧胞丁胺（5AZA），是一种DNA甲基转移酶（DNMT）抑制剂，可激活肿瘤适应性免疫，抑制肿瘤进展。

然而，5Aza调节肿瘤免疫微环境的分子机制仍不完全清楚。

方法：研究了5AZA在结直肠癌（CRC）的腹膜癌（PC）免疫微环境中的作用。

通过流式细胞仪，实时PCR，Western印迹测定法和药物亲和力响应靶标稳定性（DARTS）研究了5AZA对巨噬细胞激活的影响。

5AZA对CRC患者的基质巨噬细胞和T细胞中验证了5AZA对肿瘤免疫力的影响。

结果：5Aza可以刺激巨噬细胞向M1样表型的激活，并随后刺激转移前脂肪组织中T细胞的激活，最终抑制免疫功能小鼠模型中的CRC-PC。

从机制上讲，5Aza刺激原代小鼠巨噬细胞向M1样表型发展，其特征是p65磷酸化和IL-6表达增加。

此外，我们筛选并鉴定了ATP结合盒转运蛋白A9（ABC A9）作为5Aza 的结合靶标。

5Aza以ABC A9依赖的方式诱导胆固醇积累、p65磷酸化和IL-6表达。

NF-κB的药理学抑制或IL-6的遗传耗竭消除了5Aza在小鼠中的抗肿瘤作用。

此外，常规化疗药物5-Fu或OXP协同增强了5Aza的抗肿瘤作用。

最后，我们验证了5Aza在CRC患者基质巨噬细胞和T细胞抗肿瘤免疫中的重编程作用。

结论：综上所述，我们的发现首次表明5AZA通过调节巨噬细胞依赖性的T细胞激活前分散微环境中抑制了CRC-PC，同时抑制了CRC-PC。

产品使用说明书NanoJuice TM转染试剂盒试剂盒简介以下货号试剂和试剂盒均可参照此说明书操作：建议同时参考本说明书英文原文（说明书编号TB496）。

NanoJuice™转染试剂盒：货号71902-3，71902-4NanoJuice核心转染试剂：1ml，货号71900-3NanoJuice转染增强试剂：1ml，货号71901-3NanoJuice™转染试剂盒结合了纳米技术的最新成就Priostar® dendrimers （树枝状聚合物）和一种广泛认证过的多价阳离子脂质体，是一种新型的哺乳动物细胞转染试剂。

这种独特的设计使提高转染效率和降低细胞毒性都得到最好的优化，特别适合那些难以转染的细胞，包括原代细胞，已经成功用于Saos-2，Caco-2，HUVEC，Jurkat， Raw 264.7，HeLa等常见“顽固抵抗转染”的细胞品种。

转染的具体条件因哺乳动物细胞品种不同而有很大差别。

原代细胞和其它一些常见难转染细胞的转染尤其需要通过细致地摸索条件才能获得满意的转染效果。

而目前市场上的转染试剂均为单一组分，优化的可能很有限。

Novagen新上市的NanoJuice转染试剂盒由两种组分构成：NanoJuice核心转染试剂和NanoJuice转染增强试剂。

两种试剂的不同配比，以及混合的转染试剂与质粒DNA配比的调节，极大程度地方便了特定细胞转染条件的优化。

实验证明NanoJuice转染试剂盒可以获得比传统的脂质体和树枝状聚合物都要更好的转染效率。

这个试剂盒还有一些优点，包括：•细胞毒性低•转染时不必去除培养基，操作简便，适合高通量转染操作•试剂原料为非动物来源•与含血清和不含血清的培养基兼容•灵活调整核心转染试剂和增强试剂的比例，方便获得特定细胞的最佳转染配方•适合用于瞬时和稳定转染NanoJuice试剂盒足够用于24孔板240次（货号71902-3）或2400次（货号71902-4）转染。