RFectPM原代细胞小核酸转染试剂说明书

上海捷门生物技术有限公司RF检测试剂盒说明书
类风湿因子（RF）科研检测试剂盒组成结构：
1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。

1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

1000×g离心10分钟，取上清液。

5、类风湿因子（RF）科研检测试剂盒保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。

尽可能的不要使用溶血或高血脂血。

如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。

不要在37℃或更高的温度加热解冻。

应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

类风湿因子（RF）科研检测试剂盒注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。

2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

3. 一次加样时间X好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线，X好做复孔。

5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请
X后乘以稀释倍数。

6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。

7. 底物请避光保存。

8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

RFect SP 悬浮细胞小核酸转染货 号：BIOG-11024: 0.5mlBIOG-11025: 1.0ml 储存条件：-20℃BIOG-11026: 1.5ml产品特点产品介绍RFect SP 悬浮细胞小核酸转染试剂是我公司研发团队在RFect PM 原代细胞小核酸转染试剂的基础上加以改进研发成功的专门用于悬浮细胞小核酸转染的试剂。

RFect SP 可用来转染siRNA 、antisense RNA 、microRNA 等200bp 以内的小分子RNA 和DNA ，可转染绝大多数悬浮细胞。

目前，无论国外还是国内，悬浮细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的悬浮细胞小核酸转染试剂。

RFect SP 能够高效转染绝大多数悬浮细胞，获得比较理想的基因敲除效果。

对于大多数悬浮细胞，RFect SP 的细胞转染阳性率都在75%以上，而转染细胞死亡率不到10%。

RFect SP 的使用也极其简便，先将sRNA 与RFect SP 室温混合，再将siRNA-RFect SP 混合物直接加入含培养基的细胞，血清对转染效果没有影响，不必刻意添加或更换培养液。

操作步骤：本说明书适用于24孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。

A. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔 500 μl 培养基（不可加抗生素），使细胞在转染时密度在30-40% 。

B. siRNA-RFect SP混合物准备：1. 6pmol siRNA 用50μl 无血清培养基稀释。

2. 2μl RFect SP 用50μl 无血清培养基稀释。

轻轻混匀，室温孵育5min 。

注意：确保在25 min 内执行第三步操作，不要过于延迟。

3. 孵育5min 后，将siRNA 稀释液与RFect MN 稀释液混合（总体积100μl ）。

轻轻混匀，室温孵育20 min 。

C. 将混合物加到培养的细胞内（完全培养基培养）：转染实验优化: 为了提高转染效率，最好对转染条件进行优化，特别是首次使用。

PEI细胞转染液是一种广泛应用于实验室的转染试剂，用于将外源DNA或RNA 转染到细胞中。

以下为PEI细胞转染液的标准使用方法：一、准备工作1. 细胞：选择合适的细胞类型，如HEK293、CHO等。

确保细胞状态良好，密度适中。

2. 转染试剂：PEI细胞转染液。

3. 外源DNA或RNA：需转染的基因或表达载体。

4. 实验器材：离心机、显微镜、培养皿、移液器等。

二、操作步骤1. 细胞培养：将细胞接种于适当的培养皿中，用含适当抗生素的培养基培养细胞。

将培养皿放入37℃、5% CO₂的培养箱中，进行细胞培养。

2. 转染液制备：根据实验要求，将PEI细胞转染液按照一定比例稀释。

一般情况下，可以使用10倍稀释的PEI细胞转染液。

3. 转染操作：（1）将稀释后的PEI细胞转染液与外源DNA或RNA混合均匀。

（2）用移液器将混合液滴加到细胞培养皿中，注意不要直接将液体倒在细胞上，以免破坏细胞。

（3）将培养皿轻轻摇晃，使转染液与细胞充分接触。

然后将培养皿放入培养箱中，继续培养。

4. 转染后处理：转染后的细胞需要继续培养，观察转染效果。

根据实验要求，可使用荧光显微镜、实时定量PCR等方法检测转染效果。

三、注意事项1. 操作过程中，应确保实验器材干净无菌，避免污染。

2. 转染过程中，应控制转染液的浓度和滴加速度，避免对细胞造成过度刺激。

3. 转染后，注意观察细胞状态，如出现异常情况，应立即处理。

4. 实验过程中，应遵循实验室安全规定，确保人身安全。

以上为PEI细胞转染液的标准使用方法。

实际操作过程中，可能因实验条件、细胞类型等因素而有所调整。

在实际应用中，请根据具体情况进行操作。

RFect 小核酸转染试剂货 号：11011: 0.5ml11012: 1.0ml 储存条件：-20℃11013: 1.5ml产品特点 应 用产品介绍RFect 小核酸转染试剂是国际知名科学家崔坤元博士领导我公司研发团队在美国西雅图实验室研发成功的一种新型的小核酸转染试剂。

RFect 可用来转染siRNA 、antisense RNA 、microRNA 等200bp 以内的小分子RNA 和DNA ，转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞，如一般细胞株、肿瘤细胞株等。

目前，无论国外还是国内，转染试剂的主要成分均为脂质体或聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI)，这两种成分都具有很大的细胞毒性，并且转染效果不好。

RFect 采用新型的动物源性的纳米材料，毒性很低并且拥有非常卓越的转染性能。

与其它品牌的小核酸转染试剂相比，RFect 的细胞转染阳性率一般在90%以上，Lamin A/C 基因抑制效率在95%以上，而其它品牌转染试剂的细胞转染阳性率一般不超过70%，Lamin A/C 基因抑制效率不超过75%。

RFect 细胞毒性很低，转染细胞死亡率不到10%，而其它品牌试剂的转染细胞死亡率一般在30%以上。

血清对转染效果没有影响，不必刻意添加或更换培养液。

有关RFect 小核酸转染试剂的材料合成和试剂配制我们已申请了国际专利，并通过PCT 覆盖国际上多个国家和地区。

操作步骤：本说明书适用于24孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。

A. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔 500 μl 培养基（不可加抗生素），使细胞在转染时密度在30-50% 。

B. siRNA-RFect 混合物准备：1. 6pmol siRNA 用50μl 无血清培养基稀释。

2. 2μl RFect 用50μl 无血清培养基稀释。

轻轻混匀，室温孵育5min 。

注意：确保在25 min 内执行第三步操作，不要过于延迟。

ribo SCRIPT TM mRNA/lncRNA qRT-PCR Starter Kit使用说明RN：R11088.2产品简介ribo SCRIPT TM mRNA/lncRNA qRT-PCR Starter Kit是研究基因表达变化的通用检测方法。

然而，与mRNA 不同的是，lncRNA 表达水平相对较低，通常需要进行多个要素的系统优化才能准确地检测分析。

ribo SCRIPT TM mRNA/lncRNA qRT-PCR Starter Kit是锐博生物推出的基于SYBR Green I 嵌合荧光法的qRT-PCR 试剂盒，其包含已优化浓度的RT 酶，Taq 酶，缓冲液，SYBR Green I 荧光染料，RT引物和内参qPCR引物，仅需结合推荐浓度的qPCR引物即可实现mRNA或lncRNA表达情况的快速、高效、准确的检测。

运输保存产品需低温运输。

收到产品后，请于-20℃保存，可以稳定保存一年。

使用前须知使用前请瞬时离心，以免制品粘附于管壁或管盖上，造成损失或污染。

血浆/血清/外泌体的mRNA/lncRNA qPCR检测需要在提取RNA前加入外参。

实验方法1. mRNA/lncRNA RT反应1）取Random Primer (200µM) 和Oligo (dT) 18 (25µM)，恢复至室温，振荡混匀。

2以上体系混匀后，瞬时离心，RT反应程序为：42℃60 min，70℃10 min。

注：1）Random Primer和Oligo (dT)混合使用，可以高效合成cDNA。

实验目的不同，也可以用单引物或者基因特异性RT引物，使用量如下：2）RT反应结束后请立即将cDNA产物取出，快速置于冰上冷却备用或-20度以下保存；3）体系可按照实验需求等比放大，20μL反应体系建议不超过5μg的Total RNA。

2. mRNA/lncRNA qPCR反应1）SYBR Green Mix：包括Taq酶、dNTP mix、PCR Buffer、SYBR Green Ⅰ等。

FuGENE6（Roche）转染步骤:转染前一天将细胞分至培养板，转染当天细胞应50-80％融合。

将细胞以1-3×105/2ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。

将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。

使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。

1.在PCR管中加入不含血清和双抗的营养液以稀释FuGENE6，直至总体积到100ul。

2.将3-6ul FuGENE6 Reagent直接加入营养液，轻弹管壁混合。

3.加入1-2ug的DNA溶液（0.02－2.0ug/ul），轻弹管壁混合。

4.室温孵育20分钟。

5.将6孔板中的旧营养液吸出，加入约1ml不含血清和双抗的营养液洗涤一次，再加入2ml不含血清和双抗的营养液。

6.将转染复合物加入细胞，混匀使之均匀分布。

7.3-8小时后，加入血清或换成含血清的营养液。

Lipofectamine 2000(Invitrogen)转染试剂转染步骤（6孔板）：1.转染前一天，胰酶消化细胞并计数，细胞铺板，使其在转染日密度为90-95％。

细胞铺板在2ml含血清，不含抗生素的正常生长的培养基中。

2.对于每孔细胞，使用250ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释4.0ugDNA，轻轻混匀。

3.使用前将Lipofectamine 2000转染试剂轻轻混匀，用250ul无血清培养基（如OPTI-MEM I培养基）稀释10ul Lipofectamine 2000转染试剂，轻轻混匀。

Lipofectamine 2000稀释后，在5分钟内同稀释的DNA混合（<30分钟）。

NOTE：若使用DMEM培养基，则需在5分钟内同稀释的DNA混合。

4.混合稀释的DNA（第二步）和稀释的Lipofectamine 2000（第三步）。

室温放置20分钟。

5.（optional）将6孔板中的旧营养液吸出，用无血清培养基清洗两次。

加入2ml无血清配养基。

NeoFect是一种用于将DNA或RNA转染到真核细胞中的转染试剂。

以下是一个简化的、假设性的NeoFect转染试剂说明书的中文翻译，请注意，这不是官方翻译，仅供参考。

实际使用时，请参考随产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）。

---NeoFect转染试剂说明书【产品名称】通用名：转染试剂商品名：NeoFect【成分】主要成分为阳离子脂质体，用于促进核酸分子与细胞膜的融合。

【性状】本品为透明至微浑浊的液体，通常以小瓶或多孔板包装。

【适应症】用于科研实验中，将DNA或RNA高效转染到哺乳动物细胞中，以进行基因表达、基因沉默、基因编辑等研究。

【使用方法】1. 准备待转染的细胞和核酸溶液（DNA或RNA）。

2. 根据实验设计，将适量的NeoFect转染试剂加入无血清培养基中，轻轻混匀。

3. 将核酸溶液加入含有NeoFect的培养基中，轻轻混匀，室温孵育15-30分钟。

4. 将混合物加入到细胞培养皿中，轻轻摇晃使混合均匀。

5. 根据细胞类型和实验目的，孵育一定时间后更换为完全培养基继续培养。

【不良反应】本品仅供实验室使用，不适用于临床治疗。

【禁忌】对本品成分过敏者禁用。

【注意事项】1. 使用前请检查试剂是否清澈，如有沉淀或颜色变化请勿使用。

2. 避免反复冻融，分装后请立即使用。

3. 使用过程中请遵守实验室安全操作规程，佩戴适当的个人防护装备。

4. 请在无RNA酶和DNA酶的环境中操作RNA转染实验。

5. 转染效率受多种因素影响，如细胞状态、核酸浓度、孵育时间等，建议优化实验条件。

【贮藏】存放于4°C冰箱中，避免冷冻。

【有效期】请参考包装标签上的说明。

【生产批号】见包装标签。

【生产企业】（请填写生产企业名称和联系方式）---以上信息仅供参考，实际使用时请遵循产品附带的正式说明书和安全数据表（SDS）的内容。

在操作前，务必了解所有相关的安全和健康信息。

A549细胞转染操作说明货 号：11011: 0.5ml11012: 1.0ml 储存条件：-20℃11013: 1.5ml产品特点 应 用产品介绍RFect 小核酸转染试剂是国际知名科学家崔坤元博士领导我公司研发团队在美国西雅图实验室研发成功的一种新型的小核酸转染试剂。

RFect 可用来转染siRNA 、antisense RNA 、microRNA 等200bp 以内的小分子RNA 和DNA ，转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞，如一般细胞株、肿瘤细胞株等。

目前，无论国外还是国内，转染试剂的主要成分均为脂质体或聚乙烯亚胺(Polyethylenimine, PEI)，这两种成分都具有很大的细胞毒性，并且转染效果不好。

RFect 采用新型的动物源性的纳米材料，毒性很低并且拥有非常卓越的转染性能。

与其它品牌的小核酸转染试剂相比，RFect 的细胞转染阳性率一般在90%以上，Lamin A/C 基因抑制效率在95%以上，而其它品牌转染试剂的细胞转染阳性率一般不超过70%，Lamin A/C 基因抑制效率不超过75%。

RFect 细胞毒性很低，转染细胞死亡率不到10%，而其它品牌试剂的转染细胞死亡率一般在30%以上。

血清对转染效果没有影响，不必刻意添加或更换培养液。

有关RFect 小核酸转染试剂的材料合成和试剂配制我们已申请了国际专利，并通过PCT 覆盖国际上多个国家和地区。

操作步骤：本说明书适用于24孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。

A. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔 500 μl 培养基（不可加抗生素），使细胞在转染时密度在30-50% 。

B. siRNA-RFect 混合物准备：1. 6pmol siRNA 用50μl 无血清培养基稀释。

2. 2μl RFect 用50μl 无血清培养基稀释。

轻轻混匀，室温孵育5min 。

注意：确保在25 min 内执行第三步操作，不要过于延迟。

NEOFECT™ DNA transfection reagent使用说明一产品介绍Neofect™ DNA transfection reagent 是由零客创智（北京）生物科技有限公司研发合成的以非脂阳离子聚合物为主的转染试剂，是新一代非病毒转染试剂。

可以与DNA 形成稳定的复合物，透过细膜进入细胞内，并保护DNA 免受核酸酶的降解。

该试剂对细胞毒性很小，可在含血清与抗生素的完全养基中充分发挥作用。

对多数培养细胞都有较高的转染效率（不同种类细胞的转染效率可有明显差异）本品推荐用于贴壁动物细胞的转染，用于质粒等DNA的转染。

二产品特征高效、低毒、广谱、操作简单。

三实验流程（以6孔板为例）1．细胞铺板提前一天将细胞种植在六孔板中，以转染时细胞密度在60%-80%为宜。

2．转染过程(1) 在转染前2小时，移除细胞上原有的培养基，换为新鲜的完全培养基。

(2) 将2µg质粒DNA用100 μL无血清稀释液稀释，充分混匀后制成DNA稀释液。

注意：无血清稀释液建议采用Opti-MEM，无血清DMEM或150 mM NaCl溶液。

(3) 向DNA稀释液中直接加入2 μL Neofect™，轻柔混匀，室温静置15-30分钟。

转染复合物制备完成(4) 将转染复合物加入细胞培养基中，轻柔混匀。

(5) 继续培养24-48小时，收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。

(table.1)不同细胞培养容器转染用量四储存与安全本品常温运输，储存于4℃，有效期12个月。

五使用限制本转染试剂仅限于科研用途。

注：1）本产品对细胞非常温和，一般情况下转染后无需进行换液操作2）使用本产品转染后，一般在24小时开始进入表达高峰期，36小时到48小时达到表达高峰，相对于脂质体转染试剂，达到峰值的时间延后约6到12小时。

Attractene Transfection Reagent: 一种高效的基因转染工
具
在生命科学领域，基因转染是一种重要的技术，用于将外源性核酸分子如DNA 或RNA引入到细胞中。

这种技术的应用范围广泛，包括研究基因功能、蛋白质表达和药物筛选等。

本文将介绍一款名为Attractene的转染试剂，它是如何工作的以及如何使用。

Attractene转染试剂是由Qiagen公司开发的一种非脂质体转染试剂。

它通过与核酸结合形成复合物，然后通过细胞膜进入细胞内部。

与其他转染试剂相比，Attractene具有更高的转染效率和更低的细胞毒性。

Attractene转染试剂适用于多种类型的细胞，包括贴壁细胞和悬浮细胞。

此外，它还可以用于多种类型的核酸，包括DNA、siRNA和miRNA。

其操作过程简单，只需将Attractene与核酸混合，然后加入到细胞培养液中即可。

根据Attractene的说明书，为了获得最佳的转染效果，需要根据细胞类型和核酸类型来调整Attractene和核酸的比例。

此外，转染后也需要适当的孵育时间以允许核酸进入细胞。

总的来说，Attractene转染试剂是一款高效且易于使用的基因转染工具。

它的出现极大地提高了基因转染的效率和成功率，为生命科学研究提供了有力的支持。

非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒说明书【兽药名称】通用名称：非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒汉语拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe英文名称：African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit 商品名称：无【用法与判定】1 用法1.1待检样品釆集、保存及运输1.1.1样品釆集（1）活猪样品无菌采集抗凝血或血清5mL（2）病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品无菌采集死猪的牌、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。

2〜8°C低温运至实验室用于检测。

（3）病猪污染的周边环境采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。

2〜8°C低温运至实验室用于检测。

1.1.2样品保存采集的样品在2〜8°C保存应不超过24小时，-70°C条件下保存，避免反复冻融。

1.1.3样品运输泡沫箱加冰袋后密封进行运输。

包装和运输应符合农业农村部《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样品运输包装规范》和交通运输部门关于危险品运输管理的有关规定。

1.2样品处理1.2.1血液样品处理抗凝血样品置于离心管中，8000 r/min离心2分钟取上层血浆，编号待检。

非抗凝血样品置于离心管中，待凝固后，8000 r/min离心2分钟取200μL上层血清，编号待检。

1.2.2组织样品处理取适量脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体、肌肉等组织，置于研磨器或研磨管中研磨，再加适量生理盐水混匀，制成约10%的组织匀浆，8000 r/min离心2分钟，取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心管中，编号备用。

1.2.3环境样品处理1.2.3.1粪便、饲料样品处理方法取适量的粪便、饲料放入盛有PBS缓冲液的研磨管中研磨混匀，制成约10%的匀浆液.8000 r/min离心2分钟，取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心管中，编号备用。

小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸扩增检测试剂盒说明书【名称】中文名：小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸检测试剂盒英文名：Peste des Petits Ruminants Virus Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction(PCR)Diagnostic Kit汉语拼音:xiao fan chu shou yi bing du he suan jian ce shi ji he【目的】本试剂盒适用于检测动物肺、淋巴结、血清等标本中小反刍兽疫病毒(PPRV)mRNA，适用于小反刍兽疫病毒感染的辅助诊断。

其检测结果仅供参考。

【原理】本试剂盒用一对小反刍兽疫病毒特异性引物，Trizol提取RNA，经逆转录酶作用将RNA转录成cDNA，后者在Taq酶作用下，配以SD-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，用RT-PCR体外扩增法对小反刍兽疫病毒RNA进行扩增，产物经凝胶电泳，溴化乙锭(EB)染色，紫外灯观察，从而达到快速检测之目的。

【组成】名称数量规格PPRV RT MIX2管140μl/管逆转录酶系1管40μl/管PPRV-PCR反应管40管50μl/管PPRV阳性质控品1管50μl/管阴性质控品1管250μl/管DEPC水1管2000μl/管备注:Trizol等另行配备【标本采集】1.适用标本类型：动物肺、淋巴结、血清或其他组织等2.标本采集动物肺、淋巴结：无菌条件下取动物肺、淋巴结或其他组织等100mg左右，置入1.5ml洁净EP管，立即送检。

血清：用一次性无菌注射器抽取受检动物耳静脉或者前腔静脉静脉血2-5ml，静置斜放待血清析出，1,0000rpm离心3分钟，可取上清立即用于测试；或吸取上部血清(约200µl)转入无菌1.5ml Eppendoff管，保存待检。

【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。