血清学反应试验

梅毒的血清学试验参考范围：性病研究实验室试验（VDRL）阴性不加热血清反应素试验（USR）阴性快速血浆反应素试验（RPR）阴性荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）阴性梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）1：25以下为阴性梅毒螺旋体制动试验试验标本活动螺旋体数为对照标本的40%为阴性梅毒螺旋体抗体试验（TP-Ab）阴性临床评价：1．梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体，是性传播疾病梅毒的病原体。

机体对梅毒螺旋体感染可产生体液和细胞免疫反应，梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的依据之一。

血清学试验主要有两个类型，一类是VDR L，USR和RPR．属非螺旋体抗原试验，是用正常牛心类脂质作为抗原，测定血清中的反应素，为筛查试验。

另一类是FTA-ABS，TPHA和TPl，属螺旋体抗原试验，是用梅毒螺旋体作为抗原，检测血清中的特异性抗体，为确证试验。

2．非螺旋体抗原试验(VDRL，USR，RPR)敏感性高，其反应素效价与病变活动性有关。

第一期梅毒病灶出现后1～2周即可测出反应素，第二期梅毒病人血清中反应素效价最高，阳性率可达99％，经药物治疗后可转阴。

先天性梅毒80％～100％阳性。

但此类试验特异性不高，常有假阳性反应，在分析结果时应注意结合病史、临床症状及特异性试验作出正确判断。

FTA-ABS的敏感性和特异性均高，在早期梅毒首先出现阳性，病人经药物治疗后反应仍不转阴，故不能用作疗效的评价，常用于梅毒的确定诊断。

TPI是一种经典的特异性较高的梅毒血清学反应，假阳性不到1％，主要用于晚期梅毒及疑难病人的诊断。

TPHA具有敏感、快速、简便等特点，但特异性不及FTA-ABS和TPI。

采取脑脊液标本进行特异性抗体检测，对中枢神经系统的梅毒具有诊断价值。

3．暗视野检查法对梅毒的诊断有重要意义。

此法系采取病灶组织渗出液、淋巴穿刺液或组织悬液制成涂片，在暗视野显微镜下直接检查梅毒螺旋体，主要适用于初期梅毒的检查，有一定局限性。

暗视野检查法一次阴性结果不能否定梅毒的存在，一般连续检查3天阴性才能予以排除。

血清学试验种类
血清学试验主要分为微量凝集试验、酶联免疫吸附试验、免疫印迹试验和补体结合试验等。

这些试验在医学诊断和治疗中有着广泛的应用，可以帮助医生了解患者的免疫系统状态，从而制定更有效的治疗方案。

微量凝集试验是一种通过测定血清中特定抗体与细菌或病毒抗原之间的反应来检测感染的试验。

这种试验通常用于诊断细菌感染和病毒感染。

酶联免疫吸附试验是一种常用的血清学试验，通过酶标记的抗体与抗原的结合反应，检测样本中是否存在目标抗原。

这种试验具有较高的灵敏度和特异性，可用于检测各种感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤标志物等。

免疫印迹试验是一种将被测样本中的蛋白分离出来，然后通过特定抗体与蛋白进行相互作用，从而确认特定抗体或蛋白的方法。

这种试验常用于检测自身免疫性疾病、传染病和肿瘤等。

补体结合试验是一种通过测定补体结合率来检测免疫反应
的试验。

这种试验通常用于诊断自身免疫性疾病和某些感染性疾病。

除了以上几种血清学试验，还有间接血凝试验、亲和素-生物素-酶复合物酶联免疫吸附试验、斑点酶联免疫吸附试验等其他血清学方法。

这些试验在临床诊断和治疗中都有着广泛的应用，为医生提供了重要的参考信息。

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抗链球菌溶血素“O"试验参考范围：免疫比浊法：0～200 u/ml临床评价：1．链球菌溶血素“O”（ASO）是A群链球菌的代谢产物之一，它是一种具有酶活性的蛋白质，能溶解红细胞，也能破坏白细胞和血小板。

溶血素“O”具有很强的抗原性，机体受A群链球菌感染后可产生溶血素“O”抗体，这种抗体可以抑制溶血素“O”的溶血作用。

通过测定血清中ASO水平，有利于A群链球菌感染的诊断。

2．当ASO试验呈阳性反应，且抗体滴度有逐步增高趋势时，即具有诊断参考价值。

主要见于A群链球菌感染后引起的变态反应性疾病，如风湿热、急性肾小球肾炎等，还可见于A群链球菌感染所致的上呼吸道炎症(咽炎或扁桃体炎)。

85％～90％的患者感染后2周左右到病愈后数月至年余血清中均可测到ASO。

应用ELISA可检测患者血清中的IgM型和IgG 型ASO特异性抗体，IgM-ASO多见于感染的急性期，IgG-ASO见于恢复期。

抗体效价逐步下降时为疾病缓解期，抗体恒定在高效价水平多为非活动期。

3．咽拭培养直接分离病原菌是诊断A群链球菌感染的可靠方法，急性风湿热发作时阳性率可高达70％～90％。

进行多项链球菌抗体试验，可提高对A群链球菌感染诊断的准确率。

这些试验包括抗链球菌激酶(ASK)，抗脱氧核糖核酸酶B(ADNase B)，抗链球菌二磷酸吡啶核苷酸酶(ADPNase)和抗透明质酸酶(AH)等，其中ASK试验是新近链球菌感染的一个非常敏感的指标。

其它实验室检查还有红细胞沉降率，血清C-反应蛋白试验，血清补体C3、C4成分测定等，上述项目联合应用对A群链球菌感染所致疾病有一定辅助诊断意义。

4．影响本试验结果的因素(1)单一次试验结果对诊断意义不大。

(2)链球菌溶血素“O”在Ph6.5环境中活性最强，偏酸或偏碱都可影响其活性。

(3)在溶血抑制法中，血清溶血、黄疸、高胆固醇或血清保存过久污染长菌者，皆可致试验结果偏高，胆固醇有抑制溶血素活性的作用。

体外的抗原抗体反应常称为血清学反应或血清学试验。

一、血清学鉴定血清学鉴定即采用含有已知特异性抗体的免疫血清（诊断血清）与分离培养出的未知纯种细菌或标本中的抗原进行血清学反应，以确定病原菌的种或型。

血清学鉴定常用的血清学试验是凝集试验、沉淀试验（毛细管法）、荚膜肿胀试验和毒素-抗毒素中和试验等。

二、血清学诊断血清学诊断是指用已知抗原或已知抗体检测患者血清中相应抗体的方法，以诊断感染性疾病。

抗体效价必须明显高于正常人群的水平或随病程递增才有诊断价值。

多数血清学诊断需取患者急性期和恢复期双份血清标本，若后者的抗体效价比前者升高4倍或4倍以上才有诊断意义。

在患者血清中检出病原微生物的抗原有诊断意义。

血清学诊断常用的血清学试验是凝集试验（直接凝集试验和间接凝集试验）、酶联免疫吸附试验、免疫荧光技术和放射免疫测定法。

十二章经典血清学实验一、名词解释凝结性实验：按照是否产生凝结现象，用已知抗体或抗本来判定相应（未知）抗原或抗体的免疫反应。

凝集反应：细菌，红细胞等颗粒性抗原，或吸附在颗粒性载体表面的可溶性抗原，与相应抗体发生特异性反应，在适当电解质存在下，经过一段时光形成肉眼可见的凝集现象。

反应中的抗原称为凝集原，反应中的抗体称为凝集素。

直接凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体直接发生特异性结合并浮上肉眼可见的凝集现象称为直接凝集反应。

间接凝集反应：将可溶性抗原（或抗体）吸附在一种与免疫无关的惰性载体颗粒表面，使其成为致敏载体，然后与相应抗体（或抗原）结合，在电解质存在的条件下发生凝集的现象。

葡萄球菌A蛋白（SPA）：是金黄色葡萄球菌的特异性表面抗原，能与IgG分子的Fc片段结合，当SPA-Ab与相应抗原结合时，就可产生协同凝集反应。

HA：有些病毒具有能凝集某种哺乳动物和禽类红细胞的特性，依此特性建立的检测主意称为病毒血凝实验。

HI：按照病毒的特异性抗体可以抑制血凝现象建立的检测主意称为血凝抑制实验。

沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在适量电解质存在的条件下，形成肉眼可见的白色沉淀。

参加沉淀反应的可溶性抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。

琼脂免疫蔓延：抗原，抗体在琼脂凝胶中蔓延，当二者在比例适当处相遇，即发生沉淀反应。

反应的沉淀物因颗粒较大，故在凝胶中不再蔓延，而形成沉淀带。

电泳：带电质点在电场中向着带异向电荷的电场移动。

免疫电泳：由琼脂双蔓延与琼脂电泳技术结合的实验。

凝集价/滴度/抗体效价：浮上50%以上凝集的血清最大稀释度为该血清的凝集价。

沉淀价：环状沉淀实验时，以浮上白色沉淀环的最高抗原稀释倍数作为沉淀素的效价，即沉淀价。

中和指数：在尽头法中和实验中，使病毒感染力减少至50%的血清中和效价称为中和指数。

中和效价：中和实验中，被检血清中抗体中和病毒的能力。

病毒的毒价：引起半数感染动物死亡的病毒最小量。

第1页/共5页二、简答题1.凝集反应和沉淀反应的基本类型有哪些？有何用途？2.凝集反应和沉淀反应的区别？（凝集反应和沉淀反应各有什么特点？）3.琼脂凝胶免疫蔓延实验有哪些不同的主意？举例说明它们的用途？抗原，抗体在琼脂凝胶中蔓延，当二者在比例适当处相遇，即发生沉淀反应。

非梅毒螺旋体抗原血清学试验常用方法1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验是一种常用的实验室方法，用于检测非梅毒螺旋体感染。

2. 常用的非梅毒螺旋体抗原血清学试验方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光试验（IFA）、血凝试验（RPR / VRDL）等。

3. ELISA是一种常用的非梅毒螺旋体抗原血清学试验方法。

它通过将被测血清中的抗体与已知抗原相结合，使用酶标记的二抗检测抗体是否结合，从而确定是否存在抗体反应。

4. IFA是另一种常用的非梅毒螺旋体抗原血清学试验方法。

它使用含有荧光标记的非梅毒螺旋体抗原与被测血清中的抗体结合，通过检测荧光信号的强度来确定抗体反应。

5. RPR / VRDL是非梅毒螺旋体抗原血清学试验中常用的血凝试验方法。

它通过将被测血清与非梅毒螺旋体抗原结合，观察是否出现血浆凝聚的现象来确定抗体反应。

6. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验方法可以用于检测非梅毒螺旋体感染的早期和晚期，含有不同的抗原组分。

7. 抗原血清学试验的准确性受多种因素影响，包括试剂质量、操作技术、被测样品的稀释度等。

8. 为了提高非梅毒螺旋体抗原血清学试验的准确性，常常需要进行阳性对照和阴性对照的测试，以确保结果的可靠性。

9. ELISA方法的具体步骤包括：将被测血清稀释后与抗原进行反应，清洗掉未结合的成分，加入酶标记的二抗进行标记，再次清洗掉未结合的成分，加入底物，观察酶标记的反应产物生成情况，并通过光度计测量光吸光度。

10. IFA方法主要包括将被测血清与荧光标记的非梅毒螺旋体抗原进行反应，经过洗涤去除未结合的成分，再通过荧光显微镜观察标记的荧光信号。

11. RPR / VRDL方法的步骤通常涉及将被测血清加入包含非梅毒螺旋体抗原的玻璃载玻的试管中，观察是否出现血浆凝固反应。

12. 为了避免误判，非梅毒螺旋体抗原血清学试验通常需要重复进行，以确保结果的准确性。

13. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验通常需要使用其他方法进行验证，如PCR（聚合酶链反应）等分子生物学方法。

血清学试验名词解释血清学试验是一种客观检测病人血清中化学成分的实验过程，它可以帮助医生们更准确地诊断病人的疾病，同时也能够排查出可能的疾病危险因素。

血清学试验也被称为血液化学分析，它可以快速准确地测量患者的血清成分，临床血清学试验的主要内容包括血清生化分析、肝功能检查、肾功能检查、脂质代谢紊乱和骨骼质量检查等。

一、血清生化分析血清生化分析是一种常见的血清学试验，它可以检测出血清中的各种化学成分，如蛋白质、糖类、磷、钾、钠、氯离子等，它们能够帮助医生们更精确地检测病人的状况，以及每种疾病的发病机制。

二、肝功能检查肝功能检查也是血清学试验的一种，它可以测量血清中的一组特殊的物质，如胆红素、胆汁酸、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白等，这些物质可以反映出患者肝脏正常运作能力的程度，从而帮助医生们进行诊断。

三、肾功能检查肾功能检查也是血清学试验的一种，它通过测量血清中的一组特定的代谢产物，如尿素氮、血清肌酐、血钾、血磷等，来反映患者肾脏正常运作能力的程度，提供肾病的早期诊断和分类。

四、脂质代谢紊乱检查脂质代谢紊乱检查也是血清学试验的一种，它可以测量血清中的胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等脂质代谢相关物质，以及一些炎症分子，如C反应蛋白、白介素-6、载脂蛋白A1等，这些物质的水平可以用来反映患者的脂质代谢状况，为预防和治疗脂质代谢紊乱提供重要的参考。

五、骨骼质量检查骨骼质量检查也是血清学试验的一种，它可以检测血清中的钙质、磷质、胱抑素C、尿酸等特殊物质，以及一些炎症分子，如载脂蛋白A1、白介素-6等，这些物质可以用来评估患者的骨骼健康情况，帮助医生们进行准确的诊断与治疗。

血清学试验是用来帮助医生们更准确诊断病人疾病的一种实验过程，它可以快速准确地测量患者的血清成分，帮助医生们排查出可能的疾病危险因素。

目前，血清学试验主要包括血清生化分析、肝功能检查、肾功能检查、脂质代谢紊乱检查和骨骼质量检查五个部分，它们能够帮助医生们进行准确的诊断，同时可以为患者的预防及早期诊断提供重要的参考。

血清学试验简介血清学反应是指：相应的抗原与抗体在体外肯定条件下作用，可消失肉眼可见的沉淀、凝集现象。

在食品微生物检验中，常用血清学反应来鉴定分别到的细菌，以最终确认检测结果。

血清学反应的一般特点：1)抗原体的结合具有特异性，当有共同抗原体存在时，会消失交叉反应。

2)抗原体的结合是分子表面的结合，这种结合虽相当稳定，但是可逆的。

3)抗原体的结合是按肯定比例进行的，只有比例适当时，才能消失可见反应。

4)血清学反应大体分为两个阶段进行，但其间无严格界限。

第一阶段为抗原体特异性结合阶段，反应速度很快，只需几秒至几分钟反应即可完毕，但不消失肉眼可见现象。

其次阶段为抗原体反应的可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合反应等。

反应速度慢，需几分、几非常以至更长时间。

而且，在其次阶段反应中，电解质、PH、温度等环境因素的变化，都直接影响血清学反应的结果。

习惯上将经典的血清学反应分三种类别：凝集反应、沉淀反应和补体结合反应。

１、凝集反应颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体结合，在电解质参加下所形成的肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应（Agglutination reaction）。

其中的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。

在该反应中，由于单位体积抗体量大，做定量试验时，应稀释抗体。

１）直接凝集反应颗粒性抗原与相应抗体直接结合所消失的反应，称为直接凝集反应(Direct agglution reaction)。

a.玻片凝集法。

是一种常规的定性试验方法。

原理是用已知抗体来检测未知抗原。

常用于鉴定菌种、血型。

如将含有痢疾杆菌抗体的血清与待检菌液各一滴，在玻片上混匀，数分种后若消失肉眼可见的凝集块，即阳性反应，证明该菌是痢疾杆菌。

此法快速、简便，但不能进行定量测定。

b.试管凝集法。

是一种定量试验方法。

多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。

常用于帮助诊断某些传染病及进行流行病学调查。

如肥达氏反应就是诊断伤寒、付伤寒的试管凝集试验。

常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前，该项技术已在兽医学上得到广泛的应用，大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。

1、酶联免疫吸附试验的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。

用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。

再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。

2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型：①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。

在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。

例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA，就是根据这种原理设计的。

②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。

用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。

与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。

乙肝HBs的检测常采用本法。

本法关键在于酶标抗原的制备，需要根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。

此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于于间接法。

此外，该方法不受被检动物种属差异的限制。

③.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。

其原理为利用酶标记的抗体（抗免疫球蛋白抗体），检测与固相抗原结合的受检抗体（见图1）。