生物血清学反应

触酶试验标准操作规程1.目的规范触酶试验标准操作规程。

2．原理具有触酶(过氧化氢酶)的细菌，能催化过氧化氢，放出新生态氧，继而形成分子氧，出现气泡。

3．试剂3％过氧化氢溶液。

4．质控金黄色葡萄球菌ATCC 25923阳性，肺炎链球菌ATCC 4961 9阴性。

5．操作步骤取3％过氧化氢溶液0．5 ml，滴加于不含血液的细菌琼脂培养物上，或取1～3 ml滴加入盐水菌悬液中。

6．结果判断培养物出现气泡者为阳性。

7．注意事项7．1细菌要求新鲜。

7．2不宜用血琼脂平板上的菌落作触酶试验，因红细胞内含有触酶，可能出现假阳性。

7．3需用已知阳性菌和阴性菌作对照。

8．临床意义在革兰阳性球菌中，链球菌触酶试验阴性，葡萄球菌及微球菌均阳性，因此可用于革兰阳性球菌的初步分群。

氧化酶试验标准操作规程1．目的l规范氧化酶试验标准操作规程。

{2.原理氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的酶。

具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色的醌类化合物。

3 . 试剂盐酸二甲基对苯二胺(或四甲基对苯二胺)0.1g，加蒸锱水10ml，置于棕色瓶内可用一周。

冰箱保存，或分装于棕色瓶内密封。

4. 质控铜绿假单胞菌ATCC27853阳性，大肠埃希菌ATcc 25922阴性。

5.操作步骤去洁净的滤纸一小块，蘸取菌苔少许，加1滴10g／L盐酸二甲基对苯二胺溶液于菌落上，观察颜色变化。

6．结果判断立即呈粉红色并迅速转为紫红色者为阳性。

7. 注意事项7．1 试剂在空气中易氧化，故应经常更换新试剂，或配置时试剂内加入0．1％维生素c以减少自身氧化。

7. 2 不宜采用含葡萄糖培养基上的菌落(葡萄糖发酵可抑制氧化酶活性)。

7．3实验时应避开含铁的培养基等含铁物质，因本实验过程中，遇铁时会出现假阳性。

8 . 临床意义8. 1 用于奈瑟菌属﹑非发酵等细菌的鉴定。

如果肠杆菌科不进行本试验，则可能将氧化8．2所有的革兰阴性菌均应进行氧化酶试验，如果肠杆菌科不进行本试验，则可能将氧化酶阳性的嗜水气单胞菌错误地鉴定为大肠埃希杆菌或沙雷菌。

腹膜腔：壁腹膜与脏腹膜互相移行，形成不规则的囊状间隙，称腹膜腔。

男性腹膜腔是密闭的；女性腹膜腔则通过输卵管腹腔口、输卵管、子宫和阴道间接与外界相通。

腹膜在脏器之间转折形成陷凹。

女性有盲肠子宫陷凹和膀胱子宫陷凹；男性有直肠膀胱陷凹。

坏死：是活体内范围不等的局部细胞死亡，死亡细胞底质膜崩解，结构自溶并引发急性炎症反应。

淤血：器官和组织由于静脉回流受阻血液淤积于毛细血管和小静脉中而发生的充血，称为微静脉性淤血，简称淤血。

漏出性出血：因毛细血管和毛细血管后静脉通透性增加，血液经扩大的内皮细胞间隙和受损的基底膜漏出于血管外，称为漏出性出血。

栓塞：血管内出现异常物质，随血流至远处阻塞血管，这种现象称为栓塞。

炎症：具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应为炎症。

心绞痛：是冠状动脉供血不足和心肌耗氧量骤增致使心肌急剧的、暂时性缺血、缺氧所引起的临床综合征。

心肌梗死：是冠状动脉供血中断引起的心肌坏死，临床上有剧烈而持久的胸骨后疼痛，休息及硝酸酯类不能完全缓解，伴发热、白细胞增多、红细胞沉降率加快、血清心肌酶活力增高及进行性心电图变化，可并发心律失常、休克和心力衰竭。

去大脑僵直：在中脑上、下丘之间切断脑干的去大脑动物，会出现肌紧张亢进现象，表现为四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬，称为去大脑僵直。

牵涉痛：某些内脏疾病往往引起远隔的体表部位发生疼痛或痛觉过敏，这种现象称为牵涉痛。

等渗溶液：在临床或生理实验室使用的各种溶液中，其渗透压与血浆渗透相等的称为等渗溶液，如0.9%氯化钠溶液、5%葡萄糖溶液等。

渗透性利尿：临床上给患者使用可被肾小球滤过而又不被肾小球重吸收的物质，如甘露醇等，来提高小管液中溶质的浓度，借以达到利尿和消除水肿的目的，这种利尿方式称为渗透性利尿。

基础代谢率：指基础状态下单位时间内的能量代谢。

所谓基础状态，是指满足以下条件的一种状态：清晨、清醒、静卧，未作肌肉活动；前夜睡眠良好，测定时无精神紧张；测定前至少禁食12小时；室温保持在20~25℃。

血清学原理
血清学原理是一种用于检测人体血清中特定抗体和抗原的方法。

它基于免疫学原理，即人体对入侵病原体产生特异性的免疫应答。

当病原体侵入人体后，免疫系统会产生相应的抗体来抵御病原体的进一步感染。

血清学原理中常用的方法是血清中特定抗体与抗原结合的反应。

抗体是免疫系统产生的一种蛋白质，具有特异性，可以识别并结合特定的抗原。

当特定抗原存在于血清中时，与之相应的抗体会结合在一起形成抗原-抗体复合物。

这种结合反应可以通
过使用不同的实验技术来进行检测。

常见的血清学实验技术包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、间
接免疫荧光试验（IFA）和凝集反应。

这些方法可以用于检测
多种病原体，如细菌、病毒和寄生虫等。

通过测量抗原-抗体
复合物的形成或凝集反应的程度，可以确定血清中是否存在特定的抗体和抗原。

这可以用于诊断疾病、监测免疫应答、评估免疫状态以及筛查疫苗的有效性。

血清学原理在医学和流行病学研究中具有重要的应用价值。

它不仅能够帮助医生确定疾病的类型和严重程度，还可以追踪病原体的传播途径和感染人群的免疫状况。

此外，血清学原理还可以用于血型鉴定、移植匹配和妊娠筛查等领域。

总之，血清学原理是一种重要的免疫学方法，通过检测血清中的特定抗体和抗原，可以为疾病诊断、流行病学研究和其他医学应用提供有价值的信息。

细菌的血清学鉴定
细菌的血清学鉴定是一种基于抗原-抗体反应的实验室诊断方法，用于准确识别和区分不同种类的细菌。

这种方法依赖于细菌表面或内部的特异性抗原，这些抗原可以与相应的抗体发生反应，从而产生可见的沉淀、凝集或溶血等现象，从而实现对细菌的鉴定。

在血清学鉴定中，常用的技术包括凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等。

凝集试验，如玻片凝集试验和试管凝集试验，通过观察细菌与特异性抗体结合后形成的凝集现象来鉴定细菌。

沉淀试验则是利用抗原-抗体复合物在凝胶或液体介质中形成沉淀的原理，通过检测沉淀的形成来鉴定细菌。

补体结合试验则是一种更为敏感的血清学鉴定方法，它利用补体系统来放大抗原-抗体反应，从而提高检测的灵敏度和特异性。

在进行细菌血清学鉴定时，需要使用标准化的抗原和抗体试剂，并严格控制实验条件，以确保结果的准确性和可靠性。

此外，由于不同细菌之间可能存在交叉反应，因此在进行血清学鉴定时还需要结合其他实验方法，如细菌培养、生化试验和分子生物学方法等，以实现对细菌的准确鉴定。

总之，细菌的血清学鉴定是一种重要的实验室诊断方法，它具有高度的特异性和灵敏度，可以用于快速准确地识别和区分不同种类的细菌。

在临床医学、公共卫生和食品安全等领域中，细菌的血清学鉴定发挥着重要的作用，为疾病的预防和控制提供了有力的支持。

病原微生物中细菌常见检测方法有哪些病原微生物种类繁多，变异迅速，快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。

目前，应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等，该文对这些检测技术进展做一综述。

对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物，又称病原体，有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。

这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。

近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强，往往造成世界性大流行，因此对病原体的检测必须做到快速、准确。

常规病原学检测方法操作繁琐，检测周期长，而且对操作人员技术水平要求比较高。

随着医学微生物学研究技术的不断发展，病原学诊断已不再局限于病原体水平，深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室J。

核酸分子杂交技术、PCR技术、基因芯片技术等检测方法，自动化程度高，快速省时、无污染、结果精确，可以准确灵敏地鉴定病原微生物。

1传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主，将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。

1．1直接涂片镜检病原微生物体形体积微小，大多无色半透明状，将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。

直接涂片染色镜检简便快速，对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用，例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。

直接涂片镜检不需要特殊的仪器和设备，在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。

1．2分离培养与生化反应分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。

细菌的生长繁殖需要一定时间，检测周期较长，不能同时处理批量样本。

微生物学与免疫学名词解释免疫:是指机体接触“抗原性异物”或“异己成分”的一种特异性生理反应，由机体内免疫系统执行的，识别和排除抗原性异物（识别”自己”和”非己”成分），藉以维持机体的生理平衡，包括：（1）免疫防御：病原体（2）免疫监视：突变细胞（3）免疫自稳抗原：能诱导机体免疫系统产生特异性免疫应答并能与相应免疫应答产物（抗体，致敏淋巴细胞）特异性结合，发挥免疫效应的物质。

交叉反应：某些抗原不仅可与其诱生的抗体发生反应，还可与其它抗原诱生的抗体发生反应抗体：B细胞识别抗原后活化、分化为浆细胞产生的糖蛋白；能与相应抗原表位特异性结合。

特性：①糖蛋白②B细胞产生③与表位特异性结合免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构上与抗体相似的球蛋白类型：分泌型：存在于血液等体液中（抗体）膜型：BCR(B Cell Receptor)单克隆抗体：单个Ｂ细胞克隆在一种表位刺激下所生的抗体补体：存在于血清、组织液和细胞膜表面的一组与免疫功能有关，活化后具有酶活性和自我调节作用的球蛋白，可辅助特异性抗体介导的溶菌、溶血作用CD抗原：免疫细胞表面抗原的表达常与分化发育有关，即在不同的发育阶段和不同的功能分化状态有不同的表面抗原表达。

这些与细胞分化发育有关的抗原称为分化抗原免疫细胞：所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体细胞NK细胞：即自然杀伤细胞，是第三类淋巴细胞，其形态学特点为胞浆内有许多嗜苯胺颗粒，故又称大颗粒淋巴细胞T淋巴细胞：T细胞或胸腺依赖性淋巴细胞(Thymus-dependent lymphocyte)：来源于骨髓中淋巴样干细胞，在胸腺中发育成熟B淋巴细胞：简称B细胞,在哺乳动物的骨髓（Bone marrow)或鸟类法氏囊(Bursa of Fabricius)中发育成熟;能产生免疫球蛋白(Ig),其特征性细胞表面标记：膜表面免疫球蛋白(mIg),可作为抗原受体(BCR).抗原提呈细胞：具有抗原提呈功能的细胞。

鉴别培养基：用于鉴别不同类型微生物的培养基，主要用于微生物的快速分类鉴定以及分离和筛选产生某种代谢产物的微生物菌种。

遗传密码：指DNA链上决定各具体氨基酸的特定核苷酸排列顺序。

补料分批培养：是在分批发酵过程中补入新鲜料液，以克服由于养分不足，导致发酵过早结束。

共价修饰：指蛋白质分子中的一个或多个氨基酸残基与一化学基团共价连接或解开，使其活性改变的作用。

乙醛酸循环：是TCA循环的一条回补途径，可使TCA循环不仅具有高效产能功能，而且还兼有可为许多重要生物合成提供有关中间代谢产物的功能，因循环中存在乙醛酸这一关键中间代谢物而得名。

单细胞蛋白：就是从单细胞藻类，酵母，细菌等单细胞微生物中获取的蛋白质。

温和噬菌体：水活度：表示在天然或人为环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。

能荷：在总的腺苷酸库中所负荷的ATP的比例。

代谢工程：通过某些特定的生化反应的修饰来定向改善细胞特性或运用重组DNA技术来创造新的化合物。

水体自净作用：指水体依靠自身的物理、化学、生物作用使水质向原有状态恢复的功能。

补给反应：指能补充两用代谢途径中因合成代谢而消耗的中间代谢物的那些反应。

通过这种机制，一旦重要产能途径中的某种关键中间代谢物必须被大量用作生物合成原料而抽走时，仍可保证能量代谢的正常进行，例如乙醛酸循环等。

卫星病毒：指一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒，一般有裸露的DNA或RNA组成。

存在于自然界的一种绝对缺损病毒，必须依赖于与之无关的辅助病毒的基因产物才能复制，同时亦可干扰其辅助病毒的复制。

选择性培养基：是一类根据某种微生物的特殊营养要求或其对某种化学物理因素个抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变为优势菌的功能，广泛应用于菌种筛选等领域，例如阿须贝无氮培养基。

恒化器：是一种使培养液的流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖的连续培养装置。

分化：是生物的细胞形态和功能向不同的方向发展，由一般变为特殊的现象。

血清学试验种类
血清学试验主要分为微量凝集试验、酶联免疫吸附试验、免疫印迹试验和补体结合试验等。

这些试验在医学诊断和治疗中有着广泛的应用，可以帮助医生了解患者的免疫系统状态，从而制定更有效的治疗方案。

微量凝集试验是一种通过测定血清中特定抗体与细菌或病毒抗原之间的反应来检测感染的试验。

这种试验通常用于诊断细菌感染和病毒感染。

酶联免疫吸附试验是一种常用的血清学试验，通过酶标记的抗体与抗原的结合反应，检测样本中是否存在目标抗原。

这种试验具有较高的灵敏度和特异性，可用于检测各种感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤标志物等。

免疫印迹试验是一种将被测样本中的蛋白分离出来，然后通过特定抗体与蛋白进行相互作用，从而确认特定抗体或蛋白的方法。

这种试验常用于检测自身免疫性疾病、传染病和肿瘤等。

补体结合试验是一种通过测定补体结合率来检测免疫反应
的试验。

这种试验通常用于诊断自身免疫性疾病和某些感染性疾病。

除了以上几种血清学试验，还有间接血凝试验、亲和素-生物素-酶复合物酶联免疫吸附试验、斑点酶联免疫吸附试验等其他血清学方法。

这些试验在临床诊断和治疗中都有着广泛的应用，为医生提供了重要的参考信息。

第一部分名词解释第一章原核生物1. 磷壁酸（teichoic acid）：G+细菌细胞壁结合在细胞壁上的一种酸性多糖，主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸2. LPS：脂多糖，位于G-细菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质，由类脂A、核心多糖和O-特异侧链 3 部分组成。

3. PHB：聚-β-羟丁酸，一种存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的碳源类贮藏物，不溶于水而溶于氯仿，具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压等作用。

4. PHA：聚羟链烷酸，与PHB差异仅在甲基上，若甲基用“R”取代，就成了PHA5. 伴孢晶体（parasporal crystal）：少数芽孢杆菌（如苏云金芽孢杆菌）在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体。

又叫δ内毒素6. 异形胞（heterocyst）：蓝细菌特有的，只含少量藻胆素，不含藻蛋白，只含有光系统，不产氧气，能进行固氮作用7. 静息孢子（akinete）：一种长在细胞链中间或末端的形大、壁厚、色深的休眠细胞，富含营养物，能抵御干旱等不良环境。

8. 原体（elementary body）：衣原体生活史中，有一阶段具有感染力且细胞致密、不能运动、不生长、抗干旱、有传染力的细胞9. 始体（initial body）：衣原体经过原体阶段后，原体在空气中传播，一遇到合适的新宿主，通过吞噬作用进入细胞，在其中生长，转为无感染力的体细胞10. 缺壁细菌：在自然界长期进化中和实验室菌种的自发突变中都会产生少数缺细胞壁的种类，或是用人为的方法通过抑制新生细胞壁的合成或对现成细胞壁进行酶解而获得人工缺壁的细菌第二章真核生物1. 真酵母（euyeast）：具有有性生殖的酵母菌2. 假酵母（pseudo-yeast）：只进行无性生殖的酵母菌3. 假菌丝（pseudohyphae）：酵母菌经一连串芽殖后，长大的子细胞与母细胞不立即分离，而以狭小的面相连的藕节状的细胞串4. 真菌丝（enhyphae）：酵母菌经一连串芽殖后,长大的子细胞与母细胞相连的横隔面积与细胞直径一致的竹节状的细胞串5. 单细胞蛋白（SCP）：指那些工厂化大规模培养的、作为人类食品和动物饲料的蛋白质来源的酵母、细菌、放线菌、霉菌、藻类和高等真菌等微生物的细胞。