地中海贫血的基因检测

α-地中海贫血基因检测操作规程（益生堂）一、目的：对筛查出来的地贫疑似病例和需要进行地贫产前诊断的夫妇提供进一步的确认。

二、适用范围：适用于益生堂PCR扩增、琼脂糖电泳技术等分析的操作。

三、原理：应用特异的PCR引物选择性地扩增不同类型的α-地中海贫血基因，通过琼脂糖凝胶电泳的带型分析，诊断α-地中海贫血基因缺失型。

四、操作规程（一）标本收集、标本保存、标本转运1、静脉采血：从肘静脉或手背静脉抽取静脉血1mL以上，将血液沿管壁缓慢注入加有EDTA或枸橼酸钠的试管内，轻轻混匀，即为抗凝全血。

羊水的采集：由临床医师经腹壁行羊膜穿刺取得。

采集羊水时速度不宜太快，标本抽取量也不宜太多，一般10-15mL即可。

2、标本一经采集，则应尽快送至实验室检测，抗凝全血室温放置不超过4小时，4℃保存不超过一周，-20℃保存不超过半年，应避免反复冻融。

3、标本装入试管密封，再装入塑料袋中，置冰壶或泡沬箱加冰袋密封运输，在运输过程中应避免剧烈震荡。

4、注意事项（1）抗凝时，不能用肝素抗凝。

（2）采集羊水穿刺羊膜要在妊娠16周羊水达到200mL以后才能进行。

（二）全血DNA提取操作规程1、所需试剂及仪器：试剂由益生堂生物技术（深圳）有限公司提供，包含核酸提取试剂、扩增管、模条、无水乙醇，1.5mL离心管.仪器有黑马和博日扩增仪、台式高速离心机、旋涡振荡器、真空旋转干燥仪、电泳仪、电泳槽、分子杂交仪、凝胶成像系统。

2、实验前准备工作2.1、准备好1.5mL无菌离心管及无菌吸头。

2.2、变性液在每次使用前应充分摇匀以保证提取质量。

3、操作步骤（1）在1.5mL离心管中加入250μL充分摇匀的变性液及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟。

也可选择以下操作步骤，以获得更高质量的DNA：在1.5mL离心管中加入1mL无菌水及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟以裂解红细胞。

13000rmp离心1分钟，弃上清，保留管底白细胞块。

医生帮我看下地中海贫血基因检测报告地中海贫血是一种常见的血液疾病，主要发生在地中海沿岸、亚洲和非洲等地区。

该疾病是由于血红蛋白基因突变导致的红细胞生成障碍，严重的地中海贫血会导致氧气供应不足，引起多种组织和器官的损害。

本文将重点介绍地中海贫血基因检测报告、治疗方法和注意事项。

一、地中海贫血基因检测报告1. 基因突变类型：地中海贫血是由β-地中海贫血基因、α-地中海贫血基因或α/β地中海贫血基因突变所引起的。

基因突变类型需要在基因检测报告上详细说明。

2. 基因型：地中海贫血基因型通常包括正常基因型、单一基因型、复合基因型等。

基因型的不同将直接影响患者的临床表现和治疗方案。

基因检测报告应详细说明患者基因型的具体情况。

3. 检测结果解读：基因检测报告中应详细说明检测结果的含义和对患者的影响。

只有经过科学解读的基因检测报告，才能为医生制定合理的治疗方案提供帮助。

二、治疗方法地中海贫血目前尚没有完全治愈的方法，治疗主要是通过一系列的药物和治疗来改善患者的贫血症状和生活质量。

常用的治疗方法有以下几种：1. 输血治疗：对于严重的地中海贫血患者，输注健康人的红细胞是改善贫血症状的主要方法。

输血周期是根据患者的具体情况而定，通常在一个月到三个月之间。

2. 骨髓移植：对于患者家族内有配型相合的骨髓移植供体时，可以考虑进行骨髓移植治疗。

3. 螯合剂治疗：对于地中海贫血患者，身体内容易出现过量的铁元素，这会对身体造成极大的伤害，常常导致心肌纤维化、移行性肝脏、继发性内分泌障碍及细菌感染。

此时需要使用螯合剂清除多余的铁元素，预防并治疗破坏性作用。

三、注意事项1. 定期复查，及时扩充医学知识：地中海贫血患者需要定期进行血常规和转氨酶检测等相关检查，以便及时发现和处理贫血和其他并发症。

同时，应及时了解医学最新的研究成果，更新治疗方案。

2. 科学合理的饮食：地中海贫血患者需要科学合理地摄入主要营养素，保持健康的生活方式。

少量多餐、多吃含铁、维生素C等营养素的食物，同时避免食用含铜、含铝等高危食品。

2 376例地中海贫血基因筛查结果分析王云娟 1,2,3），张艳亮 1,2,3），徐秋月 1,2,3），赵　滢 1,2,3），胡赵武 4），苏　洋 1,2,3）（1）昆明医科大学第一附属医院医学检验科；2）云南省实验诊断研究所；3）云南省检验医学重点实验室，云南 昆明　650032；4）禄丰县人民医院检验科，云南 禄丰　651200）[ 摘要 ] 目的　了解于昆明医科大学第一附属医院就诊的地中海贫血（简称“地贫”）基因筛查者地贫基因阳性率和基因突变类型及分布特征。

方法　回顾性分析2017年4月1日至2018年12月31日于昆明医科大学第一附属医院就诊的地贫基因筛查者2 376例，对地贫基因进行统计分析。

结果　（1）2 376例地贫基因筛查中检出地贫基因阳性样本817例，阳性率为34.39%；其中检出α地贫基因阳性样本392例，占总阳性样本的47.98%；β地贫基因阳性样本398例，占总阳性样本的48.71%；αβ复合型地贫基因阳性27例，占总阳性样本的3.30%；（2）392例α地贫基因阳性样本中以αα/--SEA、αα/-α3.7、αα/ααCS、αα/-α4.2和-α3.7/--SEA 基因型为主，分别占α地贫的50.51%、32.91%、4.34%、3.57%和2.55%；398例β地贫基因阳性样本中以CD26、CD41-42、CD17、IVS II-654、nt28基因型为主，分别占β地贫的25.38%、23.37%、20.60%、20.60%和3.27%。

结论　云南地区地贫基因携带率仍较高，其中β地贫中CD26最多，与国内其它省市人群存在差异。

[ 关键词 ] 地中海贫血； 基因突变； 筛查[ 中图分类号 ] R556.7 [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] 2095 − 610X （2021）01 − 0068 − 04Gene Screening and Result Analysis of2 376 Cases of ThalassemiaWANG Yun-juan 1,2,3），ZHANG Yan-liang 1,2,3），XU Qiu-yue 1,2,3），ZHAO Ying 1,2,3），HU Zhao-wu 4），SU Yang 1,2,3）（1） Dept. of Clinical Laboratory ，The 1st Affiliated Hospital of Kunming Medical University ;2） Yunnan Institute of Experimental Diagnosis ; 3） Yunnan Key Laboratory of Laborotory Medicine ，Kunming 650032; 4） Dept. of Clinical Laboratory ，People’s Hospital ofLufeng County ，Lufeng Yunnan 651200, China ）［Abstract ］ Objective To investigate the positive rate，gene mutation type and distribution characteristics of thalassemia gene screening patients in the First Affiliated Hospital of Kunming Medical University. Methods A retrospective analysis was made on 2 376 cases of thalassemia gene screening patients in the First Affiliated Hospital of Kunming Medical University from April 1，2017 to December 31，2018. The parameters of thalassemia gene and blood cell analysis (Hb，MCV，MCH，RDW) were statistically analyzed. Results （1） Among 2 376 cases of thalassemia gene screening，817 were positive for thalassemia gene，the positive rate was 34.39%，of which 392cases were positive for α thalassemia gene，accounting for 47.98% of the total positive samples；398 were positive samples of βthalassemia gene，accounting for 48.71% of the total positive samples；27 cases were αβcompound[收稿日期] 2020 − 07 − 23[基金项目] 云南省卫生健康委员会医学学科带头人基金资助项目（D-2018024）；昆明医科大学百名中青年学术和技术骨干基金资助项目（60117190460）[作者简介] 王云娟（1988～），女，云南嵩明人，临床检验诊断学硕士，主管检验师，主要从事临床基因检测、细菌耐药及传播机制研究工作。

α地中海贫血3种点突变基因检测（CS、QS、WS）
项目简介
地中海贫血是全球广为流行的遗传性溶血性疾病，属于常染色体隐性遗传的人类血红蛋白病，全世界至少有3.45亿人携带地中海贫血的致病基因。

全球地中海贫血基因携带者频率高达2.62%，包括中国南方在内的东南亚地区，印度次大陆、地中海地区、中东、北非和太平洋地区都是该病的高发地区，尤其我国广西的携带率高达24%、广东高达11%。

由于携带者没有症状，然而婚配的下一代却有1/4的机会罹患严重溶血性贫血症状的重症地中海贫血，因而构成了严重的公共健康问题。

目前，对此类遗传病尚无有效的治疗方法，但通过产前诊断可避免重症地中海贫血患儿的出生，这是目前国际上公认的首选预防措施。

临床意义：
地中海贫血基因突变位点众多，α地中海贫血基因突变类型主要为缺失，点突变比较少见，本项目针对相对常见的三个α地中海贫血基因点突变进行检测，可作为地中海筛查和诊断的辅助检测。

适检情况
1、地贫基因全套查无α地贫基因缺失，但患者有地贫临床表现，需进一步检测较为常见的三种α地贫基因点突变
2、家族中有地中海贫血疾病的高危人群，联合地贫基因全套进行较全面的筛查
标本采集要求
1、填写地贫基因检测的专用申请单。

2、EDTA抗凝管取全血2ml，2-8℃保存，当天送检
临床项目收费标准。

地中海贫血基因检测结果判读Prepared on 22 November 2020地中海贫血基因检测试剂结果判读亚能生物技术（深圳）有限公司1．α-地中海贫血基因检测试剂结果判读2．β-地中海贫血基因检测试剂结果判读●当β地贫复合α地贫时,患者不仅有β地贫的缺陷同时又有α地贫基因的缺失,这使得α和β珠蛋白琏的不平衡状态有所改善,表现临床症状可以较轻,实验室检查中凸显的是β地贫特征，因此临床上要重视这种复合地贫患者的检出,避免漏诊。

另外患者为复合地贫时,他无论与任何一种轻型地贫者婚配均存在1 /4生育重型地贫患儿的风险,因此,当夫妇一方为α地贫另一方为β地贫时,β地贫的一方一定要检查α地贫基因,以排除复合地贫的存在。

●当夫妇一方分别为α地贫,另一方为β地贫基因携带时，他们生育复合型地贫患儿的风险为1 /4,因此出生后子代的基因确诊对其今后的婚配指导是很有必要的。

●地中海贫血患者多次输血后容易造成体内铁的过度沉积,并可损害心脏及肝肾功能,临床上对多次输血患者需进行去铁治疗以减轻铁负荷。

然而地中海贫血患者并不是总伴体内铁负荷过重，地中海贫血患儿也可能发生铁缺乏,尤其是婴幼儿及轻型β地中海贫血患儿。

因此对地中海贫血患儿进行常规铁指标的测定,对伴铁缺乏者给予适当补铁治疗,可以提高Hb 浓度,减缓贫血症状。

3．地中海贫血治疗轻型地贫无需特殊治疗。

中间型和重型地贫应采取下列一种或数种方法给予治疗。

1.一般治疗：注意休息和营养，积极预防感染。

适当补充叶酸和维生素E。

2.输血和去铁治疗，此法在目前仍是重要治疗方法之一。

3.使用铁鳌合剂。

4.脾切除，脾切除对血红蛋白 H 病和中间型β地贫的疗效较好，对重型β地贫效果差。

脾切除可致免疫功能减弱，应在5～6岁以后施行并严格掌握适应症。

5.造血干细胞移植，是目前能根治重型β地贫的方法。

如有 HLA 相配的造血干细胞供者，应作为治疗重型β地贫的首选方法。

【预防】●开展人群普查和遗传咨询，作好婚前指导以避免地贫基因携带者之间联姻，对预防本病有重要意义。

地中海贫血基因检测校准方案地中海贫血是一种以地中海沿岸国家为主要分布区域的常见遗传性疾病。

由于地中海贫血的高发性和普遍性，对其进行有效的基因检测和校准方案显得尤为重要。

本文将深入探讨地中海贫血基因检测的校准方案，揭示其中的重要性和挑战，并分享本人的观点和理解。

一、地中海贫血基因检测的重要性地中海贫血是由基因突变引起的血红蛋白合成障碍性疾病，主要通过遗传方式传播。

了解个体的地中海贫血基因状态对于疾病的筛查、诊断和预防具有重要意义。

1. 提早进行准确诊断：地中海贫血携带者通常无症状，而患者则可能出现疲劳、贫血、乏力等症状。

准确诊断可以让患者及时采取治疗和管理措施。

2. 预防婴儿地中海贫血的出生：如果双亲中至少有一人是地中海贫血的携带者，那么他们的子女有高风险患上地中海贫血。

通过基因检测，可以提前判断是否存在携带地中海贫血基因的可能，并采取相应的遗传咨询和生育计划。

3. 促进国家的健康政策：了解地中海贫血的患病情况和携带者比例可以为制定针对该疾病的防控政策提供参考依据，包括基因检测的普及和家庭遗传咨询的推广。

二、地中海贫血基因检测的挑战然而，地中海贫血基因检测也存在一些挑战，主要包括以下几个方面：1. 基因多样性和突变类型：地中海贫血是由多个基因的遗传变异引起的，不同基因突变类型的检测方法和策略也不尽相同。

建立一个全面且准确的基因检测校准方案对于覆盖不同地区和人群的遗传变异至关重要。

2. 检测技术的选择：目前，基因检测方法包括传统的PCR和Sanger测序、Next Generation Sequencing（NGS）等。

不同的检测技术在准确性、成本和效率等方面存在差异，需要根据特定的实际情况选择合适的技术。

3. 公众意识和接受度：由于地中海贫血是一种遗传性疾病，公众对于基因检测的认知和接受度往往存在差异。

加强公众教育，提高对基因检测和遗传咨询的认识度，可以促进地中海贫血基因检测的普及和应用。

三、地中海贫血基因检测校准方案的优化为了解决以上挑战，以下是我对地中海贫血基因检测校准方案的一些建议和观点：1. 多样性覆盖和标准化：建立一个多样性覆盖的基因检测校准方案，包括覆盖多个地区和人群的常见和罕见地中海贫血基因突变。

α地中海贫⾎3种点突变基因检测（CS、QS、WS）项⽬
简介
α地中海贫⾎3种点突变基因检测（CS、QS、WS）
项⽬简介
地中海贫⾎是全球⼴为流⾏的遗传性溶⾎性疾病，属于常染⾊体隐性遗传的⼈类⾎红蛋⽩病，全世界⾄少有3.45亿⼈携带地中海贫⾎的致病基因。

全球地中海贫⾎基因携带者频率⾼达2.62%，包括中国南⽅在内的东南亚地区，印度次⼤陆、地中海地区、中东、北⾮和太平洋地区都是该病的⾼发地区，尤其我国⼴西的携带率⾼达24%、⼴东⾼达11%。

由于携带者没有症状，然⽽婚配的下⼀代却有1/4的机会罹患严重溶⾎性贫⾎症状的重症地中海贫⾎，因⽽构成了严重的公共健康问题。

⽬前，对此类遗传病尚⽆有效的治疗⽅法，但通过产前诊断可避免重症地中海贫⾎患⼉的出⽣，这是⽬前国际上公认的⾸选预防措施。

临床意义：
地中海贫⾎基因突变位点众多，α地中海贫⾎基因突变类型主要为缺失，点突变⽐较少见，本项⽬针对相对常见的三个α地中海贫⾎基因点突变进⾏检测，可作为地中海筛查和诊断的辅助检测。

适检情况
1、地贫基因全套查⽆α地贫基因缺失，但患者有地贫临床表现，需进⼀步检测较为常见的三种α地贫基因点突变
2、家族中有地中海贫⾎疾病的⾼危⼈群，联合地贫基因全套进⾏较全⾯的筛查
标本采集要求
1、填写地贫基因检测的专⽤申请单。

2、EDTA抗凝管取全⾎2ml，2-8℃保存，当天送检
临床项⽬收费标准。

地中海贫血基因检测实验步骤地中海贫血（Mediterranean anemia），又称为地中海型家族性小红细胞性贫血，是一种常染色体隐性遗传病。

该病是由珠蛋白基因缺陷引起的，导致血红蛋白结构异常，造成红细胞携氧能力减弱。

地中海贫血的基因检测通常涉及以下几个步骤：1. 样本采集：- 采集患者的血液样本或使用拭子采集口腔黏膜细胞。

2. DNA提取：- 从血液或细胞样本中提取DNA。

这通常涉及破坏细胞膜和核膜，然后使用化学试剂纯化DNA。

3. PCR扩增：- 利用聚合酶链反应（PCR）技术，特异性地扩增珠蛋白基因的特定片段。

这通常涉及设计针对基因突变热点区域的引物，并通过循环加热和退火步骤使目标DNA片段指数级增长。

4. 凝胶电泳：- 将PCR产物通过凝胶电泳进行分离，根据大小将不同长度的DNA片段分开。

这有助于识别是否存在特定的突变。

5. 基因测序：- 对PCR产物进行测序，以识别可能的基因突变。

测序可以揭示DNA序列中的碱基替换、插入或缺失，这些改变可能与地中海贫血的发生有关。

6. 突变分析：- 将测序结果与已知的突变数据库进行比对，以确定是否存在与地中海贫血相关的特定基因突变。

7. 数据解读：- 根据突变分析的结果，结合患者的临床症状和家族史，医生或遗传顾问将解释检测结果，并提供遗传咨询服务。

8. 报告编写：- 编写一份包含检测结果和相关解释的报告，供医疗专业人员和患者参考。

基因检测对于诊断地中海贫血非常重要，它不仅可以帮助确诊患有该病的个体，还可以为家族成员提供风险评估和遗传咨询。

随着科技的进步，新的检测技术（如芯片基因分型和下一代测序）正在使地中海贫血的基因检测变得更加快速和精确。