分子生物学考研真题1
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分子生物学试题及答案(整理版)第一篇:DNA结构与特性1. DNA的全称是什么?DNA的全称是脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid)。
2. DNA是由哪些基本单元组成的?DNA由四种不同的碱基组成,称为腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)。
3. DNA含有一条还是两条互补的链?DNA是由两条互补的链组成的,它们以双螺旋形式交织在一起。
4. DNA的双螺旋结构是由哪些部分组成的?DNA的双螺旋结构是由磷酸基团、脱氧核糖糖基和碱基三部分组成的。
5. DNA的碱基配对方式是什么?每个碱基都能与哪些其他碱基配对?DNA的碱基配对方式是A-T、C-G,即腺嘌呤与胸腺嘧啶互补,鸟嘌呤与胞嘧啶互补。
6. DNA的链方向是什么?DNA的两条链是相对方向相反的,即它们是“头对头”地排列在一起的。
7. DNA的复制方式是什么?该过程用哪种酶?DNA的复制方式是半保留复制,即每条新合成的DNA链都包含一个旧链和一个新链。
该过程用DNA聚合酶完成。
8. DNA序列编码的是什么?DNA序列编码的是生物体遗传信息的载体,包括基因和非编码区域。
9. DNA在哪些生物体中被发现?DNA存在于所有有细胞核和一些原核生物的细胞中。
10. DNA是如何被发现的?DNA是由克里克和沃森在1953年通过X射线晶体学研究得到的。
这项研究揭示了DNA的双螺旋结构,正式开启了分子生物学的新篇章。
第二篇:基因表达调控1. 什么是基因表达?基因表达是指基因信息从DNA转录为RNA,再转化为蛋白质的过程。
2. 基因表达是否受到调控?为什么?基因表达是受到调控的。
因为不同的细胞类型和不同的时期需要不同的基因表达模式来维持生命活动。
3. 给出三种调控基因表达的方式。
调控基因表达的方式有:转录水平调控、RNA后转录水平调节和转化水平调控。
4. 什么是启动子?在哪里找到它?启动子是一段DNA序列,位于转录开始位点上游,通常是几百个碱基对。
考研分子生物学常见试题分子生物学常见试题一, 名词解释1, 基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位.2, 基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和.3, 端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在.4, 操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子.5, 顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等.6, 反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子.7, 启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.8, 增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列.它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远.9, 基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录,翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程.10, 信息分子:调节细胞生命活动的化学物质.其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子. 11, 受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的特殊蛋白质.12, 分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝.13, 蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶.14, 蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子,与蛋白激酶相对应存在,共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统.15, 基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程.16, 载体:能在连接酶的作用下和外源DN**段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA分子.17, 转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程.18, 感染:以噬菌体,粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增.19, 转导:指以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程,有时也指在真核细胞之间通过.的过程DNA逆转录病毒转移和获得细胞20, 转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程.21, DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响.22, DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构.23, 退火:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交链.24, 筑巢PCR:先用一对外侧引物扩增含目的基因的大片段,再用内侧引物以大片段为摸板扩增获取目的基因.可以提高PCR的效率和特异性.25, 原位PCR:以组织固定处理细胞内的DNA或RNA作为靶序列,进行PCR反应的过程.26, 定量PCR:基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA进行定量测定,对此采用的PCR技术就叫定量PCR.27, 基因打靶:是指通过DNA定点同源重组,改变基因组中的某一特定基因,从而在生物活体内研究此基因的功能.28, DNA芯片NA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后与标记的样品杂交,通过对杂交信号的检测析,即可获得样品的遗传信息.由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片. 29, 错义突变:DNA分子中碱基对的取代,使得mRNA的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变.30, 无义突变:由于碱基对的取代,使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变.31, 同义突变:碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止,有时虽然有碱基被取代,但在蛋白质水平上没有引起变化,氨基酸没有被取代,这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的突变.32, 移码突变:在编码序列中,单个碱基,数个碱基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变,不能编码原来的蛋白质的突变.33, 癌基因:是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性.当癌基因结构或表达发生异常时,其产物可使细胞无限制增殖,导致肿瘤的发生.包括病毒癌基因和细胞癌基因.34, 细胞癌基因:存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长,增殖,分化和发育等生理功能.在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化.35, 病毒癌基因:存在于病毒(大多是逆转录病毒)基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因. 它不编码病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用.36, 基因诊断:以DNA或RNA为诊断材料,通过检查基因的存在,结构缺陷或表达异常,.对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程37, RFLP:即限制性片段长度多态性,个体之间DNA的核苷酸序列存在差异,称为DNA多态性.若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为RFLP.38, 基因治疗:一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞,以最终达到预防或改变特殊疾病状态为目的治疗方法.39, 反义RNA:碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA.可以作为一种调控特定基因表达的手段.40, 核酶:是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶,可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂.41, 三链DNA:当某一DNA或RNA寡核苷酸与DNA高嘌呤区可结合形成三链,能特异地结合在DNA的大沟中,并与富含嘌呤链上的碱基形成氢键.42, SSCP:单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法.相同长度的单链DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同,这样就形成了单链构象多态性.43, 管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因.44, 细胞全能性:指同一种生物的所有细胞都含有相同的DNA,即基因的数目和种类是一样的,但在不同阶段,同一个体的不同组织和器官中基因表达的种类和数目是不同的.45, SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点.46, 反义核酸技术:是通过合成一种短链且与DNA或RNA互补的,以DNA或RNA为目标抑制翻译的反义分子,干扰目的基因的转录,剪接,转运,翻译等过程的技术.47, 核酸探针:探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用,并在相互作用之后可以检测出来的生物大分子.核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子.48, 周期蛋白:是一类呈细胞周期特异性或时相性表达,累积与分解的蛋白质,它与周期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行.49, CAP:是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白,这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个许多操纵子,使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源.50, 顺反子51, 结构域二, 问答题(一),病毒,原核,真核基因组的特点答:1,病毒基因组的特点:①种类单一;②单倍体基因组:每个基因组在病毒中只出现一次;③形式多样;④大小不一;⑤基因重叠;⑥动物/细菌病毒与真核/原核基因相似:内含子;⑦具有不规则的结构基因;⑧基因编码区无间隔:通过宿主及病毒本身酶切;⑨无帽状结构;⑩结构基因没有翻译起始序列.2,原核基因组的特点:①为一条环状双链DNA;②只有一个复制起点;③具有操纵子结构;④绝大部分为单拷贝;⑤可表.⑦重复序列很少;无内含子,⑥基因一般是连续的;大于真核生物小于病毒50%,达基因约.3,真核基因组的特点:①真核生物基因组远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大,具有多个复制起点;②基因组DNA与蛋白质结合成染色体,储存于细胞核内;③真核基因为单顺反子,而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子;④基因组中非编码区多于编码区;⑤真核基因多为不连续的断裂基因,由外显子和内含子镶嵌而成;⑥存在大量的重复序列;⑦功能相关的基因构成各种基因家族;⑧存在可移动的遗传因素;⑨体细胞为双倍体,而精子和卵子为单倍体.(二),乳糖操纵子的作用机制答:1,乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶, 透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.2,阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶.所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控.3,CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶.4,协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP 的正调控两种机制,互相协调,互相制约.(三),真核生物转录水平的调控机制答:真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子,顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程.1, 转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA 聚合酶所识别并结合.转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物.在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD与TATA 盒结合;促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成.2, 反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域,转录活性域和结合其他蛋白结合.对基因的表达有正性或负性调控作用;能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件);域3, 转录起始的调控:⑴反式作用因子的活性调节:①表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;②共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;③配体结合——许多激素受体是反式作用因子;④蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成.⑵反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用.⑶反式作用因子的作用方式——成环,扭曲,滑动,Oozing.⑷反式作用因子的组合式调控作用:每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用.(四),真核生物转录后水平的调控机制答1),5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化的调控意义:5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化是保持mRNA 稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解.(2),mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用(3),mRNA运输的控制(五),受体的特点答:1,高度专一性;2,高度亲和性;3,可逆性;4,可饱和性;5,特定的作用模式(六),表皮生长因子介导的信号传导途径答:表皮生长因子受体是一个典型的蛋白酪氨酸激酶受体,这个信号转导途径的主要步骤是:1, 受体二聚化的形成及其磷酸化:表皮生长因子与受体的结合使受体发生二聚化,从而改变受体构象,使蛋白酪氨酸激酶活性增强,受体自身的几个蛋白酪氨酸残基在激酶的作用下发生磷酸化.2, 募集接头蛋白Grb2:表皮生长因子受体自身被磷酸化后,不仅其激酶活性增强,而且其构象发生变化,从而适合与含SH2结构域的蛋白分子相结合.Grb2是作为接头蛋白结合到受体上. 3, 调控分子SOS的活化:SOS含有可与SH3结构域相结合的富含脯氨酸基序,当Grb2结合到磷酸化的表皮生长因子受体后,它的两个SH3结构域即可结合SOS,使之活化.4, 低分子量G蛋白Ras的活化:SOS可促进Ras释放GDP,结合GTP的反应,使Ras激活.活化的Ras作用其下游分子Raf,使之活化.Raf是MAPK级联反应的第一个分子,由此启动了MAPK 的三级激活过程.5, MAPK的级联激活:Raf是一种MAPKKK,它作用于MEK,使之磷酸化而激活,活化的MEK在作用于MAPK家族的ERK1,使之磷酸化激活由此完成了三级激活.6, 转录因子的磷酸化及转录调控作用:活化的ERK可以转至细胞核内,使某些转录调控因子发生磷酸化,从而影响基因的转录.(七),cAMP信号转导途径答:1,组成:胞外信息分子(主要是胰高血糖素,肾上腺素和促肾上腺皮质激素),受体,G蛋白, AC,cAMP , PKA.:途径2,.信号分子与受体结合,引起受体构象变化受体活化G蛋白活化后的G蛋白激活腺苷酸环化酶(AC)AC 催化ATP生成cAMPcAMP 活化PKA,PKA使目标蛋白磷酸化,调节代谢酶的活性或调节基因的表达(八),IP3-Ca2+信号途径:信号分子与受体结合,引起受体构象变化受体活化G蛋白活化后的G蛋白激活PLCPLC 水解PIP2生成IP3 和DGIP3 使钙通道打开,细胞内Ca2+升高Ca2+ 与CaM结合,激活Ca2+-CaM依赖的蛋白激酶Ca2+ -CaM依赖的蛋白激酶使目标蛋白磷酸化.(九),分子克隆中常用的工具酶及良好载体的条件答:(1),常用的工具酶1, 限制性核酸内切酶:是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶.2, DNA连接酶:将两段DNA分子拼接起来的酶.3, DNA聚合酶:催化单核苷酸链延伸.4, 逆转录酶:依赖于RNA的DNA聚合酶,这是一种有效的转录RNA成为DNA的酶,产物DNA又称互补DNA.5, 末端脱氧核糖核酸转移酶:将脱氧核糖核酸加到DNA的3末端.6, 碱性磷酸酶:催化去除DNA,RNA等的5磷酸基团.7, 依赖DNA的RNA聚合酶:识别特异性启动子,RNA转录.(2),良好载体的条件1,必须有自身的复制子;2,载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点,即多克隆位点,以供外源DNA插入;3,载体应具有可供选择的遗传标志,以区别阳性重组子和阴性重组子;4,载体分子必须有足够的容量;5,可通过特定的方法导入细胞;6,对于表达载体还应具备与宿主细胞相适应的启动子,前导顺序,增强子,加尾信号等DNA调控元件.(十),蓝-白筛选的原理答:某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段,在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列.这些位点上如果没有克隆外源性DN**段,在质粒被导入lac-的大肠杆菌后,质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达,与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补,产生有活性的半乳糖苷酶,加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后,出现蓝色的菌落.如果在多克隆位点上插入外源DN**段,将使lac Z基因灭活,不能生成半乳糖苷酶,结果菌落出现白色.由于这.种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然.(十一)SANGER双脱氧链终止法的原理答:DNA链中核苷酸以3',5'-磷酸二酯键连接,合成DNA所用的底物是 2'-脱氧核苷三磷酸.2',3'ddNTP与普通dNTP不同,它们在脱氧核糖的3'位置缺少一个羟基.在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中,但由于没有3'羟基,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此,正在延伸的DNA链不能继续延伸.在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP,链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争,产物是一系列的核苷酸链, 其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离.在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP,结果将产生4组寡核苷酸,它们将分别终止于模板链的A,C,G或T位置.(十二),核酸分子杂交的原理答:具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下(适宜的温度及离子强度等)碱基互补配对结合,重新形成双链;在这一过程中,核酸分子经历了变性和复性的变化,以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂.杂交的双方是待测核酸和已知序列.(十三),影响杂交的因素答:1,核酸分子的浓度和长度:核酸浓度越大,复性速度越快.探针长度应控制在50-300个碱基对为好.2,温度:温度过高不利于复性,而温度过低,少数碱基配对形成的局部双链不易解离,适宜的温度是较TM值低25度.3,离子强度:在低离子强度下,核酸杂交非常缓慢,随着离子强度的增加,杂交反应率增加.高浓度的盐使碱基错配的杂交体更稳定,所以进行序列不完全同源的核酸分子杂交时必须维持杂交反应液中的盐浓度和洗膜液中的盐浓度.4,杂交液中的甲酰胺:甲酰胺能降低核酸杂交的TM值.它有以下优点:在低温下探针更稳定;能更好地保留非共价结合的核酸.5,核酸分子的复杂性:是指存在于反应体系中的不同顺序的总长度.两个不同基因组DNA变性后的相对杂交速率取决于样品浓度绝对一致时的相对复杂性(即DNA 中的碱基数).6,非特异性杂交反应:在杂交前应对非特异性杂交反应位点进行封闭,以减少其对探针的非特异性吸附作用.(十四),探针的种类和优缺点答:1,cDNA探针:通过逆转录获得cDNA后,将其克隆于适当的克隆载体,通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增.提取质粒后分离纯化作为探针使用.它是目前应用最为广泛的一种探针.纯,大量扩增,从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后:基因组探针2,.化,切取插入片段,分离纯化为探针.3,寡核苷酸探针:根据已知的核酸顺序,采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针. 4,RNA探针:采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针.(十五),探针的标记法答:1,缺口平移法:此法是利用适当浓度的DNase Ⅰ在DNA双链上随机切割单链,造成单链切口. 切口处产生一个5末端和3末端,3末端就可以作为引物,在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的催化下,以互补的DNA单链为摸板,依次将dNTP连接到切口的3末端的羟基上,合成新的DNA单链;同时DNA聚合酶Ⅰ的5→3的核酸外切酶活性在切口处将旧链从5末端逐步切除,新合成链不断延伸, 从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代.2,随机引物法:随机引物是人工合成的长度为6个寡核苷酸残基的寡聚核苷酸片段的混合物.对于任何一个用作探针的DN**段,随机引物混合物中都会有一些六核苷酸片段可以与之结合,起到DNA合成引物的作用.将这些引物与变性的DNA单链结合后,以4种dNTP(其中一种是标记物标记的dNTP)为底物,合成与探针DNA互补的切带有标记物的DNA探针.3,PCR标记法:在PCR反应底物中,将一种dNTP换成标记物标记的dNTP, 这样标记的dNTP就在PCR反应的同时掺入到新合成的DNA链上.4,末端标记法:只是将DN**段的一端进行标记.(十六),PCR的基本原理答CR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的.需要重复进行DNA模板解链,引物与模板DNA结合,DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性,低温退火,中温延伸3个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA 得以迅速扩增.DNA模板变性:模板双链DNA 单链DNA,94℃.退火:引物+单链DNA 杂交链,引物的Tm值.引物的延伸:温度至70 ℃左右, Taq DNA聚合酶以4种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物3'末端为起点的5'→3'DNA链延伸反应,形成新生DNA链.新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增.(十七),PCR引物设计的基本要求答:1,引物长度一般为15~30个核苷酸.过短影响PCR的特异性,过长会提高相应退火温度,使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成.2,引物的碱基尽可能随机,避免出现嘌呤,嘧啶碱基堆积现象.3'端不应有连续3个G和C.否,Tm值Tm端引物具有相似的5'端和-55%.3'45% 含量一般占.G+C则会使引物和模板错误配对.值计算公式:Tm=4(G+C)+ 2(A+T)。
考研分子生物学试题及答案# 考研分子生物学试题及答案## 一、选择题(每题2分,共20分)1. DNA复制的主要酶是:A. 逆转录酶B. RNA聚合酶C. DNA聚合酶D. 限制性内切酶2. 转录过程中,RNA聚合酶结合的DNA序列是:A. 启动子B. 增强子C. 终止子D. 信号肽序列3. 下列哪个不是真核生物基因表达调控的特点?A. 存在启动子和增强子B. 存在多种RNA剪接形式C. mRNA具有5'帽子和3'尾巴D. 转录后修饰4. 基因工程中常用的载体必须具备哪些条件?A. 易于转化B. 含有选择标记C. 具有复制起点D. 所有以上5. 下列哪个是原核生物的基因表达调控方式?A. 增强子的使用B. 启动子的识别C. 转录后修饰D. 操纵子模型## 二、简答题(每题10分,共30分)1. 简述PCR技术的原理及其在分子生物学研究中的应用。
2. 描述真核生物与原核生物在基因结构和表达调控方面的主要区别。
3. 解释什么是基因敲除技术,并简述其在生物医学研究中的重要性。
## 三、论述题(每题25分,共50分)1. 论述基因编辑技术CRISPR-Cas9的工作原理,并讨论其在基因治疗中的潜在应用。
2. 分析基因组学研究对现代生物医学的影响,包括但不限于疾病诊断、治疗策略的制定以及个性化医疗的发展。
## 参考答案### 一、选择题1. C2. A3. A4. D5. D### 二、简答题1. PCR技术,即聚合酶链反应,是一种在体外快速扩增DNA片段的方法。
其原理是利用DNA聚合酶在特定温度下循环进行DNA的合成,通过反复的变性、退火和延伸步骤,实现目标DNA序列的指数级扩增。
PCR技术在分子生物学研究中具有广泛的应用,包括基因克隆、遗传疾病诊断、法医学鉴定等。
2. 真核生物与原核生物在基因结构和表达调控方面的主要区别包括:真核生物的基因含有内含子和外显子,需要经过剪接形成成熟的mRNA;而原核生物的基因通常是连续的,不需要剪接。
分子生物考研试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. DNA分子的双螺旋结构是由哪位科学家首次提出的?A. 沃森和克里克B. 达尔文C. 孟德尔D. 牛顿答案:A2. 以下哪个不是基因表达的基本步骤?A. 转录B. 翻译C. 复制D. 后修饰答案:C3. 真核生物的基因表达调控主要发生在哪个阶段?A. 转录前B. 转录后C. 翻译前D. 翻译后答案:A4. 以下哪种技术不是用于DNA测序的?A. Sanger测序B. 质谱分析C. 聚合酶链反应(PCR)D. 次代测序答案:C5. 以下哪个是原核生物?A. 酵母菌B. 乳酸菌C. 大肠杆菌D. 人类答案:C6. 以下哪个不是蛋白质合成的必需氨基酸?A. 赖氨酸B. 色氨酸C. 谷氨酸D. 精氨酸答案:C7. 以下哪种酶在DNA复制中不起作用?A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA解旋酶D. RNA引物酶答案:B8. 以下哪个是真核生物的基因结构特点?A. 基因连续B. 基因间有非编码区C. 基因包含内含子和外显子D. 基因只编码一种蛋白质答案:C9. 以下哪个是细胞周期中的间期?A. G0期B. G1期C. S期D. G2期答案:B10. 以下哪个是RNA干扰现象的分子机制?A. RNA降解B. RNA编辑C. RNA剪接D. RNA沉默答案:D二、简答题(每题10分,共30分)1. 简述PCR技术的原理及其在分子生物学中的应用。
答案:PCR(聚合酶链反应)是一种分子生物学技术,用于快速复制特定DNA序列。
其原理是利用DNA聚合酶在热循环条件下反复进行DNA的合成。
PCR技术在分子生物学中的应用广泛,包括基因克隆、DNA指纹分析、病原体检测等。
2. 描述转录和翻译过程的基本步骤。
答案:转录是DNA信息转变成mRNA的过程,包括启动、延伸和终止三个步骤。
翻译是mRNA信息转变成蛋白质的过程,包括氨基酸的激活、肽链的合成和蛋白质的折叠。
分子生物学试题及答案(整理版)
一、选择题
1.DNA双螺旋结构是由哪两种碱基之间的氢键支撑的? A. 腺嘌呤和胸腺嘧啶
B. 腺嘌呤和鳌酷嘧啶
C. 胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
D. 腺嘌呤和胸腺嘧啶、胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
2.在RNA转录中,哪种RNA是由RNA聚合酶合成的? A. mRNA
B. rRNA
C. tRNA
D. snRNA
3.下列哪个过程不属于DNA复制中的信息单向传递过程? A. 串联扭曲
B. 连续DNA合成
C. 不连续DNA合成
D. 缺氧齿合
二、填空题
1.DNA双螺旋结构中,两根链之间的碱基互为__________。
2.在生物细胞中,DNA的复制是由__________完成的。
3.参与DNA复制的酶包括DNA__________酶、DNA__________酶和
DNA__________酶。
三、简答题
1.请简要说明DNA双螺旋结构的特点和形成方式。
2.什么是DNA复制?简要描述DNA复制的过程。
四、解答题
1.请根据你的理解,解释DNA复制的半保留复制特点。
2.试分析DNA复制过程中可能出现的错误及其纠正机制。
以上为分子生物学试题及答案的整理版,希望能对您的学习有所帮助。
重庆大学考研分子生物学题库+答案一、选择题1、以下哪种不是核酸分子杂交的类型?()A Southern 杂交B Northern 杂交C Western 杂交D 原位杂交答案:C解析:Western 杂交是用于检测蛋白质的技术,不是核酸分子杂交。
Southern 杂交用于检测 DNA,Northern 杂交用于检测 RNA,原位杂交则是在细胞或组织切片上进行的核酸杂交。
2、原核生物启动子中-10 区的保守序列是()A TATAATB TTGACAC CCAATD GGGCCC答案:A解析:原核生物启动子中-10 区的保守序列是 TATAAT,也称为Pribnow 盒。
3、以下哪种酶在 DNA 复制过程中负责解开双螺旋?()A DNA 聚合酶B 拓扑异构酶C 解旋酶D 引物酶答案:C解析:解旋酶的作用是解开 DNA 双螺旋结构,使复制得以进行。
DNA 聚合酶负责合成新的 DNA 链,拓扑异构酶主要解决 DNA 超螺旋问题,引物酶合成引物。
4、真核生物 mRNA 的 5'端帽子结构是()A m7GpppNmpNB m7ApppNmpNC m7CpppNmpND m7UpppNmpN答案:A解析:真核生物 mRNA 的 5'端帽子结构是 m7GpppNmpN,对mRNA 的稳定性和翻译起始等具有重要作用。
5、基因表达调控的主要环节是()A 转录起始B 转录后加工C 翻译起始D 翻译后加工答案:A解析:转录起始是基因表达调控的关键环节,通过调控转录起始复合物的形成来控制基因表达的水平。
二、填空题1、核酸的基本组成单位是_____。
答案:核苷酸2、 DNA 双螺旋结构的稳定因素主要有_____、_____和_____。
答案:碱基堆积力、氢键、离子键3、蛋白质生物合成的模板是_____,场所是_____。
答案:mRNA、核糖体4、操纵子包括_____、_____和_____。
答案:调节基因、操纵基因、结构基因5、基因突变的类型有_____、_____、_____和_____。
分子生物学习题集(1)证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是::(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂(b)DNA突变导致毒性丧失(c)生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子(e)真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代--答案:c1953年Watson和Crick提出:( ) --类型:选择题--选择:(a)多核苦酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋(b)DNA的复制是半保留的,常常形成亲本—子代双螺旋杂合链(c)三个连续的核苦酸代表一个遗传密码(d)遗传物质通常是DNA而非RNA (e)分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变--答案:a双链DNA中的碱基对有:( ) --类型:选择题--选择:(a)A—U (b)G─T (c)C—G (d)T─A (e)C─A --答案:c,dDNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。
以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述:( ) --类型:选择题--选择:(a)哺乳动物DNA约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险的(b)依赖于A-T含量,因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少(c)是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值(d)可通过碱基在260nm的特征吸收蜂的改变来确定(e)就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度--答案:c,dDNA的变性:( ) --类型:选择题--选择:(a)包括双螺旋的解链(b)可以由低温产生(c)是可逆的(d)是磷酸二酯键的断裂(e)包括氢键的断裂--答案:a,c,e在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中,发夹结构的形成:( ) --类型:选择题--选择:(a)基于各个片段问的互补,形成反向平行双螺旋(b)依赖于A—U含量,因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少(c)仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生(d)同样包括有像G—U这样的不规则碱基配对(e)允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基--答案:a,dDNA分子中的超螺旋:( ) --类型:选择题--选择:(a)仅发生于环状DNA中。
分子生物学试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. DNA分子的双螺旋结构是由谁提出的?A. 沃森和克里克B. 达尔文C. 孟德尔D. 摩尔根答案:A2. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能?A. 合成DNA链B. 修复DNA损伤C. 催化RNA转录D. 校对新合成的DNA链答案:C3. 真核生物的mRNA帽子结构位于其5'端,其主要功能是什么?A. 促进翻译B. 保护mRNA不被降解C. 促进mRNA的剪接D. 促进mRNA的运输答案:B4. 以下哪种RNA分子在蛋白质合成中不直接参与?A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA5. 基因表达调控中,转录因子的作用是什么?A. 提供转录所需的能量B. 识别并结合到特定的DNA序列上C. 催化DNA复制D. 促进DNA修复答案:B6. 以下哪种技术用于研究基因功能?A. PCRB. DNA测序C. 基因敲除D. DNA指纹分析答案:C7. 以下哪个不是DNA复制的特点?A. 半保留复制B. 需要引物C. 双向复制D. 需要逆转录酶答案:D8. 以下哪个不是RNA干扰(RNAi)的作用机制?A. 降解特定的mRNAB. 抑制基因表达C. 促进基因突变D. 沉默特定基因答案:C9. 以下哪个是真核生物中常见的非编码RNA?B. siRNAC. tRNAD. rRNA答案:A10. 以下哪个是原核生物和真核生物共有的基因表达调控机制?A. 转录后修饰B. 转录因子调控C. mRNA剪接D. 核糖体结合位点调控答案:B二、填空题(每空1分,共20分)1. DNA分子的基本组成单位是_______,而RNA分子的基本组成单位是_______。
答案:脱氧核苷酸;核糖核苷酸2. 在DNA复制过程中,_______酶负责解开双链DNA,而_______酶负责合成新的DNA链。
答案:解旋酶;DNA聚合酶3. 真核生物的基因表达调控主要发生在_______水平,而原核生物的基因表达调控主要发生在_______水平。
电子科技大学2023年613分子生物学考研真题(回忆版)一名词解释10题共30分
核小体
Tm
颠换
Gold gate克隆
DNA拓扑异构酶
内含子可变剪接
中心法则
SiDNA
复制叉
卫星DNA
二选择20题共60分
Rna聚合酶三种作用
核心酶亚基
端粒构成及作用
Dna聚合酶构成作用
Dna修复方法
氨基酸活化
顺式作用元件
SnDna作用
操纵子基质
DNA子母链计算
复制起点
全酶核心酶
启动子位置及作用
高中低重复序列
三简答题6题共35分
描述DNA一二三级结构
介绍三种RNA作用
核糖开关是怎么发挥作用的
新冠病毒检测的原理与技术以及操作
色氨酸操纵子的组成与作用
转录前DNA染色体调控有哪些方式
四材料分析题1题共10分
原体突变为突变体密码子突变对转录及终止的影响
五实验1题共15分
某拟南芥某基因可能对花型发育有关,设计实验得到其突变体并对可能出现的实验结果进行分析。
分子子生物学试题及答案一、选择题1. 基因的表达过程包括以下哪几个步骤?A. DNA复制B. 转录C. 翻译D. 所有以上选项答案:B、C2. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能?A. 合成DNAB. 校对错误C. 修复DNAD. 催化DNA链的延伸答案:C3. 真核生物的mRNA在进行翻译前需要进行哪些加工?A. 剪接B. 加帽C. 多聚腺苷酸化D. 所有以上选项答案:D二、填空题4. 基因的转录过程是由______酶催化的。
答案:RNA聚合酶5. 真核生物的基因表达调控主要发生在______阶段。
答案:转录6. 原核生物的基因表达调控主要发生在______阶段。
答案:转录后三、简答题7. 简述PCR技术的原理及其应用。
答案:PCR(聚合酶链反应)技术是一种分子生物学方法,用于快速扩增特定的DNA片段。
其原理是利用DNA聚合酶在体外反复进行DNA 的合成,通过多次循环的变性、退火和延伸步骤,实现目标DNA序列的指数级扩增。
PCR技术广泛应用于基因克隆、遗传疾病诊断、法医学鉴定等领域。
8. 什么是基因编辑技术,举例说明其在医学研究中的应用。
答案:基因编辑技术是指利用特定的酶(如CRISPR-Cas9系统)对生物体的基因序列进行精确的添加、删除或替换,从而改变生物体的遗传特性。
在医学研究中,基因编辑技术可以用于研究特定基因的功能,治疗遗传性疾病,以及开发新的治疗策略。
四、论述题9. 论述真核生物与原核生物在基因表达调控方面的主要差异。
答案:真核生物与原核生物在基因表达调控方面存在显著差异。
真核生物的基因表达调控更为复杂,涉及多个层次,包括染色质结构的调控、转录因子的结合、mRNA的加工和稳定性调控、翻译后调控等。
相比之下,原核生物的基因表达调控主要发生在转录水平,例如通过操纵子结构实现多个基因的协同调控。
此外,真核生物的基因表达还受到细胞类型、发育阶段和环境因素等多种因素的影响。
结束语:本试题涵盖了分子生物学的基础知识和核心概念,旨在考察学生对基因表达调控机制的理解和应用能力。