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血疟原虫(MP)厚血片检查法（手工法）标准操作规程1. 实验原理应用瑞氏染色法对制备好的厚血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。
2. 标本采集2.1标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。
2.2标本种类：全血或末梢血2.3标本要求：厚血片的溶血要及时。
3. 标本储存：厚血片的放置期限在夏季不超过48h，冬季不超过62h。
4. 标本运输：室温运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染。
6. 操作步骤6.1 在洁净玻片上，滴患者血液2滴。
6.2 用推片角将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。
6.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血数分钟。
脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。
6.4 不必待干，进行瑞氏染色。
6.5 干后镜检。
7. 结果判断与分析：在油镜下观察20个视野或以上才能报告“未检出疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。
8. 临床意义：本实验有利于提高疟原虫的阳性检出率。
9. 操作性能：快速简便、阳性检出率高、利于人群普查初筛10. 方法局限性10.1 易受溶血不完全的影响。
10.2 经验缺乏者易受其他杂物的影响。
10.3 存在主观判断的失误10.4 不易鉴别出疟原虫的种类。
11. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,85-86 12. 注意事项12.1 染色后，水洗时不要先倒去染液，应让清水流进染液，使沉渣冲走。
12.2 注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。
血疟原虫(MP)薄血片检查法（手工法）标准操作规程1. 实验原理应用瑞氏染色法对制备好的薄血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫，并鉴别其形态种类。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。
2.2 标本种类：全血或末梢血2.3 标本要求：薄血片的血膜厚度要适度均匀以利镜检。
血疟原虫检查标准操作程序1 检验目的应用瑞氏-吉姆萨染色法对制备好的血片进行染色后在显微镜下观察，判断是否感染疟原虫。
2 检测原理瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成。
将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。
瑞氏染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。
各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。
核与酸性染料伊红结合,染成粉红色；胞质与碱性染料美蓝或天青结合，染蓝色;胞质中含有血红蛋日白消化分解后的产物-疟色素,疟色素不着色，为棕黄色或棕褐色。
3 性能特征无4 标本要求（包括病人准备、容器、样本类型等)4.1 病人准备:间日疟及三日患者应在发作后数小时至10余小时采血，此时，早期滋养体已发育成易于鉴别形态的晚期滋养体；恶性疟患者，应在发作后20小时左右采血。
4.2 标本类型:静脉全血4.3 标本容器: EDTA-K2抗凝管4.4 标本存放:4.4.1未检测标本的存放:放在工作台标本架。
4.4.2已拉测标本的存放:检毕标本排列于样本架,置检毕标本台，由卫生员统一转入2-8℃标本冷藏库保存7天，血片用乙酸乙酯脱油保存于存片盒。
4.5 标本运输:室温条件下运输。
4.6 标本拒收标准:参照《用户手册》4.7 检测时限: 1小时。
5 仪器和试剂5.1 试剂名称:瑞姬氏染色液5.1.1瑞姬氏染色液:瑞氏染料0.5g、姬氏染料0.5g，加入500ml甲醇中，混匀溶解后备用。
5.1.2pH6.5磷酸盐缓沖液:磷酸二氢钾0.3g、磷酸氢二钠0.2g,加入100ml蒸馏水中溶解。
5.2 试剂来源:珠海贝索。
5.3 仪器:普通光学显微镜。
6 环境和安全:6.1 检测环境:应符合《显微镜标准操作程序》相关要求。
6.2 设备的安全操作:详见《显微镜标准操作程序》。
6.3 生物安全:6.3.1血液标本的运送必须保证运送过程中的生物安全，防止溢出。
血液标本溢出后，应该立即对污染的环境和设备进行消毒处理。
检查疟原虫染应采集的标,本
疟疾检测方法:血涂片找疟原虫，检测流程:确定采血对象，采集标本，核对化验单，记录相关登记本，制作血涂片，最后在显微镜下找疟原虫。
1.疟疾检测流程:
(1)采血对象。
临床诊断为疟疾、疑似疟疾和不明原因的发热病人。
(2)化验单，由临床医师开具化验单，嘱咐患者到化验室血检，检验者核对患者信息。
(3)镜检人员对血检对象按照登记本要求进行登记。
(4)消毒采血部位，用75％乙醇对采血部位消毒，采血部位多在手指末端。
也可在耳垂采血。
(5)待采血部位干后，采集血标本。
(6)血膜制作，取清洗过的玻片2张，1张做载片、1张做推片，要求推片的一侧边缘光滑、用右手大拇指和食指夹持推片中部。
(7)血膜染色，建议首选姬姆萨氏染液。
先用甲醇固定薄片。
完全晾干后与厚片同时染色。
如选用瑞氏染色则先滴几滴蒸馏水在厚血膜上溶血至灰白色，倾去水滴、晾干后按说明进行染色。
(8)镜检。
2.风险提示:疟疾为乙类法定传染病，通过按蚊叮咬接触传播，血检阳性，应及时到专科医院进行规范治疗。
疟原虫血检工作制度
开展血检工作是基本消除疟疾重点检测手段，它对监测疟疾疫情动态，及时发现病人，及时根治，及时制定相应防治措施，控制疟疾流行均有十分重要的意义，为一步加强我镇的疟疾防控工作，提高疟疾涂片的质量，成立疟疾血检工作制度。
一、临床医生、检验科医生应严格按照登记本项目内容，详细登记，不得漏项，检验科医生负责将开据疟疾血检申请单的临床医生姓名登记到患者相关信息一栏。
二、检验科医生应严格按照疟原虫镜检操作规程进行疟原虫镜检工作。
三、对前来进行疟疾血检的患者采血，并按操作规程开展疟原虫镜检工作，做好血片编号。
四、阴、阳性血片要分类存放、长期保存，以备上级部门检查复核。
五、院防保科定期不定期就疟疾涂片完成情况及质量开展督导检查并对结果进行通报。
疟原虫镜检规章制度第一章总则第一条为规范疟原虫镜检工作，提高疟疾诊断准确率，保障患者健康，特制定本规章制度。
第二条本规章制度适用于医疗机构、检验检测机构开展疟原虫镜检工作。
第三条疟原虫镜检应遵守相关法律法规和相关标准，确保检测结果准确可靠。
第四条医疗机构和检验检测机构应建立健全疟原虫镜检管理制度，保证检测人员熟练掌握检测技术。
第五条疟原虫镜检工作应当严格遵守检验检测质量管理规范，确保检测结果准确。
第六条医疗机构和检验检测机构应当配备专业的技术人员从事疟原虫镜检工作。
第七条疟原虫镜检工作应当遵循“安全、准确、迅速”的原则，保证检测工作质量和效率。
第八条医疗机构和检验检测机构应当建立健全疟原虫镜检的质量控制和质量保证体系，确保检测结果可靠。
第二章疟原虫镜检设备和耗材第九条医疗机构和检验检测机构应当购置标准符合要求的疟原虫镜检设备，并定期维护和保养设备。
第十条医疗机构和检验检测机构应当使用符合要求的疟原虫镜检耗材，保证检测过程的质量和准确性。
第十一条疟原虫镜检设备和耗材应当定期检测和校准，确保检测结果准确可靠。
第三章疟原虫镜检人员第十二条从事疟原虫镜检工作的人员应具有相应的专业技能和执业资格，熟练掌握检测技术。
第十三条疟原虫镜检人员应当遵守相关法律法规和相关标准，保证检测结果的准确性和可靠性。
第十四条疟原虫镜检人员应当接受规范的培训，不断提升自身的专业水平和技能。
第十五条疟原虫镜检人员应当定期进行健康体检，确保身体健康，保障检测工作的顺利进行。
第四章疟原虫镜检流程第十六条疟原虫镜检工作应当遵循严格的操作流程，确保检测过程准确无误。
第十七条疟原虫镜检工作应当按照标准操作规程进行，规范操作步骤，确保检测结果的可靠性。
第十八条疟原虫镜检的检测和分析过程应当记录详细，以备查证。
第十九条疟原虫镜检工作完成后应及时整理和归档相关资料，保证检测结果能够有效利用。
第五章疟原虫镜检质量控制第二十条医疗机构和检验检测机构应当建立健全疟原虫镜检的质量控制和质量保证体系，加强对检测工作的监督和管理。
一、项目名称、检验方法名称:项目名称：疟原虫检查检验方法：薄/厚血片法及胶体金法二、方法学原理胶体金法：采用双抗体夹心薄膜免疫层析技术，层析条由质控区、检测区和金标垫三部分构成。
质控区包被了羊抗鼠IgG抗体(C)，作为对检测试剂的质量控制；检测区分别包被了特异性的抗疟原虫乳酸脱氢酶抗体(T1)和抗富组氨酸蛋白抗体（T2）；金标垫中包含有偶联了玫红色胶体金的另一株抗疟原虫乳酸脱氢酶抗体和抗富组氨酸蛋白抗体。
当检测样品中存在针对上述抗体的特异性抗原时，样品中的抗原与金标垫中的标记抗体结合，形成抗原-胶体金复合物，并借助层析作用向上迁移。
当复合物流经检测区时，被相应的包被抗体捕获。
若血样中存在间日疟原虫（Pv）抗原时，在T1区会形成一条玫红色检测线。
若血样中存在恶性疟原虫（Pf）抗原，在T2区会形成一条玫红色检测线，T1区有或无检测线形成。
检测样品中若不存在特异性抗原时，检测区不显色。
质控区出现的玫红色指控线表示试剂有效并且操作正确。
三、试剂品牌、代号、包装规格、内容物：1、薄/厚血片法试剂品牌：珠海贝索生物技术有限公司Baso内容物：瑞氏—姬姆萨复合染色液组成：主要成分瑞氏--姬姆萨A液×2瓶(瑞氏染料、姬姆萨染料)瑞氏--姬姆萨B液×2瓶(PH6.8磷酸盐缓冲液)2、胶体金法：试剂品牌：上海疾控生物科技有限公司内容物：检测卡：20人份（1人份/铝箔袋）洗涤液：1瓶（5ml）四、具体操作步骤（包括主要的仪器测定参数）（一）、薄/厚血片法：1．薄血片：在清洁玻片上用一滴外周血，以常法推制成薄片。
2．厚血片：在清洁玻片上用一滴外周血，制成厚血片，血膜干燥后蒸馏水脱去血红蛋白3．血膜完全干燥后即可染色，染色法（瑞氏法）同白细胞分类检查。
4．染色涂片干后油镜检查，寻找疟原虫。
（二）、胶体金法：1．将检测卡从铝箔袋中取出，平放在工作台上，编号待用2. 使用微量移液器，在加样孔前端缓慢加入5μl待检全血3. 然后在加样孔后端缓慢加入3-4滴洗涤液，待液体完全渗透4. 20分钟内观察检测结果，记录结果5. 胶体金法对恶性疟原虫敏感性为99%，特异性是98%；对间日疟原虫的敏感性是97%，特异性是98%。
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