血常规SOP文件
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血液常规检验标准操作规程一.目的:检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白的数量和质量,对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。
2.检测项目:红细胞计数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均红细胞二.检测项目:红细胞计数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、白细胞计数、白细胞分类、血小板计数。
三.标本的采集与运送1 .标本类型:静脉血或手指末梢血。
2.标本要求:标本用EDTA-K2 抗凝;静脉血标本量应达到2ml;末梢血20µl。
3.标本运送:室温运送,4小时内完成检测。
如不需PLT、MCV、和白细胞三分群的分析结果,可在2-8摄氏度的冰箱中保存24小时。
经过冷藏的样本应在室温下放置30分钟后才能进行分析。
4.标本拒收标准:严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。
四.标本的检测仪器及试剂1 .仪器:深圳mindrary公司BC—2800全自动血液细胞分析仪。
试剂:由mindrary公司提供包括LH溶血剂、LEO(Ⅰ)溶血剂、LBA溶血剂、LEO(Ⅱ)溶血剂、清洁液、稀释液、探头清洁液等配套试剂。
2.检测原理采用流式细胞技术,通过检测光学信号进行白细胞计数及白细胞分类测定;双鞘流电阻原理进行红细胞与血小板测定;HiCN-HGB法检测血红蛋白。
3.操作步骤3.1打开仪器电源开关,电源指示灯亮,屏幕显示Intializing,分析仪进入初始化,初始化结束后,系统自动进入“计数”界面。
注:在分析仪报“本底异常”故障时进行分析,将得到不可靠的结果,3.2在仪器进入样本分析前,每日需进行质控分析,以确保分析仪得到可靠的分析结果。
3.3全血-全参数模式a. 在仪器主界面点击“计数”,进入计数界面。
b. 点击计数界面“模式”,在弹出的对话框中选择“全血模式”。
录入样本信息,输入分析样本编号。
c. 上下颠倒试管将试管内容物充分混匀,轻轻取下盖子,防止血液溅出。
血常规仪器校准规范化SOP文件血细胞分析仪是临床最常用的分析之一,其检测结果是否准确对疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。
在仪器检测结果精密度良好的前提下,仪器校准的关键步骤,为此结合国内的实际情况,在参考有关文献的基础上,就分析仪校准的基本要求提出如下建议。
一、血液分析仪校准的一般要求(一)为了保证检测结果的准确性,要求对每一台进行校准。
仪器安装时必须由厂家进行校准并提供校准记录,否则不能用于临床标本的检测。
(二)实验室需按“建议”的要求建立适合本实验室使用的血液分析校准程序并写成文件。
内容包括:使用校准物的溯源性、来源、名称及其保存方法;校准的具体方法和步骤;何时要求进行校准、由何人负责实施等。
(三)血液分析仪进行校准后,必须开展室内以监测仪器的检测结果是否发生漂移。
二、校准物(一)校准物的来源1.来自本仪器的配套校准物。
2.来自新鲜人血,但定值要求直接或间接地溯源至国际标准。
(二)新鲜血作为校准物的定值1.直接溯源至国际标准的定值方法:可使用血细胞分析的参考方法定,但要求建立参考方法的难度较大,在临床实验室难以实施。
2.间接溯源至国际标准的定值方法:取新鲜血用二级标准检测系统或规范操作的检测系统对其进行定值,用定值的新鲜血作为常规校准物。
要求在8小时内(温度条件为18℃-25℃)完成定值及仪器的校准。
二级标准检测系统:直接溯源至参考方法;具备较完善的质量保证措施;与国外具有权威性的参考实验室定期进行比对的检测系统。
规范操作的检测系统:使用配套试剂;用配套校准物定期进行仪器校准;规范地开展室内质量控制;参加室间质量评价成绩优良;人员经过培训。
(三)校准物的选择使用中国药品监督管理局注册登记的国际公认质量可靠的检测系统的实验室,可使用制造商规定的配套校准物,也可使用新鲜血作为校准物。
对于使用无配套校准物检测系统的实验室,必须使用新鲜血进行仪器校准。
三、校准方法对于使用中国药品监督管理局注册登记的国际公认质量可靠的检测系统的实验室,在使用制造商规定的配套校准物时,严格按仪器说明书规定的程序进行校准。
全自动血细胞分析SOP一,检验目的及原理1,目的:用BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪,在临床和实验室定量分析血液细胞,对人体的血液中三种有形成分(红细胞,白细胞,血小板)的19项参数和3个直方图进行对患者和健康人群来讲,观察有无各种原因引起的贫血,出血和失血,目前机体有无细菌及病毒感染,可筛查出各种血液病,如白血病,血小板减少性紫癜等。
2,原理:电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释,用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下,分别通过各自的计数微孔,流入管道,通过两个光电传感器,在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边,在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境,根据血细胞非传导性的性质,当有细胞通过计数微孔时,将引起阻抗的变化,阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小,它有多种形态,由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同,WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下,显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞(嗜酸+嗜碱+单核)和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合形成复合物,用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强,用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较,得到血红蛋白浓度(空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态)。
二,标本1,标本种类:末梢血为200-300微升,静脉血2毫升。
2,采集标本容器及添加剂:容器:末梢血为一次性朔料试管,静脉血为真空采血管。
添加剂:不同实验使用不同的抗凝剂,不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3,采集方法:毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间:患者随到随时采集。
4,标本运送:标本采集后,应及时送检。
5,标本接受:标本的编号与化验单上的编号要一致,清楚,正确及完整。
全自动血细胞分析SOP一,检验目的及原理1,目的:用BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪,在临床和实验室定量分析血液细胞,对人体的血液中三种有形成分(红细胞,白细胞,血小板)的19项参数和3个直方图进行对患者和健康人群来讲,观察有无各种原因引起的贫血,出血和失血,目前机体有无细菌及病毒感染,可筛查出各种血液病,如白血病,血小板减少性紫癜等。
2,原理:电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释,用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下,分别通过各自的计数微孔,流入管道,通过两个光电传感器,在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边,在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境,根据血细胞非传导性的性质,当有细胞通过计数微孔时,将引起阻抗的变化,阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小,它有多种形态,由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同,WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下,显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞(嗜酸+嗜碱+单核)和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合形成复合物,用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强,用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较,得到血红蛋白浓度(空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态)。
二,标本1,标本种类:末梢血为200-300微升,静脉血2毫升。
2,采集标本容器及添加剂:容器:末梢血为一次性朔料试管,静脉血为真空采血管。
添加剂:不同实验使用不同的抗凝剂,不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3,采集方法:毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间:患者随到随时采集。
4,标本运送:标本采集后,应及时送检。
5,标本接受:标本的编号与化验单上的编号要一致,清楚,正确及完整。
医院检验科标本SOP管理程序医院检验科标本SOP管理程序目的:本程序旨在管理受控分析过程中标本的质量,以确保检验质量为临床提供准确有效结果,实验室工作人员必须重视标本的采集、处理、贮存、安全处置等全过程。
保证标本编号的唯一性,也是准确发放报告的基础。
适用范围:本程序适用于临床各类检测标本。
职责:实验室人员必须严格遵守操作规程。
工作程序:一、标本的采集:请参阅《标本采集管理程序》。
二、标本的运送:1.门诊1.1 血液标本:1.1.1 血常规标本在门诊二楼抽血后,由登记员直接送到门诊化验室,检验工作人员进行分析。
1.1.2 其他项目,如生化、免疫等标本,在护士采集标本后,由登记员统一收集后,两小时内送到检验科。
1.2 尿液、大便、分泌物、痰常规标本。
由病人自行采集后,送到门诊化验室进行检查。
1.3 细菌培养标本:由登记员接到标本后,立即送到检验科。
1.4 分泌物作PCR标查,由登记员统一收集后,两小时内送到检验科。
2.病房2.1 常规标本:由病房护士采集后,由助护统一收集,在规定的时间内送检。
早上八点半前全部送检完毕。
2.2 急诊标本:由病房护士采集后,由助护送到检验科,此类标本的送检不受时间限制。
三、标本的接收1.登记员在接收标本时,认真、仔细地核对标本。
2.检查标本与检验申请单是否一致。
工作人员有权拒收检验申请有不一致的标本,标签不清的标本。
检验申请不清晰时,应立即与临床科室或相关人员联系核实。
3.标本接收人须检查标本状态。
4.标本在以下情况下视为不合格,工作人员有权拒收该标本:A。
无被检标本基本信息或与申请单不符(姓名、年龄、性别、住院号、检验项目等)。
B。
使用不适当的。
C。
有破损。
D。
标本外泄污染。
临检室血液检验的质量控制流程1目标使血常规检验的受到全程质量控制,确保检测结果准确性。
2质量控制血常规检验质量控制分为:分析前、分析中和分析后3个方面。
2.1血常规检验分析前的质量控制2.1.1检验单的申请:检验申请单中应包含足够的信息 ,如患者的姓名、年龄、性别、住院科室、床号、疾病的诊断 ,可能干扰实验结果的服药史、特殊的病理变化 ,与血常规检验有关的既往史等患者信息 ,以便检验人员查对。
申请的检验项目应准确无误 ,如需特殊检验应注明。
2.1.2患者的准备:许多生理因素可引起血细胞数的改变 ,如剧烈运动、饱餐、饥饿、紧张等 ,常使白细胞数增加 ,所以在采血前应尽量避免这些生理因素的影响。
在采血前患者应把自己的生理状态、病理状态告知医生 ,以便确定最佳的采血时间。
2.1.3标本的制备:高质量的标本是保证检验结果准确、可靠的前提 ,其最基本的要求是保证血液标本中各项细胞形态的完整。
2.1.4标本的采集2.1.4.1详见《检验科标本采集手册》2.1.4.2抗凝剂:血常规标本必须经抗凝剂抗凝处理。
2.1.4.3标本采集后,立即将抗凝标本轻轻180度混匀8-10次。
最后再次核对病人姓名和号码。
2.1.5标本的运输和储存:采血完成后应尽快检测,,尽量减少运输和储存的时间。
因为标本储存过程中 ,血细胞的代谢活动、蒸发作用和升华作用、化学反应、微生物降解等因素会直接影响标本的质量。
如不能及时送检的标本,应在4-8℃低温保存,但不要超过4小时。
3血常规检验分析中的质量控制3.1测定时间对标本的影响标本取好后 ,放置的时间长短会对标本的质量产生影响。
有研究表明 ,用EDTA 抗凝的静脉血标本 ,在标本收集后的 8h 内(室温)检测 ,可以得到最佳的检测结果。
白细胞分类可稳定 6~8h ,但 2h 后粒细胞形态即有变化 ,故做镜检分类者应及早分血片。
如果不需要血小板和白细胞分类的准确数据 ,则标本可以在 2~8 ℃的条件下保存24h。
血常规仪器校准规范SOP文件血常规仪器校准规范化SOP文件血细胞分析仪是临床最常用的分析之一,其检测结果是否准确对疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。
在仪器检测结果精密度良好的前提下,仪器校准的关键步骤,为此结合国内的实际情况,在参考有关文献的基础上,就分析仪校准的基本要求提出如下建议。
一、血液分析仪校准的一般要求(一)为了保证检测结果的准确性,要求对每一台进行校准。
仪器安装时必须由厂家进行校准并提供校准记录,否则不能用于临床标本的检测。
(二)实验室需按“建议”的要求建立适合本实验室使用的血液分析校准程序并写成文件。
内容包括:使用校准物的溯源性、来源、名称及其保存方法;校准的具体方法和步骤;何时要求进行校准、由何人负责实施等。
(三)血液分析仪进行校准后,必须开展室内以监测仪器的检测结果是否发生漂移。
二、校准物(一)校准物的来源1.来自本仪器的配套校准物。
2.来自新鲜人血,但定值要求直接或间接地溯源至国际标准。
(二)新鲜血作为校准物的定值1.直接溯源至国际标准的定值方法:可使用血细胞分析的参考方法定,但要求建立参考方法的难度较大,在临床实验室难以实施。
2.间接溯源至国际标准的定值方法:取新鲜血用二级标准检测系统或规范操作的检测系统对其进行定值,用定值的新鲜血作为常规校准物。
要求在8小时内(温度条件为18℃-25℃)完成定值及仪器的校准。
二级标准检测系统:直接溯源至参考方法;具备较完善的质量保证措施;与国外具有权威性的参考实验室定期进行比对的检测系统。
规范操作的检测系统:使用配套试剂;用配套校准物定期进行仪器校准;规范地开展室内质量控制;参加室间质量评价成绩优良;人员经过培训。
(三)校准物的选择使用中国药品监督管理局注册登记的国际公认质量可靠的检测系统的实验室,可使用制造商规定的配套校准物,也可使用新鲜血作为校准物。
对于使用无配套校准物检测系统的实验室,必须使用新鲜血进行仪器校准。
三、校准方法对于使用中国药品监督管理局注册登记的国际公认质量可靠的检测系统的实验室,在使用制造商规定的配套校准物时,严格按仪器说明书规定的程序进行校准。
检验项目标准操作规程(SOP)- 1—检验标本的采集一、标本的正确采集标本采集必须符合2个条件,即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情,避免干扰因素的存在.二、标本的贮存标本采集后尽快送至实验室,若不能及时送检,已采集的标本要按检验规定的贮存条件,如室温、冰浴、温浴或防腐贮存,将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中,避免振摇,以免标本遗洒或溶血影响检测结果.三、标本的运送必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结果一致。
四、标本的签收临床工作人员从口才采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接收临床标本,均应按标准化要求进行,做到认真核对,包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档.五、标本的处理1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理,否则会影响检测结果的准确性。
2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆,血清与血块簪时间接触可发生变化。
3、实验室接收标本后处理应注意事项:(1)、时间:实验室接收标本后应尽快予以分类和离心.①、促凝标本应尽早处理,可在采血5-15分钟后离心;②抗凝标本可采血后立即离心;③非抗凝(无促凝)标本采血30—60分钟后离心;④抗凝全血标本(全血细胞分析、ESR等)不需要离心.(2)、温度:一般标本为室温(最好是22—25℃)放置;冷藏标本(对温度依赖性分析物)应保持在2—8℃直到温度控制离心。
(3)、采血管放置:应管口(盖管塞)向上,保持垂直立位放置。
(4)、采血管必须封口:管塞移去后会使血PH改变,影响检测结果,封口可以减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。
六、分析前的可变因素1、生物因素:可引起所检测物质在体内的变化,此种变化与检测方法无关,分为可变的和固定的生物因素。
2、干扰因素:在收集和分析标本过程中,干扰因素常导致分析结果与被测物真实浓度不符.七、标本采集的基本原则遵照医嘱采集各种标本均应按医嘱执行。
全自动血细胞分析SOP一,检验目的及原理1,目的:用BC-3000 Plus 全自动血细胞分析仪,在临床和实验室定量分析血液细胞,对人体的血液中三种有形成分(红细胞,白细胞,血小板)的19项参数和3个直方图进行分析。
是人体血液的基本生理病理指标之一。
对患者和健康人群来讲,观察有无各种原因引起的贫血,出血和失血,目前机体有无细菌及病毒感染,可筛查出各种血液病,如白血病,血小板减少性紫癜等。
2,原理:电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释,用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下,分别通过各自的计数微孔,流入管道,通过两个光电传感器,在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边,在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境,根据血细胞非传导性的性质,当有细胞通过计数微孔时,将引起阻抗的变化,阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小,它有多种形态,由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同,WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下,显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞(嗜酸+嗜碱+单核)和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合形成复合物,用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强,用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较,得到血红蛋白浓度(空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态)。
二,标本1,标本种类:末梢血为200-300微升,静脉血2毫升。
2,采集标本容器及添加剂:容器:末梢血为一次性朔料试管,静脉血为真空采血管。
添加剂:不同实验使用不同的抗凝剂,不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3,采集方法:毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间:患者随到随时采集。
4,标本运送:标本采集后,应及时送检。
LSHZHYY/CH血Rt-C1-2005 SOP文件C1血常规测定C1.1血常规测定通辽市中医院操作规程文件号:CG第二版共6页2005年8月1日起实施本规程每2年复审一次复审日期:年月日复审人:规程编写者:卢玲玲审批者:批准日期:年月日医务科保管者:检验科主任:王彦夫常规室:C1.2原理:BC-2000分辨WBC,RBC和PLT所用的方法是世界上通用的阻抗法。
在细胞计数孔的周围建立了一个电环境,当有一个细胞通过计数孔时,它将由于体积的不同具有不同的阻抗,当恒流电源起作用时,稀释液将和线路一起组成一个回路,当由于负压的作用,细胞通过计数孔(一个由红宝石做成的标准尺寸的小孔),仪器对细胞计数,此时,稀释液被细胞代替,引起了阻抗的变化,从而在测量线路中产生了电脉冲,仪器就记录下此脉冲的数量和幅度。
C1.3标本的采集与处理C1.3.1采血部位:成人可从手指采血,世界卫生组织(WHO)推荐取左手无名指指端内侧血液做血常规检验,婴幼儿则可在足跟或大拇趾上采血。
C1.3.2采血方法:先用75%乙醇棉球消毒局部皮肤,待干后用左手拇指和示指固定采血部位,右手持采血针迅速穿刺组织约3mm,待血液自行流出后,用消毒棉球擦去第一滴血,如出血不畅,可在针刺四周稍稍加压(切忌用力挤压,以免组织液混入影响检验结果)。
以后流出的血液用血红蛋白吸管吸取20ul血液做检验用。
C1.3.3标本处理使用末稍血做血液细胞检查时采到标本后应及时测定。
最好在2小时内完成,且不要在冰箱内存放,冬季在室外传送标本应注意保暖,雨天要注意防水,高温天气应避免阳光直射。
C1.4试剂C1.4.1BC-2000分类稀释剂:本科使用迈瑞公司医用试剂,是一种不含叠氮物的稳定的稀释剂,用于稀释全血标本并可防止在标本制备及计数过程中血样变质。
C1.4.2BC2000分类溶血剂,该试剂由迈瑞公司医用试剂提供,该溶血剂不含叠氮物,能迅速破坏红细胞壁并使细胞碎片体积减小至不干扰白细胞的分析,这样,白细胞就可以被分成三个子群进行分类。
临检血常规复片镜检标准:1.新生儿:(1)复检条件:首次检测标本;(2)复检要求:涂片镜检。
2.WBC、RBC、Hb、PLT、网织红细胞(Ret):(1)复检条件:超出线性范围;(2)复检要求:稀释标本后重新测定。
3.WBC、PLT:(1)复检条件:低于实验室确认的仪器线性范围;(2)复检要求:按实验室标准操作规程(SOP)进行。
4.WBC、RBC、Hb、PLT:(1)复检条件:无结果;(2)复检要求:①检查标本是否有凝块,②重测标本,③如果维持不变,用替代方法计数。
5.WBC:(1)复检条件:首次结果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L;(2)复检要求:涂片镜检。
6.WBC:(1)复检条件:3天内Delta值超限,并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L;(2)复检要求:涂片镜检。
7.PLT:(1)复检条件:首次结果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L;(2)复检要求:涂片镜检。
8.PLT:(1)复检条件:Delta值超限的任何结果;(2)复检要求:涂片镜检。
9.Hb:(1)复检条件:首次结果<70g/L或>其年龄和性别参考范围上限20g/L;(2)复检要求:①涂片镜检,②确认标本是否符合要求。
10.平均红细胞体积(MCV):(1)复检条件:24h内标本的首次结果<75fl或>105fl(成人);(2)复检要求:涂片镜检。
11.MCV:(1)复检条件:24小时以上的成人标本>105fl;(2)复检要求:①涂片镜检观察大红细胞相关变化,②如无大红细胞相关变化,要求重送新鲜血标本,③如无新鲜血标本,报告中注明。
12.MCV:(1)复检条件:24h内标本的Delta值超限的任何结果;(2)复检要求:确认标本是否符合要求。
13.平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC):(1)复检条件:≥参考范围上限20g/L;(2)复检要求:检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。
血常规sop仪器测量原理一、白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)的检测原理血细胞的计数原理是以血细胞通过宝石微孔传感器的过程中产生的阻抗变化为基础的。
1、血液样本在导电的稀释液中被稀释,由于血细胞是电的不良导体,而稀释液的导电性良好,两者在导电率上有相当大的差别。
2、稀释液在通过宝石微孔传感器时,电流连续的通过旋转在微孔两边的两个电极。
3、当细胞通过小孔时,在两个电极之间的电阻随着细胞体积的增加而增加,根据欧姆定律公式::U=RI(U=电压,R=电阻,I=电流),假设I是恒定的,R 随着细胞体积的增大而增加,因而U随着细胞体积的增大而增加。
4、经过仪器放大电路的处理,将电压信号放大并除去背景噪音,得到可以进行分析的信号。
5、一个测量计数池和检测电路对白细胞进行计数分析,一个测量计数池和检测电路对红细胞、血小板进行计数分析。
每类型的细胞(白细胞、细胞、血小板)均由仪器内的微处理器进行分析、计算,并给出直方图。
6、血小板计数采用了先进的流体、电子、软件处理系统,有效地解决了在宝石微孔计数区一侧部分血细胞的重复计数。
因为当细胞再次进入分析区,产生的脉冲和高度与血小板的脉冲类似,这就造成血小板的重复计数。
二、血红蛋白(HGB)的测量原理血液中加入溶血剂,溶血剂会迅速溶解红细胞膜、破坏红细胞壁释放血红蛋白衍生物,释放的血红蛋白衍生物与SLS结合形成稳定的血红蛋白,该处血红蛋白在540-550nm处有一吸收峰,通过测定该处其吸光度,与空白吸光度的比值,可计算出血红蛋白浓度。
三、血细胞的体积健分布仪器通过其预置的软件,将白细胞、红细胞、血板按照血细胞过传感器微孔所产生脉冲值的大小,将白细胞、红细胞、血小板按照体积大小进行分群。
具体体积范围划分如下:白细胞(WBC)约130-1000fL.红细胞(RBC)约82-98fL.血小板(PLT)约2-35fL。
白细胞的分类通过溶血剂处理后的白细胞,按照其体积大小可细分为:淋巴细胞(LYM),中间细胞(MID),料细胞(GRAN)三类。
XT-1800i血液常规检查操作规程1. 分析参数和方法学名称Sysmex XT-1800i提供24项参数的结果,各检测参数和方法见表1。
表1. Sysmex XT-1800i各检测参数和方法2. 原理2.1鞘流DC检测方法(RBC、PLT、HCT)在该检测器内,样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。
将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后,由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。
通过小孔以后,经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。
这样就可以防止该区域的血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。
鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。
同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔,所以也可防止产生异常血细胞脉冲。
2.2使用半导体激光器的流式细胞计数方法使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。
使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。
一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比,并进行染色。
然后将该样品送入流动池中。
这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。
同时,由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心,故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。
一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。
前向散射光由光电二极管接收,侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。
光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血液细胞的信息。
2.3前向散射光和侧向散射光当一束激光照射到血细胞颗粒上时,就产生光散射。
XT-1800i检测前向散射光和侧向散射光,前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。
侧向散射光的强度反映细胞内部(如细胞核的体积大小)的信息。
2.4侧向荧光当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时,就产生比入射光波长更长的光。
随着染色集团浓度的增加,荧光强度也增加。
通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色的信息,XT-1800i 检测侧向荧光。
2.5SLS-血红蛋白测定法在稀释的血液中加入溶血素,红细胞中的血红蛋白被释放出来。
血液实验室作业指导书河北省张家口市第二医院检验科编制:审核:批准:河北省张家口市第二医院凝血酶原时间-纤维蛋白原(PT-FIB)测定1. 实验原理本实验可同时测定凝血酶原时间(PT)和纤维蛋白原(FIB)浓度。
原理:确定量的抗凝血浆(50微升)样本经一定时间加温后,将组织凝血活酶、钙离子加入其中,激活外源凝血途径,产生纤维蛋白血凝块,通过660nm光照射血浆,测定其凝固过程中90o散射光变化,然后通过标准曲线求出凝血酶原时间,再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。
在检测PT的同时,血浆浊度的变化与血浆中FIB的含量成正相关,通过测定凝固终点和起始点光散射强度的差值,再根据试验前已经做出的由不同已知FIB浓度与相应的光散射差值关系的标准曲线即可推测出FIB的浓度。
2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
3. 标本存放:全血贮存在4~10oC不超过2小时,最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,此血浆在室温22~24oC下可存放2小时,在2~4oC可存放4小时,在-20oC可存放2周,长时间保存需在冰冻条件下,在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时,应将盛血浆的容器置37oC水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化,以免凝血因子消耗,解冻后立即测试。
冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果不准确。
4. 标本运输:低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6. 实验材料:6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。
1)PT-FIB测定试剂盒(代号P/N: 84688210)兔脑促凝血激酶10mL X8瓶2)定标血浆Calibration Plasma(代号P/N:20003700)3)参比液Reference Emulsion(代号P/N:9756900)4)因子稀释液Factor diluent(代号P/N: 9757600)5)正常质控血浆Normal control plasma(代号P/N:20003110)6)低水平质控血浆Abnormal control plasma level I/Low(代号P/N: 20003210)7)高水平质控血浆Abnormal control plasma level II/High(代号P/N: 20003310)注:促凝血酶原激酶当用不同的促凝血酶原激酶,或用不同的检测方法(手工、半自动、全自动)做PT测试时,其秒数结果将会有较显著的差异。
BYLAB-LJ-102 血细胞分析仪室内质控的标准操作程序血细胞分析仪室内质控的标准操作程序【目的】保证检验结果的准确性和可比性。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、质控主管、科主任。
【室内质控的重要性】是临床实验室全面质量管理重要组成部分,也是实验室认可的重要依据。
【室内质控的适用性】1. 连续监测和评价本室工作质量,评价结果的可信性。
2. 排除质量环节中所有阶段导致不满意的原因。
3. 反映检验操作中所有步骤的工作情况,包括从收集标本到结果的发出全过程。
提高常规测定工作的批间和批内标本检测结果的一致性。
【室内质控的方法】L-J质控图和Westgard多规则质控方法。
【室内质控的准备程序】开展室内质控前的准备工作1.培训实验室工作人员,每个人都应对质控的重要性、基础知识、实验方法有较充分的了解。
并在实际工作中不断进行培训提高。
2.建立一套完整的标准操作规程。
(SOP文件)3.仪器须检定与校正其校正品应能溯源到参考方法或/参考物质,确立校正频度。
4.质控品的选择、应用与保存。
【质控图的限值设定与规则】1.质控图控制限的计算和设定[1] 准备二个不同浓度的质控物。
[2] 先将第1天和第2天测定的数据计算均数和标准差,并将数据设置在质控图中。
[3] 再连续测定8天,将10天的数据计算均数和标准差,计算均数+2SD和-2SD的数值,计算均数+3SD和-3SD的数值,将数据重新设置在质控图中。
[4] 在重新进行质控设定时须清除质控文件内质控数据:在质控屏面上选择〔3:全部消除〕。
使用〔 〕健和〔 〕选择〔是〕。
再使用〔 〕健和〔 〕健选择〔执行〕。
按下〔ENTER〕健。
[5] TARGET(目标)值/LIMIT(限度)值的设定:在质控屏面上选择〔2〕健,选择〔2:设定〕用〔▲〕健和〔▼〕健来移动光标,选择Lot.No.(批号)、Ext.date(有效期限)、管理项目。
一、目的:保证血细胞检测的规范性和准确性。
二、范围:合用于白细胞、红细胞、血小板等的检测。
三、实验原理样品通过样品吸引管吸入, 经过准确定量的样品和稀释液一同被送入混匀腔、 检测室在 同一个检测室轮流测量 WBC/HGB 和 HERBC/PLT 的所有参数。
对 WBC/HGB 测量, WBC/HGB 溶血剂被加到测量室进行进一步的稀释和溶解红细胞, 然后样品进行大约十秒钟 化学反应。
反应过程中,红细胞被溶解,生成血红蛋白,并形成红色甲基红蛋白。
白细胞保 持完整。
此外,白细胞(WBC )的大小和数量可用 DC 检测方法测定。
在 HGB 测量阶段, 用光度计检测血红蛋白浓度。
在 RBC/PLT 测量中, 稀释的样品由混匀进入检测室, 采用 DC 方法测定红细胞和血小板的大小和数量。
四、标本要求:抗凝静脉血、手指尖部末梢血五、开关机程序(一)启动1、检查仪器是否有稀释液及溶血素,然后打开仪器右侧电源开关,仪器将执行自动冲 洗及空白检测,大约 15 分钟后进入准备状态。
2、检查(1)在仪器准备状态下,按样本号的图标将浮现数字键盘,输入病人的 ID 号。
注:在输入样本时,可按 ALPH 进行数字、大写字母、小写字母循环切换。
(2)测量模式普通选择“全血”模式。
测末梢时按“稀释”键。
(3)按仪器右下方的 PUSH ,打开紫色的小门,然后将待测样品放入样品适配器内, 关上样品门,点击显示屏“运行”键检验完毕后仪器自动打印出结果。
(二)关机:关机前用清洗液当标本检测一次,按显示屏右下角的“关机”键,仪器自 动执行关机程序,大约需 2 分钟。
然后关闭仪器右侧电源。
六、操作步骤(一)预稀释模式(合用于微量全血)1、打开紫色的小门,将空子弹头(IML )放入样品适配器,关上样品台门,点击显示 器“稀释”键→分装→执行,仪器将自动放入 500UL 稀释液,执行完毕后,取出子弹头。
2、20UI 末梢血加入盛有稀释液的子弹头,充分混匀,然后放入适配器,关上样品门, 在主界面上选择“稀释”键一运行,执行完毕仪器将自动打印结果。
临床血液学检测(SOP)保证血细胞分析仪测定结果的准确性。
【适用仪器范围】血细胞分析仪。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、质控主管、科主任。
【校准方法】(一)校准环境、仪器和试剂要求室温:20~25℃。
湿度:<80%。
试剂:所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品。
校准品:为仪器配套产品,并在使用效期内,同时无变质或污染仪器:(1)校准前仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30分钟。
(2)仪器的背景计数、重复性及携带污染率均符合要求,否则需请维修人员检修。
(二)操作步骤1.从冰箱中取出校准物,放置室温15分钟,勿摇动。
2.在测定校准物前,先测定两份正常人新鲜血液。
3.将校准物瓶口朝上置双手掌心,双手来回搓动8次。
4.颠倒小瓶,使瓶口朝下置于掌心,来回搓动8次。
5.重复3和4步骤8次(计2分钟左右)。
6.瓶底朝上,确认瓶底无沉积物,说明已充分混匀。
7.用软纸拭净瓶口,轻轻打开瓶塞。
8.将两瓶校准物混合在一起,充分混匀后再分装于两个瓶内。
9.取一瓶校准物在仪器上连续测定11次。
10.由仪器自动校准。
(三)计算与核对标准1.计算出各项结果的均值和精密度,均值应比日常检测报告多保留一位小数点。
2.检查精密度是否达到使用说明书上所示的精密度,如达到,继续下一步;否则,停止校准,与维修人员联系。
3.计算出各项参数均值与定值之差的绝对值和相差的百分数,与校准标准(表1—1)进行比较。
4.结果小于第一列数值,则不需校准;结果大于第二列数值,需请维修人员处理;结果在第一列与第二列数值之间,需校准仪器。
5.如有自动校准功能,可按说明书进行。
如没有此项功能,则用定值除以均值,再乘以原校正系数即为新校正系数,输入仪器即完成校正。
【1.按上述方法混匀第2管校准物后再在仪器上重复测定11次,按同样的方法计算,将结果再次与校准标准核对,如合格,校准完毕,仪器方可使用。
血常规SOP文件全自动血细胞分析SOP一,检验目的及原理1,目的:用BC-3000 Plus 全自动血细胞分析仪,在临床和实验室定量分析血液细胞,对人体的血液中三种有形成分(红细胞,白细胞,血小板)的19项参数和3个直方图进行分析。
是人体血液的基本生理病理指标之一。
白细胞计数WBC淋巴细胞计数Lymph#中间细胞计数Mid#中性粒细胞计数Gran#淋巴细胞百分比Lymph%中间细胞百分比Mid%中性粒细胞百分比Gran%红细胞计数RBC血红蛋白HGB平均红细胞体积MCV平均红细胞血红蛋白含量MCH平均红细胞血红蛋白浓度MCHC红细胞分布宽度变异系数RDW-CV红细胞分布宽度标准差RDW-SD红细胞压积HCT血小板计数PLT平均血小板体积MPV血小板分布宽度PDW血小板压积PCT白细胞分布直方图WBC Histogram红细胞分布直方图RBC Histogram血小板分布直方图PLT Histogram对患者和健康人群来讲,观察有无各种原因引起的贫血,出血和失血,目前机体有无细菌及病毒感染,可筛查出各种血液病,如白血病,血小板减少性紫癜等。
2,原理:电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释,用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下,分别通过各自的计数微孔,流入管道,通过两个光电传感器,在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边,在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境,根据血细胞非传导性的性质,当有细胞通过计数微孔时,将引起阻抗的变化,阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小,它有多种形态,由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同,WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下,显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞(嗜酸+嗜碱+单核)和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合形成复合物,用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强,用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较,得到血红蛋白浓度(空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态)。
二,标本1,标本种类:末梢血为200-300微升,静脉血2毫升。
2,采集标本容器及添加剂:容器:末梢血为一次性朔料试管,静脉血为真空采血管。
添加剂:不同实验使用不同的抗凝剂,不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3,采集方法:毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间:患者随到随时采集。
4,标本运送:标本采集后,应及时送检。
5,标本接受:标本的编号与化验单上的编号要一致,清楚,正确及完整。
6,准备与保存:室温静置10-15分钟,充分混匀后上机检测。
血液常规标本一般保存在室温24小时。
三,设备与试剂1,设备:BC-3000 Plus 全自动血细胞分析仪。
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产。
产品注册号:粤食药监械(准)字2005第2400522号。
2,专用试剂:①稀释液:M-30PD,等渗溶液,具有特定的电导值,为细胞计数提供稳定的环境。
作为人体血细胞计数,体积测量以及白细胞分类计数时的稀释液使用。
本品应为透明液体,不得有沉淀,悬浮物和絮状物。
主要成份,NaCl,Na2SO4,缓冲剂,抗菌剂。
本品2-30℃保存期2年。
开瓶后,使用温度15-30℃,有效期60天。
产品注册号:粤食药监械(准)字2005第2400276号。
②冲洗液:M-30PR,不含蛋白酶和次氯酸钠(NaCIO)等强蛋白清除剂的电解质溶液,用于仪器的进样孔,阀和管路系统的清洁和冲洗。
本品应为透明液体,不得有沉淀,悬浮物和絮状物。
主要成份,NaCl,KCl,Na2SO4,缓冲剂,抗菌剂和表面活性剂。
本品2-30℃保存期2年。
开瓶后,使用温度15-30℃,有效期60天。
产品注册号:粤食药监械(准)字2005第2400303号。
③无氰溶血剂:M-30PCFL,能溶解红细胞,与血红蛋白形成复合物。
用于白细胞计数,白细胞分群和血红蛋白测定。
本品应为透明液体,不得有沉淀,悬浮物和絮状物。
主要成份,NaCl,KCl,Na2SO4,缓冲剂,抗菌剂和表面活性剂。
本品2-30℃保存期2年。
开瓶后,使用温度15-30℃,有效期60天。
产品注册号:粤食药监械(准)字2005第2400274号。
④ E-Z清洗液(酶清洗液):M-30PE,含有蛋白水解酶的电解质溶液,能有效地清除蛋白污渍,用于仪器的进样器,阀和管路系统的清洁和冲洗。
本品应为透明液体,不得有沉淀,悬浮物和絮状物。
主要成份,NaCl,,缓冲剂,抗菌剂,表面活性剂,蛋白水解酶。
本品2-30℃保存期2年。
开瓶后,使用温度15-30℃,有效期60天。
产品注册号:粤食药监械(准)字2005第2400303号。
⑤探头清洁液:M-30PP,本品为含有次氯酸钠的电解质溶液,用于仪器的进样器,的清洁和冲洗。
主要成份,NaOH,次氯酸钠(NaCIO),表面活性剂。
本品2-30℃保存期2年。
开瓶后,使用温度15-30℃,有效期60天。
产品注册号:粤食药监械(准)字2005第2400303号。
四,操作步骤1, 开机前的准备:①检查试剂(稀释液,冲洗液,溶血剂)是否足量,有无浑浊变质。
②试剂管路连接正常否,管道有无扭结。
③并倒空废液瓶。
④电源连接是否正常。
2,开机启动:①打开仪器主机后面的电源开关。
②电源指示灯燃亮,仪器内部进行初始化,进行自检。
③自动冲洗内部管路,自动测量本底。
④80秒钟后进入计数界面。
3,本底检查:出现计数界面后,仪器自动测量本底数值显示在屏幕上,本底结果要求:WBC≤0.3 RBC≤0.03 HGB≤1 PLT≤10如果本底没有达到仪器的要求,仪器将会提示“本底异常”,请执行清洗或维护程序。
4,室内质控操作:5,全血测量:①在计数界面下,按[模式]键,将模式设置为“全血”。
②用K2EDTA抗凝剂作抗凝血标本。
③混匀抗凝血后,送到采样针下,让采样针插入抗凝血。
⑤按开始键,开始对样本计数。
⑥58秒后测试结果显示在屏幕上。
⑦按“打印”键,结果打印出来。
6,末梢血测量:①在计数界面下,按[模式]键,将模式设置为“预稀释”。
②按“稀释液”,按开始键,用试管从采样针下取0.7ml稀释液。
③将毛细血管采取的20μl末梢血标本,迅速注入盛有0.7ml的稀释液的试管中,制成稀释血样(注意针刺得要深,用不起毛的纸巾拭去第一滴血)④制好的稀释血样要摇匀(注意不要剧烈震荡,否则有可能会因产生微小气泡导致计数值不准)⑧将预稀释血样放置3分钟后,再次摇匀,放于采样针下,按开始键计数。
⑨58秒后测试结果显示在屏幕上。
⑩按“打印”键,结果打印出来。
7,关机:每天测试完毕一定要用E-Z清洗液执行“关机”程序,等待屏幕提示“关闭电源”后关掉主机电源。
WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、Lymph#、Lymph%、Gran#、Gran%六,结果分析与报告1,复查标准:HGB凡低于80g/L,高于170g/L者应进行复查。
WBC凡低于3*109/L或高于20*109/L者应复查。
凡直方图有明显异常者,必须推片染色油镜分类。
PLT低于5×109/L或高于35×109/L应复查2,按照仪器模式出血细胞分析检验报告。
七,参考值与临床意义:1. 血红蛋白测定(HGB):120-160g/L降低:贫血、白血病、大量失血及钩虫病等。
增高:慢性缺氧(肺气肿和先天性心脏病等)、严重脱水、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及真性红细胞增多症等时。
2. 红细胞计数(RBC):4.0-5.5×1012/L临床意义同血红蛋白,巨幼红细胞贫血时减少更为明显。
3. 红细胞压积(HCT):0.42-0.49增高:失水和大面积烧伤等所致的血液浓缩以及真性红细胞增多症时。
降低:贫血及血液稀释时。
4. 红细胞平均容积(MCV): 82-92fl用于贫血分类:增大为巨红细胞性贫血,减小为小细胞性贫血(如严重缺铁性贫血)和遗传性球型红细胞增多症;正常红细胞性贫血时正常。
5. 红细胞平均血红蛋白含量(MCH):27-31pg用于贫血分类:增加见于大细胞性贫血,减少见于单纯小细胞性贫血和小细胞低色素贫血。
6. 红细胞平均血红蛋白浓度(MCHG):320-360g/L大细胞性贫血正常,单纯小细胞性贫血时正常,小细胞低色素性贫血时减小。
贫血形态分类MCVMCHMCHC病因大细胞性贫血↑↑→巨红细胞性贫血,恶性贫血正细胞性贫血→→→急性失血,急性溶血,再障,白血病单纯小细胞性贫血↓↓→慢性感染,炎症,肝病,恶性肿瘤,风湿疾病小细胞低色素性血↓↓↓缺铁性,地中海性,铁粒幼细胞性贫血7. 红细胞分布宽度(RDW): 11.5-14.5%是反映血液中红细胞体积变异的参数,以测得红细胞体积大小的变异系数表示。
RDW与MCV结合可将贫血分为①小细胞均一性贫血(MCV ↓RDW正常,如地中海贫血),②小细胞不均一性贫血(MCV↓RDW↑,如缺铁性贫血),③正细胞均一性贫血(MCV,RDW均正常,常见急性失血和再生障碍性贫血),④正细胞不均一性贫血(MCV正常RDW↑,如早期缺铁性贫血和急性溶血性贫血),⑤大细胞均一性贫血(MCV↑ RDW 正常,如慢性再障)。
⑥大细胞不均一性贫血(MCV 和RDW均↑,如巨幼细胞性贫血和恶性贫血)。
8. 白细胞计数(WBC): 4.0-10.0×109/L增多:细菌性感染、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病和应激状态(急性出血和大手术)等增多(妊娠后期、月经期、饭后、剧烈运动后可有生理性增加)。
减少:病毒感染、伤害及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血、极严重感染、放射性辐照、肿瘤化疗后和非白血性白血病等。
9. 白细胞分类(DC):正常参考值见下表检测项目英文缩写参考值中性粒细胞百分比NEUT % 0.5-0.7淋巴细胞百分比LYMPH % 0.2-0.4单核细胞百分比MONO % 0.03-0.08嗜酸性粒细胞百分比EO % 0.005-0.05嗜碱性粒细胞百分比BASO % 0.000-0.005中性粒细胞绝对值2,NEUT #3.0-5.0×109/L 淋巴细胞绝对值LYMPH # 1.0-3.0×109/L 单核细胞绝对值MONO # 0.067-0.325×109/L嗜酸性粒细胞绝对值EO # 0.02-0.05×109/L嗜碱性粒细胞绝对值BASO # 0.005-0.05×109/L中性粒细胞:增多见于急性化脓性细菌感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后和尿毒症等;其减少见于伤寒和副伤寒、疟疾、粒细胞缺乏症、放射性辐照和肿瘤化疗。