疟原虫检查sop

血疟原虫(MP)厚血片检查法（手工法）标准操作规程1. 实验原理应用瑞氏染色法对制备好的厚血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。

2. 标本采集2.1标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。

2.2标本种类：全血或末梢血2.3标本要求：厚血片的溶血要及时。

3. 标本储存：厚血片的放置期限在夏季不超过48h，冬季不超过62h。

4. 标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：细菌污染。

6. 操作步骤6.1 在洁净玻片上，滴患者血液2滴。

6.2 用推片角将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。

6.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血数分钟。

脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。

6.4 不必待干，进行瑞氏染色。

6.5 干后镜检。

7. 结果判断与分析：在油镜下观察20个视野或以上才能报告“未检出疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。

8. 临床意义：本实验有利于提高疟原虫的阳性检出率。

9. 操作性能：快速简便、阳性检出率高、利于人群普查初筛10. 方法局限性10.1 易受溶血不完全的影响。

10.2 经验缺乏者易受其他杂物的影响。

10.3 存在主观判断的失误10.4 不易鉴别出疟原虫的种类。

11. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,85-86 12. 注意事项12.1 染色后，水洗时不要先倒去染液，应让清水流进染液，使沉渣冲走。

12.2 注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。

血疟原虫(MP)薄血片检查法（手工法）标准操作规程1. 实验原理应用瑞氏染色法对制备好的薄血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫，并鉴别其形态种类。

2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。

2.2 标本种类：全血或末梢血2.3 标本要求：薄血片的血膜厚度要适度均匀以利镜检。

血疟原虫检查标准操作程序1 检验目的应用瑞氏-吉姆萨染色法对制备好的血片进行染色后在显微镜下观察，判断是否感染疟原虫。

2 检测原理瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成。

将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。

瑞氏染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。

各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。

核与酸性染料伊红结合,染成粉红色；胞质与碱性染料美蓝或天青结合，染蓝色;胞质中含有血红蛋日白消化分解后的产物-疟色素,疟色素不着色，为棕黄色或棕褐色。

3 性能特征无4 标本要求（包括病人准备、容器、样本类型等)4.1 病人准备:间日疟及三日患者应在发作后数小时至10余小时采血，此时，早期滋养体已发育成易于鉴别形态的晚期滋养体；恶性疟患者，应在发作后20小时左右采血。

4.2 标本类型:静脉全血4.3 标本容器: EDTA-K2抗凝管4.4 标本存放:4.4.1未检测标本的存放:放在工作台标本架。

4.4.2已拉测标本的存放:检毕标本排列于样本架,置检毕标本台，由卫生员统一转入2-8℃标本冷藏库保存7天，血片用乙酸乙酯脱油保存于存片盒。

4.5 标本运输:室温条件下运输。

4.6 标本拒收标准:参照《用户手册》4.7 检测时限: 1小时。

5 仪器和试剂5.1 试剂名称:瑞姬氏染色液5.1.1瑞姬氏染色液:瑞氏染料0.5g、姬氏染料0.5g，加入500ml甲醇中，混匀溶解后备用。

5.1.2pH6.5磷酸盐缓沖液:磷酸二氢钾0.3g、磷酸氢二钠0.2g,加入100ml蒸馏水中溶解。

5.2 试剂来源:珠海贝索。

5.3 仪器:普通光学显微镜。

6 环境和安全:6.1 检测环境:应符合《显微镜标准操作程序》相关要求。

6.2 设备的安全操作:详见《显微镜标准操作程序》。

6.3 生物安全:6.3.1血液标本的运送必须保证运送过程中的生物安全，防止溢出。

血液标本溢出后，应该立即对污染的环境和设备进行消毒处理。

疟原虫镜检操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!**疟原虫镜检操作流程**一、准备工作阶段。

在进行疟原虫镜检之前，要做好充分的准备。

检查疟原虫染应采集的标,本
疟疾检测方法:血涂片找疟原虫，检测流程:确定采血对象，采集标本，核对化验单，记录相关登记本，制作血涂片，最后在显微镜下找疟原虫。

1.疟疾检测流程:
(1)采血对象。

临床诊断为疟疾、疑似疟疾和不明原因的发热病人。

(2)化验单，由临床医师开具化验单，嘱咐患者到化验室血检，检验者核对患者信息。

(3)镜检人员对血检对象按照登记本要求进行登记。

(4)消毒采血部位，用75％乙醇对采血部位消毒，采血部位多在手指末端。

也可在耳垂采血。

(5)待采血部位干后，采集血标本。

(6)血膜制作，取清洗过的玻片2张，1张做载片、1张做推片，要求推片的一侧边缘光滑、用右手大拇指和食指夹持推片中部。

(7)血膜染色，建议首选姬姆萨氏染液。

先用甲醇固定薄片。

完全晾干后与厚片同时染色。

如选用瑞氏染色则先滴几滴蒸馏水在厚血膜上溶血至灰白色，倾去水滴、晾干后按说明进行染色。

(8)镜检。

2.风险提示:疟疾为乙类法定传染病，通过按蚊叮咬接触传播，血检阳性，应及时到专科医院进行规范治疗。

疟原虫血检工作制度
开展血检工作是基本消除疟疾重点检测手段，它对监测疟疾疫情动态，及时发现病人，及时根治，及时制定相应防治措施，控制疟疾流行均有十分重要的意义，为一步加强我镇的疟疾防控工作，提高疟疾涂片的质量，成立疟疾血检工作制度。

一、临床医生、检验科医生应严格按照登记本项目内容，详细登记，不得漏项，检验科医生负责将开据疟疾血检申请单的临床医生姓名登记到患者相关信息一栏。

二、检验科医生应严格按照疟原虫镜检操作规程进行疟原虫镜检工作。

三、对前来进行疟疾血检的患者采血，并按操作规程开展疟原虫镜检工作，做好血片编号。

四、阴、阳性血片要分类存放、长期保存，以备上级部门检查复核。

五、院防保科定期不定期就疟疾涂片完成情况及质量开展督导检查并对结果进行通报。

操作人员:经批准人授权的本院专业技术人员
部门主管：彭建宏
质量控制员：唐日升
目的：
发现血液中的寄生虫。

该SOP变动程序：
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。

适用仪器范围：
双目显微镜。

适用范围：
血液寄生虫检查。

试剂：
瑞氏染液。

标本采集
根据各种疟原虫在人体外周血中出现的规律采集外周血，及时送检。

操作步骤：
1、以常法推制成薄片。

2、血膜完全干燥后即可染色，方法同白细胞分类检查。

3、用油镜观察100或100以上个视野中红细胞中是否有疟原虫。

临床意义：
了解血液中有无寄生虫感染。

参考文献：
叶应妩，王毓三，全国临床检验操作规程，第二版，南京东南大学出版社，1997。

目 录第一章 疟原虫生活史 (3)一、在人体内发育 (3)（一）红细胞外期 (3)（二）红细胞内期 (4)二、在蚊体内发育 (5)（一）配子生殖期 (5)（二）孢子增殖期 (5)三、疟原虫的生物学特征 (6)第二章 人体疟原虫形态 (8)一、疟原虫的基本结构 (8)（一）核 (8)（二）细胞浆 (8)（三）色素 (8)（四）被寄生的红细胞 (8)二、疟原虫染色后形态特征 (9)（一）薄血膜中疟原虫形态 (9)（二）厚血膜中疟原虫形态 (9)（三）厚、薄血膜的优缺点及其适用范围 (14)（四）同其他物体的鉴别 (14)（五）四种疟原虫的鉴别要点 (15)第三章 疟原虫镜检技术 (17)一、血膜的制作 (17)（一）所需设备 (17)（二）采血部位及取血方法 (17)（三）涂制血膜 (18)（四）厚、薄血膜的位置 (19)（五）染色前血膜的保存 (19)二、血膜的染色 (20)（一）染色原理 (20)（二）常用染液的配制 (21)（三）染色方法 (22)三、影响染色效果的因素 (24)（一）染料和溶剂的质量 (24)（二）染液的新旧 (24)（三）染液的稀释浓度 (24)（四）染色时间 (24)（五）稀释和冲洗用水 (25)（六）冲洗方法 (25)四、疟原虫镜检 (25)五、血膜质量控制 (26)（一）血膜制作和染色质量判定标准 (26)（二）血膜制作和染色质量规范 (26)六、疟原虫计数 (28)七、镜检站工作的管理 (30)第四章 血清免疫学检测 (31)一、疟原虫抗体的检测 (31)二、疟原虫抗原的检测 (33)第五章 生物显微镜的使用 (36)一、使用方法 (36)二、保养 (36)附件１：全球基金疟疾项目现场血膜制作及显微镜使用考核标准附件２：疟原虫形态图第一章 疟原虫生活史人体疟原虫有4种：间日疟原虫(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum )、三日疟原虫(Plasmodium malariae )和卵形疟原虫(Plasmodium ovale)。

疟原虫检测标准操作程序疟原虫检测检测标准操作程序1. 检验目的与原理1.1检验目的：检查血液中是否有疟原虫。

1.2 检验原理：瑞氏染色原理：瑞氏染料中含有美蓝和伊红两种染料，前者为碱性，后者为酸性，它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力，使其显现出不同的色调，以便于辨认。

根据瑞氏染色的酸碱物质染色性不同，可讲疟原虫各期的形态进行清楚染色，便于观察，高倍镜下一般可以观察到各种类型的疟原虫（常见间日疟、三日疟、恶性疟），疟原虫的各期，如环状体（早期滋养体），晚期滋养体，裂殖体、配子体等。

2. 样本收集和贮存2.1原始样本系统：全血。

2.2标本类型：EDTA抗凝血2ml,标本的采集应使用标准一次性采血管，充分混匀，勿震荡。

2.2保存条件：EDTA抗凝血尽快即时检测。

2.4病人要求：必须是发烧时采血。

3．试剂3.1瑞氏染液：3.1.1试剂成分：瑞氏染料 1.0g无水甲醇500ml甘油10ml3.1.2瑞氏染液配制方法：将瑞氏染料称量好后，放在乳钵中加少量无水甲醇匀速研磨至溶解，将研磨好的染液倾倒入试剂储存瓶中，倒入无水甲醇继续研磨，反复多次，直至乳钵中无瑞氏染料沉淀为止，染液试剂瓶存满为止。

将配制好的染液放在37℃24小时后方可使用，放在阴凉干燥处，避光保存。

3.2磷酸盐缓冲液PH6.43.2.1 脱水Na2HPO4 1份: 处理方法将Na2HPO4于蒸发皿上干燥(火燃烘烤）成粉末称量。

3.2.2无水KH2PO4 2.6份将脱水Na2HPO4 1份和水KH2PO4 2.6份充分混合，边研磨边混匀。

3.2.3将上述粉末1g加溶解于500ml去离子水中，混合均匀，方可使用。

3.3 器材：载玻片、加样枪、吸头、推片器4. 仪器显微镜 OLYMPUS 型号：CX21。

4.1开机前检查4.1.1 OLYMPUS显微镜：检查显微镜光路系统，目镜、物镜镜头正常，聚光器、光圈、螺旋、微螺旋调节正常。

4.2日维护：每日清理纤维镜表面，保持显微镜光圈、聚光器干净整洁；每日下班前无水乙醇（二甲苯少用，有致癌性）清洗所有显微镜物镜（低倍镜10，高倍镜油镜）、目镜。

疟原虫镜检规章制度第一章总则第一条为规范疟原虫镜检工作，提高疟疾诊断准确率，保障患者健康，特制定本规章制度。

第二条本规章制度适用于医疗机构、检验检测机构开展疟原虫镜检工作。

第三条疟原虫镜检应遵守相关法律法规和相关标准，确保检测结果准确可靠。

第四条医疗机构和检验检测机构应建立健全疟原虫镜检管理制度，保证检测人员熟练掌握检测技术。

第五条疟原虫镜检工作应当严格遵守检验检测质量管理规范，确保检测结果准确。

第六条医疗机构和检验检测机构应当配备专业的技术人员从事疟原虫镜检工作。

第七条疟原虫镜检工作应当遵循“安全、准确、迅速”的原则，保证检测工作质量和效率。

第八条医疗机构和检验检测机构应当建立健全疟原虫镜检的质量控制和质量保证体系，确保检测结果可靠。

第二章疟原虫镜检设备和耗材第九条医疗机构和检验检测机构应当购置标准符合要求的疟原虫镜检设备，并定期维护和保养设备。

第十条医疗机构和检验检测机构应当使用符合要求的疟原虫镜检耗材，保证检测过程的质量和准确性。

第十一条疟原虫镜检设备和耗材应当定期检测和校准，确保检测结果准确可靠。

第三章疟原虫镜检人员第十二条从事疟原虫镜检工作的人员应具有相应的专业技能和执业资格，熟练掌握检测技术。

第十三条疟原虫镜检人员应当遵守相关法律法规和相关标准，保证检测结果的准确性和可靠性。

第十四条疟原虫镜检人员应当接受规范的培训，不断提升自身的专业水平和技能。

第十五条疟原虫镜检人员应当定期进行健康体检，确保身体健康，保障检测工作的顺利进行。

第四章疟原虫镜检流程第十六条疟原虫镜检工作应当遵循严格的操作流程，确保检测过程准确无误。

第十七条疟原虫镜检工作应当按照标准操作规程进行，规范操作步骤，确保检测结果的可靠性。

第十八条疟原虫镜检的检测和分析过程应当记录详细，以备查证。

第十九条疟原虫镜检工作完成后应及时整理和归档相关资料，保证检测结果能够有效利用。

第五章疟原虫镜检质量控制第二十条医疗机构和检验检测机构应当建立健全疟原虫镜检的质量控制和质量保证体系，加强对检测工作的监督和管理。

一、项目名称、检验方法名称:项目名称：疟原虫检查检验方法：薄/厚血片法及胶体金法二、方法学原理胶体金法：采用双抗体夹心薄膜免疫层析技术，层析条由质控区、检测区和金标垫三部分构成。

质控区包被了羊抗鼠IgG抗体(C)，作为对检测试剂的质量控制；检测区分别包被了特异性的抗疟原虫乳酸脱氢酶抗体(T1)和抗富组氨酸蛋白抗体（T2）；金标垫中包含有偶联了玫红色胶体金的另一株抗疟原虫乳酸脱氢酶抗体和抗富组氨酸蛋白抗体。

当检测样品中存在针对上述抗体的特异性抗原时，样品中的抗原与金标垫中的标记抗体结合，形成抗原-胶体金复合物，并借助层析作用向上迁移。

当复合物流经检测区时，被相应的包被抗体捕获。

若血样中存在间日疟原虫（Pv）抗原时，在T1区会形成一条玫红色检测线。

若血样中存在恶性疟原虫（Pf）抗原，在T2区会形成一条玫红色检测线，T1区有或无检测线形成。

检测样品中若不存在特异性抗原时，检测区不显色。

质控区出现的玫红色指控线表示试剂有效并且操作正确。

三、试剂品牌、代号、包装规格、内容物：1、薄/厚血片法试剂品牌：珠海贝索生物技术有限公司Baso内容物：瑞氏—姬姆萨复合染色液组成：主要成分瑞氏--姬姆萨A液×2瓶(瑞氏染料、姬姆萨染料)瑞氏--姬姆萨B液×2瓶(PH6.8磷酸盐缓冲液)2、胶体金法：试剂品牌：上海疾控生物科技有限公司内容物：检测卡：20人份（1人份/铝箔袋）洗涤液：1瓶（5ml）四、具体操作步骤（包括主要的仪器测定参数）（一）、薄/厚血片法：1．薄血片：在清洁玻片上用一滴外周血，以常法推制成薄片。

2．厚血片：在清洁玻片上用一滴外周血，制成厚血片，血膜干燥后蒸馏水脱去血红蛋白3．血膜完全干燥后即可染色，染色法（瑞氏法）同白细胞分类检查。

4．染色涂片干后油镜检查，寻找疟原虫。

（二）、胶体金法：1．将检测卡从铝箔袋中取出，平放在工作台上，编号待用2. 使用微量移液器，在加样孔前端缓慢加入5μl待检全血3. 然后在加样孔后端缓慢加入3-4滴洗涤液，待液体完全渗透4. 20分钟内观察检测结果，记录结果5. 胶体金法对恶性疟原虫敏感性为99%，特异性是98%；对间日疟原虫的敏感性是97%，特异性是98%。

疟原虫检测工作方案及流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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疟原虫镜检技术操作规范1.目的指导实验室检验人员正确使用和维护全显微镜，完成疟原虫检测项目2、范围适用于实验室检验人员3、职责检验人员需按照本操作规程使用和维护全显微镜, 确保仪器在最佳状态下运行，以便得到正确的结果，提高结果准确率。

4、作业指导4.1.需用器材显微镜单、双目显微镜均可，目镜一般以5X为宜（有的用10X），物镜必须用油镜（100X）、镜油、擦镜纸、二甲苯或酒精乙醚4.2操作步骤4.2.1、血膜上滴加镜油滴一滴镜油在血膜上，再将血片置载物台上。

4.2.2、镜检用目镜5×和物镜10～40×低倍镜检下找到血膜，再将物镜转换成油镜（100×），查找疟原虫，吉氏染色较好的血膜，红细胞呈淡红色，嗜酸性细胞的颗粒呈鲜红色，淋巴细胞及疟原虫胞浆呈蓝色或淡蓝色，白细胞的核呈紫蓝色，疟原虫的核呈红色。

4.2.3、观察血膜的方法镜检时从血膜的一端开始，自上而下，自左而右，逐个视野顺序查看。

发热病人血片至少要查完200个视野以上，普查带虫血片则需看完全片，方可报告结果。

镜检疟原虫一般只查厚血膜，薄血膜作为疟原虫的分类定种。

4.3、结果报告结果报告分阳性和阴性，阳性者至少要查见一个典型疟原虫（并需鉴别虫种和期别）方可确定；以查完整个厚血膜，未查见疟原虫者判为阴性。

4.4、注意事项4.4.1染色前血膜的保存新制作的血膜应防止污染和苍蝇吸食血膜，新鲜厚血膜放置时要保持水平，直到充分干燥后可不溶血直接染色。

血膜放置时间，夏天不宜超过48小时，冬天不宜超过72小时，否则厚血膜会自然固定而不能溶血，影响镜检。

不能即时染色的血膜，可先用甲醇固定薄血膜，将厚血膜溶血，晾干后包好，放入干燥器中，置于冰箱内保存。

临用时，将干燥器放置室温中1～2小时后取出血片。

4.4.2、患者资料应登记详细，确保能追踪随访，个案调查、登记、统计等资料应有专人负责保管。

4.4.3、镜检人员应加强自身防护，操作戴手套、穿工作服。