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检测奶粉三聚氰胺方法
奶粉中三聚氰胺的检测方法主要有以下几种：
1. HPLC-UV法：利用高效液相色谱技术结合紫外检测器，通过样品中三聚氰胺的特征吸收峰进行定量分析。
2. LC-MS/MS法：利用液相色谱联用串联质谱仪的方法，对样品中的三聚氰胺进行定量分析，具有较高的灵敏度和准确性。
3. 免疫法：通过制备抗三聚氰胺抗体或利用商用的抗体盒，然后利用抗体与三聚氰胺结合形成特定复合物，并通过免疫反应进行检测和定量。
4. 酶法：利用三聚氰胺酶催化三聚氰胺分解产生氨气，然后利用氨气检测仪器进行定量分析。
需要注意的是，以上方法在检测奶粉中三聚氰胺时，通常需要先进行样品的预处理步骤，如提取、净化、富集等，以提高检测的灵敏度和准确性。
此外，不同的方法对样品的处理和仪器设备要求也有所不同，具体操作还需要参考相关的检测标准和方法说明。
奶粉中三聚氰胺的高效液相色谱快速测定法作者：吴红萍陶嫣娥来源：《现代商贸工业》2012年第08期摘要：对高效液相色谱法快速测定奶粉中的三聚氰胺进行方法学考察，选用高效液相色谱法，进行线性范围试验、溶液稳定性试验、重复性试验、中间精密度试验。
高效液相色谱法快速测定奶粉中的三聚氰胺，方法线性良好，供试品溶液稳定性好。
不受检验条件、试验环境、人员变化的影响，方法操作简单，准确性好。
关键词：高效液相色谱法；快速测定；三聚氰胺中图分类号：TU文献标识码：A文章编号：1672-3198（2012）08-0187-01自2008年三聚氰胺事件以来，食品安全问题得到了广泛的关注。
“民以食为天”，食物是人类赖以生存的物质基础，食品安全与人类的生命和健康息息相关，在加强和完善食品安全的法律法规以及监督检查力度的同时，作为食品的生产加工销售企业来说，加强对所生产或销售产品的质量控制，保证上市产品的质量尤为重要。
本文对高效液相色谱法快速准确地测定奶粉中残留的三聚氰胺进行方法学考察，意在寻找准确可靠的质量控制方法。
1 试验准备1.1 仪器与试剂Agilent 1260高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)，甲醇、乙腈、辛烷磺酸钠为色谱纯，乙醇、三氯乙酸、柠檬酸为分析纯，试验用水为二次蒸馏水。
1.2 对照品储备液的制备取三聚氰胺对照品约50mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇-水（9∶1）使溶解．并稀释至刻度．摇匀得1ml约含三聚氰胺1mg的溶液作为对照品储备液。
1.3 样品溶液的制备取被测奶粉约2g，精密称定，置25ml容量瓶中，加入20％乙醇溶液17.5ml，用10%的三氯乙酸溶液定容至刻度．超声处理10min，摇匀，冷却至室温后，以10000转／分的转速离心处理10分钟，经0.22μm的微孔滤膜过滤，即得。
1.4 色谱条件选用岛津COLUMN VP-ODS（150×4.6，5μm）色谱柱，以缓冲液（柠檬酸2.10g，辛烷磺酸钠2.16g，加入约980ml水时溶解，调节pH值至3.0，定容至1000ml）-乙腈（90∶10）为流动相，流速1.0ml／min，柱温40℃，检测波长240nm，进样量20μl。
28 食品安全导刊 2010年11月刊ANAlySIS & TEST 自2008年三聚氰胺事件爆发以来，乳品安全一直备受关注。
为了加大对乳品行业的监管力度，使中国乳品行业迅速恢复元气，相关职能部门出台了多项措施：在质量控制方面，要求对奶源做到严格把关，有效提高乳品质量安全系数。
因此，在奶站收奶环节，企业对原料奶的检测把关显得尤为重要，同时为保证牛奶不发生腐败变质的现象，必须在最短的时间内对其进行检测并立即入罐冷藏，这些都对乳品的检测技术提出了挑战。
常规的三聚氰胺残留量检测方法主要有液相色谱/质谱法（LC-MS）、高效液相色谱（H PLC）、液相色谱串联质谱（LC-M S-M S）等，这些方法因为存在仪器设备昂贵、检测过程繁琐、检测时间太长和对检验人员的技能要求高等局限，所以不适合现场监控和大量样品的筛查，在鲜奶收购环节使用不现实。
鉴于此，如何选择一种快速、低成本的检测方法，构建从奶□ 张德红 扶胜 杜祥乐 北京望尔生物技术有限公司站、企业到政府监管的安全检测网络已成为当前迫切需要解决的问题。
目前，快速筛查技术主要有两大类：生物分析技术和化学分析技术。
生物分析技术又包含免疫学方法，该方法具有检出限低、准确性好、灵敏度高、重现性好等特点，是现在和未来快速筛查技术发展的主流技术，非常适合对原料乳的快速检测。
依托此项技术，北京望尔生物技术有限公司（以下简称北京望尔）开发出三聚氰胺酶联免疫试剂盒和胶体金试纸卡等检测产品，为广大乳品企业及相关机构提供了有效的三聚氰胺快速检测方案。
三聚氰胺酶联免疫试剂盒检测方案检测原理三聚氰胺试剂盒采用间接竞争E L I SA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的三聚氰胺将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗三聚氰胺抗体，在加入酶标二抗后，用T M B底物显色，样本吸光值与残留物三聚氰胺的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中三聚氰胺的含量。
液相色谱-串联质谱法测定奶和奶制品中三聚氰胺残留柳菡1，孙宁宁1，杨雯筌1，刘飞2，丁涛1，徐锦忠 11. 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，南京，210001，2. 赛默飞世尔科技上海有限公司色谱质谱部，上海，201206摘要研究报导了高效液相色谱电喷雾串联质谱联用（HPLC/MS/MS）测定奶和奶制品中三聚氰胺残留的方法。
三氯乙酸溶液沉淀样品中的蛋白，同时提取目标分析物，强阳离子固相萃取柱进一步富集净化后，利用液相色谱-电喷雾串联质谱测定。
方法检测低限为0.05 mg/kg，HPLC/MS/MS添加回收率72 ～ 87 ％之间（基质匹配曲线校正），相对标准偏差（RSD）在4.2％～ 8.2％。
关键词三聚氰胺；奶和奶制品；液相色谱-串联质谱法Determination of melamine residues in milk and dairy products by liquid chromatography tandem mass spectrometryHan Liu1, Fei Liu2, Ningning Sun1, Wenquan Yang1, Tao Ding1, Jinzhong Xu1,1 Animal, Plant and Food Inspection Center (APFIC) of Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Nanjing 2100012 Thermo Fisher Scientific, Shanghai，201206Abstracts: A method for analysis of melamine residues in milk and dairy products was developed by liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/MS). Trichloroacetic acid solutions were used to precipitate proteins and dissociate the target analytes from sample matrix. After matrix purified by strong cation exchange solid phase extraction cartridge, analyses can be performed using HPLC/MS/MS in the selected reaction monitoring (SRM) mode. The limit of dection is 0.05 mg/kg when using HPLC/MS/MS method. The mean recovery was 72 ~ 108％(matrix match calibration curve)and the standard deviation was 4.2 ~ 12.5 % by HPLC/MS/MS method.KEYWORDS:melamine; milk and dairy products; HPLC-MS/MS9月上旬，甘肃等地报告多例婴幼儿泌尿系统结石病例，调查结果表明，导致多名儿童患泌尿系统结石病的主要原因是患儿服用的奶粉中含有三聚氰胺。
高效液相色谱(HPLC-UV)法测定奶粉中三聚氰胺的含量一、实验目的：测量奶粉中三聚氰胺的含量是否达标。
二、仪器：高效液相色谱仪，离心机，固相萃取装置，柱温箱，紫外检测器，C18柱，超声波清洗器，pH 计，电子天平，氮气吹干仪，涡旋混合器；5mL移液管1支,1mL刻度移液管1支，25mL容量瓶1个，100mL容量瓶6个，100mL烧杯1个，微量进样器一支。
三、试剂：三聚氰胺标准品，1%三氯乙酸，氨水，柠檬酸，庚烷磺酸钠（色谱纯），甲醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），二次水，甲醇水溶液（准确量取50mL甲醇和50mL水，混合备用），5%氨化甲醇（量取5mL氨水和95mL甲醇混合备用），离子对缓冲溶液（准确称取2.10g柠檬酸和2.02g 庚烷磺酸钠加水溶解后调节pH=3，定容至1L备用），三聚氰胺储备液（准确称取100mg三聚氰胺，在100mL容量瓶中用甲醇水溶液定容），净化柱（固相萃取柱，基质为苯磺酸化的聚苯乙烯），氮气。
四、实验步骤：1.样品预处理：准确称取2g样品，用10mL 1%三氯乙酸溶解后转移至25ml容量瓶中，乙腈定容。
超声提取10分钟后离心，干过滤。
用5mL移液管准确移取5mL过滤后的溶液过净化柱，依次用3mL水和3mL甲醇洗涤并抽干后后用约6mL 5%氨化甲醇洗脱。
洗脱液用氮气吹干后用1mL流动相定容，涡旋混合1分钟后经0.20 μm有机相滤膜过滤后进样。
2.色谱条件：C18 色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），以离子对缓冲溶液+乙腈（85+15）作为流动相，流量为1.0 ml/min，柱温为35 ℃，检测波长为240 nm，进样量为20 μl。
3. 标准曲线的绘制：将三聚氰胺标准储备液（1.00×10^3 mg/L）用甲醇-水溶液（1+1）逐级稀释得到浓度为1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mg/L的标准系列溶液，以峰面积（y）对浓度（x）绘制标准曲线。
奶及奶制品中三聚氰胺的检测□梁海霞连云港市食品药品检验检测中心郭瑛连云港市质量技术综合检验检测中心陈健周文梅连云港市食品药品检验检测中心摘要：随着人们生活质量的不断提高，奶及奶制品的食品安全事件引发了人们普遍的关注。
一些居心不良的人将三 聚象胺加入奶及奶制品之中，导致原料奶及奶制品受到极大的污染，对于人体的健康和安全造成了极大的威胁和危害。
为此，要注重对奶及奶制品中三聚氰胺的检测，采用多样化的检测技术和方法，确保奶及奶制品的食品安全。
关键词：奶及奶制品；三聚氛胺；检测技术随着人们对食品安全健康问题关注度的提升，奶及奶制品中三聚氰胺 的检测成为人们关注的焦点和话题。
一些不法商贩将三聚氰胺冒充蛋白质 添加到奶及奶制品之中，以提升奶及 奶制品的氮含量，导致人体内部形成 无法溶解的氰尿酸三聚氰胺结石，对 人体的肾脏和泌尿系统造成极大的危 害。
为此，要加强对奶及奶制品中的 三聚氰胺的检测，采用多样化检测技 术和方法，并开发和应用简单快速、灵敏高、特异性强的三聚氰胺检测技 术一纳米孔单通道技术，以较好地 实现对奶及奶制品中三聚氟胺的检测。
1三聚氰胺及其在食品中的检测标准三聚氰胺是一种几乎无味的白色单斜晶体，可溶于水、甲醇、甲醛、甘油、吡啶等有机溶剂之中，大多用 于塑料制品生产或粘合剂、金属抗老 化剂、着色剂的生产中，它进入到人 体之中会刺激人体的呼吸道，引发恶 心、呕吐和腹泻等现象，如果人体摄 入微量的三聚氰胺不会造成威胁，而 如果摄入过多则会超出人体肾脏所承 受的排泄能力，引发人体的肾衰竭甚 至死亡现象。
在2007年、2008年的 与三聚氟胺相关的食物中毒事件之中，出现有大面积的婴幼儿因食用含有三 聚氟胺的奶粉或奶制品而引发肾管道 阻塞、肾结石甚至死亡的案例。
为此，我国规定在奶及奶制品中的三聚氰胺 的最大限量值为2.5 mg/kg。
2三聚氰胺的检测方法分析2.1仪器检测分析方法(1)毛细管电泳法（CE)。
收稿日期:2008 11 20 修回日期:2009 01 18*通讯联系人:史烨弘,男,在读博士生,研究方向为环境化学.第25卷第2期V ol.25 N o.2分析科学学报JO U RN AL O F A N AL Y T ICA L SCIEN CE 2009年4月A pr.2009文章编号:1006 6144(2009)02 0214 03超高速液相色谱测定奶粉中的三聚氰胺史烨弘*1,石欲容2(1.北京大学地球与空间科学学院二恶英实验室,北京100871;2.天美(中国)科学仪器有限公司,北京100009)摘 要:使用超高速液相色谱仪(LCU),在LaChromU ltra C18柱(50 2.0mm i.d.,2 m )上,以10m ol/L 柠檬酸-10m ol/L 辛烷磺酸钠/CH 3CN 为流动相,紫外240nm检测,2.2min 内快速检测出奶粉中的三聚氰胺。
结果表明,三聚氰胺浓度在0.25~100 g/m L 范围内线性关系良好(R 2>0.999),平均回收率为87%~95%,保留时间的相对标准偏差为0.26%~0.38%,峰面积的相对标准偏差为0.91%~ 1.82%。
该方法适用于大批量样品的常规分析。
关键词:超高速液相色谱仪;三聚氰胺;奶粉中图分类号:O657.7+2 文献标识码:A三聚氰胺(Melamine)是一种重要的氮杂环有机化工原料,能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐。
它是一种用途广泛的有机化工中间产物,最主要的用途是作为生产三聚氰胺/甲醛树脂(M F)的原料,还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。
目前用于三聚氰胺的检测方法有高效液相色谱(H PLC)法[1-4]、液相色谱 质谱法[5,6]、超高速液相色谱 质谱法[7]。
本文采用超高速液相色谱仪,紫外240nm 检测,在2.2m in 内很好的分离分析奶粉中三聚氰胺,方法适用于常规大批量样品的检测。
1 实验部分1.1 主要仪器与试剂LaChromU ltra 超高速液相色谱仪(日本,日立公司),包括L 2160U 输液泵、L 2200U 自动进样器、L 2300柱温箱、L 2400U 紫外检测器、EZ Chrom ELite 系统工作站;IKA Basic 均质器;津腾0.2 m 针筒式微孔滤膜过滤器。
基于QuEChERS前处理技术和弱阳离子交换色谱的牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法魏杰;郭志谋;沈爱金;章飞芳;梁鑫淼【摘要】A simple , rapid method for the determination of melamine in milk and milk powder was developed using QuEChERS approach coupled with weak cation exchange chromatography (WCX). The samples were extracted and cleaned-up by medicinal alcohol and lipid adsorbent (LAS) simultaneously, then centrifuged and filtered for high performance liquid chromatographic ( HPLC ) analysis. The separation was performed on a WCX column ( 150 mm × 4.6 mm, 5 μm) with 2 mmol/L KH2PO4( pH 3.8 ) as mobile phase. The flow rate was 1.5 mL/min and the detection wavelength was 208 nm. The injection volume was 20 μL and the column temperature was 30 ℃. Under the optimized conditions, good linearity was obtained in the range of 0.02 - 20 mg/L with a correlation coefficient ( r2 ) of 0.9999. For samples spiked with melamine standard in the range of 1 -50 mg/kg, the average recoveries of standard in the milk and milk powder were 98.9％-105.2％ and 86.4％- 102.9％, respectively. The relative standard deviations were 0.9％-3.4％ and 1.5％- 6.7％, respectively. The limits of detection ( LOD ,S/N≥3 ) were 0.05 mg/kg ( milk ) and 0.1 mg/kg ( milk powder ). The present method is green due to not use of the toxic organic solvents.%应用QuEChERS前处理技术,并结合弱阳离子交换色谱,建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法.样品使用医用酒精(乙醇含量75%)和一种新型脂肪吸附(LAS)材料超声振荡处理,在沉淀(吸附)蛋白质和脂肪的同时提取三聚氰胺,然后经8000 r/min离心,上清液过膜直接分析.色谱分析在弱阳离子交换色谱柱(WCX)上进行,采用2 mmol/L pH为3.8的磷酸二氢钾水溶液为流动相,在5 min内实现分离分析.结果表明,该方法在0.02～20 mg/L内线性相关系数大于0.999 9.在1～50 mg/kg添加浓度范围内,牛奶的平均回收率为98.9%～105.2%,相对标准偏差(RSD)为0.9%～3.4%;奶粉的平均回收率为86.4%～102.9%,RSD为1.5%～6.7%.本方法的检出限为0.05 mg/kg(牛奶)和0.1 mg/kg(奶粉).整个分析检测过程没有使用有毒有害有机溶剂,是一种绿色的分析方法.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2011(029)007【总页数】4页(P687-690)【关键词】QuEChERS方法;弱阳离子交换色谱;快速分析;三聚氰胺;牛奶;奶粉【作者】魏杰;郭志谋;沈爱金;章飞芳;梁鑫淼【作者单位】华东理工大学药学院,上海,200237;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;华东理工大学药学院,上海,200237;华东理工大学药学院,上海,200237;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023【正文语种】中文【中图分类】O658三聚氰胺 (m elam ine)是一种三嗪类含氮杂环有机化合物,因其相对较高的含氮量(66.7%)被一些不法商贩添加到乳制品中冒充蛋白质,人体长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统损害,引起膀胱、肾部结石,并进一步诱发膀胱癌。
