分光光度法快速检测奶粉中三聚氰胺

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检测奶粉三聚氰胺方法

检测奶粉三聚氰胺方法
奶粉中三聚氰胺的检测方法主要有以下几种：
1. HPLC-UV法：利用高效液相色谱技术结合紫外检测器，通过样品中三聚氰胺的特征吸收峰进行定量分析。

2. LC-MS/MS法：利用液相色谱联用串联质谱仪的方法，对样品中的三聚氰胺进行定量分析，具有较高的灵敏度和准确性。

3. 免疫法：通过制备抗三聚氰胺抗体或利用商用的抗体盒，然后利用抗体与三聚氰胺结合形成特定复合物，并通过免疫反应进行检测和定量。

4. 酶法：利用三聚氰胺酶催化三聚氰胺分解产生氨气，然后利用氨气检测仪器进行定量分析。

需要注意的是，以上方法在检测奶粉中三聚氰胺时，通常需要先进行样品的预处理步骤，如提取、净化、富集等，以提高检测的灵敏度和准确性。

此外，不同的方法对样品的处理和仪器设备要求也有所不同，具体操作还需要参考相关的检测标准和方法说明。

乳中三聚氰胺的测定

乳中三聚氰胺的测定概述三聚氰胺是一种有机化合物，常用于工业生产中的胶粘剂和树脂制造等。

然而，由于其毒性和致癌性，三聚氰胺被禁止在食品和饲料中使用。

因此，对于乳制品中三聚氰胺的测定显得尤为重要。

本文将介绍乳中三聚氰胺的测定方法及其应用。

一、乳中三聚氰胺的来源和危害乳制品是人们日常生活中常见的食品之一，而乳中三聚氰胺是一种常见的污染物。

三聚氰胺通常来自于牲畜饲料中的添加剂，当牲畜摄入三聚氰胺过多时，其代谢产物会通过牛奶等分泌物进入乳制品中。

三聚氰胺对人体健康有严重危害，可能导致泌尿系统疾病、肾结石甚至导致肾衰竭。

二、乳中三聚氰胺的测定方法1. 红外光谱法红外光谱法是一种常用的乳中三聚氰胺测定方法。

该方法基于三聚氰胺在特定红外光波长下吸收的特性，通过测量样品中红外光的吸收强度来确定三聚氰胺的含量。

红外光谱法具有快速、准确的优点，但需要专业的仪器设备和操作技术。

2. 气相色谱法气相色谱法也是一种常用的乳中三聚氰胺测定方法。

该方法通过将样品中的三聚氰胺蒸发并分离，然后通过气相色谱仪进行定量分析。

气相色谱法具有灵敏度高、分离效果好的优点，但需要较长的操作时间和较高的设备要求。

3. 液相色谱法液相色谱法是一种常用的乳中三聚氰胺测定方法。

该方法通过将样品中的三聚氰胺溶解并分离，然后通过液相色谱仪进行定量分析。

液相色谱法具有准确度高、操作简便的优点，但需要一定的样品前处理步骤。

三、乳中三聚氰胺的应用1. 食品安全检测乳中三聚氰胺的测定在食品安全检测中具有重要意义。

通过对乳制品中三聚氰胺的测定，可以保障消费者的健康和权益，防止不合格产品上市和流入市场。

2. 生产控制与质量保障乳制品生产过程中对三聚氰胺的测定也非常重要。

通过对原料和成品中三聚氰胺的监测，可以及时发现和控制潜在的污染源，确保产品质量和生产工艺的稳定性。

3. 法律监管与标准制定乳中三聚氰胺的测定在法律监管和标准制定中起着重要的作用。

通过对乳制品中三聚氰胺含量的限制和监测，可以制定相应的法律法规和标准，保障乳制品行业的健康发展。

奶粉的理化指标和三聚氰胺的检测

2012.10.23-2012.10.25奶粉的理化指标和三聚氰胺的检测姓名（学号）苏州大学材料与化学化工学部09级化学专业摘要:本实验选用高钙奶粉做样品，对其进行简单的预处理，利用凯氏定氮法和分光光度法测定奶粉的理化指标及其氮含量，并通过火焰原子吸收法测定铜含量。

关键词：三聚氰胺、奶粉、检测Abstract：This experiment chooses high calcium milk powder to do samples, with simple pretreatment, then using kjeldahl determination and spectrophotometry to determine the milk powder's physical and chemical parameter and nitrogen content, and use the flame atomic absorption spectrometry to determine the copper content. Keyword：tripolycyanamide、milk powder、detection1.前言乳及乳制品成分复杂，主要包括水、蛋白质、脂肪、乳糖、无机盐、维生素和酶等。

由于在其加工过程中可能受到污染以及不法商人恶意添加三聚氰胺等因素，对乳制品中各种成分和物质的检测分析极为重要。

蛋白质是含氮有机物，乳粉样品与硫酸一同加热消化后，其中有机物会分解为二氧化碳和水，蛋白质分解为氨，滞留在溶液中，然后通过碱化溶液释放氨气，用硼酸溶液吸收，测定其分光光度，乘以其换算系数即为蛋白质含量。

碱性溶液中用次溴酸盐氧化氨为亚硝酸盐，在pH=2溶液中，亚硝酸根与磺胺反应生成重氮化合物，再与萘乙二胺反应生成偶氮染料，呈紫红色，最大吸收波长为543nm，摩尔吸光系数为5×104，浓度在0.1mg•L-1以内符合比尔定律。

三聚氰胺奶粉检测方法

三聚氰胺奶粉检测方法
三聚氰胺奶粉检测方法如下：
1. 离子色谱法：该方法基于三聚氰胺在水中形成氢氧化铵和靛酚蓝络合物的反应，在离子色谱柱中用硫酸为流动相进行分离，再通过紫外检测器进行检测。

2. 高效液相色谱法：该方法使用高效液相色谱柱进行分离，以甲醇和水为流动相，以紫外检测器和荧光检测器进行检测三聚氰胺。

3. 液质联用法：该方法是高效液相色谱法和质谱法的结合，可以同时分离和定量三聚氰胺及其代谢产物。

4. 岛式红外光谱法：该方法利用不同样品的红外光谱图谱的差异性来鉴别含三聚氰胺的奶粉。

5. 快速检测法：该方法使用荧光和拉曼光谱等技术，可以在几秒钟内快速、准确地检测奶粉中的三聚氰胺。

以上是常用的几种三聚氰胺奶粉检测方法。

不同的方法具有不同的优点和适用范围，可以根据实际需求选择合适的检测方法。

分子印迹—紫外分光光度法测定乳品中三聚氰胺

分子印迹—紫外分光光度法测定乳品中三聚氰胺作者：胡静高文惠来源：《农村经济与科技》2016年第18期[摘要]以三聚氰胺为模板分子，α-甲基丙烯酸（MAA）为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯（EDMA）为交联剂，采用本体聚合方式合成三聚氰胺分子印迹聚合物（MIP），样品经分子印迹固相萃取法进行净化，紫外分光光度计测定。

试验结果表明：此方法的线性范围为0.007mmol/L～0.1mmol/L，线性相关系数为0.9973，在0.02mmol/L、0.07mmol/L的两个添加水平下，平均回收率在75%～75.2%之间，相对标准偏差（RSD）小于4.5%（n=5）。

[关键词]紫外分光光度法;三聚氰胺;分子印迹固相萃取[中图分类号]TS207.5 [文献标识码]A三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，常用在有机化工原料生产中。

由于分子中含氮量比较高，因此不法商贩为提高乳制品的蛋白质含量，将其加入牛奶当中。

2008年爆发了“三鹿奶粉”事件，婴幼儿因食用了含三聚氰胺的奶粉而致肾结石甚至死亡的恶性事件。

因此建立快速的检测方法以确保食品的安全十分必要。

国内外对食品中三聚氰胺的检测常采用的是液相色谱，液质联用技术。

但由于其仪器价格昂贵，再加上固相萃取前处理比较繁琐，在一定程度上限制其应用。

三聚氰胺具有紫外吸收，因此利用紫外分光光度法测定成为可能，并且简便快速。

当采用紫外分光光度法测定时，因为很多物质在紫外区都有吸收，所以干扰较大。

因此如何进行样品的前处理就成为采用紫外分光光度法测定三聚氰胺所面临的最大难题。

分子印迹技术具有从复杂样品中选择性地吸附模板分子或与其结构相近的某一族化合物的能力，因此非常适合用作固相萃取剂用来分离、净化样品。

本文利用分子印迹固相萃取技术结合紫外分光光度法检测奶粉中三聚氰胺的残留量。

1 实验部分1.1 试剂与仪器三聚氰胺标准品（纯度大于99.0%）;二甲亚砜;α-甲基丙烯酸;乙二醇二甲基丙烯酸酯;偶氮二异丁腈;庚烷磺酸钠;三氯乙酸。

三聚氰胺分光光度法快速检测研究

ｒｌｔｎｈｐｂｔｅｎｔｅｃｒｅｒｇｅｓｎｅｕｔｎ：＝００５ｌ＋．８（０９８９，ｎｅｅｏｅｙｒｔａ５９％．ｅａｉｓｉｅｗｅｕｖｒｓｉｑａｉｙ一．３ｘ０３６６Ｒ＝．９）ａｄｔｃｖｒｅｗｓ％￣９ｏｈｅｏｏｈｒａ９
食品科学
现代农业科技
２１年第４期０１
三聚氰胺分光光度法快速检测研究
郑洁周兵邵康群周云莹胡霄罡潘秋月
（江经贸职业技术学院应用工程系，江杭州Ｉ３０１）浙浙１０８
摘要研究三聚氰胺与试剂ｌ反应后引起溶液吸光度值的变化规律。果表明：最大吸收波长２０ｎ下，结在６ｍ在一定浓度范围内，三聚氰胺的浓度与体系吸光度值的降低呈现一定的线性关系，应体系工作直线为ｙ一．３ｘ０３６６Ｒ２０９８９。样品回收率为９％－反：００５ｌ＋．８（＝．９）其５
比为蒸馏水。分别在２０６０ｎ０～０ｍ范围对样品１样品２进行、
目前，聚氰胺的检测方法分为浊度法『升华法、三１］、重量
法囝０５ｍ儿硫酸电位滴定法网高效液相色谱法（ＰＣ）、、．ｏ、ＨＬ嗍液相色谱一质谱／谱法（ＣＭＳＭＳ［、相色谱一质Ｌ — ／）１气５质谱法（ＣＭＳ嘲ＥＩＡ试剂盒法。Ｇ — ）和ＬＳ不同的测定方法采用不同的三聚氰胺提取方法和使用不同的样品量。国家标准规定的高效液相色谱法、相色谱一气质谱联用法、相色谱一液质谱／质谱联用法等检测原料乳与乳制品中三聚氰胺含量的方法优点明显：测极限低，量结果准确。缺点也相当突出：检测但样品的前处理十分复杂，尤其对于难以挥发的三聚氰胺在气相色谱一质谱联用法中需要用衍生化试剂如双三甲基硅基三氟乙酰胺和三甲基氯硅烷衍生化处理，之变成沸点相对使较低的物质，更是增加了检测的难度；且不可能对每种产并

分光光度法测定三聚氰胺

１实验部分
１１所需化学品和反应试剂．三聚氰胺标准品；甲醛，甲萘酚，ＯＨ１ＫＨ，Ｃ，乙腈．己烷：为ＡＲ正均
图１各溶液的光谱图
从上到下依次为反应混合液．－氰胺溶液．准反应溶液５聚标
２结果与讨论
２１实验方法的确定．
通过上述实验和仪器分析．得到各溶液的光谱图．如图ｌ所示三聚氰胺溶液的紫外光谱显示在２１ｍ处有一最大的吸收峰．０ｎ甲醛没有紫外吸收光谱．标准反应溶液没有明显的紫外光谱峰。三聚氰胺与标准反应溶液加热反应后的混合溶液在２６ｍ附近有唯一的０ｎ波峰．利用该峰可判断三聚氰胺的存在和含量
２１０１年
第ＩＥＨＯＬＹＩＯＲＴＯＮＮ
０科教前沿０
科技信息
分光光度法测定三聚氰胺
韩德红（山东科技职业学院化工系山东
潍坊
２１５）６０３
【摘要】该项研究的目的是研究一种新型的定量测定三聚氰胺的方法，方法基于三聚氰胺与甲醛和含有活泼氢的羰基化合物之间进行该的络合反应．反应形成的复合物在２７ａ０ｒ处有一最大的特殊吸收峰。利用峰的特殊性和吸光度大小来测出三聚氰胺的含量。ｍ【关键词】三聚氰胺；酚；甲萘分光光度法
利用紫外分光光度计测定其吸光度，录结果和图像。根据上表数据记和实验图像绘制定量校正曲线
０引言
三聚氰胺（化学式：）ｃＨ，俗称密胺、蛋白精，ＰＣ命名为ＩＡＵ “ ，５三嗪一，三氨基” 是一种三嗪类含氮杂环有机化合物。１３一２６４一化学性质呈弱碱性（Ｈ值＝）与盐酸、ｐ８，硫酸、硝酸、乙酸、草酸等都能形成三聚氰胺盐在中性或微碱性情况下．甲醛缩合而成各种羟甲基三与聚氰胺，但在微酸性中（Ｈ值５～．）Ｄ．６与羟甲基的衍生物进行缩聚反５５应而生成树脂产物。遇强酸或强碱水溶液水解．胺基逐步被羟基取代，先生成三聚氰酸二酰胺．进一步水解生成三聚氰酸一酰胺．最后生成二聚氰酸三在现有奶粉检测的国家标准中。主要进行蛋白质、脂肪、细菌等检测。三聚氰胺属于化工原料．是不允许添加到食品中的．所以现有标准不会包含相应内容亦即三聚氰胺检测目前并无国家标准目前国内外检验三聚氰胺的方法主要有紫外检测法ｌ液相色谱法［ｊＩ１．一．气相色谱一质谱联用检测法［］ｗ和超高效液相色谱与质谱联用法［］８。－９该项研究的任务是探索发现一种新的定量检测各种物质中的三聚氰胺的含量浓度的方法在研究中用牛奶作为被三聚氰胺污染的样品．该方法可用于被三聚氰胺污染的各种物质中

紫外分光光度法直接测定三聚氰胺的研究

ｄｔｒｉａｉｎｗａｏｅｏ．５ ×１ｅｅｎｔｓｄｎｆ１２ｍｏ０～ｍｇ／ｍＬｍｅａｎｅｆｒ１１ｔｍｅｎｈｅａｉｅｓａｄｒｅｉｔｎｗａ８％．Ｓｔｌｍｉｉｓａｄｔｅｒｌｔｔｎａｄｄｖａｉｓ３．ｏｖｏａ—
摘要：利用三聚氰胺的甲醇溶液在２３ｎ０ｍ波长处有最大吸光度，建立了紫外分光光度法直接测定三聚氰胺的新方法，并研
究了反应的各种影响因素。该方法对三聚氰胺的检出限为１５×１ｍｇｍＬ线性范围为０２．０／；．５×１～．０２５×１ｍ／Ｌ对浓度为０ｇｍ，１２．５×１。ｍ／０ｇｍＬ的三聚氰胺进行１次平行测定，１得到相对标准偏差为３８．％。将本法用于合成样品中三聚氰胺的测定，回收率为１０３～１１，果令人满意。０．％０％结
Ｎｎｘｅｉｌｎｖｒｉ，ｉｘｉｃｕｎ７００，ＣｉａｉｇｉＭｄｃｉｅｓｙＮｎｉＹｎｈａ５０４ｈｎ）ａａＵｔｇａ
Ａｂｔａｔｓｒｃ：Ａｐｃｒｐｏｏｔｉｔｏｏｈｕｎｉａｉｅｄｔｒｉａｉｎｏｌｍｉｅｗａｅｅｏｄ．ＴｅＵＶｐｅｓｅｔｏｈｔｍｅｒｃｍｅｈｄｆｒｔｅｑａｔｔｔｖｅｅｎｔｏｆｍｅａｎｓｄｖｌｐｅｍｈｓｅ—
１０．％～ｌ％．０３０１
Ｋｅｒｓｙｗｏｄ：ＵＶｓｅｔｍ；ｍｅａｎｐｃｒｕｌｍｉｅ

三聚氰胺的快速检测方法

三聚氰胺的快速检测方法
三聚氰胺是一种有毒化学物质，常被用作添加剂掺假奶粉等食
品中，对人体健康造成严重危害。

因此，快速检测三聚氰胺的方法
显得尤为重要。

本文将介绍几种常见的三聚氰胺快速检测方法。

首先，光谱法是一种常用的三聚氰胺快速检测方法。

通过分析
三聚氰胺在特定波长下的吸收特性，可以快速准确地检测样品中三
聚氰胺的含量。

这种方法操作简单、快速，适用于实验室和生产现
场的快速检测。

其次，生物传感器技术也是一种有效的三聚氰胺快速检测方法。

生物传感器利用生物体内的生物分子对三聚氰胺的特异性识别，通
过测定生物传感器的信号变化来检测样品中的三聚氰胺含量。

这种
方法具有灵敏度高、检测速度快的优点，适用于食品安全监测领域。

另外，色谱法也是一种常见的三聚氰胺快速检测方法。

色谱法
通过样品中三聚氰胺与色谱柱固定相之间的相互作用，分离出三聚
氰胺并进行定量分析。

这种方法具有分离效果好、灵敏度高的特点，适用于实验室对样品进行深度分析。

除了上述方法之外，近年来还出现了基于纳米材料的三聚氰胺快速检测技术。

利用纳米材料的特殊性能，可以快速、高效地检测样品中的三聚氰胺含量，且对样品的要求较低，适用范围广泛。

综上所述，针对三聚氰胺的快速检测方法有多种选择，每种方法都有其独特的优点和适用范围。

在实际应用中，可以根据需要选择合适的方法进行快速检测，以保障食品安全和人体健康。

希望本文介绍的方法能够对三聚氰胺快速检测技术的研究和应用提供一定的参考和帮助。

基于超分子自组装策略定性和定量检测奶粉中的三聚氰胺

大学化学Univ. Chem. 2022, 37 (5), 2111071 (1 of 10)收稿：2021-11-24；录用：2021-12-07；网络发表：2022-04-06 †共同第一作者，对本文工作同等贡献 *通讯作者，Email:******************.cn基金资助：西安交通大学本科实践教学改革研究专项项目(20SJZX34)；国家自然科学基金(21901196)；陕西省自然科学基金(2020JQ-016)•化学实验• doi: 10.3866/PKU.DXHX202111071 基于超分子自组装策略定性和定量检测奶粉中的三聚氰胺察爽爽†，牛金盆†，刘川枫†，严杰†，朱敏，张雯，胡明友*西安交通大学化学学院，西安 710049摘要：三聚氰胺是一种应用广泛的化工原料，但在摄入人体后会形成结石，对肾功能造成极大损伤。

由于其含氮量高，常被不法商家添加在奶粉中以提高奶粉含氮量，因此在食品工业中三聚氰胺的定性定量检测十分重要。

本研究利用超分子自组装的策略，以三聚氰胺与氰尿酸自组装作用为基础，利用亚甲基蓝作为反应指示剂，使用操作便捷的分光光度法对奶粉中的三聚氰胺进行定性和定量检测。

本方法反应条件温和、颜色变化明显、检出限低、灵敏度高，也可拆分成多个环节实验，应用于不同学时的实验教学，是一个适合本科教学环境的新颖实验。

关键词：三聚氰胺；超分子自组装；吸光度；指示剂中图分类号：G64；O6Qualitative and Quantitative Determination of Melamine in Milk Powder Based on Supramolecular Self-Assembly StrategyShuangshuang Cha †, Jinpen Niu †, Chuanfeng Liu †, Jie Yan †, Min Zhu, Wen Zhang, Mingyou Hu *School of Chemistry, Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710049, China.Abstract: Melamine is a widely used industrial raw material that forms stones after ingestion, causing great damage to the kidneys. Because of its high nitrogen content, melamine is often illegally added to milk powder to improve the nitrogen content. Therefore, the qualitative and quantitative detection of melamine in the food industry is critical. This study was based on the supramolecular self-assembly strategy; cyanuric acid was selected as the detection reagent to form the supramolecular structure with melamine, and methylene blue was used as an indicator through the interaction of melamine and cyanuric acid. The melamine in milk powder was quantitatively detected by an ultraviolet spectrophotometer. The reaction conditions of this experiment were mild, the color change was clear, the detection limit was low, and the sensitivity was high. The experiment can be divided into many experimental units and is a novel experiment, thus making it suitable for the undergraduate teaching.Key Words: Melamine; Supramolecular self-assembly; Absorbance; Indicator1 引言在2008年曝出的毒奶粉事件中，有数万婴幼儿因奶粉中掺杂三聚氰胺而受到肾损伤[1,2]。

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0.005 0.294 0.005 0.293 0.005 0.293 0.01 0.359 0.01 0.383 0.01 0.383 0.05 0.299 0.05 0.296 0.05 0.119 0.100 0.024 0.100 0.033 0.100 0.030
浓度梯度序号 5
6
7
茜素红浓度 /% 0.150 0.150 0.150 0.020 0.020 0.020 0.250 0.250 0.250
Rapid determine melamine in milk powder by spectrophotometric method
NAN Hai-juan1, WANG Wei-hua2, GAO Han1, JIA Lei-lei1 (1.College of Food Science,Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang 453003 ,China；
2.4 加标回收率的测定经测定 2.5、3.5、4.5 mg/kg 三聚氰胺奶粉上清液与
0.01% 茜素红的反应物的吸光度值，带入标准方程中计算三聚氰胺的浓度，结果见表 2。由表 2 可知，样品的加标回收率为 94%~98%，说明该方法的准确度较高，可以用来测定奶粉中的三聚氰胺含量。
吸光度
0.003 0.002 0.003 0.000 0.001 0.001 0.000 0.000 0.000
吸光度
吸光度
吸光度
波长（nm）图 1 0.05%茜素红水溶液吸收光谱
波长（nm）图 2 奶粉上清液吸收光谱
y=0.0095x+0.1085 R2=0.9918
三聚氰胺浓度（mg/kg ）图4
2. College of Food Science,South China Agricultural University ,Guangzhou 510642,China)
Abstract: In this paper,milk powder was used as raw material and the rapid detection method to melamine in milk powder had been studied.The results showed that there were color reaction between alizarin red and melamine, the best concentration of reagent was 0.01% The best volume ratio of milk powder supernatant and alizarin red was 5 ∶1.The maximum absorption wavelength of the reagent was 426 nm. The linear range of the method was 1~5 mg/kg and the recovery range was 94%～98%.
参考文献:
[1] 王会串.三聚氰胺的生产技术和应用前景[J].精细与专用化学品, 2007,15(11):33-36.
[2] GB/T22400-2008,原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法[S]. [3] 吴小华,郭航鸣, 缪吉根,等.硼砂存在下茜素红 S 作为络合滴定
锌指示剂的研究 [J].浙江师范大学学报，2006,9(1):70-73.
表 2 样品的加标回收试验结果
三聚氰胺浓度（mg/kg ）
2.5 3.5 4.5
测定值（mg/kg ）
2.4 3.3 4.4
回收率（% ）
96 94 98
3 结语
茜素红与三聚氰胺反应的最佳显色浓度是 0.01%。三聚氰胺奶粉上清液与茜素红的最佳反应体积比例为 5∶1；反应物的最大吸收波长为 426 nm；反应体系工作直线为 y=0.0095x+0.1085，在 1～5 mg/kg 三聚氰胺浓度范围内测定，加标回收率为 94%~98%。
吸光度
波长（nm）图 3 三聚氰胺与茜素红的络合物吸收光谱
2.2 茜素红最佳反应浓度选择加入不同浓度茜素红水溶液后，在 426 nm 处测得溶
液的吸光度值（表 1）。由表 1 可知，当茜素红浓度为 0.01%时，吸光度最大，随后浓度增大，吸光度反而降低。因此，将茜素红的最适浓度确定为 0.01%。 2.3 工作直线的制定
nm 下分别测定吸光度，利用工作直线方程算得三聚氰胺浓度，计算加标回收率。
2 结果及分析
2.1 显色反应络合物最佳吸收波长的确定在 400~800 nm 范围内分别扫描样品 1、样品 2、样品
3，所得吸收光谱见图 1、图 2 和图 3。由图 1 可知，茜素红的最大吸收波长在 500~600 nm 之
液与茜素红的最佳反应体积比例为 5∶1；最大吸收波长为 426 nm；该方法线性范围为 1～5 mg/kg，样品加标回收率在 94%～98%之间
关键词: 分光光度法；奶粉；三聚氰胺
中图分类号： R155.57
文献标识码：A
文章编号：1004-874X （2010 ）05-0174-02
Key words：spectrophotometry; milk powder; melamine
三聚氰胺（Melamine）化学式为 C3H6N6，俗称蛋白精， IUPAC 命名为 1,3,5-三嗪-2,4,6-三氨基，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，通常被用作化工原料[1]。由于食品和饲料工业蛋白质含量测试方法的缺陷，三聚氰胺常被不法商人用作食品添加剂，以提升食品检测中的蛋白质含量指标。 2008 年的“三鹿奶粉”事件引起了全国范围乃至世界范围对乳剂乳制品中添加三聚氰胺的重视，因此对奶粉中三聚氰胺进行快速检测研究具有非常重要的意义。
在 426 nm 波长下，测定三聚氰胺含量分别为 1、2、3、 4、5 mg/kg 的奶粉上清液与茜素红反应后的络合物的吸光度所得工作直线（图 4）。由图 4 可知，在测量范围 1~5 mg/kg 内，工作直线方程为 y=0.0095x+0.1085，R2=0.9918，可见，吸光度和浓度之间线性关系良好。
174Βιβλιοθήκη 广东农业科学 2010 年第 5 期
分光光度法快速检测奶粉中三聚氰胺
南海娟1，王伟华2，高晗1，贾蕾蕾1 （1.河南科技学院食品学院，河南新乡 453003；2.华南农业大学食品学院，广东广州 510642）
摘要:研究了奶粉中三聚氰胺的快速检测方法。结果表明：茜素红与三聚氰胺有颜色反应，最佳显色浓度为 0.01%。奶粉上清
目前，国内外检验三聚氰胺的方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）、气相色谱-质谱法（GC-MS）、气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/ MS）、免疫反应等方法，这些方法具有检测极限低、测量结果准确等优点，但缺点也相当突出，如仪器昂贵、不易普及、试剂不易保存等，特别是样品的前处理十分复杂，需要专业人员操作，耗时较长，检测费用高昂。本研究根据茜素红与三聚氰胺的显色反应，利用分光光度计测定吸光度值从而快速检测出奶粉中三聚氰胺含量，此方法尚未见有报道。由于原料易得、仪器造价低，所以该法容易在实验室及基层普及，具有一定的实际应用价值。同时对其他食品中三聚氰胺的检测具有重要的参考价值。
间。由图 2 可知，三聚氰胺在扫描波长范围内基本无吸收。由图 3 可知，茜素红和三聚氰胺反应后，吸光度急剧降低，且最大吸收峰发生了紫移，证明茜素红和三聚氰胺发生了络合反应，由图 3 可知，络合物最大吸收波长为 426 nm。
175
表 1 茜素红浓度对吸光度的影响
浓度梯度序号 1
2
3
4
茜素红浓度(%) 吸光度
1 材料与方法
1.1 试验材料供试奶粉为飞鹤学生高钙奶粉（黑龙江飞鹤乳业有限
公司产品）。供试试剂为乙腈、三聚氰胺、茜素红等，均为分析纯。
收稿日期：2009-12-01 作者简介：南海娟（1974-），女，硕士，实验师， E-mail：nanhaijuan 1@
供试仪器为 TU-1810 型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司产品）、MD100-2 型分析天平（上海天平仪器厂产品）。 1.2 试验方法 1.2.1 显色剂的配制 0.1%茜素红溶液：称取 0.1 g 茜素红溶于水，定容至 100 mL，混匀备用。 1.2.2 样品前处理取 2.0 g 奶粉，加 20 mL 水溶解后，加 50 mL 乙腈沉淀蛋白质，振荡提取 6 min，静置 10 min，过滤后取上清液作为提取液待用 [2]。 1.2.3 显色反应络合物最佳吸收波长的确定试验选取 3 个样品：样品 1 为 0.05%茜素红水溶液，对照为水。样品 2 为三聚氰胺含量为 2.0 mg/kg 的奶粉上清液，对照为无三聚氰胺的奶粉上清液。样品 3 为三聚氰胺含量为 2.0 mg/kg 的奶粉上清液 5 mL，加 1 mL 茜素红后，反应 10 min；对照为无三聚氰胺奶粉上清液 5 mL，加 1 mL 茜素红，反应 10 min。分别在 400~800 nm 范围对样品 1、样品 2 和样品 3 进行吸收光谱扫描，寻找显色反应络合物的最佳吸收波长。 1.2.4 显色剂最佳反应浓度的选择采用吴小华等[3]的方法：配制 0.25%茜素红水溶液，经稀释得 0.005%、0.010%、 0.050%、0.100%、0.150%、0.200%、0.250%7 个浓度梯度。取三聚氰胺含量为 2 mg/kg 的奶粉上清液 5 mL，分别添加不同浓度茜素红溶液 1 mL，摇匀后在最大吸收波长处测吸光度值，每组 3 个平行。 1.2.5 工作直线的制定取三聚氰胺含量分别为 1、2、3、4、 5 mg/kg 的奶粉上清液各 5 mL，加 0.01%茜素红 1 mL 反应 10 min，在最大吸收波长下测定吸光度值，得工作直线。 1.2.6 加标回收率的测定配制三聚氰胺浓度分别是 2.5、3.5、4.5 mg/kg 的奶粉上清液。取每种浓度上清液 5 mL，分别加入 0.01%茜素红 1 mL，反应 10 min 后，在 426