MS培养基配方及培养基简介

ms培养基配方表ms培养基是一种常用的细胞培养基，用于无菌条件下培养哺乳动物细胞，特别是鼠胚胎成纤维细胞（Mouse Embryo Fibroblast,MEF）。

它是由多种有机和无机化合物组成的复杂混合物，可以提供细胞生长所需的必需氨基酸、糖类、维生素和微量元素等营养物质。

同时，它还包含有机缓冲剂和盐类，可以调节培养品的 pH 值和离子浓度，保持培养条件的稳定性。

下面介绍 ms培养基的配方表：MS培养基水相1. 将1L 去离子水（DI水）加入1mol/L NaCl 至5mL2. 加入HEPES缓冲液（1mol/L）27.7g，调节至pH7.2-7.43. 加入葡萄糖25.0g，混合直至葡萄糖完全溶解4. 加入 L-谷氨酸1.42g，细胞培养I 类和 II 类所需濃度5. 加入 L-苏氨酸0.07g，细胞培养所需濃度6. 加入 L-半胱氨酸0.16g7. 加入 L-赖氨酸0.07g8. 加入 L-缬氨酸0.07g9. 加入L-异亮氨酸0.07g10. 加入L-亮氨酸0.14g11. 加入L-丙氨酸0.14g12. 加入L-天冬氨酸0.15g13. 加入L-芸香氨基酸0.42g14. 加入 L-色氨酸0.03g15. 加入 L-酪氨酸0.03g16. 加入 L-精氨酸0.17g17. 加入 L-组氨酸0.03g18. 加入 L-甘氨酸0.10gMS培养基固相1. 加入 NaHCO3（7.5%）4mL，细胞培养所需濃度2. 加入 4-(2-羟乙基)吡啶盐酸盐（HEP）2g，细胞培养所需濃度；过度使用可导致凝块形成3. 加入 MgSO4（7H2O）0.94g，细胞培养所需濃度4. 加入 KH2PO4 0.17g，细胞培养所需濃度5. 加入 NaH2PO4（H2O，2. H2O）0.19g，细胞培养所需濃度6. 加入 Na2HPO4（7H2O）3.05g，细胞培养所需濃度7. 加入次黄嘌呤（NEAA）1mL，必需的非必需氨基酸，促进细胞生长8. 加入乳酸钠2.72g，利用减少氧淤积，促进细胞生长9.加入硫酸铜子（10-5M)）1mL，为MEF的细胞类型提供最佳的增生所需注：以上配方根据MS原始文献略作调整，如果在实验中出现差异，请根据实际情况微调。

MS 培养基配方1、配置MS母液母液配置：加热都是用温水浴加热，全部都要避光保存，用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可表2.1大量元素母液药品20x g/L 500ml（20 x）KNO338g 19gNH4NO333 g 16.5gMgSO4•7H2O7.4 g 3.7gCaCl2 6.644g 3.322gKH2PO4 3.4g 1.7g溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解CaCL2.2H2O 4.4g/L表2.2微量元素母液药品100x g/L 500ml（100x g/L）KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OGuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g0.6222.3 g0.86 g0.025 g0.0025 g0.0025 g0.0415 g0.31 g1.115 g0.43 g0.0125 g0.00125 g0.00125 g溶于100ml蒸馏水,定容至500ml表2.3有机母液药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g烟酸0.05g0.025gVB60.05g0.025gVB10.1g0.05g甘氨酸0.2g0.1g表2.4铁盐母液药品100x g/L500mlFeSO4•7H2O 2.78g 1.39gNa2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，加水定容至500ml，置于小口瓶中，贴上标签2、固体MS培养基材料•找到4种母液：大量元素，微量元素，有机微量元素，铁盐母液•蔗糖，琼脂锥形瓶MS培养基配方：母液都稀释至1xMS培养基配方（1L）母液体积或重量(1L) 200ml大量元素20x50mL 10ml铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml有机100x10mL 2ml 蔗糖15g（15g/L）3g琼脂8g（8g/L） 1.6gPH先调至 5.85-5.88，最终灭菌后pH接近5.81）。

MS培养基的配制1、配制几种母液（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。

分别称取名称重量名称重量NH4NO3165g KH2PO417gKNO3190g CaCl2·2H2O44gMgSO4·7H2O37g各自配成1L的母液。

各自倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。

依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称重量名称重量KI0.083g Na2MoO4·2H20.025gOH3BO3 0.62g CuSO4·5H2O0.0025gMnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O0.0025gZnSO4·7H2O0.86g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

注：CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。

分别称取CuSO4·5H2O 0.05g，CoCl2·6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。

（3）配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。

依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称重量名称重量肌醇10g盐酸硫胺素（VB1）0.01g烟酸0.05g甘氨酸0.2g盐酸吡哆醇（VB6） 0.05g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

（4）配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液。

依次称取EDTA二钠 3.73g，FeSO4·7H2O 2.78g（注：溶好一个后，再加下一个）配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。

（5）激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。

MS培养基培养法
（1）MS培养基配制：1L培养基中，主成分4.74g，脯氨酸0.5g，谷氨酰胺0.5g，酸水解酪蛋白0.3g，蔗糖30g（均为粉状药品，可自带），按比例称取药品（称量纸和药匙可自带，电子天平），加双蒸水溶解混匀，加水定容，调pH值至5.8，经验值，1L培养基调pH=5.8需加400ul 2M NaOH（需pH计或pH试纸，试纸可自带），然后加琼脂粉8g ，121度，灭菌20分钟（高压灭菌锅）；
（2）培养基分装：在超净工作台中，将培养基分装到组培瓶中（皮筋、封瓶膜和记号笔可自带，酒精灯，打火机）；
（3）种子消毒：70%酒精消毒1min，灭菌双蒸水冲洗3-4次，5%NaClO消毒5min，灭菌双蒸水冲洗6-7次；
（4）将消过毒的种子用镊子夹入培养基中，作好标记放入恒温光照培养箱中培养，昼35度8h，夜30度16h；
（5）5-7天以后，将株高约5-7公分的幼苗转入土中培养。

（育苗盘，土）。

MS培养基是什么？生长发育所需的营养而设计的。

它既有植物所需的氮、磷、钾及锌、铜、钼、铁等元素，同时也包含了对生长发育起促进和调节作用的有机物质及植物激素等。

加入琼脂使之凝固的称固体培养基，没有琼脂的灭菌后仍保持液态的叫液体培养基。

成功的组织培养，在一定程度上依赖于对培养基的选择。

不同的培养基由于所含无机盐的量不同，对试验材料的反应也不会完全一样。

常用的植物试管苗快繁培养基是不含激素的MS基本培养基，附加2％--3％的蔗糖，用固体培养基培养时再加入0．6％--0．7％的琼脂，pH5．6--5．8.MS培养基：Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。

前花卉组织培养中应用最多的为MS培养基。

其组成是在配制1升（1000毫升）培养基时，加硝酸铵1.65克、硝酸钾1.9克、氯化钙0.44克、硫酸镁0.37克、磷酸二氢钾0.17克、碘化钾0.83毫克、硼酸5.2毫克、硫酸镁22.3毫克、硫酸锌3.6毫克、钼酸钠0.25毫克、硫酸铜0.025毫克、氯化钴0.025毫克、硫酸铁27.8毫克、蔗糖30克和琼脂7克。

其他生长调节物质要根据花卉的种类和培养目的而确定。

MS培养基中大量元素浓度过高，为此常采用1/2、?大量元素浓度作培养用，这样生长效果列好。

配制培养基前要准备好三角瓶、试管、烧杯、量筒、吸和等玻璃器皿，预先称好药品。

配制时先将琼脂溶化，再加入在水中深解的各种营养元素和蔗糖，然后用氢氧化钠或盐酸调整培养基的pH，一般掌握在5.7左右。

以后可分注到养瓶中，盖好瓶盖。

培养基配好要经高压灭菌。

冷却后放到培养室预培养3天，如没有杂菌污染，才可进行花卉材料的接种。

植物组织培养MS培养基配方MS培养基主要包括两部分：无机盐和有机物。

无机盐部分的配方如下：1.氮源：氮源通常由硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾（KNO3）和硫酸铵（（NH4）2SO4）组成。

氮源的浓度通常为20-30mM。

2.磷酸盐：磷酸盐通常由二氢二钠磷酸盐（NaH2PO4）组成，浓度为10mM。

3.钠盐：MS培养基中含有钠盐，通常由硝酸钠（NaNO3）和硝酸钾（KNO3）组成。

钙盐的浓度为2.0mM，钾盐的浓度为1.0mM。

4.钠盐：MS培养基中含有钠盐，通常由硝酸钠（NaNO3）和硝酸钾（KNO3）组成。

钙盐的浓度为2.0mM，钾盐的浓度为1.0mM。

5.硫酸镁：硫酸镁（MgSO4）的浓度为1.0mM。

6.磷酸铵铁：磷酸铵铁（FeSO4·(NH4)2SO4）的浓度为27.8μM。

7.各种微量元素：包括锌、铜、锰、硼、钼、钴和镍等微量元素。

这些微量元素的浓度通常在微摩尔（μM）级别。

有机物部分的配方如下：1.蔗糖：蔗糖是植物培养基中最常用的碳源，浓度通常为30g/L。

2. 维生素：通常使用的维生素有二硝基地巴泼甲素（2,4-D）和吲哚-3-乙酸（IAA）。

它们的浓度通常在0.1-2.0 mg/L之间。

3. 激素：常用的激素包括植物生长素（BA）和乙烯利（2,4-D）。

它们的浓度通常在1.0-10.0 mg/L之间。

4.混合物：还可以加入一些有机物混合物，如胆固醇、烟酸和核酸酸等。

值得注意的是，这只是MS培养基的一个基本配方，根据具体的研究目的和植物种类的不同，还可以对该配方进行一些调整和优化。

总结起来，MS培养基是一种常用的植物组织培养基，主要用于植物生长和增殖。

其配方包括无机盐和有机物两部分，无机盐包括氮源、磷酸盐、钙盐、镁盐、磷酸铵铁和微量元素等；有机物包括蔗糖、维生素和激素等。

通过适当调整这些配方的浓度和比例，可以实现不同植物的生长和增殖需求。

MS培养基成分(1962)（单位：mg/L)无机盐含量有机物含量 PH值NH4NO4 1650 肌醇 100 5.8 KNO3 1900 烟酸 0.5CaCl2·2H2O 440 盐酸吡哆醇 0.5MgSO4·7H2O 370 甘氨酸 2KH2PO4 170 盐酸硫胺素 0.1KI 0.83 蔗糖 30g/LH3BO3 6.2 琼脂 4~8g/LMnSO4·4H2O 22.3ZnSO4·7H2O 8.6Na2MoO4·2H2O 0.25CuSO4·5H2O 0.025CoCl2·6H2O 0.025FeSO4·7H2O 27.8Na2·EDTA·2H2O 37.3一个完善的培养基配方中，应该包括一下几个部分，分别为：无机营养成分、有机营养成分、植物激素，琼脂，其他成分。

大量元素：氮，磷，钾，硫，钙，镁等。

（1）无机营养成分：微量元素：硼，锰，锌，钼，铜，铁，钴等。

（国际植物生理学会建议，植物所需要的元素浓度大于0.5mmol/L的为大量元素，而小于0.5mmol/L的则为微量元素）（a）维生素类：如：硫胺素（维生素B1）,吡哆醇（维生素B6),烟酸（维生素B3）抗坏血酸（维生素C)(b) 氨基酸类：如甘氨酸，丙氨酸，谷氨酸等（2)有机营养成分：(c) 复杂的天然混合物：如：椰乳（CM），水解络蛋白（CH）,麦芽浸出物（ME),番茄汁等（d)作为碳源的糖：常用的碳源为蔗糖，葡萄糖和果糖也是较好的碳源。

（e) 肌醇：肌醇在糖类的相互转化中起作用，是细胞壁的构建材料。

肌醇参与碳水化合物，磷脂代谢及离子平衡等生理活动，具有帮助活性物质发挥作用的效果，能促进愈伤组织生长，对胚状体和芽的形成也有良好的促进作用。

肌醇一般用量为：50~100mg/L，在培养基中加入少量肌醇就能促进维生素B1效应的发挥。

但肌醇常可由磷酸葡萄糖转变二次，并进一步转化为果胶物质，因此，在快速繁殖中有时也可省去不用。

ms培养基配方表MS（Murashige and Skoog）培养基是细胞培养中常用的基础培养基，其命名来源自培养基组合者Murashige和Skoog。

MS培养基呈现出广泛的适用性，可用于各种组织培养和植物组织培养的研究。

其配方主要采用无机盐和有机物的混合物，以下是MS培养基的详细配方表。

1. MS微量元素添加剂：ZnSO4.7H2O = 8.6 mg/LH3BO3 = 3.1 mg/LMnSO4.4H2O = 0.25 mg/LCuSO4.5H2O = 0.025 mg/LKI = 0.83 mg/LNa2MoO4.2H2O = 0.025 mg/LCoCl2.6H2O = 0.025 mg/LFeSO4.7H2O = 27.8 mg/L2. MS盐基：NH4NO3 = 1650 mg/LKNO3 = 1900 mg/LCaCl2.2H2O = 440 mg/LKH2PO4 = 170 mg/LMgSO4.7H2O = 370 mg/L3. MS综合维生素添加剂：Myo-inositol = 100 mg/LNicotinic acid = 50 mg/LPyridoxine.HCl = 10 mg/LThiamine.HCl = 10 mg/LGlycine = 2 mg/LL-Asparagine.H2O = 150 mg/L4. MS植物生长调节剂添加剂：2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) = 0.5 ~ 5 mg/Lα-Naphthaleneacetic acid (NAA) = 0.5 ~ 5 mg/L6-Benzylaminopurine (BA) = 0.5 ~ 5 mg/LKinetin (Kin) = 0.5 ~ 5 mg/LGibberellic acid (GA3) = 0.1 ~ 10 mg/LAbscisic acid (ABA) = 0.1 ~ 10 mg/L以上是MS培养基的配方表，各种配方的配比可以根据实验需要适当调整。

MS培养基配方MS培养基的配制包括以下步骤。

培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的2 0倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。

现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。

成分分子量使用浓度(mg/L)大量元素硝酸钾KNO3 101.11 1900硝酸铵NH4NO3 80.04 1650磷酸二氢钾KH2PO4 136.09 170硫酸镁MgSO4.7H2O 246.47 370氯化钙CaCl2.2H2O 147.02 440微量元素碘化钾KI 166.01 0.83硼酸H3BO3 61.83 6.2硫酸锰MnSO4.4H2O 223.01 22.3硫酸锌ZnSO4.7 H2O 287.54 8.6钼酸钠Na2MoO4.2 H2O 241.95 0.25硫酸铜CuSO4.5 H2O 249.68 0.025氯化钴CoCl2.62 237.93 0.025铁盐乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA 372.25 37.3硫酸亚铁FeSO24.7H2O 278.03 27.8有机成分肌醇100甘氨酸 2盐酸硫胺素VB1 0.1盐酸吡哆醇VB6 0.5烟酸VB5或VPP 0.5蔗糖sucrose 342.31 30g/L琼脂agar 7 g/L [1]以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5?5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。