实验1-1 MS培养基母液和常用试剂的配制

MS培养基母液的配制与保存一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制与保存培养基母液的基本技能。

2、掌握培养基各种母液的保存方法。

二、仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱等。

2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签等。

3、试剂：95%酒精，0.1-1 NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。

三、方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。

优点：（1）保证各物质成分的准确性。

（2）便于配置时快速移取。

（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（10X）称10升量溶解在1升蒸馏水中。

配1升培养基取母液100ml。

2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基取母液10ml。

注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10 =2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，（即含0．25 mg的量），加入到母液中。

3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基取母液10ml。

注意配制时，应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。

混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。

4、MS有机物母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基取母液10ml。

5、生长调节剂单独配制，浓度为1-5 mg/ml（书中为0．5 -1mg/ml），一般配成4 mg/ml 。

配制培养基母液时注意事项：①一些离子易发生沉淀，可先用少量蒸馏水溶解，在按配方顺序依次混合；②配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水；③药品应用化学纯或分析纯；④溶解生长素时，可用少量0．5 –1N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0．5 –1N的HCl加热溶解。

MS 培养基配方1、配置MS母液母液配置：加热都是用温水浴加热，全部都要避光保存，用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可表2.1大量元素母液药品20x g/L 500ml（20 x）KNO338g 19gNH4NO333 g 16.5gMgSO4•7H2O7.4 g 3.7gCaCl2 6.644g 3.322gKH2PO4 3.4g 1.7g溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解CaCL2.2H2O 4.4g/L表2.2微量元素母液药品100x g/L 500ml（100x g/L）KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OGuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g0.6222.3 g0.86 g0.025 g0.0025 g0.0025 g0.0415 g0.31 g1.115 g0.43 g0.0125 g0.00125 g0.00125 g溶于100ml蒸馏水,定容至500ml表2.3有机母液药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g烟酸0.05g0.025gVB60.05g0.025gVB10.1g0.05g甘氨酸0.2g0.1g表2.4铁盐母液药品100x g/L500mlFeSO4•7H2O 2.78g 1.39gNa2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，加水定容至500ml，置于小口瓶中，贴上标签2、固体MS培养基材料•找到4种母液：大量元素，微量元素，有机微量元素，铁盐母液•蔗糖，琼脂锥形瓶MS培养基配方：母液都稀释至1xMS培养基配方（1L）母液体积或重量(1L) 200ml大量元素20x50mL 10ml铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml有机100x10mL 2ml 蔗糖15g（15g/L）3g琼脂8g（8g/L） 1.6gPH先调至 5.85-5.88，最终灭菌后pH接近5.81）。

一、MS培养基母液的配制注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

A.制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

B.称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

二、培养基配制和灭菌一．养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————母液浓缩倍数（二）各种母液按顺序编号排列A.大量元素；B.CaCl2.2H2O；C.微量元素；D.铁盐；E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。

组织培养实验有关试剂的配制：75%的酒精：75ml的95%的酒精加水定容至95ml。

0.2％的升汞溶液：称取HgCl2 20克，加蒸馏水至4000ml。

1N 盐酸：取8.25ml的浓盐酸，加蒸馏水定容至100ml。

1N NaOH：称8g NaOH，用蒸馏水定容至200ml。

0.1mg/ml的2,4-D溶液：取25mg的2,4-D，加入少量95%的酒精和1N的NaOH 溶解，再加蒸馏水定容至250ml。

0.1mg/ml 的6-BA溶液：取25mg的6-BA，用少量1N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250ml。

遗传转化与GUS基因检测的试剂配制LB培养基的配制：将下列组分溶解在0.9L水中：1L10ml 的10mmol/l的AS（乙酰丁香酮）母液（100x）配制：称19.6mg的AS，先溶于少量甲醇中，然后慢慢加蒸馏水定容至10ml，过滤除菌，分装成200ul/管（每组1管），使用时将200ul的AS母液加入20ml的MS液体培养基中。

50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）：A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水，定溶至100ml。

B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水，定溶100ml。

取A 液39ml与B 液61ml混合，定容至400ml，调PH至7.0。

50mmol/L铁氰化钾母液：称3.295g，用蒸馏水定容至200ml50mmol/l亚铁氰化钾母液：称4.224g ，用蒸馏水定容至200ml。

0.5mol/l EDTA母液（pH8.0）：药品分子量100ml 500mlEDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g双蒸H2O 80ml 400ml用NaOH调PH至8.0 6g 10gDdH2O定容至100ml 500mlGUS检测液的配制：100mgGluc，先溶于1ml的DMF。

取80ml 50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0），加入1ml 50mmol/L铁氰化钾、1ml 50mmol/L亚铁氰化钾和2ml 0.5mol/l EDTA（PH 8.0），再加入已溶解的Gluc，再加20ml的甲醇，混匀。

一、MS培养基母液的配制注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称〔或编号〕，浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐〔FeSO4·7H2O和Na22O〕作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na22O分别溶于450mlml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的〔分析纯〕。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。

不同药品在配制时假设不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸〔NAA〕，吲哚乙酸〔IAA〕,赤霉素〔GA3〕，2，4-D等生长素和玉米素〔ZT〕可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

冲动素〔KT〕和6-苄基嘌呤〔BA〕可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。

称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升那么含有生长调节物质，配制后一般要求在低温〔0~4℃〕保存，配制培养基时如每升〔1000ml〕需添加的生长调节剂物质为时，那么取1ml母液即可。

组织培养实验有关试剂的配制：75%的酒精：75ml的95%的酒精加水定容至95ml。

0.2％的升汞溶液：称取HgCl2 20克，加蒸馏水至4000ml。

1N 盐酸：取8.25ml的浓盐酸，加蒸馏水定容至100ml。

1N NaOH：称8g NaOH，用蒸馏水定容至200ml。

0.1mg/ml的2,4-D溶液：取25mg的2,4-D，加入少量95%的酒精和1N的NaOH 溶解，再加蒸馏水定容至250ml。

0.1mg/ml 的6-BA溶液：取25mg的6-BA，用少量1N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250ml。

遗传转化与GUS基因检测的试剂配制LB培养基的配制：将下列组分溶解在0.9L水中：1L10ml 的10mmol/l的AS（乙酰丁香酮）母液（100x）配制：称19.6mg的AS，先溶于少量甲醇中，然后慢慢加蒸馏水定容至10ml，过滤除菌，分装成200ul/管（每组1管），使用时将200ul的AS母液加入20ml的MS液体培养基中。

50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）：A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水，定溶至100ml。

B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水，定溶100ml。

取A 液39ml与B 液61ml混合，定容至400ml，调PH至7.0。

50mmol/L铁氰化钾母液：称3.295g，用蒸馏水定容至200ml50mmol/l亚铁氰化钾母液：称4.224g ，用蒸馏水定容至200ml。

0.5mol/l EDTA母液（pH8.0）：药品分子量100ml 500mlEDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g双蒸H2O 80ml 400ml用NaOH调PH至8.0 6g 10gDdH2O定容至100ml 500mlGUS检测液的配制：100mgGluc，先溶于1ml的DMF。

取80ml 50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0），加入1ml 50mmol/L铁氰化钾、1ml 50mmol/L亚铁氰化钾和2ml 0.5mol/l EDTA（PH 8.0），再加入已溶解的Gluc，再加20ml的甲醇，混匀。

一、MS培养基母液注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。

不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

实验一MS培养基母液的配制与保存一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能；2、掌握培养基各种母液的保存方法。

二、仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱；2、用具：烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签；3、试剂：95%酒精，0. 1 -1N NaOH，0.1-1N HCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。

三、方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点：（1）保证各物质成分的准确性；（2）便于配置时快速移取；（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（10×）称10升量溶解在1升蒸馏水中。

配1升培养基取母液100ml。

化学药品1升量10升量（10×）50升量（50×）①NH4NO31650 mg 16.5g②KNO31900 mg 19.0g③CaCl2·2H2O （CaCl2）440 mg （） 4.4g④MgSO4·7H2O（MgSO4）370 mg （） 3.7g⑤KH2PO4170 mg 1.7g2、MS微量元素母液（100×）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基取母液10ml。

化学药品1升量10升量100升量（100×）①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22.3mg（21.4 mg）223mg（214 mg）②ZnSO4·7H2O8.6 mg 86mg③H3BO3 6.2 mg 62 mg④KI 0.83 mg 8.3 mg⑤Na2MoO4·2H2O0.25 mg 2.5mg⑥CuSO4·5H2O0.025 mg 0.25mg⑦CoCl2·6H2O0.025mg 0.25mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0.25 mg×10=2.5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0.25 mg的量。

ms基本培养基母液的配制方法一、准备所需材料1. 酸性植物激素溶液：包括吲哚乙酸（IAA）、纯度较高的激素（如6-苄基腺嘌呤，BA）等。

2. 碱性植物激素溶液：如生长素（GA3）等。

3. 无机盐溶液：包括硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钾、硼酸、锌硫酸、硼酸等。

4. 维生素溶液：如次黄嘌呤核苷酸（NAA）等。

5. 蔗糖溶液：用于提供能量和碳源。

6. 琼脂：用于凝固培养基。

二、配制步骤1. 称取适量的无机盐溶液成分，按照MS基本培养基的配方比例将各种盐溶解在蒸馏水中，常用的浓度为1/2或1/4的MS培养基。

2. 将酸性植物激素溶液和碱性植物激素溶液分别加入到溶液中，注意控制激素的浓度。

3. 加入维生素溶液，按照配方比例加入到溶液中。

4. 加入适量的蔗糖溶液，用来提供能量和碳源。

5. 最后将琼脂加入到溶液中，搅拌均匀。

6. 调节溶液的pH值，通常为5.8左右。

7. 用蒸馏水补充溶液至总体积，并充分搅拌均匀。

8. 将配制好的培养基溶液进行高温高压灭菌处理，一般条件下为121摄氏度，压力为0.1MPa，持续20分钟。

三、注意事项1. 在配制过程中，要保持实验室卫生，使用无菌操作。

2. 使用高质量的试剂和蒸馏水，避免杂质的干扰。

3. 激素的浓度要根据实验需要进行调整。

4. 配制过程中要注意酸碱度的调节，尽量控制在5.8左右。

5. 琼脂的加入要充分搅拌均匀，避免结块。

6. 灭菌处理要按照规定的条件进行，确保培养基的无菌性。

通过以上步骤，我们可以成功地配制出MS基本培养基的母液。

这种培养基在植物组织培养、植物细胞和胚胎发生研究中起着重要的作用。

根据实验的需要，可以在母液的基础上进一步调整培养基的成分和浓度，以满足不同植物材料的培养要求。

希望以上内容对您有所帮助。

实验一 MS培养基母液和培养基的配制一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能；2、通过MS培养基的配制、分装和灭菌，掌握配制培养基的基本技能；3、掌握培养基各种母液的保存方法。

二、仪器与用具1、仪器：电子分析天平、磁力搅拌器、冰箱、高压灭菌锅2、用具：三角瓶、烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签、移液管、记号笔、注射器、封口塑料、电磁炉、酸度计3、试剂：95%酒精，0.5mol ∕L NaOH，0.5mol∕ L HCL，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水，琼脂，蔗糖三、方法步骤（一）培养基母液的配制（MS培养基）配制培养基前先要配制母液。

母液分大量元素、微量元素、铁盐及有机物质四类。

MS培养基母液配制（单位：mg）分别称取10倍用量的各种大量无机盐，依次溶解于大约800mL热的（60～80℃）蒸馏水中。

（一种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容至1000mL后装入试剂瓶中，存放冰箱内备用。

）2. 微量元素母液（100倍液）分别称取100倍用量的微量无机盐，依次溶解于800mL重蒸水中，加水定容到1000mL。

3. 铁盐母液（100倍液）称取100倍用量的Na2-EDTA（乙二胺四乙酸钠）和FeSO4·7H2O，溶于800mL重蒸水中，最后定溶到1000mL。

4. 钙盐母液(10倍): 称取10倍用量的CaCl2·2H2O溶于80mL重蒸水中，最后定溶到100mL。

5. 有机物质母液（50倍液）分别称取50倍用量的各种有机物质，依次溶解于400mL重蒸水中，定容至500mL装入棕色试剂瓶中，存放在冰箱中备用。

6. 生长素如2，4-D、IAA、NAA等。

准确称取20mg，先用2mL95％乙醇溶解，然后加水，定容至20mL，浓度为1mg/mL,放在冰箱内备用。

6.细胞分裂素如激动素（Kt）、6-BA.准确称取20mg，先用2mL的1mol/L的NaOH或HCl溶解，然后加水，定容至20mL，浓度为1mg/mL，再放置冰箱内备用。

MS母液的配制与保存一、目的要求：通过MS培养基母液的配制，掌握配制与保存培养基母液的基本技能。

二、设备用品：1、设备：百分之一天平，万分之一天平,电磁炉，家用冰箱2、用品：称量纸（大小都要），玻璃烧杯250ml,容量瓶500ml和250ml，广口瓶500ml250ml，标签纸，洗瓶，药匙，玻璃棒，搪瓷杯，纯水，95%酒精，纸巾，笔。

三、方法步骤计算方式：称取量＝规定量×浓缩倍数×母液体积1、MS1大量元素母液配制(0.5L）化合物原配方量扩大倍数称取量母液体积NH4NO3 1650mg/L 20倍16.5g0。

5LKNO3 1900mg/L 20倍19g0。

5LMgSO4。

7H2O 370mg/L 20倍3。

7g0。

5LKH2PO4 170mg/L 20倍 1.7g0.5LCaCl2。

2H2O 440mg/L 20倍 4.4g0，5L配制方法:用百分之一天平称取NH4NO316。

5g，KNO319g,MgSO4.7H2O3。

7g，KH2PO41。

7g；将纯水装入搪瓷杯中放到电磁炉上加热，把药品分别放入玻璃烧杯中加热水玻璃棒搅拌至药品完全溶解,用玻璃棒引流的方式将溶解完的药品倒入容量瓶中，用洗瓶清洗3次玻璃烧杯，以免药品残留。

用此方式分别将药品溶解然后引流至容量瓶中，最后将容量瓶定溶至500ml刻度线，待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存。

注意：CaCl2.2H2O是放热性药品所以单独配制，称取药品4。

4g放入玻璃烧杯中用冷水将药品溶解，用同样的方法将CaCl2。

2H2O定溶，待冷却后倒入广口瓶中放置冰箱内保存.在MS母液瓶上贴标签，注明母液名称，浓缩倍数，配制日期，配制人以及吸取量。

2、MS2微量元素母液的配制(0.25L）化合物原配方量扩大倍数称取量母液体积H3BO36。

2mg/L200倍0.31g0.25LMnSO4. 4H2O22.3mg/L200倍1。

115g0。

25LZnSO4. 7H2O 8。

一、MS培养基母液的配制注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。

不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。

MS培养基母液的配制与保存方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。

优点：（1）保证各物质成分的准确性。

（2）便于配置时快速移取。

（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（10X）称如下药品，溶解在1升蒸馏水中。

化学药品①NH4NO3硝酸铵16．5g②KNO3硝酸钾19．0g③CaCl2·2H2O两水合氯化钙4．4g④MgSO4·7H2O七水合硫酸镁3．7g⑤KH2PO4磷酸二氢钾1．7g 2、MS微量元素母液（100X）称如下药品，溶解在100ml蒸馏水中。

化学药品①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）四水合硫酸锰（一水合硫酸锰）223mg（214mg）②ZnSO4·7H2O七水合硫酸锌86mg③CoCl2·6H2O六水合氯化钴0．25mg④CuSO4·5H2O五水合硫酸铜0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O两水合钼酸钠2．5mg⑥KI 碘化钾8．3 mg⑦H3BO3硼酸62 mg3、MS铁盐母液（100X）称如下药品，溶解在100ml蒸馏水中。

化学药品Na2·EDTA乙二胺四乙酸二钠373 mgFeSO4·7H2O七水合硫酸亚铁278 mg注意配制时，应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。

混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。

4、MS有机物母液（100X）称如下药品，溶解在100ml蒸馏水中。

化学药品①烟酸 5 mg②盐酸吡哆素（VB6） 5 mg③盐酸硫胺素（VB1） 1 mg④肌醇1000 g (1 g)⑤甘氨酸20 mg5、生长调节剂配成1 mg/ml 。

各100 ml。

6-苄基嘌呤（6-BA）用0.5 N的HCl加热溶解。