黄嘌呤氧化酶(xanthione oxidase, XOD)试剂盒说明书
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CheKine™系列生化检测试剂盒解决方案生物科研,生化检测试剂盒重中之重,那么现在就来聊一聊,以及介绍一些大家耳熟能详,但又不好选择的生化检测试剂盒,这个系列比较有意思,因为它并不常见,但却非常有用。
对,它就是颜值与口碑并存的CheKine™系列生化检测试剂盒。
CheKine™系列生化检测试剂盒采用更高效、创新的检测技术、优化的实验方案,试剂盒中包括了检测所需的全套试剂和标准品,并附有详细的实验操作说明,可帮助用户快速获得准确且可重复的结果,省时高效!一、抗氧化系列生化检测试剂盒包括黄嘌呤氧化酶(XO)活性分析、超氧阴离子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)检测、总抗氧化能力(TAC)检测、植物原花青素(OPC)含量检测、植物类黄酮含量检测、植物总酚(TP)含量检测试剂盒。
以CheKine™黄嘌呤氧化酶(XO)活性分析试剂盒为例,提供了一种简单易用的比色分析法,用于测定各种样品中的XO活性,特点是测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的黄嘌呤氧化酶活性,以及广泛的检测范围:15.6 -500 mU/mL。
二、氧化系列生化检测试剂盒包括过氧化氢酶(CAT) 活性分析、过氧化氢(H2O2)检测、脂质过氧化(丙二醛) 分析、蛋白质羰基含量检测、超氧阴离子含量检测等试剂盒。
以CheKine™蛋白质羰基含量检测试剂盒(比色法)为例,提供了一种简单易用的比色法,用于分析不同生物样品(细胞/组织裂解液,生物液体)中蛋白质羰基含量。
羰基与2,4-二硝基苯肼反应生成红色2,4-二硝基苯腙,在370 nm处有特征吸收峰。
特点是:1.测定组织样本、细胞、细菌、血清等中的蛋白质羰基含量。
2.样本处理、实验步骤以及结果计算更加详尽准确精炼。
3.保质期长。
三、抗逆系列生化检测试剂盒包括超氧化物歧化酶(SOD) 活力检测、羟自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性检测、过氧化物酶(POD)活性检测等试剂盒。
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®黄嘌呤氧化酶(XOD)比色法测试盒Xanthine Oxidase (XOD) Activity Assay Kit产品货号:E-BC-K805-M产品规格:48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器:酶标仪(540-560 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测血清、血浆及动物组织样本中的黄嘌呤氧化酶的活力。
检测原理黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XOD)主要存在于哺乳动物的乳汁及肝脾中,属需氧脱氢酶类,是体内核酸代谢中的重要酶。
在肝细胞损伤时,此酶早于SGPT释放于血清中,并且升高明显,其对鉴别肝细胞性黄疸及阻塞性黄疸有明显的测定意义,在缺氧过程中黄嘌呤脱氢酶很快形成黄嘌呤氧化酶,黄嘌呤氧化酶对自由基的产生起了重要作用。
XOD可催化次黄嘌呤生成黄嘌呤,与此同时产生超氧阴离子自由基,当有电子受体及显色剂存在的情况下,生成紫红色结合物,根据后者生成量的多少可以推算出XOD的活力。
本试剂盒检测组织样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用BCA法。
(货号:E-BC-K318-M)。
提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器:酶标仪(540-560 nm,最佳检测波长550 nm)、37o C恒温箱试剂:双蒸水,生理盐水(0.9 %NaCl)试剂准备①检测前,试剂盒中的试剂平衡至室温。
②显色剂工作液的配制:将试剂四:试剂五按体积比= 1:1配制,现配现用,按需配制,避光待用,配好的显色剂显色剂工作液1 h用完。
超氧化物歧化酶测定试剂盒(SOD底物法)适用范围:用于体外定量测定全血中的超氧化物歧化酶的活性。
1.1规格试剂1a:5×20mL,试剂1b:1×105mL,试剂2: 3×10mL,稀释液:1×100mL。
1.2主要组成成分试剂1a主要组分:试剂1b主要组分:试剂2主要组分:稀释液主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1a:白色或淡黄色晶块,试剂1b:无色或淡黄色透明溶液,试剂2:白色或淡黄色晶块,稀释液:无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在505nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.9;2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.8。
2.4 分析灵敏度测试2.0U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0012。
2.5 准确度在样品中加入一定体积的纯品,计算回收率,应介于90%-110%之间。
2.6 重复性批内变异系数(CV)应不超过10%。
2.7 线性2.7.1在[0.1,5.5]U/L区间内,线性相关系数r应不低于0.990;2.7.2 [0.1,0.66)U/L区间内绝对偏差不超过±0.08U/L;[0.66,5.5]U/L区间内相对偏差不超过±12%。
2.8 批间差对同一份样品进行重复测定,相对极差≤12%。
2.9 稳定性取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
黄嘌呤氧化酶法测定抗氧化能力集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)发酵过程产物形成的测定(SOD活性的测定)一、实验目的1、了解SOD活性测定的原理2、学习黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性二、实验原理原理:黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤产生超氧阴离子自由基,后者氧化羟胺成亚硝酸盐,亚硝酸盐在对氨基苯磺酸与甲萘胺作用下呈现紫红色,用可见光分光光度计测其吸光度。
当被测样品中含SOD时,则对超氧阴离子自由基有专一性抑止作用,使可形成的亚硝酸盐减少,比色时测定管的吸光度值低于空白管的吸光度值,通过公式计算可求出被测样品中SOD 的活力。
操作步骤:如表2-1。
三、实验试剂硫酸盐缓冲液,盐酸羟胺,黄嘌呤,黄嘌呤氧化酶,醋酸等。
四、实验步骤试剂测定管对照管0.550.5575mmol/L 磷酸盐缓冲液(pH7.8)待测样品(ml)A(取样量)00.1mol/L 盐酸羟胺溶液0.050.0575mmol/L 黄嘌呤溶液0.050.050.037U/L 黄嘌呤氧化酶0.050.05双蒸水0.2-A0.2用漩涡振荡器充分混匀,置37℃恒温水浴30min。
显色剂(ml)11总体积1.9ml ,混匀,室温放置10min ,蒸馏水调零,测A530五、计算方法计算公式:每毫升反应液中SOD 抑止率达50%时对应的SOD 量为一个SOD 活力单位(U ),待测样品中的SOD 活力由下式计算:SOD 抑制率(%)=(A2-A1)/A2×100%SOD 活力(U/ml )=(A2-A1)/A2×100%÷50%×反应体系的稀释倍数×样本测试前的稀释倍数 式中:A1:测定管的吸光值;A2:空白管的吸光值 六、注意事项:1.试管要洗干净,在测定微量样品时尤为重要。
2.要做空白管,并且放在所有测试管的中间做,取平均值。
常用试剂(1)诱导剂:分别配制 IPTG 100μmol/mL ; CuSO 4·5H 2O 250μm/mL ; ZnSO 4 100μm/mL 。
小鼠黄嘌呤氧化酶实验步骤
小鼠黄嘌呤氧化酶实验步骤可能如下:
1. 准备试剂和设备:包括小鼠组织样本、缓冲液、显色液、透明胶膜、离心机等。
2. 提取小鼠组织样本:将小鼠组织样本(如肝脏、肾脏)取出并迅速冷冻在液氮中,然后研磨成粉末。
3. 制备酶提取液:向合适的体积的缓冲液中加入适当的蛋白溶解酶,使之溶解。
4. 组织提取:将研磨好的小鼠组织样本加入已制备好的酶提取液中,均匀搅拌,然后用离心机离心,收集上清液。
5. 蛋白浓度检测:使用蛋白浓度检测试剂盒等方法测定所提取的酶样的蛋白质含量。
6. 酶活性测定:将提取的酶样液加入含有底物的试管中,进行酶活性反应。
底物可以是黄嘌呤或其他适当的底物。
7. 停酶步骤:在一定时间后,加入停酶液停止酶反应,从而保留最终的底物产物。
8. 显色步骤:将停酶后的试管中的底物产物加入显色液中,观察颜色变化,使用分光光度计测定吸光度值。
9. 数据分析:根据测定的吸光度值计算小鼠黄嘌呤氧化酶的活性,可以进行统计比较和结果分析。
请注意,以上实验步骤仅供参考,具体步骤可能因实验目的、试剂、设备等不同而有所不同,需根据实际情况进行调整。
同时,在进行实验时,应遵守实验操作规范,并注意实验设备和试剂的安全使用。
超氧化物歧化酶测定方法黄嘌呤氧化酶摘要:一、引言二、超氧化物歧化酶简介1.定义与作用2.分布与生理功能三、黄嘌呤氧化酶简介1.定义与作用2.与超氧化物歧化酶的关系四、超氧化物歧化酶测定方法1.比色法2.化学发光法3.酶联免疫吸附法五、黄嘌呤氧化酶测定方法1.比色法2.酶联免疫吸附法3.高效液相色谱法六、应用与意义1.在疾病诊断中的应用2.在科研与生产中的应用七、总结正文:一、引言超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)是生物体内重要的氧化还原酶,它们的活性测定在生物学、医学和工业领域具有重要的意义。
本文将介绍这两种酶的测定方法及其应用。
二、超氧化物歧化酶简介1.定义与作用超氧化物歧化酶是一种抗氧化酶,主要作用是清除生物体内产生的超氧阴离子自由基,保护细胞免受氧化损伤。
2.分布与生理功能超氧化物歧化酶广泛分布于动植物细胞、微生物和人体内,具有重要的生理功能,包括抑制脂质过氧化、维护细胞膜稳定性、抗衰老等。
三、黄嘌呤氧化酶简介1.定义与作用黄嘌呤氧化酶是一种存在于细胞胞液和线粒体的酶,主要作用是将黄嘌呤氧化为尿酸,参与嘌呤代谢。
2.与超氧化物歧化酶的关系黄嘌呤氧化酶和超氧化物歧化酶在生理功能上相互关联,黄嘌呤氧化酶的活性增高可能导致超氧化物歧化酶的消耗增加,从而影响生物体的抗氧化能力。
四、超氧化物歧化酶测定方法1.比色法比色法是测定超氧化物歧化酶活性的一种常用方法,通过测定反应体系中酶催化的超氧阴离子清除速率与酶活性之间的关系,从而计算出酶活性。
2.化学发光法化学发光法是一种灵敏、快速的测定超氧化物歧化酶活性的方法,通过监测酶催化反应产生的化学发光信号强度,反映酶活性。
3.酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种特异性强的测定超氧化物歧化酶活性的方法,通过抗原-抗体反应及酶标记技术,检测酶活性。
五、黄嘌呤氧化酶测定方法1.比色法比色法是测定黄嘌呤氧化酶活性的一种常用方法,通过测定反应体系中黄嘌呤氧化酶催化的黄嘌呤浓度变化,计算出酶活性。
货号:MS1402 规格:100管/96样黄嘌呤氧化酶(xanthione oxidase, XOD)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:XOD(EC 1.17.3.2)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。
XOD主要分布于哺乳动物的心,肺,肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。
测定原理:XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:提取液:100mL×1瓶,4℃保存;试剂一:30mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存。
粗酶液提取:1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
操作步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至290nm,蒸馏水调零。
2、XOD检测工作液的配制:用时在每瓶试剂二中加入15mL试剂一,充分混匀,待用;现配现用;3、测定前将XOD检测工作液在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上。
4、准备96孔UV板一块(非普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm务必使用UV板)。
氧化低密度脂蛋白,OxLDLELISA试剂盒说明书氧化低密度脂蛋白,OxLDLELISA试剂盒说明书产品规格:96T/48T。
保存条件:2-8℃低温保存保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
上海乔羽生物有限公司专业的提供elisa试剂盒,人elisa试剂盒,猪elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,羊elisa试剂盒,植物elisa试剂盒等等,更多优惠,来电咨询!谢谢!氧化低密度脂蛋白,OxLDLELISA试剂盒说明书氧化低密度脂蛋白,OxLDLELISA试剂盒说明书操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl?,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到?第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各?取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul?,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标?准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别?加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度?分别为1800ng/L,1200ng/L?,600ng/L,300ng/L,?150ng/L)。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。
在?酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)?。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法)适用范围:用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性。
1.1规格校准品(选配):1×0.5mL。
1.2主要组成成分校准品靶值批特异,详见瓶标签。
2.1 外观2.1.1 试剂1为无色透明液体,无混浊,无可见不溶物。
2.1.2 试剂2为白色或微黄色胶乳液体。
2.1.3 校准品应为白色或浅黄色粉末。
2.1.4 标签内容清晰,字迹不易脱落。
2.2 试剂装量液体试剂的净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度A≤0.5(光径1.0cm,500nm±20nm波长)。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率ΔA/min≤0.020/min。
2.4 分析灵敏度测定60U/L的样本,吸光度变化率在0.006/min~0.060/min区间内。
2.5 线性2.5.1 [1,200]U/L。
在规定的线性范围内,测定值与样本浓度值的相关系数(r)应不低于0.9900。
2.5.2 [1,20]U/L区间内,绝对偏差应不超过2U/L;(20,200]U/L区间内,相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 批内精密度用高、低2个浓度的样本测试试剂盒,各重复测试10次,其变异系数(CV)应不大于5%。
2.6.2 批内瓶间差校准品批内瓶间差CV≤5%。
2.6.3 批间差用样本分别测试3个不同批次的试剂盒,每个批次测试3次,其相对极差(R)应不大于6%。
2.7 准确度相对偏差在±10%范围内(测试国际参考物质(BCR-647))。
2.8 溯源性根据GB/T21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容,溯源至国际参考物质BCR-647。
2.9 稳定性2.9.1 校准品冻干粉复溶后在2℃~8℃避光保存稳定30天,测定结果应符合4.6.2和2.7要求。
2.9.2 原装试剂盒2℃~8℃保存,有效期12个月,有效期满后2个月内测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.6.2和2.7要求。
货号:QS1402 规格:50管/48样黄嘌呤氧化酶(xanthione oxidase,XOD)试剂盒说明书
紫外分光光度法
正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
XOD(EC 1.17.3.2)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。
XOD主要分布于哺乳动物的心,肺,肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。
测定原理:
XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:60mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×4瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
操作步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至290nm,蒸馏水调零。
2、XOD检测工作液的配制:用时在每瓶试剂二中加入15mL试剂一,充分混匀,现配现用;
3、测定前将XOD检测工作液37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min。
4、取1mLXOD检测工作液于1mL石英比色皿中,再加入35μL样本,混匀,室温下立即测定290nm下的初始吸光值A1和1min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1。
XOD活性计算:
1、血清(浆)XOD计算:
单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=2424×ΔA
2、组织、细菌或细胞中XOD计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
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XOD(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr)÷T =2424×ΔA÷Cpr (2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=2424×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)÷T=4.848×ΔA V反总:反应体系总体积,1.035×10-3L;ε:尿酸摩尔消光系数,1.22×104L/ mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,1 min;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;500:细胞或细菌总数,500万。
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