UltraECL底物化学发光检测试剂盒说明书

关于蛋⽩定量，ECL试剂盒的⼀些实验建议蛋⽩定量⼁ECL试剂盒化学发光技术经过多年的发展，已经有多种发光体系，但实验室最常⽤的仍然是基于鲁⽶诺（Luminol）或者其衍⽣物（异鲁⽶诺等）的技术体系。

Western荧光检测试剂ECL免疫印迹化学发光溶液是⼀种旨在通过⾮放射性（辣根过氧化酶）发光系统，检测固定在固相膜上（如NC、PVDF等）的30⾄50⽪克以上蛋⽩，经X光⽚（放射⾃显影⽚）感光记录其免疫印迹的实验辅助试剂。

⼀、实验建议：为获得最佳的实验结果，需要优化所有实验要素，包括样品数量，抗体浓度，膜和封闭剂的使⽤。

⼆、特点：Abbkine开发的SuperLumia HRP底物ECL试剂盒，基于经典的过氧化物酶底物体系⾰新优化⽽来，⽤于增强化学发光(ECL)，可直接替代其它昂贵ECL产品⽽⽆需重新优化实验条件，是卓越品质与亲和价格的完美结合。

三、使⽤注意事项：1.按照1：1的⽐例混合两种底物组分，制备底物⼯作溶液。

2.建议每1 cm2⼤⼩的膜对应0.1-0.2ml SuperLumia ECL⾼敏⼯作液3.使⽤SuperLumia ECL Substrate⾼敏⼯作液孵育1-5mins4.排出多余的试剂。

⽤透明塑料包装覆盖印迹。

5.使⽤X光胶⽚曝光SuperLumia ECL底物系列是⼀类即⽤型的化学发光试剂，⽤于基于HRP的免疫印迹检测。

SuperLumia ECL Plus HRP底物试剂，组分和配⽅经过特殊优化，特别适合⽤于飞克级别的抗原检测。

货号产品名称K22020SuperLumia HRP底物ECL⾼敏试剂盒- 30mlK22030SuperLumia HRP底物ECL Plus超敏试剂盒- 30mlAbbkine专注于蛋⽩学和细胞学领域，致⼒于创新和研发各类抗体、蛋⽩质、分析试剂与试剂盒，以期成为⽣命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。

我们为您提供蛋⽩和免疫研究⽤户最喜爱的产品，从免疫学基础产品，如蛋⽩提取定量，到免疫学实验的内参标签抗体、⼀抗及⼆抗等；细胞研究⽤户最喜爱的产品，从⽤于检测细胞状态的染料及试剂盒，细胞器提取试剂盒，细胞亚结构染⾊⽰踪及细胞代谢检测产品，到⽤于细胞培养的细胞因⼦及蛋⽩类检测试剂盒，只为助⼒您的研究事业！。

ecl发光液使用方法ecl发光液是一种能够发出强烈光亮的化学试剂，广泛应用于生物化学和生命科学领域。

它的发光原理是通过化学反应释放能量，激发荧光物质发出光线。

下面将详细介绍ecl发光液的使用方法，以帮助读者更好地使用该试剂。

使用ecl发光液前需要准备实验室所需的器材和试剂。

常见的器材包括离心机、显微镜和电子天平等，而试剂包括ecl发光液和底物等。

确保实验环境干净整洁，以避免外部因素对实验结果的干扰。

在开始实验之前，需要根据实验的要求选择合适的ecl发光液。

市面上有多种型号和规格的ecl发光液，根据实验的需要选择合适的型号。

同时，根据实验的要求，确定所需的底物，底物的选择也会影响到实验结果。

接下来，按照实验方案准备样品。

样品的准备包括提取目标物质并制备成适当的浓度。

在提取样品时，要注意避免污染和损伤目标物质。

制备样品时，要根据实验要求调整样品的浓度，以保证实验的准确性和可重复性。

准备好样品后，开始进行实验。

首先，将样品和ecl发光液混合均匀。

混合时要轻轻摇晃试管或容器，以确保样品和ecl发光液充分接触。

然后，根据实验方案，在合适的温度下反应一段时间，使底物被ecl发光液激发发光。

在实验过程中，要控制实验条件，如温度、时间和pH值等。

不同的实验条件可能会对实验结果产生影响，因此要根据实验要求进行调整。

同时，要记录实验过程中的关键数据和观察结果，以备后续分析和解读。

实验完成后，可以通过观察样品的发光情况来评估实验结果。

正常情况下，样品在加入ecl发光液后会发出明亮的光线。

根据发光的强度和持续时间，可以初步评估样品中目标物质的含量或活性。

对实验结果进行分析和解读。

根据实验方案和相关知识，对实验结果进行定性和定量分析。

同时，要注意排除实验中可能存在的误差和偏差，确保结果的准确性和可靠性。

ecl发光液是一种重要的实验试剂，在生物化学和生命科学领域具有广泛的应用。

通过合理选择试剂和底物，并严格控制实验条件，可以获得准确可靠的实验结果。

超敏ECL化学发光液超敏ECL发光液Super ECL Reagent Cat.No..M2301 Size: 50 ml描述：海基超敏ECL发光液⽤于Western、Northern和Southern blot分⼦杂交的化学发光检测，⽐传统化学显⾊法灵敏度⾼，可达pg⽔平。

原理是采⽤新型发光底物（Luminol），其与辣根过氧化物酶反应时产⽣很强的发光信号，在暗室中对X-光⽚感光，以此检测微量蛋⽩⽽获得理想的实验结果。

海基增强型ECL发光液具有灵敏度⾼，持续时间长等特点。

组分应⽤在Western 印迹分析，核酸杂交以及EMSA 实验中，HRP 标记的⼆抗或探针与靶分⼦结合再与底物反应产⽣可见光。

储存：2-8°C，Super ECL A要求避光保存。

操作⽅法（以Western Blot为例)1．按每平⽅厘⽶膜⾯积⽤0.1-0.2 ml配置发光液：根据发光液的需要量，取等体积A液和B液，混匀后避光保存备⽤；该发光液必须现配现⽤。

2. 取出膜，平放在⼲净的保鲜膜上，膜的正⾯（蛋⽩质⾯）朝上，在膜的中央加适量的配置好的发光液（6×8 cm的膜加2 ml 发光液），溶液向四周迅速扩散，覆盖所有膜⾯。

室温保温5分钟左右，在此过程中请仔细观察信号的出现。

注意：如果信号强，在暗室中能很快看到阳性信号出现。

3. 待信号出现且稳定后，⽤镊⼦夹起膜，除去多余的发光液，平放在⼲净的保鲜膜上，膜的正⾯（蛋⽩质⾯）朝上，在转移膜的上⾯再覆盖⼀层保鲜膜，除去保鲜膜与转移膜之间的空⽓泡，请务必保证保鲜膜是⼲净的，不被其他杂物或液体污染。

4. 在暗室中，将膜的正⾯对着X-光⽚，放⼊暗盒。

第⼀次曝光时间在1分钟左右(有经验的操作者可以根据信号的强弱⾃⾏决定)，⽴即按要求对X-光⽚进⾏显影和定影，确定最佳曝光时间。

曝光时间从数秒到数⼩时不等；特别弱的过夜曝光也可。

注意1.PVDF膜较硝酸纤维膜能更好的结合蛋⽩，因此呈现较强的信号。

星汉DBI 生物技术研究中心网址： 免费电话400-711-6961TOP TOP——ECL 印迹化学发光溶液主要用途星汉生物通用型ECL 免疫印迹化学发光溶液是一种旨在通过非放射性（辣根过氧化酶）发光系统，检测固定在固相膜上（如NC 、PVDF 等）的30或50飞克以上蛋白，经X 光片（放射自显影片）感光记录其免疫印迹的实验辅助试剂。

该技术由DBI 公司精心研制、成功实验证明的。

其适用于辣根过氧化酶标记蛋白的免疫学检测。

产品即到即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，发光清晰，重复性好。

产品内容保存星汉生物发光液A （Reagent A ）和星汉生物发光液B （Reagent B ）在4℃冰箱里；星汉生物发光液A （Reagent A ），避免光照，有效保证12月。

用户自备固相膜：用于蛋白转移的载体2毫升锥形离心管：用于发光工作液配制的容器平式摇荡仪：用于孵育和混匀反应X 光片：用于发光显影实验步骤1．实验开始前，将4℃冰箱里的试剂盒中的发光液A （Reagent A ）和发光液B （Reagent B ）置入室温下，移出1毫升星汉生物发光液A （Reagent A ）到2毫升锥形离心管，加入1毫升星汉生物发光液B （Reagent B ），混匀后，标记为发光工作液，用锡箔纸包裹，避免光照。

然后进行下列操作。

准备好含有待测蛋白的固相膜（5X 8cm 2）3．置于平式摇荡仪上，在室温下孵育1-2分钟，避免光照。

4．用镊子夹起固相膜，一角放在吸水纸上，吸干发光液。

5．用保鲜膜塑料纸包住，避免气泡。

6．置于X 光片夹压片（膜片蛋白吸附面面向X 光片），曝光3分钟至15分钟不等。

(对于内参和GAPDH 和细胞内表达比较高的蛋白质，曝光时间控制在3分钟之内，但对于表达量较低的蛋白质，曝光时间延长到10——30分钟左右)注意事项1．本产品为50毫升总量，可用于1000cm 2膜片2．建议2毫升用于1张5X 8cm 2膜片3．操作时，须戴手套4．星汉生物发光工作液配制后切莫暴露在光线下，否则影响效果5．如果蛋白浓度低到30飞克，建议曝光16小时6．膜片封闭和洗涤处理十分重要7．孵育时，避免光照8．曝光时间需根据情况调整9．本公司提供系列免疫印迹发光试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能长期稳定2．本产品经鉴定显影清晰使用承诺星汉生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。

Western blotting ECL化学发光法检测试剂盒说明书货号：SW2010Western blotting(小鼠IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2020Western blotting(兔IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2030Western blotting(山羊IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2040Western blotting(小鼠/兔IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2050Western blotting(人IgG)ECL化学发光法显色试剂盒产品内容：1.封闭试剂：30g(可配制600ml)。

2.10倍浓缩抗体稀释液，50ml。

3.HRP标记二抗，0.1ml，效价1：5000-10000。

4.ECL显色液，25ml A+25ml B。

保存：-20℃避光密闭保存，一年有效。

若经常使用，可将封闭试剂，抗体稀释液和ECL显色液存放于2-8℃以方便使用。

产品简介：SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。

经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带（抗原所在位置）。

操作步骤：(仅供参考)常规电泳转膜后:1)清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。

室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。

2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。

用TBS-T缓冲液（PH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。

3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。

West Femto ECL化学发光底物说明书货号：PE0030规格：2*12.5ml/2*25ml保存：保存：室温运输，收到后在4℃避光下储存试剂产品说明：West Femto最高灵敏度底物是用于辣根过氧化物酶(HRP)的增强型化学发光底物，有以下特点：•灵敏—使用适当的一抗和二抗时，可在硝化纤维膜或PVDF膜上检测丰度为飞克级的蛋白条带•定量—所得信号的可定量检测范围跨越两个数量级。

•明亮信号—通过胶片或成像系统进行曝光，易于捕获图像。

•长信号持续时间—优化条件下，可检测的光信号输出长达8小时。

•稳定试剂—试剂盒组分能够在4°C条件下稳定放置一年，在室温下可稳定放置6个月。

•价格经济—配方经过优化，可适用于浓度极低的抗体检测。

•1ng至0.2μg/mL一抗（以1μg/mL储存液稀释1:5,000至1:100,000倍）•2ng至10ng/mL二抗（以1μg/mL储存液稀释1:100,000至1:500,000倍）当West Femto底物与优化的抗体浓度和封闭缓冲液配合使用时，可检测到常规ECL底物无法检测的低丰度靶标蛋白。

重要提示:1、为获得最佳效果，必须优化该系统的全部组分，包括样品量、一抗和二抗浓度以及膜和封闭试剂的类型。

2、使用该产品比使用沉淀比色HRP底物检测所需的抗体浓度低。

为优化抗体浓度，请进行一次系统的点印迹分析。

3、没有一种封闭试剂对所有系统而言都是最佳的，所以为每一个免疫印迹检测系统找到最合适的封闭缓冲液非常必需。

封闭试剂有可能与抗体产生交叉反应，导致出现非特异性信号。

封闭缓冲液同时也会影响系统的灵敏性。

当从一种底物转换为另一种底物时，有时会出现信号衰减或背景增加的现象，原因可能是封闭缓冲液不适合新的检测系统。

4、使用亲和素/生物素检测系统时，避免使用牛奶作为封闭试剂，因为牛奶中含有不定量的内源性生物素，会导致高背景信号。

5、保证洗涤缓冲液、封闭缓冲液、抗体溶液和底物工作液的使用体积，以确保在整个实验过程中印迹膜完全被液体覆盖，避免膜变干。

ECL发光液（Enlight）使⽤⼿册第1页共2页北京英格恩⽣物科技有限公司⽹址：订购电话：************转8001订购Email:*****************.cn技术⽀持：************转8003技术⽀持Email：*******************.cn EnlightTMWestern特异发光检测试剂盒（WesternBlottingDetectionReagents）使⽤⼿册常温运输，避光储存于4℃⼀产品介绍EnlightTMWestern特异发光检测试剂盒⽤于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋⽩或核酸检测。

在WesternBlotting实验的发光检测中，由于发光增强剂的使⽤，发光灵敏度已不是问题，更核⼼和关键的是，避免发光试剂造成“⾮特异条带”或“背景条带”、避免“发光淬灭”，需要发光更加稳定可靠，避免⼈为⼲扰。

发光检测试剂的发光特异性和发光稳定性已成为实验成功的关键。

EnlightTMWestern特异发光检测试剂有如下特点：1.EnlightTM采⽤精准的发光底物，有效降低发光试剂造成的⾮特异发光和背景发光。

2.EnlightTM含独特的发光增强剂，灵敏度⾼，微弱的信号也能检测。

3.EnlightTM采⽤特异的发光配⽅，发光快速⽽稳定。

4.EnlightTM不破坏膜上蛋⽩，可在曝光后，经洗涤，对多种蛋⽩进⾏杂交。

⼆组成Cat.No.Description29050BufferA50ml，BufferB50ml29100BufferA100ml，BufferB100ml三使⽤⽅法1.常规电泳、转膜、HRP标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。

以下操作在室温进⾏。

注意：EnlightTM推荐的抗体稀释度为:储存液浓度为1mg/ml的⼀抗推荐稀释度储存液浓度为1mg/ml的⼆抗推荐稀释度1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/ml1:2000-1:10,000或100-500ng/ml2.新鲜配制发光⼯作液。