增强型化学发光底物检测试剂盒

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0150S Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒 1000次 S0150MKinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒10000次产品简介：Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Luminescent Kinase Assay Kit )，是一种通过化学发光法测定激酶反应后溶液中ATP 的剩余量(最高可达10μM)来定量检测激酶活性的试剂盒。

本试剂盒也可用于检测任何消耗ATP 的酶，例如ATPase 。

本试剂盒可以检测反应体系中浓度最高为10μM 的ATP ，并在0-10μM 范围内有良好的线性关系。

对于更高浓度的ATP ，可以选购检测浓度上限为50μM 的Kinase-Lumi™增强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Plus Luminescent Kinase Assay Kit )或上限为200μM 的Kinase-Lumi™超强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Max Luminescent Kinase Assay Kit )，或者需要适当稀释后再进行检测。

另外两个试剂盒分别在0-50μM 和0-200μM 范围内有良好的线性关系。

本试剂盒应用范围广，适用于各类消耗ATP 的激酶，包括以蛋白或多肽为底物的蛋白激酶和以糖、脂、醇等为底物的非蛋白激酶。

本试剂盒也同样适用于检测消耗ATP 的ATPase 。

本试剂盒的检测激酶活性的原理参考图1。

激酶在反应过程中催化ATP 上的磷酸基团转移到底物的羟基上，从而使ATP 转变为ADP ，这样就可以根据ATP 的减少量来定量激酶的活性。

◆UltraECL底物化学发光检测试剂盒◆目录号1924◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外UltraECL底物化学发光检测试剂盒目录号：1924目录编号包装单位192401 50ml（A液B液各25ml）192402 100ml（A液B液各50ml）192403 500ml（A液B液各250ml）试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50ml 100ml 500ml溶液A 4℃避光25 ml 50 ml 250 ml溶液B 4℃避光25 ml 50 ml 250 ml 本产品收到后按照上面指示温度存放，至少6个月内有效。

产品介绍：Western blot底物发光检测试剂可由标记于二抗上的辣根过氧化酶催化，产生化学发光反应，可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。

UltraECL底物化学发光检测试剂盒基于新一代增强型化学发光底物研制而成，并对成份做了优化。

产品背景低，稳定性好，比普通ECL试剂敏感度高数十倍。

它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对X光胶片曝光，也可直接进行luminometer检测或者荧光CCD扫描。

操作步骤：1.按常规Western blot操作，二抗孵育后，进行最后一次洗涤时，根据膜的大小，按每10cm2膜混合0.5ml溶液A和0.5ml溶液B，混匀，配制成发光检测工作液。

2.用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。

膜的蛋白面朝上，置于洁净保鲜膜（某些市售保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜）上。

用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上，使其均匀覆盖，室温孵育1-2分钟。

3.用平头镊夹持蛋白膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。

膜的蛋白面朝上，包裹于洁净保鲜膜内。

轻轻赶出其间的气泡，固定在X片暗盒内。

4.在暗室中取一张X片置于包裹的膜上，合上暗盒，曝光30秒至1分钟。

立即显影定影，根据其曝光强度，缩短或延长下一张X片的曝光时间（对微弱信号，曝光时间可延长至数小时）,或者曝光0.5，1，2，4，6分钟一系列后再显影定影挑选一张满意的。

2. 性能指标2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、无液体渗漏；包装标签应清晰，准确、牢固；2.1.2 试剂条中7#孔内组分应为棕色含固体微粒的液体或含棕色固体沉淀的透明液体；2.1.3 试剂条中13#孔内化学发光底物应为无色或淡绿色液体；2.1.4 试剂条2#、3#、4#、5#和11#孔内皆为无色透明液体，无悬浮物、无沉淀、无絮状物。

其余1#、6#、8#、9#、10#、12#、14#、15#和16#为空孔。

2.2 装量2.2.1 试剂条各组分不少于额定装量（见表1）表1 各组分额定装量2.2.2 纯水装量不低于标示值。

2.3 空白限应不大于0.2μg/mL FEU。

2.4 回收率回收率应在90%-110%范围内。

2.5 线性范围在0.25μg/mL FEU～20μg/mL FEU范围内，其线性相关系数（r）应不小于0.9900。

2.6 重复性用高低两个不同浓度水平的参考品，重复检测10次，其变异系数（CV）应不大于10%。

2.7 批间差用3个批号试剂盒检测同一份参考品，则3个批号试剂盒之间的变异系数（CV）应不大于15%。

2.8 校准品的性能指标2.8.1 外观校准品为白色冻干固体，加入纯化水后应在15min中内完全溶解，溶液无沉淀或絮状物。

2.8.2 准确度以校准品作为样本进行检测，其检测结果与靶值的相对偏差应不超过±10%。

2.8.3 均一性2.8.3.1 瓶内均一性：校准品的（CV瓶内）应≤8%。

2.8.3.2 瓶间均一性：校准品的（CV瓶间）应≤8%。

EZ ECL Pico化学发光液(皮克级)使用说明书产品描述《EZ ECL Pico化学发光液》是一款增强型化学发光(ECL)HRP底物，可帮助用户在免疫印迹分析过程中实现低皮克级的蛋白检测(<10-12g)，极其节省抗体。

本产品一抗浓度范围0.2-0.1μg/ml（以1µg/mL储存液稀释1:1,000至1:5,000倍）；二抗浓度10-50ng/ml （以1mg/mL储存液稀释1:20,000至1:100,000倍）。

EZ Pico底物，为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物的免疫印迹实验提供了明亮的信号、低至皮克级检测灵敏度。

该ECL底物能够兼容各种膜、封闭液和宽范围抗体稀释液，以出色性能、通用性和高性价比，满足用户的免疫印迹应用需求。

EZ Pico底物的特点：•ECL—用于辣根过氧化物酶(HRP)的增强型化学发光底物•低至皮克级灵敏度—检测硝化纤维素膜或PVDF膜上皮克级的蛋白条带•长信号持续时间—在条件优化情况下，经底物孵育的印迹条带能够持续输出6至8小时的可检测光信号•稳定试剂—工作液在24小时内保持稳定；试剂盒在室温下可稳定放置长达1年•价格经济—针对稀释的抗体浓度条件进行了优化：2)取A液和B液一定要用不同的枪头，工作液现配现用，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3.用平头镊取出膜，搭在滤纸上沥干洗液，勿使膜完全干燥。

用移液器将工作液加到膜上（推荐100μl发光液/cm2膜），使之充分接触。

室温孵育5分钟，准备立即压片曝光。

4.用平头镊子夹起膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，去除膜上多余的液体，留下少量工作液，不可让膜完全干燥。

5.在X光胶片暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。

将印迹膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹印迹膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。

用滤纸吸去多余的发光工作液。

用胶带将覆盖印迹膜的保鲜膜固定在暗盒内，蛋白条带面向上。

6.将X光胶片置于膜的上面。

ECL 发光液简介：ECL 化学发光检测试剂是基于Luminol 的新一代增强型化学发光底物试剂，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase，HRP)催化发生化学反应而发出荧光，结果可以通过X 光片压片和其他显影技术展现或使用Luminometer 检测。

Leagene ECL 发光液为普通的ECL 发光液，比DAB 显色灵敏度高数百倍以上，比Amersham 的ECL 发光液灵敏度高几十倍以上。

在暗房内高丰度蛋白条带的荧光常数小时内仍然肉眼可见，X 线胶片曝光10～30s 即可得到高清晰条带；低丰度蛋白条带荧光肉眼可能不易察觉，但曝光30s~5min 即可检测条带；极低丰度的蛋白条带荧光可允许30min~12h 曝光以检测目的条带。

ECL 敏发光液衰减较慢，15min 内荧光几无减弱，检测时产生的非特异背景非常低，也可节省抗体和待测样品的用量，该试剂可用于PVDF 膜和NC 膜(硝酸纤维素膜)的Western blot 免疫印迹等印迹发光显色。

组成：操作步骤（仅供参考）：1、Western 二抗孵育数次洗涤后，用镊子将膜轻轻取出，用吸水纸略吸去过多的液体(勿接触膜的蛋白面)，然后置于一洁净保鲜膜或恰当容器上。

2、配制ECL 工作液：根据需要量，取HRP Substrate Luminol Reagent 和HRP Substrate Peroxide Solution 等体积混合即为ECL 工作液，室温放置备用，工作液宜在临检测前配制。

注意事项：1、HRP Substrate Luminol Reagent 和HRP Substrate Peroxide Solution 在吸取过程中必须要更换枪头，上述试剂相互污染后会导致HRP Substrate Luminol Reagent 或HRP Substrate Peroxide Solution 逐渐失效，影响后续的使用效果。

Western blotting ECL化学发光法检测试剂盒说明书货号：SW2010Western blotting(小鼠IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2020Western blotting(兔IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2030Western blotting(山羊IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2040Western blotting(小鼠/兔IgG)ECL化学发光法显色试剂盒SW2050Western blotting(人IgG)ECL化学发光法显色试剂盒产品内容：1.封闭试剂：30g(可配制600ml)。

2.10倍浓缩抗体稀释液，50ml。

3.HRP标记二抗，0.1ml，效价1：5000-10000。

4.ECL显色液，25ml A+25ml B。

保存：-20℃避光密闭保存，一年有效。

若经常使用，可将封闭试剂，抗体稀释液和ECL显色液存放于2-8℃以方便使用。

产品简介：SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。

经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带（抗原所在位置）。

操作步骤：(仅供参考)常规电泳转膜后:1)清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。

室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。

2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。

用TBS-T缓冲液（PH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。

3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。

D-二聚体（D-Dimer）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）
适用范围：本试剂盒采用化学发光免疫分析法（CLIA）体外定量测定人血浆中D-二聚体（D-Dimer）的含量。

1.1 包装规格
96人份/盒
1.2 主要组成成成分
表1主要组成成分
注：校准品采用生物梅里埃D-二聚体排除试验试剂盒(酶联免疫荧光法)比对赋值，校准品（A～F）目标浓度为0、100、300、1000、2000、5000ng/ml FEU。

2.1 外观
组分齐全、完整，液体无渗漏，微孔板包装袋无破损、漏气现象；标签应清晰，易识别。

2.2 装量
液体装量应不少于标示值。

2.3 准确度
在剂量反应曲线检测范围内，用已知浓度的纯品做回收试验，其回收率应在
85~115%范围内。

2.4 线性
在线性范围[50，5000]ng/ml FEU内，剂量反应曲线相关系数(r)的绝对值应不低于0.9900。

2.5 空白限
应不大于50ng/ml FEU。

2.6 重复性
变异系数(CV)应不大于10.0%。

2.7 批间差
批间变异系数(CV)应不大于15.0%。

2.8 分析特异性
测定浓度为4g/L纤维蛋白原，交叉反应率小于0.013%。

2.9 稳定性
产品在2~8℃条件下保存有效期为12个月，取到效期产品在1个月内进行检测，检测结果应满足2.3~2.6，2.8项要求。

术语
4.1 CLIA：Chemiluminescent immunoassay化学发光免疫分析
4.2 D-Dimer：D-二聚体
4.3 RLU：Relative Light Unit相对光单位。

化学发光检测试剂盒原理
化学发光检测试剂盒是一种用于检测目标物质浓度的分析试剂盒。

其原理是通过化学反应产生发光信号，并利用发光信号的强度与目标物浓度之间的关系进行定量分析。

一般来说，化学发光检测试剂盒包含两种试剂：底物和酶。

底物是指与目标物质发生化学反应后产生发光信号的化合物，酶则是催化这个反应的催化剂。

当目标物存在于待测样品中时，它与底物发生特定的化学反应。

这个化学反应可以是酶促反应、氧化还原反应或其他与目标物质的性质有关的反应。

反应产物中的底物会发生发光反应，产生可检测的发光信号。

发光信号可以利用光学仪器进行测量和定量分析。

一般采用光电倍增管或光电二极管测量发光信号的强度，然后与已知浓度的标准曲线相比较，从而确定待测样品中目标物质的浓度。

化学发光检测试剂盒具有灵敏度高、选择性好、操作简便快速等优点，广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。