实验三离体蛙心灌流

离体蛙⼼灌流实验实验五离体蛙⼼灌流实验⼀实验⽬的1、了解蟾蜍离体⼼脏的灌流的⽅法。

2、观察细胞外液钾离⼦、钙离⼦浓度变化对⼼脏活动的影响。

⼆实验原理⼼脏离体后，如⽤⼈⼯灌流的⽅法，保持其新陈代谢的顺利进⾏，则⼼脏仍能有节律的⾃动收缩和舒张，并可维持较长的时间。

离体⼼脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起⼼脏活动的变化。

1、任⽒液：正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4和蒸馏⽔，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。

2、0.65%NaCl灌流：3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流5、1:10000 E 灌流6、1:10000 Ach灌流7、⼼得安β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作⽤。

8.、阿托品M受体阻断剂，抑制Ach减慢⼼率，加速房室传导，增加⼼房收缩⼒。

三实验器材微机⽣物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙⼼，任⽒液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，⼼得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。

四实验步骤1、标本制备（观看视频）2、仪器及标本的连接3、具体软件操作：1）离⼦试剂：任⽒液→0.65%NaCl溶液→任⽒液清洗→1%KCl溶液→任溶液→任⽒液清洗⽒液清洗→2%CaCl22）药物试剂：肾上腺素（E）→任⽒液清洗→⼼得安→任⽒液清洗→Ach，任⽒液清洗→阿托品→任⽒液清洗。

五实验结果表1 离体蛙⼼灌流数据记录六结果分析此实验说明⼼脏具有⾃律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体⼼脏静脉窦还能产⽣兴奋并传导到⼼房和⼼室，引起⼼脏有节律的兴奋和收缩。

体内细胞所直接⽣存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常⽣存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起⼼脏收缩的改变。

目的原理观察内环境理化因素相对稳定对维持心脏正常节律性活动的重要作用，了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调节意义。

实验对象与用品大蛙或蟾蜍。

斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架等(试剂见实验项目)。

方法步骤(一)实验准备操作对蛙行双刺毁，仰卧固定于蛙板上，用铁剪刀剪去胸壁，再用眼科剪小心地剪开心包膜，暴露心脏，识别心脏动脉球、静脉窦(背面)等结构(图17-1A、B、C)。

用蛙心夹夹住蛙心尖部，蛙心夹用线固定在蛙板上，松紧以动脉、心房、心室拉直呈水平位为合适。

于主动脉分支下预埋一条棉线做一虚结备用。

把主动脉左支上端结扎，在近动脉球处剪一向心斜切口(注意要剪破血管内膜，每次心缩时有血自切口涌出，但不要把血管剪断。

剪口位置视套管尖端长度与心脏大小而定)，左手用眼科镊提起切口缘，右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后走手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球；把蛙心夹上的连线从固定物上取下，提起心尖，使心室与动脉球约呈100°-200°的钝角，然后当心室缩紧时把套管平直往心室方向推进。

当感觉套管进入心室后再把心尖放平，随即将套管稍向心室推进，调整合适位置，可见套管内液面随心跳而升降。

即将已作虚结之丝线把血管和套管固定起来，余线则扎于套管的玻璃小钩上，以免心脏滑脱。

提起套管，剪断与心脏相连的血管和组织(注意勿损伤静脉窦及两心房)，摘出心脏。

用任氏液洗去心内外的余血后，注入新鲜任氏液备用。

可在套管的下1/3处结一线作为标志，每次换任氏液时使液面与此线相平。

接好二道生理仪和机械－电换能器(图17-2)选用适当参数，待记录。

(二)实验项目1.描记正常心跳曲线并分析其疏密、规律性、幅度、顶点及基线的含义。

2.温度的影响：把套管内换成4℃任氏液，同时作好标记，观察曲线变化，待效应明显后，即换入室温任氏液。

待曲线恢复正常后，再进行下一项目。

第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。

2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。

3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。

在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。

实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。

2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。

四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。

用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。

2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。

3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。

4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。

b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。

c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。

d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。

5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。

五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。

2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。

六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。

2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。

离体蛙心灌流实验目的学习离体蛙心灌流的方法；观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的影响。

观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。

实验器材动物：蟾蜍器材：斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、0.65%NaCl 溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液实验方法与步骤1、离体蛙心的制备：双毁髓→左主动脉结扎→左右两主动脉下方活结备用→剪口，插管（管内盛任氏液与肝素）→结扎备用线（套管＋左右主动脉）→剪断动脉→结扎并剪断静脉。

2、固定套管并用任氏液换洗血液；进入RM6240系统。

3、观察并记录正常心搏曲线；4、向套管内分别加入以下溶液（0.65%NaCl溶液2d 、5%NaCl溶液2d 、1%KCl溶液1-2d 、2%CaCl2溶液1d 、1:5000肾上腺素溶液1-2d 、1:10000乙酰胆碱溶液1-2d ），观察并记录曲线变化。

实验结果此图为蛙心正常心搏曲线此图为换入0.65% Nacl溶液后蛙心收缩曲线的变化由波形图可知，Nacl可使心肌收缩能力减弱，心率减慢，导致心率曲线幅度减小。

此图为加入5%Nacl溶液后蛙心收缩曲线的变化有波形图可知，向任氏液中加入5%Nacl之后心搏曲线的幅度大大降低。

此图为加入Kcl溶液后蛙心收缩曲线的变化KCl导致心脏肌细胞收缩能力减弱，心率减慢。

此图为加入Cacl2溶液后蛙心收缩曲线的变化可使心肌收缩能力增强，心率加快，导致心率曲线幅度由上图可知，CaCl2增加。

此图为加入肾上腺素后蛙心收缩曲线的变化由波形图可知，肾上腺素可使心肌收缩力增强，心率加快。

此图为加入乙酰胆碱后蛙心收缩曲线的变化由上图可知，乙酰胆碱可使心肌收缩能力减弱，心率减慢，导致心率曲线幅度降低。

实验结果分析离体蛙心仍可具有揭露性收缩，是因为作为蛙心正常起搏点的经脉都（其功能相当于人体心脏的窦房结）能产生自动节律，通过传导系统维持心脏的波动，心脏正常德节律性兴奋和收缩活动必须在适宜的礼花环境才能维持，一旦适宜的环境被干扰或破坏，心脏后东就会受到影响。

蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。

2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。

二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。

外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。

三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。

套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。

四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。

在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。

再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。

当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。

此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。

用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。

一、实验目的1. 学习离体器官（蛙心）灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验，通过人工灌流的方法，使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。

实验原理如下：1. 蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。

2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。

3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素，可以观察蛙心活动的变化，了解理化因素对心脏活动的影响。

三、实验对象与用品1. 实验对象：蟾蜍2. 实验用品：斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。

四、实验方法与步骤1. 实验准备：将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪开胸壁，暴露心脏。

用蛙心夹夹住蛙心尖部，固定在蛙板上。

2. 动脉插管：在主动脉分支下预埋一条棉线，结扎主动脉左支，剪一向心斜切口，插入斯氏蛙心套管，送入动脉球。

3. 连接实验装置：将蛙心套管与二道仪相连，记录蛙心活动。

4. 灌流液准备：配制正常灌流液（任氏液）和实验灌流液（分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等）。

5. 实验操作：a. 将蛙心置于正常灌流液中，观察蛙心活动，记录心率、收缩幅度等指标。

b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中，观察蛙心活动的变化，记录心率、收缩幅度等指标。

c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。

五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下，蛙心以正常节律收缩和舒张，心率适中，收缩幅度适中。

2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后，蛙心收缩幅度稍微减小，收缩力稍微减弱。

分析原因：相当于细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。

一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握实验操作技能，提高实验观察和分析能力。

二、实验原理蛙心灌流实验是研究心肌细胞生理特性的常用方法。

通过离体蛙心灌流，可以观察和比较不同理化因素对心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的影响。

实验中，利用任氏液作为灌流液，维持蛙心的正常生理活动。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心夹、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等。

2. 实验仪器：手术显微镜、蛙板、蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹等。

四、实验步骤1. 制备蛙心标本：将蟾蜍放入装有冰块的容器中，使其昏迷。

在蟾蜍背部剪一小口，暴露心脏。

在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。

将心脏与动脉分离，用任氏液冲洗，置于蛙心夹上。

2. 连接实验装置：将蛙心夹固定于支架上，连接张力传感器和计算机采集系统。

将任氏液滴入培养皿中，用滴管控制液面高度。

3. 观察正常蛙心活动：打开计算机采集系统，观察蛙心在任氏液中的正常收缩和舒张活动。

4. 改变灌流液成分，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

c. 在灌流液中加入1%KCl溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

d. 在灌流液中加入1:10000肾上腺素，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

e. 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

f. 在灌流液中加入3%乳酸，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

5. 记录观察结果，分析实验现象。

五、实验结果与分析1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性稍微减小，表现为心跳频率和幅度降低。

一、实验目的1. 熟悉离体蛙心灌流实验的基本原理和操作步骤。

2. 学习观察和分析理化因素对蛙心活动的影响。

3. 提高实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中常用的方法之一，主要用于研究心脏的生理功能和调节机制。

实验过程中，将蛙心从体内取出，通过人工灌流的方式，模拟心脏在体内的生理环境，观察和分析理化因素对心脏活动的影响。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛙、任氏液、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、心得安、阿托品等。

2. 实验仪器：蛙心夹、蛙心套管、显微镜、二道生理记录仪、张力传感器、滴管、培养皿等。

四、实验步骤1. 蛙心提取：将蛙处死，剪开胸腔，取出心脏。

2. 蛙心插管：将蛙心夹夹住心脏尖部，用线固定在蛙板上，松紧以动脉、心房、心室拉直呈水平位为合适。

在主动脉分支下预埋一条棉线做一虚结备用。

将主动脉左支上端结扎，在近动脉球处剪一向心斜切口，左手用眼科镊提起切口缘，右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后走手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球。

3. 蛙心灌流：将蛙心套管与张力传感器相连，通过滴管向套管内加入任氏液，使心脏在灌流液中保持正常生理活动。

4. 观察和分析：观察心脏的活动情况，记录心脏收缩频率、幅度等指标。

分别向灌流液中加入不同浓度的KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、心得安、阿托品等，观察和分析理化因素对心脏活动的影响。

五、实验结果与分析1. 正常心脏活动：在正常灌流液中，心脏保持节律性收缩，收缩频率约为60-80次/分钟，收缩幅度较大。

2. KCl溶液对心脏活动的影响：加入低浓度KCl溶液后，心脏收缩频率减慢，幅度减小；加入高浓度KCl溶液后，心脏出现纤颤，最终停止跳动。

3. CaCl2溶液对心脏活动的影响：加入低浓度CaCl2溶液后，心脏收缩频率加快，幅度增大；加入高浓度CaCl2溶液后，心脏出现纤颤，最终停止跳动。

蛙心灌流实验报告实验报告：蛙心灌流实验实验目的：1. 了解蛙的心脏解剖结构及其生理特性；2. 掌握蛙心脏灌流的技术操作方法；3. 通过观察和记录实验结果，研究蛙心脏的生理功能。

实验原理：蛙心脏是一种三心室的心脏，左、右心房和右心室之间没有明显的分隔。

在正常情况下，蛙的心脏是按照一定的顺序进行收缩和舒张，完成心脏循环。

通过将生理盐水灌入蛙的心腔，可以模拟蛙的心脏循环过程，使心脏继续收缩和舒张。

实验材料：蛙、生理盐水、手术刀、缝合线、生理盐水注射器。

实验步骤：1. 用手术刀在蛙的腹部切开一小块皮肤，暴露心脏；2. 用手术刀小心地在蛙的心脏下切开一个小孔，用生理盐水注射器将生理盐水注入腔内；3. 观察心脏的收缩和舒张过程，并通过观察流入和流出的生理盐水量来评估心脏的功能；4. 实验结束后，用缝合线将心脏切开的部位缝合，然后将蛙恢复到原来的容器中。

实验结果：在实验过程中，我们观察到蛙心脏在收缩和舒张过程中有规律地推动生理盐水的流动。

正常情况下，心脏的收缩和舒张过程应该是有序的，流入和流出的生理盐水量应该是相等的。

实验结果显示，蛙心脏收缩和舒张过程正常，流入和流出的生理盐水量基本相等。

实验讨论：蛙心灌流实验是一种常用的生理实验方法，通过观察和记录心脏的生理功能，可以研究心脏的结构和功能。

实验中，我们灌流生理盐水来模拟心脏循环过程，这是比较接近真实情况的实验方法之一。

实验结果显示，蛙心脏有较好的收缩和舒张功能，流入和流出的生理盐水量相等，说明心脏的功能正常。

这与虽然虫是体型很小的生物，但它们的心脏结构和功能已经与人的心脏非常相似。

因此，蛙心灌流实验可以作为心脏生理学研究的重要工具之一。

总结：通过蛙心灌流实验，我们可以更深入地了解和研究心脏的结构和功能。

实验过程需要小心谨慎地操作，以确保实验的可靠性和准确性。

通过观察和记录实验结果，我们可以评估和分析心脏的生理功能，为进一步研究心脏疾病提供参考。